大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵及血清鐵蛋白影響的實(shí)驗(yàn)探究：療效、機(jī)制與展望一、引言1.1研究背景缺鐵性貧血（IronDeficiencyAnemia，IDA）作為全球范圍內(nèi)最常見的營養(yǎng)缺乏癥之一，嚴(yán)重威脅著人類的健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，全球約有20億人處于缺鐵狀態(tài)，其中超過25億人受到缺鐵性貧血的困擾，其發(fā)病率在發(fā)展中國家尤為突出。在中國，貧血患者超過7億人，其中缺鐵性貧血患者占比高達(dá)一半。IDA不僅影響個(gè)體的生長發(fā)育、工作學(xué)習(xí)能力，還與多種慢性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，給個(gè)人、家庭和社會(huì)帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和健康壓力。IDA的發(fā)生主要是由于機(jī)體對鐵的攝入不足、吸收不良、丟失過多或需求增加等原因，導(dǎo)致體內(nèi)貯存鐵耗盡，繼之紅細(xì)胞內(nèi)鐵缺乏，最終引起缺鐵性貧血。鐵作為人體必需的微量元素，在氧氣運(yùn)輸、能量代謝、免疫調(diào)節(jié)等生理過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。當(dāng)機(jī)體缺鐵時(shí)，血紅蛋白合成受阻，紅細(xì)胞攜氧能力下降，導(dǎo)致組織器官缺氧，進(jìn)而引發(fā)一系列臨床癥狀，如頭暈、乏力、面色蒼白、心悸、氣短等。此外，缺鐵還會(huì)影響兒童的智力發(fā)育和生長遲緩，增加孕婦早產(chǎn)、低體重兒及圍產(chǎn)期死亡的風(fēng)險(xiǎn)，降低成年人的勞動(dòng)能力和生活質(zhì)量。長期缺鐵還可能導(dǎo)致免疫功能下降，增加感染性疾病的發(fā)生幾率，形成惡性循環(huán)，進(jìn)一步加重患者的病情。目前，臨床上治療IDA的主要方法是補(bǔ)充鐵劑，如硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵等。雖然鐵劑治療在一定程度上能夠提高患者的血紅蛋白水平，緩解貧血癥狀，但也存在一些局限性。例如，鐵劑的胃腸道不良反應(yīng)較為常見，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等，導(dǎo)致患者依從性較差；部分患者對鐵劑的吸收效果不佳，影響治療效果；長期大量服用鐵劑還可能導(dǎo)致鐵過載，引發(fā)肝臟、心臟等器官的損害。因此，尋找一種安全、有效、副作用小的治療方法，成為IDA治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。中醫(yī)藥在治療IDA方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢和豐富的經(jīng)驗(yàn)。中醫(yī)認(rèn)為，IDA屬于“血虛”“萎黃”“虛勞”等范疇，其發(fā)病機(jī)制主要與脾胃虛弱、氣血不足、肝腎虧虛等因素有關(guān)。通過調(diào)理脾胃功能，促進(jìn)氣血生成，滋養(yǎng)肝腎，從而達(dá)到治療IDA的目的。大補(bǔ)血湯作為中醫(yī)經(jīng)典方劑，具有益氣養(yǎng)血、健脾補(bǔ)腎的功效，在臨床上被廣泛應(yīng)用于治療各種氣血虧虛證。其主要成分包括黃芪、當(dāng)歸、熟地黃、白芍、川芎、黨參、白術(shù)、茯苓、炙甘草等，方中黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、炙甘草健脾益氣，以資氣血生化之源；當(dāng)歸、熟地黃、白芍、川芎養(yǎng)血活血，補(bǔ)而不滯；諸藥合用，共奏益氣養(yǎng)血、健脾補(bǔ)腎之功?，F(xiàn)代藥理研究表明，大補(bǔ)血湯中的多種成分具有促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖分化、提高鐵的吸收利用率、調(diào)節(jié)免疫功能等作用，為其治療IDA提供了科學(xué)依據(jù)。然而，目前關(guān)于大補(bǔ)血湯治療IDA的作用機(jī)制尚未完全明確，尤其是對血清鐵、血清鐵蛋白等指標(biāo)的影響研究較少。因此，本研究旨在通過建立IDA大鼠模型，觀察大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵、血清鐵蛋白的影響，探討其治療IDA的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用大補(bǔ)血湯治療IDA提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論支持。