第十四章血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性檢定第一節(jié)概述第二節(jié)白喉抗毒素效價(jià)檢定法目錄第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性檢定第三節(jié)人凝血因子效價(jià)測定法學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握

白喉抗毒素效價(jià)的生物檢定法中標(biāo)準(zhǔn)品和供試品溶液的制備，人凝血因子效價(jià)測定法中溶液的制備。

熟悉

白喉抗毒素效價(jià)的生物檢定及其結(jié)果判定，人凝血因子效價(jià)測定法。了解

白喉抗毒素效價(jià)測定的相關(guān)計(jì)算，人凝血因子效價(jià)測定的相關(guān)計(jì)算。第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性檢定概述第一節(jié)第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性檢定第一節(jié)

概述

免疫血清系由特定抗原(包括細(xì)菌毒素或類毒素、動物毒液、病毒抗原或人體細(xì)胞等)免疫動物獲得的血漿,經(jīng)消化(或不消化)、純化制成的抗毒素、抗血清或免疫球蛋白制劑，用于臨床治療或被動免疫預(yù)防。毒素系指特定細(xì)菌經(jīng)液體培養(yǎng)后,將其外毒素經(jīng)純化、結(jié)晶后制成的注射劑,用于臨床治療。

1.

免疫血清第一節(jié)

概述

白喉抗毒素系由白喉類毒素免疫馬匹獲得的血漿，經(jīng)胃酶消化后純化制得的注射劑。本品含有特異性抗毒素球蛋白[包括特異性IgG及F(ab')2]，具有特異中和白喉毒素的作用，用于白喉?xiàng)U菌感染的治療和被動免疫預(yù)防。

2.

白喉抗毒素第一節(jié)

概述人凝血因子Ⅶ是“人凝血酶原復(fù)合物”制品中的一個(gè)重要成分。在凝血過程中，F(xiàn)Ⅶ被Ca2+及組織因子激活成FⅦa，F(xiàn)Ⅶa進(jìn)而激活FⅩ及FⅨ，使FⅩ成為FⅩa，以完成血液凝固反應(yīng)。維生素K缺乏可引起因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的缺乏；先天性FⅦ缺乏也有偶見，此類患者可給予凝血酶原復(fù)合物作補(bǔ)償治療。3.

人凝血因子白喉抗毒素效價(jià)測定法第二節(jié)第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性檢定第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法

白喉是由白喉棒狀桿菌引起的急性中毒性疾病，白喉抗毒素用于預(yù)防和治療白喉。本品為無色或微黃色的澄明液體，其含適量防腐劑，久置可析出少量搖散的沉淀。1.

白喉抗毒素及其性質(zhì)第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法2.

白喉抗毒素效價(jià)的檢定方法（1）試驗(yàn)前準(zhǔn)備●試劑、稀釋液（硼酸鹽緩沖鹽水）●白喉抗毒素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備●供試品溶液的制備第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法2.

白喉抗毒素效價(jià)的檢定方法（2）測定法

選用體重2?3kg的健康白皮膚家兔，試驗(yàn)前1天用適宜方法進(jìn)行背部脫毛，凡皮膚發(fā)炎或出現(xiàn)大量斑點(diǎn)現(xiàn)象者不應(yīng)使用。每份供試品溶液注射2只家兔，每只家兔不能超過4份供試品溶液。每稀釋度注射0.1ml于家兔皮內(nèi)（應(yīng)在近背脊兩側(cè)）。每只家兔至少應(yīng)包括3個(gè)不同注射部位（前、中、后）的對照試驗(yàn)。標(biāo)準(zhǔn)品溶液與供試品溶液不得用同一支注射器注射。

第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法2.

白喉抗毒素效價(jià)的檢定方法（3）結(jié)果判定

試驗(yàn)家兔于注射后48小時(shí)及72小時(shí)各觀察1次，并測量反應(yīng)面積

以48?72小時(shí)結(jié)果作最后判定。注射對照部位一般于48?72小時(shí)內(nèi)輕度發(fā)紅，其直徑應(yīng)為10?14mm。供試品的效價(jià)應(yīng)以與多數(shù)對照的反應(yīng)強(qiáng)度相同的最高稀釋度判定之，但反應(yīng)強(qiáng)度不得超過對照。人凝血因子效價(jià)測定法第三節(jié)第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性檢定第三節(jié)

人凝血因子效價(jià)測定法

凝血因子是參與血液凝固過程的各種蛋白質(zhì)組分。它的生理作用是，在血管出血時(shí)被激活，和血小板連在一起并且補(bǔ)塞血管上的漏口。整個(gè)凝血過程大致上可以分為兩個(gè)階段，凝血酶原的激活及凝膠狀纖維蛋白的形成。

1.

人凝血因子及性質(zhì)第三節(jié)

人凝血因子效價(jià)測定法（1）試劑●稀釋液●含鈣促凝血酶原激酶●人凝血因子Ⅶ缺乏血漿2.人凝血因子Ⅶ效價(jià)的檢定方法第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法（2）人凝血因子VII標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

用人凝血因子Ⅶ缺乏血漿或生理氯化鈉溶液將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成每1ml約含1IU凝血因子Ⅶ，再用稀釋液分別做10倍、20倍、40倍和80倍稀釋，置冰浴備用。2.人凝血因子Ⅶ效價(jià)的檢定方法第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法（3）供試品溶液的制備

用人凝血因子Ⅶ缺乏血漿或生理氯化鈉溶液將供試品稀釋成每1ml約含1IU凝血因子Ⅶ，再用稀釋液分別做10倍、20倍、40倍稀釋，置冰浴備用。2.人凝血因子Ⅶ效價(jià)的檢定方法第二節(jié)

白喉抗毒素效價(jià)測定法（4）測定法

量取供試品溶液0.1ml，加入凝血因子Ⅶ缺乏血漿0.1ml，混勻，置37℃水浴保溫一定時(shí)間（一般3分鐘），然后加入已預(yù)熱至37℃的含鈣促凝血酶原激酶溶液0.2ml，記錄凝固時(shí)間。

用不同稀釋度的人凝血因子Ⅶ標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.1ml替代供試品溶液，同法操作。

以人凝血因子Ⅶ標(biāo)準(zhǔn)品溶液效價(jià)（IU/ml）的對數(shù)對其相應(yīng)的凝固時(shí)間（秒）的對數(shù)作直線回歸，求得直線回歸方程，計(jì)算供試品溶液人凝血因子Ⅶ效價(jià)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為供試品人凝血因子Ⅶ效價(jià)（IU/ml）。2.人凝血因子Ⅶ效價(jià)的檢定方法小結(jié)白喉抗毒素效價(jià)測定法系依據(jù)抗毒素能中和毒素的作用，將供試品與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對比試驗(yàn)，推算出1ml供試品中所含抗毒素的國際單位數(shù)（IU