ICS65.020.30B43DB12DeterminationofCuandZncontentofdairyfarmmanure-Spectrophotometry天津市市場監(jiān)督管理委員會發(fā)布1DB12/T954—2020本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由天津市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會提出并歸口。本標準起草單位：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護科研監(jiān)測所、軍事科學院軍事醫(yī)學研究院環(huán)境醫(yī)學與作業(yè)醫(yī)學研究所。本標準主要起草人：趙潤、李辰宇、王景峰、張克強、邱志剛、李佳佳、徐浩淇。DB12/T954—20202奶牛場糞污銅、鋅含量的測定分光光度法本標準規(guī)定了基于微波消解和化學顯色分光光度法測定規(guī)?；膛黾S污中銅（Cu）、鋅（Zn）含量的技術(shù)要求及操作方法。本標準適用于規(guī)?；膛黾S污中銅（Cu）、鋅（Zn）含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682—2008分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T26798—2011單光束紫外可見分光光度計GB/T26810—2011可見分光光度計GB/T26814—2011微波消解裝置GB/T27522—2011畜禽養(yǎng)殖污水采樣技術(shù)規(guī)范CJ/T51—2018城鎮(zhèn)污水水質(zhì)標準檢測方法3糞污樣品采集3.1采樣物品按照GB/T27522—2011中第4.1款的規(guī)定執(zhí)行。3.2采樣方法按照GB/T27522—2011中第4.4款的規(guī)定執(zhí)行。3.3樣品處理每100mL樣品中加入1mL稀硝酸（將硝酸與純水以1:4的體積比混合）并震蕩，防止金屬離子沉淀。4樣品微波消解4.1方法原理結(jié)合高壓消解和微波快速加熱，水樣和酸的混合物吸收微波能量后，酸的氧化反應活性增加，樣品中的金屬元素釋放到溶液中。4.2試劑材料4.2.1實驗用水：應符合GB/T6682—2008中二級水的規(guī)定要求。DB12/T954—202034.2.2硝酸：ρ（HNO3）=1.42g/mL，分析純。4.2.3稀硝酸（1+4）：將硝酸（4.2.2）和實驗用水（4.2.1）以1:4的體積比進行混合。4.2.4過氧化氫：質(zhì)量分數(shù)30%。4.3儀器設(shè)備4.3.1微波消解儀應符合GB/T26814—2011中第4章規(guī)定。4.3.2聚四氟乙烯消解罐應符合GB/T26814—2011中第4.4款的規(guī)定。4.4樣品消解4.4.1設(shè)定條件控溫型微波消解儀，待消解溫度升高至180℃后應保持180℃恒溫15min。非控溫型微波消解儀，應保證額定功率工作狀態(tài)下微波消解時間不少于30min。4.4.2操作步驟準確稱量樣品5.0g或吸取樣品5mL，置于聚四氟乙烯消解罐（4.3.2）內(nèi)，加入1mL過氧化氫（4.2.4樣品混勻后加入20mL稀硝酸（1+4）（4.2.3），靜置待反應平穩(wěn)后加蓋懸緊，置于微波消解儀中，按4.4.1要求運行微波消解儀。微波消解后取出消解罐靜置冷卻時間不少于5min，緩慢放氣后開蓋并移出消解液，實驗用水（4.2.1）蕩洗消解罐2～3次，收集溶液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中定容，過0.22μm濾膜制成待測液備用。5銅（Cu）的測定5.1方法原理5.1.1方法：采用二乙氨基二硫代甲酸鈉法測定糞污中的Cu元素，測定范圍為0.02mg/L～0.60mg/L，應稀釋1～2個梯度使待測液稀釋至上述濃度范圍。5.1.2原理：在pH9～10的堿性溶液中，Cu與二乙氨基二硫代甲酸鈉生成黃棕色絡合物，可被有機溶劑萃取，最大吸收波長為440nm，應在1h內(nèi)完成測定。5.2試劑材料5.2.1實驗用水：應符合GB/T6682—2008中二級水的規(guī)定要求。5.2.2硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/mL，分析純。5.2.3硫酸（1+4）：取200mL硫酸（5.2.2）緩慢加入800mL實驗用水（5.2.1）中。5.2.4氨水：ρ（NH3·H2O）=0.90g/mL，分析純。5.2.5氨水（1+4）：將氨水（5.2.4）與實驗用水（5.2.1）按1:4的體積比進行混合。5.2.6四氯化碳：ρ（CCl4）=1.595g/mL，分析純。5.2.7二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液：稱取0.2g二乙基二硫代氨基甲酸鈉，實驗用水（5.2.1）溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶定容，過濾后存于棕色瓶中。DB12/T954—202045.2.8EDTA-檸檬酸銨溶液：5.0g乙二胺四乙酸二鈉鹽二水合物（EDTA）和20.0g檸檬酸銨溶于實驗用水（5.2.1）中并定容至100mL備用。5.2.9Cu標準儲備溶液[ρ（Cu）=1000mg/L]：取（0.256±0.001）g的五水硫酸銅（優(yōu)級純）溶于10mL硫酸（1+45.2.3）中，在容量瓶中采用實驗用水（5.2.1）定容至1000mL；或采用經(jīng)國家認證并授予標準物質(zhì)證書的Cu單元素標準貯備液。