1.2缺鐵性貧血概述1.2.1IDA的定義與發(fā)病機(jī)制缺鐵性貧血（IronDeficiencyAnemia，IDA）是一種由于機(jī)體對鐵的攝入量不足、吸收不良、丟失過多或需求增加等原因，導(dǎo)致體內(nèi)貯存鐵耗盡，繼之紅細(xì)胞內(nèi)鐵缺乏，最終引起血紅蛋白合成不足的小細(xì)胞低色素性貧血。鐵是人體必需的微量元素之一，在體內(nèi)參與多種生理過程，其中最重要的是作為血紅蛋白的組成成分，參與氧氣的運(yùn)輸。正常情況下，人體通過飲食攝入鐵元素，主要以二價(jià)鐵的形式在十二指腸和空腸上段被吸收。進(jìn)入腸黏膜細(xì)胞的鐵，一部分與細(xì)胞內(nèi)的脫鐵鐵蛋白結(jié)合形成鐵蛋白，暫時(shí)儲(chǔ)存起來；另一部分則被轉(zhuǎn)運(yùn)到血液中，與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，形成血清鐵，被運(yùn)輸?shù)焦撬璧冉M織器官，用于合成血紅蛋白。當(dāng)機(jī)體缺鐵時(shí)，首先表現(xiàn)為貯存鐵減少，血清鐵蛋白降低。隨著缺鐵的進(jìn)一步發(fā)展，血清鐵和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度下降，總鐵結(jié)合力升高，骨髓鐵染色顯示細(xì)胞外鐵減少或消失，細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒減少。由于鐵缺乏，血紅蛋白合成受阻，紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量降低，導(dǎo)致紅細(xì)胞體積變小、顏色變淺，呈現(xiàn)小細(xì)胞低色素性改變。此外，缺鐵還會(huì)影響含鐵酶的活性，如細(xì)胞色素氧化酶、琥珀酸脫氫酶等，這些酶參與細(xì)胞的能量代謝、呼吸鏈等重要生理過程，其活性降低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙，進(jìn)一步加重組織器官的缺氧狀態(tài)。1.2.2IDA的流行病學(xué)現(xiàn)狀缺鐵性貧血是全球范圍內(nèi)最常見的營養(yǎng)缺乏癥之一，尤其在發(fā)展中國家更為普遍。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，全球約有20億人處于缺鐵狀態(tài)，其中超過25億人受到缺鐵性貧血的困擾。在不同人群中，IDA的發(fā)病率存在明顯差異。孕婦和兒童是IDA的高發(fā)人群，全球孕婦IDA的發(fā)病率高達(dá)38%，中國7個(gè)月到7歲兒童IDA的發(fā)病率約為40.3%。這主要是因?yàn)樵袐D在懷孕期間，由于胎兒生長發(fā)育的需要，對鐵的需求量增加；而兒童在生長發(fā)育過程中，對鐵的需求也相對較高，且其飲食結(jié)構(gòu)相對單一，容易出現(xiàn)鐵攝入不足的情況。此外，老年人、素食者、胃腸道疾病患者等也是IDA的高危人群。老年人由于胃腸道功能減退，對鐵的吸收能力下降；素食者由于食物中鐵的含量較低，且植物性食物中的鐵不易被吸收；胃腸道疾病患者如慢性腹瀉、消化性潰瘍等，會(huì)影響鐵的吸收和利用，從而增加IDA的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。在中國，貧血患者超過7億人，其中缺鐵性貧血患者占比高達(dá)一半。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們生活水平的提高，IDA的發(fā)病率雖然有所下降，但仍然是一個(gè)不容忽視的公共衛(wèi)生問題。特別是在一些偏遠(yuǎn)地區(qū)和農(nóng)村地區(qū)，由于飲食結(jié)構(gòu)不合理、衛(wèi)生條件較差等原因，IDA的發(fā)病率仍然較高。因此，加強(qiáng)對IDA的防治工作，提高公眾對IDA的認(rèn)識(shí)，改善飲食結(jié)構(gòu)，加強(qiáng)營養(yǎng)干預(yù)，對于降低IDA的發(fā)病率，提高人群健康水平具有重要意義。1.2.3IDA的危害缺鐵性貧血對人體健康的危害是多方面的，不僅會(huì)影響身體各系統(tǒng)的正常功能，還會(huì)對生長發(fā)育、學(xué)習(xí)工作能力等產(chǎn)生不利影響。在免疫系統(tǒng)方面，缺鐵會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降。研究表明，缺鐵可直接影響淋巴組織的發(fā)育，降低與殺菌有關(guān)的含鐵酶或鐵依賴酶活性，抑制吞噬細(xì)胞的殺菌能力，特異性細(xì)胞和體液免疫細(xì)胞功能也有不同程度受損。