弧菌屬氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬PPT講座弧菌科弧菌屬異單胞菌屬發(fā)光桿菌屬等共8個(gè)屬O1群霍亂弧菌非O1群霍亂弧菌副溶血弧菌擬態(tài)弧菌·····分類等66個(gè)種弧菌屬（Vibrio）的共同生物學(xué)特性:除麥?zhǔn)匣【猓趸戈栃?、還原硝酸鹽發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸罕見產(chǎn)氣對(duì)O/129敏感（近年出現(xiàn)抗性株）鈉離子能刺激其生長，部分菌株嗜鹽兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高革蘭陰性、弧形（短桿）菌、動(dòng)力（＋）弧菌屬的致病性：（含鹽和海水環(huán)境中自身微生物群的一部分）腸道內(nèi)感染（霍亂、胃腸炎）腸道外感染（傷口感染、敗血癥等）

霍亂弧菌VibriocholeraeO1andO139霍亂弧菌是烈性腸道傳染病霍亂的病原菌，為我國法定傳染病（甲類），俗稱2號(hào)病。（1號(hào)病為鼠疫）。

血清學(xué)分群（型）在流行病學(xué)上有價(jià)值

抗原H抗原：共同抗原，特異性低O抗原（A、B、C)：是分群和分型的基礎(chǔ)。1.依據(jù)O抗原不同分155個(gè)血清群（O1群、O139群、非O1群霍亂弧菌）2.O1群有三個(gè)血清型

AB構(gòu)成小川型（Ogawa)

AC構(gòu)成稻葉型（Inaba）

ABC構(gòu)成彥島型(Hikojima）3.每個(gè)血清型根據(jù)表型不同分成古典和El-Tor兩個(gè)生物型。生物分型：O1群霍亂弧菌噬菌體分型：古典生物型El-Tor生物型第IV組噬菌體古典生物型第V組噬菌體El-Tor生物型霍亂的流行史1817-1923共6次印度恒河三角洲古典生物型1961第7次

印度尼西亞

Eltor生物型1992.10孟加拉灣的印度、孟加拉O139O139群霍亂弧菌在亞洲的流行(1992.10-1994.11)霍亂的流行史臨床意義(致病因素)進(jìn)入小腸，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有莢膜穿過小腸黏膜表面黏液層黏附于小腸黏膜上皮細(xì)胞刷狀緣的微絨毛上大量繁殖1.侵襲力霍亂弧菌腸毒素（CE,choleraenterotoxin）A1:活性亞單位21812A2:連接亞單位5000B：結(jié)合亞單位MW：80000-90000臨床意義(致病因素)2.霍亂腸毒素演示發(fā)病機(jī)制臨床意義霍亂弧菌在小腸黏膜部位的致病機(jī)制發(fā)病機(jī)理臨床意義感染途徑臨床意義感染途徑臨床意義感染途徑臨床意義感染途徑臨床意義感染途徑臨床意義演示感染途徑臨床意義霍亂弧菌的致病過程引起的疾病臨床意義霍亂弧菌的致?。▏?yán)重時(shí)液體丟失量達(dá)500～1000ml/h）臨床表現(xiàn)臨床意義劇烈上吐下瀉，嚴(yán)重脫水、酸中毒、痙攣、尿閉、休克、死亡。臨床分期臨床意義1.前驅(qū)期

無明顯前驅(qū)癥狀，或輕度腹鳴、腹脹和不適。臨床分期臨床意義2.吐瀉期

持續(xù)2～3天，因劇烈吐瀉造成大量水分和電解質(zhì)喪失。臨床分期臨床意義3.脫水虛脫期脫水貌，洗衣工手；循環(huán)衰竭、代謝中毒、急性腎衰；水電解質(zhì)平衡紊亂導(dǎo)致肌肉痙攣。4.恢復(fù)期各種癥狀趨于緩解，但可出現(xiàn)發(fā)熱霍亂弧菌的革蘭染色結(jié)果生物學(xué)特性(純培養(yǎng)革蘭染色)描述：革蘭陰性，彎曲弧形或逗點(diǎn)狀，糞便標(biāo)本中可首尾相接魚群樣平行排列魚群樣排列霍亂弧菌形態(tài)（電鏡）霍亂弧菌的掃描電鏡圖（金屬鍍膜）生物學(xué)特性(純培養(yǎng)掃描電鏡)描述：彎曲弧形或逗點(diǎn)狀霍亂患者小腸黏膜上皮局部平切電鏡圖霍亂弧菌掃描電鏡圖（金屬鍍膜）生物學(xué)特性(電鏡)霍亂弧菌的糖原顆粒（*）超薄切片，×105000