5.2.10Cu標準使用溶液[ρ（Cu）=5mg/L]：吸取Cu標準儲備溶液（5.2.9）5mL，用實驗用水（5.2.1）定容至1000mL。5.2.11甲酚紅指示劑：ρ=0.4g/L：稱取0.02g甲酚紅溶于50mL乙醇（95%，分析純）中。5.3儀器設(shè)備分光光度計：儀器性能指標應符合GB/T26810—2011的規(guī)定；或使用符合GB/T26798—2011的規(guī)定，具有440nm波長光源的單波長單光束紫外可見分光光度計。5.4分析步驟5.4.1測定方法在100mL玻璃燒杯中加入20mL待測液（4.4.2），加入10mLEDTA-檸檬酸銨溶液（5.2.8），充分攪拌；加入2滴甲酚紅指示劑（5.2.11攪拌；使用氨水（1+45.2.5）調(diào)節(jié)pH（溶液由紅色初變?yōu)闇\紫色）；加入5mL二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液（5.2.7），攪拌并靜置2min；準確加入四氯化碳（5.2.6）20mL，快速攪拌2min，靜置分層，使用塑料滴管緩慢吸取收集底層有機相于10mm比色皿中，在440nm波長下以四氯化碳作為參比，測定吸光度。5.4.2標準曲線擬合精確移取Cu標準使用溶液（5.2.10）0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、5.0mL、6.0mL置于50mL容量瓶中，用實驗用水（5.2.1）定容至標線，按5.4.1要求測定各標準溶液的吸光度，減去零標準吸光度，采用最小二乘法擬合吸光度對Cu含量的標準曲線。若使用專用單光束紫外可見分光光度計，可將擬合后的標準曲線信息寫入設(shè)備存儲。5.4.3Cu含量計算方法將樣品的吸光度減去空白試驗的吸光度，參考CJ/T51—2018中39.1.7款說明使用標準曲線（5.4.2）計算Cu含量，樣品中Cu含量應按式（1）計算：×10………………（1）ρ——水樣中Cu元素質(zhì)量濃度，mg/L；0——由工作曲線計算所得試樣中Cu元素的質(zhì)量濃度，mg/L；10——稀釋體積比；檢測結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。6鋅（Zn）的測定6.1方法原理6.1.1方法：采用雙硫腙分光光度法測定糞污中的Zn元素，測定范圍為0.005mg/L～0.05mg/L，由于糞污中Zn元素含量高于該檢測范圍，通過稀釋1～2個梯度使待測液至上述濃度范圍。DB12/T954—202056.1.2原理：Zn離子與雙硫腙可在乙酸鹽緩沖介質(zhì)中（pH4.0～5.5）形成紫紅色絡合物，溶于四氯nm測定吸光度。6.2試劑材料6.2.1實驗用水：應符合GB/T6682—2008中二級水的規(guī)定要求。6.2.2鹽酸：ρ（HCl）=1.19g/mL，優(yōu)級純。6.2.3鹽酸（1+6）：取100mL鹽酸（6.2.2）加入600mL實驗用水（6.2.1）中。6.2.4雙硫腙溶液：稱取125mg雙硫腙（雙硫腙精制方法參考CJ/T51—2018中40.1.31部分）溶于500mL四氯化碳中，雙硫腙溶液需要儲備于棕色瓶并在4℃保存。6.2.5乙酸鈉緩沖液：將68g三水乙酸鈉溶于實驗用水（6.2.1）并稀釋至250mL，加入體積濃度為12.5%的醋酸250mL，混合后使用雙硫腙溶液（6.2.4）萃取數(shù)次去除痕量Zn元素，最后使用四氯化碳萃取去除剩余雙硫腙。6.2.6硫代硫酸鈉溶液：25g五水硫代硫酸鈉稀釋定容至100mL，使用雙硫腙溶液（6.2.4）多次萃取，去除溶液中的痕量Zn元素，最后用四氯化碳萃取去除剩余雙硫腙。6.2.7甲基橙指示劑：稱取0.02g甲基橙溶于2mL乙醇，用水稀釋至10mL。6.2.8Zn標準儲備溶液[ρ（Zn）=100mg/L]：?。?.2092±0.0001）g氯化鋅溶于10mL鹽酸（1+6）（6.2.3）中，在容量瓶中采用實驗用水（6.2.1）定容至1000mL；或采用經(jīng)國家認證并授予標準物質(zhì)證書的Zn單元素標準貯備液。6.2.9Zn標準使用溶液[ρ（Zn）=1mg/L]：吸取Zn標準儲備溶液（6.2.8）1mL，用實驗用水（6.2.1）6.3儀器設(shè)備分光光度計：儀器性能指標應符合GB/T26810—2011的規(guī)定；或使用符合GB/T26798—2011的規(guī)定，具有535nm波長光源的單波長單光束紫外可見分光光度計。6.4分析步驟6.4.1測定方法在100mL玻璃燒杯中加入20mL待測液（4.4.2），加入2滴甲基橙指示劑（6.2.7）攪拌，使用氨水（1+4）（5.2.5）調(diào)節(jié)pH（溶液由紅色初變?yōu)槌赛S色）；加入10mL乙酸鈉緩沖液（6.2.5）和2mL硫代硫酸鈉溶液（6.2.6），充分攪拌；加入20mL雙硫腙溶液（6.2.4）攪拌5min，靜置分層，使用塑料滴管緩慢吸取底層有機相于10mm比色皿中，在535nm波長下以四氯化碳作為參比，測定吸光度。6.4.2標準曲線擬合精確移取Zn標準使用溶液（6.2.9）0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL置于10mL容量瓶中，用實驗用水（6.2.1）定容至標線，按6.4.1規(guī)定操作，測定各標準溶液的吸光度，減去零標準吸光度，采用最小二乘法擬合吸光度對Zn含量的標準曲線。若使用便攜式吸光度檢測設(shè)備，可將擬合后的標準曲線信息寫入設(shè)備存儲。6.4.3Zn含量計算方法將樣品的吸光度減去空白試驗的吸光度，參考CJ/