病理科組織活檢標(biāo)本處理指南演講人：日期:目錄CONTENTS標(biāo)本接收與登記1包埋與切片2染色與封片3歸檔與質(zhì)控4標(biāo)本接收與登記Part.01

外觀檢查核對標(biāo)本容器是否完好無損，檢查標(biāo)簽是否清晰可辨，確認(rèn)標(biāo)本無泄漏或污染現(xiàn)象，確保運(yùn)輸過程中未發(fā)生物理性損傷。

內(nèi)容物驗(yàn)證根據(jù)申請單描述核對標(biāo)本類型（如組織塊、穿刺標(biāo)本等）和數(shù)量是否一致，特別關(guān)注微小標(biāo)本的完整性，避免遺漏或丟失。

固定狀態(tài)評估檢查標(biāo)本是否充分浸泡于足量固定液（如10%中性緩沖福爾馬林），評估固定液體積與組織比例（通常1:10），確保無干涸或腐敗現(xiàn)象。標(biāo)本完整性核查患者信息雙人核對身份信息匹配由兩名工作人員同步核對標(biāo)本標(biāo)簽與申請單上的患者姓名、性別、年齡、病歷號等基礎(chǔ)信息，采用“唱讀核對”方式降低人為差錯(cuò)風(fēng)險(xiǎn)。030201臨床資料審查確認(rèn)申請單包含完整的臨床病史、影像學(xué)結(jié)果及手術(shù)所見，重點(diǎn)核查病變部位、取材方式（如活檢/切除）和特殊檢查要求（如免疫組化、分子檢測）。危急值標(biāo)識處理對標(biāo)注“急診”“術(shù)中冰凍”等特殊標(biāo)識的標(biāo)本立即啟動優(yōu)先處理流程，并在交接記錄中雙簽名確認(rèn)接收時(shí)間。病理系統(tǒng)即時(shí)錄入電子化登記在接收后30分鐘內(nèi)完成病理信息系統(tǒng)（LIS）錄入，包括標(biāo)本類型、數(shù)量、接收時(shí)間及送檢醫(yī)生信息，系統(tǒng)自動生成唯一性病理編號并打印追溯條碼。異常情況記錄對信息不全、標(biāo)本不符等特殊情況在系統(tǒng)中標(biāo)記“待處理”狀態(tài)，觸發(fā)自動提醒功能并生成問題報(bào)告單交由質(zhì)控人員跟進(jìn)。多環(huán)節(jié)信息同步將錄入數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)共享至取材工作站、技術(shù)室和診斷終端，確保后續(xù)流程中可隨時(shí)調(diào)取患者歷史病理資料進(jìn)行對比分析。固定液類型選擇標(biāo)準(zhǔn)中性緩沖福爾馬林（10%NBF）01適用于大多數(shù)常規(guī)組織標(biāo)本，能保持細(xì)胞形態(tài)完整性并避免過度收縮或膨脹。乙醇-福爾馬林混合液02針對需快速固定的細(xì)小標(biāo)本（如穿刺活檢），可縮短固定時(shí)間同時(shí)減少人工假象。特殊固定液（如Bouin液）03適用于富含結(jié)締組織或鈣化標(biāo)本，能改善后續(xù)脫鈣和染色效果。無醛固定液（如PAXgene）04用于分子病理學(xué)檢測的標(biāo)本，可保留DNA/RNA完整性以支持基因測序需求。固定時(shí)間與體積比例常規(guī)組織固定時(shí)間大體積標(biāo)本處理固定液體積比例特殊組織調(diào)整建議6-24小時(shí)，過短可能導(dǎo)致固定不徹底，過長易引起組織硬化影響切片質(zhì)量。固定液體積應(yīng)至少為標(biāo)本體積的10倍，確保完全浸沒且滲透均勻。超過3cm的腫瘤標(biāo)本需剖開或切片后固定，避免中心區(qū)域固定延遲導(dǎo)致自溶。脂肪或空腔器官（如子宮、胃腸）需延長固定至48小時(shí)，并定期更換新鮮固定液。