生物學(xué)特性(電鏡)霍亂弧菌的運(yùn)動(dòng)模式圖生物學(xué)特性：(米泔水樣便)描述：穿梭或流星樣動(dòng)力霍亂弧菌的鞭毛生物學(xué)特性(電鏡)霍亂弧菌的鞭毛染色生物學(xué)特性(特殊染色×10,000)生物學(xué)特性(培養(yǎng)特性－－培養(yǎng)條件)需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高最適生長溫度37℃最適pH8.2～9.0Max:10.2(耐堿怕酸)Eltor生物型在血平板上可形成β-溶血（有變異）初次分離用pH8.5堿性蛋白胨水，經(jīng)4～6小時(shí)液體表面大量繁殖，形成菌膜。生物學(xué)特性(培養(yǎng)特性－－選擇鑒別性平板)TCBS（硫代硫酸鹽-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板）霍亂弧菌在TCBS瓊脂平板上形成發(fā)酵蔗糖的較大的黃色菌落生物學(xué)特性

(培養(yǎng)特性－－選擇鑒別性平板)含亞碲酸鉀的培養(yǎng)基：4號(hào)瓊脂慶大霉素瓊脂霍亂弧菌在含亞碲酸鉀的瓊脂平板上將碲離子還原成原子態(tài)的碲，形成有灰褐色中心的菌落生物學(xué)特性(重要的生化反應(yīng))霍亂弧菌副溶血弧菌擬態(tài)弧菌······麥?zhǔn)匣【趸赶跛猁}還原＋＋＋＋＋＋－－生物學(xué)特性(重要的生化反應(yīng))除霍亂和擬態(tài)弧菌外，其余弧菌在不含鹽的培養(yǎng)基上不生長霍亂弧菌擬態(tài)弧菌副溶血弧菌耐鹽試驗(yàn)(%NaCl)0%6%7%10%＋＋－－＋＋－－－

＋＋－氧化酶、吲哚、枸櫞酸鹽利用、明膠實(shí)驗(yàn)（＋）賴氨酸、鳥氨酸脫羧酶（＋）、精氨酸雙水解（－）、動(dòng)力（＋）發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、甘露醇，乳糖（v）生物學(xué)特性

（重要的生化反應(yīng)）生物學(xué)特性(生物型的區(qū)分：根據(jù)生化反應(yīng)分型)生物學(xué)性狀(血清型：根據(jù)抗原分型)生物學(xué)性狀(抵抗力)河水中：20天蔬菜水果上：1周冰內(nèi)：4天耐堿怕酸：胃酸中存活4分鐘pH10.2仍能生長對(duì)慶大霉素耐藥：用于制作選擇性培養(yǎng)基多粘菌素B(50u/ml)：Eltrobiotype耐藥，

Classicbiotype敏感，可作為分型依據(jù)對(duì)熱、干燥、日光和常用消毒劑敏感，100℃1～2min即可殺死標(biāo)本的采集微生物學(xué)檢驗(yàn)患者的米泔水樣便、嘔吐物、尸檢腸內(nèi)容物或攜帶有病原菌的海產(chǎn)品和污染的水源等檢驗(yàn)方法（1）直接鏡檢：取標(biāo)本涂片2張，乙醇或甲醇固定，革蘭染色，油鏡觀察。微生物學(xué)檢驗(yàn)（2）動(dòng)力和制動(dòng)試驗(yàn)：水樣便，懸滴（壓滴）、高倍鏡、暗視野觀察動(dòng)力：穿梭似流星狀。同法制備另一標(biāo)本，加入1滴不含防腐劑的霍亂多價(jià)診斷血清（效價(jià)>1:64）；可見運(yùn)動(dòng)活潑的細(xì)菌運(yùn)動(dòng)停止并發(fā)生凝集，為制動(dòng)試驗(yàn)陽性。（3）玻片凝集：O1和O139抗體（4）分離培養(yǎng)：常用堿性蛋白胨水、選擇性平板（TCBS等），菌落特征和蔗糖發(fā)酵菌落，進(jìn)一步鑒定。檢驗(yàn)方法l）初步鑒定：與01群和O139群抗血清(多價(jià)和單價(jià)）凝集試驗(yàn)，菌落和菌體形態(tài)、氧化酶試驗(yàn)等作出初步報(bào)告。2）最后鑒定：根據(jù)純培養(yǎng)后全面生化反應(yīng)、血清學(xué)分群及分型、生物型。

微生物學(xué)檢驗(yàn)檢驗(yàn)方法1.初篩試驗(yàn)

(1)霍亂紅試驗(yàn)(2)O/129敏感試驗(yàn)(3)黏絲試驗(yàn)（4）耐鹽試驗(yàn)