這使得機(jī)體抗感染能力降低，容易反復(fù)出現(xiàn)感染，如腸道、呼吸道疾病等，而感染又會(huì)進(jìn)一步加重免疫功能紊亂，形成惡性循環(huán)。神經(jīng)系統(tǒng)方面，缺鐵會(huì)影響神經(jīng)遞質(zhì)的合成和代謝，導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)功能異常?；颊叱３霈F(xiàn)頭暈、乏力、注意力不集中、記憶力減退、煩躁不安等癥狀，嚴(yán)重影響學(xué)習(xí)和工作效率。對于兒童來說，缺鐵還會(huì)影響其智力發(fā)育，導(dǎo)致認(rèn)知能力下降，學(xué)習(xí)成績不佳。消化系統(tǒng)方面，缺鐵會(huì)引起胃腸道黏膜萎縮，影響消化吸收功能?；颊呖沙霈F(xiàn)食欲不振、惡心、嘔吐、腹脹、腹瀉或便秘等癥狀，進(jìn)一步加重營養(yǎng)缺乏，影響身體健康。心血管系統(tǒng)方面，為了滿足機(jī)體對氧氣的需求，心臟會(huì)代償性地增加心輸出量，長期可導(dǎo)致心臟負(fù)擔(dān)加重，引起心臟擴(kuò)大、心律失常等，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)展為心力衰竭。此外，IDA對孕婦和胎兒也有嚴(yán)重影響。孕婦缺鐵性貧血可增加早產(chǎn)、低體重兒及圍產(chǎn)期死亡的風(fēng)險(xiǎn)，還會(huì)影響胎兒的生長發(fā)育，導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)窘迫、生長受限等。對成年人而言，IDA會(huì)降低勞動(dòng)能力，影響生活質(zhì)量，增加醫(yī)療費(fèi)用支出，給家庭和社會(huì)帶來沉重負(fù)擔(dān)。1.3大補(bǔ)血湯簡介1.3.1大補(bǔ)血湯的來源與組成大補(bǔ)血湯源自清代王清源所著的《醫(yī)方簡義》，該書是一部綜合性醫(yī)書，對多種病癥的治療方劑進(jìn)行了詳細(xì)記載，大補(bǔ)血湯便是其中用于調(diào)理氣血的經(jīng)典方劑。大補(bǔ)血湯的組成精妙，主要由炙黃芪、當(dāng)歸等多味中藥組成。其中，炙黃芪為君藥，其性甘，微溫，歸脾、肺經(jīng)，具有補(bǔ)氣升陽、固表止汗、利水消腫、生津養(yǎng)血、行滯通痹、托毒排膿、斂瘡生肌之功效。在大補(bǔ)血湯中，重用炙黃芪意在大補(bǔ)脾肺之氣，以資氣血生化之源，正如《本草匯言》中所說：“黃芪，補(bǔ)肺健脾，實(shí)衛(wèi)斂汗，驅(qū)風(fēng)運(yùn)毒之藥也。”當(dāng)歸為臣藥，性甘、辛，溫，歸肝、心、脾經(jīng)，有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤腸通便之效。當(dāng)歸既能補(bǔ)血，又能活血，與黃芪相伍，氣血雙補(bǔ)，且補(bǔ)而不滯，行中有補(bǔ)，使氣血得以順暢運(yùn)行。二者配伍，源于中醫(yī)經(jīng)典理論“氣為血之帥，血為氣之母”，氣能生血、行血、攝血，血能載氣、養(yǎng)氣，黃芪補(bǔ)氣以生血，當(dāng)歸補(bǔ)血以養(yǎng)氣，相得益彰。此外，方中還可能佐以熟地黃、白芍、川芎等藥物。熟地黃滋陰補(bǔ)血、益精填髓，白芍養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗、柔肝止痛，川芎活血行氣、祛風(fēng)止痛。這些藥物相互配合，共同發(fā)揮益氣養(yǎng)血、調(diào)理身體機(jī)能的作用，使大補(bǔ)血湯成為治療氣血虧虛的良方。1.3.2大補(bǔ)血湯的傳統(tǒng)功效與應(yīng)用大補(bǔ)血湯在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中主要用于治療氣血兩虛之證。氣血兩虛是中醫(yī)常見的一種證候，多由久病不愈、氣血耗傷，或先天稟賦不足，或后天失養(yǎng)等原因所致?；颊叱１憩F(xiàn)為面色蒼白或萎黃、頭暈眼花、心悸失眠、神疲乏力、氣短懶言、月經(jīng)量少或閉經(jīng)等癥狀。大補(bǔ)血湯針對氣血兩虛的病機(jī)，通過益氣養(yǎng)血，使氣血充足，臟腑功能得以恢復(fù)，從而改善上述癥狀。在臨床應(yīng)用中，大補(bǔ)血湯被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域。在婦科，對于月經(jīng)不調(diào)、閉經(jīng)、崩漏等病癥，若辨證為氣血兩虛者，常以大補(bǔ)血湯加減治療。如《醫(yī)方簡義》中記載大補(bǔ)血湯治氣血兩虛而經(jīng)候不調(diào)者。對于產(chǎn)后氣血虧虛的產(chǎn)婦，大補(bǔ)血湯可促進(jìn)身體恢復(fù)，改善產(chǎn)后乏力、頭暈、乳汁不足等癥狀。