需在固定后使用EDTA或甲酸脫鈣液處理，每日監(jiān)測脫鈣進(jìn)度直至針頭可輕松刺入。骨組織或鈣化灶特殊標(biāo)本預(yù)處理要求避免擠壓損傷，固定前輕柔分離包膜并標(biāo)記切緣方向以輔助病理分期。淋巴結(jié)及造血組織立即用生理鹽水沖洗血液后速凍，禁止預(yù)固定以防冰晶偽影干擾診斷。術(shù)中快速冰凍標(biāo)本需無菌操作并分裝部分組織至專用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，避免固定液滅活病原體。微生物培養(yǎng)相關(guān)標(biāo)本脫水梯度時(shí)間控制乙醇濃度梯度設(shè)置從70%乙醇開始逐步過渡至無水乙醇，每級停留時(shí)間需根據(jù)組織類型調(diào)整（如脂肪組織需延長至2小時(shí)，黏膜組織縮短至45分鐘）。丙酮替代方案脫水機(jī)環(huán)境溫度應(yīng)維持在22±2℃，每升高5℃需縮短脫水時(shí)間15%-20%。針對特殊易碎組織可采用丙酮脫水，但需嚴(yán)格控制時(shí)間在30分鐘內(nèi)以避免過度硬化。溫度影響校準(zhǔn)透明劑更換標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)透明液出現(xiàn)乳白色絮狀物或組織懸浮時(shí)立即更換，常規(guī)處理量下每200例標(biāo)本需強(qiáng)制更換。二甲苯透明度檢測使用檸檬烯等生物基透明劑時(shí)，需每日檢測pH值（維持6.5-7.5）和比重（＞0.85g/cm3）。環(huán)保替代品監(jiān)控透明劑回收時(shí)應(yīng)通過0.22μm孔徑濾膜去除組織碎屑，延長使用壽命30%。多層過濾系統(tǒng)石蠟熔點(diǎn)匹配常規(guī)組織使用56-58℃低熔點(diǎn)石蠟，骨組織需采用62℃高熔點(diǎn)石蠟并預(yù)加熱至65℃滲透。真空滲透參數(shù)維持真空壓力-0.8至-1.0kPa，溫度波動范圍±1℃，單次滲透時(shí)間不超過4小時(shí)。蠟槽清潔規(guī)程每日處理結(jié)束后需清除表面凝固物，每周徹底更換新蠟并清洗槽體。浸蠟溫度監(jiān)控要點(diǎn)包埋與切片Part.02包埋方向定位規(guī)范組織學(xué)定位標(biāo)準(zhǔn)化確保組織樣本在包埋盒中的方向與后續(xù)切片需求一致，如皮膚組織需垂直包埋以觀察全層結(jié)構(gòu)，管腔器官應(yīng)橫斷面包埋。01標(biāo)記系統(tǒng)統(tǒng)一化采用顏色編碼或數(shù)字標(biāo)記區(qū)分不同病例及組織類型，避免樣本混淆，標(biāo)注應(yīng)清晰可見且耐溶劑侵蝕。包埋介質(zhì)溫度控制石蠟溫度需維持在60-65℃以保證充分滲透，過高會導(dǎo)致組織脆化，過低則影響包埋均勻性。邊緣對齊優(yōu)化組織邊緣與包埋盒邊緣保持2-3mm距離，防止切片時(shí)發(fā)生組織缺失或刀具損傷。020304切片厚度質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)化厚度參數(shù)常規(guī)病理切片厚度控制在3-5μm，特殊染色（如神經(jīng)組織）可調(diào)整至7-10μm，并定期校準(zhǔn)切片機(jī)微米刻度。02040301水浴溫度校準(zhǔn)展片水浴槽溫度穩(wěn)定在40-45℃，水溫波動超過±2℃會導(dǎo)致組織皺褶或過度膨脹。刀片狀態(tài)監(jiān)測每50個(gè)切片區(qū)塊更換新刀片或調(diào)整刀鋒位置，出現(xiàn)條紋、震顫現(xiàn)象需立即停機(jī)檢查。