微生物學(xué)檢驗(yàn)2.生物分型試驗(yàn)

a.羊紅細(xì)胞溶血試驗(yàn)

b.雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)

c.VP試驗(yàn)

d.多粘菌素B敏感試驗(yàn)

e.第IV和V組霍亂弧菌噬菌體裂解試驗(yàn)

3.鑒別試驗(yàn)霍亂弧菌與擬態(tài)弧菌鑒別：蔗糖發(fā)酵

（＋）

（－）霍亂弧菌和氣單胞菌和鄰單胞菌鑒別：黏絲試驗(yàn)

（＋）

（－）副溶血弧菌

（Vibrioparahaemolyticus)臨床意義人食入污染的海產(chǎn)品發(fā)?。ㄊ澄镏卸?、急性腹瀉）、傷口感染、菌血癥。致病因子：TDH、TRH和菌毛生物學(xué)特性（形態(tài)特征）革蘭陰性直或微彎桿菌，極端單鞭毛，無莢膜副溶血弧菌革蘭染色生物學(xué)特性（培養(yǎng)特征）需氧或兼性厭氧營養(yǎng)要求不高，嗜鹽（無鹽不生長,最適鹽濃度3.5%）最適pH7.7～8.0，最適溫度30～37℃TCBS上形成綠色菌落副溶血弧菌在TCBS上菌落生物學(xué)特性（培養(yǎng)特征）從腹瀉患者中分離到的副溶血弧菌95%以上在我妻培養(yǎng)基（人血培養(yǎng)基）上可產(chǎn)生β-溶血現(xiàn)象，稱為神奈川現(xiàn)象（Kanagawaphenomenon,KP）在SS平板上形成扁平，無色半透明，蠟滴狀的菌落，不易刮下，有辛辣味。生物學(xué)特性（生化特征）氧化酶 + 蔗糖發(fā)酵 - 葡萄糖發(fā)酵 +

NaCl生長試驗(yàn)

0%NaCl - 3%NaCl + 7%NaCl + 10%NaCl -脲酶+/-(臨床分離菌株常陽性）

標(biāo)本3.5%NaCl堿性蛋白胨水培養(yǎng)基TCBS分離培養(yǎng)可疑菌落（綠色）純培養(yǎng)菌種鑒定毒素測(cè)定微生物學(xué)檢驗(yàn)程序鑒定特征革蘭陰性弧菌或桿菌，動(dòng)力（＋）氧化酶（＋），臨床分離株脲酶常（＋）TCBS上綠色菌落、氯化鈉生長試驗(yàn)神奈川現(xiàn)象(+)各種生化試驗(yàn)TDH和TRH的檢測(cè)：毒素和基因檢測(cè)氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬

AeromonasandPlesiomonas分類根據(jù)分子遺傳學(xué)研究：氣單胞菌屬獨(dú)立成氣單胞菌科鄰單胞菌屬（僅一個(gè)種：類志賀鄰單胞菌）并入腸桿菌科臨床意義（氣單胞菌：腸道致病菌）致病物質(zhì)溶血毒素細(xì)胞毒素所致疾病腸內(nèi)感染主要表現(xiàn)為腹瀉（親水氣單胞菌）腸外感染敗血癥、傷口及軟組織感染（親水氣單胞菌和威隆氣單胞菌）臨床意義（鄰單胞菌屬）所致疾?。耗c道內(nèi)感染：胃腸炎（水樣瀉或痢疾樣腹瀉）

腸道外感染：菌血癥等（免疫力低下人群發(fā)生）病史：進(jìn)食生水或海產(chǎn)品氣單胞菌屬的描述革蘭陰性直或球桿菌，大多為極端單鞭毛；生長溫度范圍廣（0～45℃）；氧化酶（＋）、觸酶（＋）、硝酸鹽還原（＋）、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、有的產(chǎn)氣、產(chǎn)生多種胞外酶；對(duì)O129耐藥；主要存在于水生系統(tǒng)（更易生活于鹽水和淡水交界處，海洋環(huán)境中偶見）。鄰單胞菌屬的描述革蘭陰性桿菌，極端2～5根鞭毛（側(cè)鞭毛）；生長溫度范圍廣（8～45℃）；氧化酶（＋）、觸酶（＋）、硝酸鹽還原（＋）、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；可耐受的NaCl濃度為0～5％；大多數(shù)菌株對(duì)O129敏感；主要存在于水生系統(tǒng)（淡水和蒸汽水中比海水環(huán)境更易存在）。KEYPOINTSThegenusVibrioiscalssifiedinthefamilyVibrionaceae,anditisthetypegenusforthefamily.Vibriocholeraisthepathogenofcholeraanditisthemostimportantspe