切片完整性評估通過鏡下檢查確認(rèn)無組織撕裂、空洞或厚度不均現(xiàn)象，不合格切片需重新制作并記錄質(zhì)控日志。預(yù)冷玻片處理載玻片需提前冷藏至4℃，利用溫差使展平的組織迅速吸附，減少褶皺形成概率?？咕砬?yīng)用雙鑷同步操作階梯式展片法防卷皺操作技巧在石蠟塊表面輕涂1%甘油-乙醇溶液，降低切片時(shí)邊緣卷曲風(fēng)險(xiǎn)，尤其適用于脂肪或纖維豐富組織。使用預(yù)熱的彎頭鑷固定切片一端，另一把精細(xì)鑷同步展開組織，保持動作協(xié)調(diào)避免機(jī)械拉伸。將切片分三段依次接觸水浴液面（先中部后兩端），配合哈氣法消除微小皺褶。染色與封片Part.03常規(guī)HE染色步驟組織脫水與透明化蘇木精-伊紅染色石蠟包埋與切片將固定后的組織依次通過梯度乙醇脫水，再經(jīng)二甲苯透明處理，確保后續(xù)浸蠟充分滲透。脫水時(shí)間需根據(jù)組織類型和厚度調(diào)整，避免過度硬化或殘留水分。將透明化后的組織置于熔融石蠟中浸漬，包埋成蠟塊后切片，厚度通?？刂圃?-6微米。切片需平整無褶皺，貼附于防脫載玻片上。切片經(jīng)脫蠟后，先以蘇木精染核（5-10分鐘），分化液去除非特異性著色，再以伊紅染胞質(zhì)（1-3分鐘），最后脫水透明并封片。染色結(jié)果應(yīng)核質(zhì)對比清晰，無沉淀或脫色。臨床需求評估實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員核對申請單信息，確認(rèn)組織塊可用性，并檢查相應(yīng)染色試劑的有效期及庫存。若需特殊試劑，需提前訂購并記錄批號。技術(shù)審核與試劑準(zhǔn)備染色質(zhì)量控制染色完成后需由資深技術(shù)員復(fù)核染色效果，如Masson三色染色的膠原纖維是否呈藍(lán)色，PAS染色的糖原是否呈紫紅色等，不合格者需重新制片。由病理醫(yī)師根據(jù)診斷需求提出特殊染色申請，明確染色目的（如顯示纖維、黏液、微生物等），并填寫申請單注明組織編號及染色類型。特殊染色申請流程根據(jù)切片面積選用中性樹膠或合成封片膠，膠液濃度需調(diào)整至適當(dāng)黏度（通常為60-80%二甲苯稀釋），避免封片時(shí)產(chǎn)生氣泡或膠液溢出。封片膠用量標(biāo)準(zhǔn)化膠液選擇與濃度配比使用校準(zhǔn)后的滴瓶或自動封片機(jī)，每張切片滴加膠液量為15-20微升，覆蓋組織區(qū)域但不超出蓋玻片邊緣。滴加前需確保切片完全脫水透明。定量滴加技術(shù)以45度角緩慢覆蓋蓋玻片，避免擠壓膠液導(dǎo)致組織變形。封片后需靜置至膠液固化，避免移動造成切片移位或膠液污染。蓋玻片操作規(guī)范歸檔與質(zhì)控Part.04玻片/蠟塊編碼規(guī)則唯一性標(biāo)識原則自動化標(biāo)簽生成采用字母+數(shù)字組合編碼，確保每個(gè)標(biāo)本具有獨(dú)立可追溯的編號，避免重復(fù)或混淆。分級分類標(biāo)注通過前綴區(qū)分組織類型（如T代表腫瘤、N代表正常），后綴標(biāo)注切片順序及染色方式（HE/IHC）。對接LIS系統(tǒng)自動打印防水防褪色標(biāo)簽，包含二維碼、病理號及患者姓名縮寫等核心信息。存儲環(huán)境溫濕度控制恒溫恒濕標(biāo)準(zhǔn)蠟塊庫房溫度維持在18-22℃，相對濕度40%-60%，配備雙路溫濕度監(jiān)測報(bào)警系統(tǒng)。使用惰性氣體柜存放珍貴標(biāo)本，定期更換硅膠干燥劑并監(jiān)控霉菌滋生情況。將常規(guī)標(biāo)本與高危傳染性標(biāo)本分柜存放，污染區(qū)配備獨(dú)