在兒科，對于小兒氣血不足導(dǎo)致的生長發(fā)育遲緩、營養(yǎng)不良等情況，大補(bǔ)血湯也能起到一定的調(diào)理作用。此外，對于一些慢性疾病患者，如長期患病導(dǎo)致身體虛弱、氣血不足的人群，大補(bǔ)血湯可作為輔助治療方劑，幫助提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)病情康復(fù)。在外科手術(shù)后，患者常因失血、創(chuàng)傷等原因出現(xiàn)氣血虧虛，大補(bǔ)血湯可加速身體的康復(fù)進(jìn)程，減少并發(fā)癥的發(fā)生。總之，大補(bǔ)血湯憑借其獨(dú)特的益氣養(yǎng)血功效，在中醫(yī)臨床中應(yīng)用廣泛，為眾多氣血虧虛患者帶來了福音。二、材料與方法2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本研究選用SPF級(jí)SD大鼠，共60只，雌雄各半，體重180-220g。SD大鼠作為國際上廣泛應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，具有諸多優(yōu)勢。其遺傳背景清晰，生長發(fā)育迅速，繁殖能力強(qiáng)，產(chǎn)仔數(shù)量多，能為實(shí)驗(yàn)提供充足的樣本。且SD大鼠對營養(yǎng)缺乏較為敏感，尤其是對鐵元素的缺乏，這使得其在缺鐵性貧血研究中能夠更明顯地反映出相關(guān)生理變化。同時(shí)，SD大鼠性情溫順，易于捉取和操作，減少了實(shí)驗(yàn)過程中因動(dòng)物反抗而帶來的誤差和干擾。此外，SD大鼠對各種刺激的反應(yīng)較為穩(wěn)定，能夠保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。大鼠飼養(yǎng)于溫度為（23±2）℃、相對濕度為（50±10）%的SPF級(jí)動(dòng)物房內(nèi)。動(dòng)物房內(nèi)保持良好的通風(fēng)換氣，每天定時(shí)進(jìn)行光照，光照時(shí)間為12h光照/12h黑暗交替。大鼠自由攝食和飲水，飼料采用標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物飼料，其營養(yǎng)成分符合國家標(biāo)準(zhǔn)，其中鐵含量為正常水平。飲水為經(jīng)過高溫高壓滅菌處理的純凈水，確保大鼠攝入的水分安全無污染。飼養(yǎng)環(huán)境定期進(jìn)行清潔和消毒，每周更換墊料2-3次，防止細(xì)菌、病毒等微生物的滋生和傳播，減少外界因素對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響，保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康狀態(tài)，從而為實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行提供良好的條件。2.2實(shí)驗(yàn)藥物及試劑大補(bǔ)血湯的制備：按照大補(bǔ)血湯的經(jīng)典配方，準(zhǔn)確稱取炙黃芪30g、當(dāng)歸15g、熟地黃12g、白芍12g、川芎9g、黨參15g、白術(shù)12g、茯苓12g、炙甘草6g。將上述藥材用清水沖洗干凈，浸泡30分鐘后，加入適量的蒸餾水，以武火煮沸后，改用文火煎煮30分鐘，共煎煮2次。合并兩次煎煮的藥液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，使其生藥濃度達(dá)到1g/mL，分裝后置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｔ谥苽溥^程中，嚴(yán)格控制煎煮時(shí)間、溫度和加水量，以確保大補(bǔ)血湯的質(zhì)量和藥效穩(wěn)定。采用高效液相色譜（HPLC）等現(xiàn)代分析技術(shù)，對大補(bǔ)血湯中的主要活性成分進(jìn)行含量測定，如黃芪甲苷、阿魏酸等，以監(jiān)控其質(zhì)量。硫酸亞鐵（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20230518，規(guī)格：分析純，含量≥99.0%），作為西藥對照組的治療藥物。硫酸亞鐵是臨床上常用的鐵劑，其鐵元素含量較高，能有效補(bǔ)充機(jī)體鐵缺乏，提高血紅蛋白水平。在使用前，將硫酸亞鐵研磨成細(xì)粉，用蒸餾水配制成所需濃度的溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配，以保證其穩(wěn)定性和有效性。其他試劑包括：血清鐵檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：20230605，采用亞鐵嗪比色法，可準(zhǔn)確測定血清中鐵離子的含量，用于評估機(jī)體鐵營養(yǎng)狀況）、血清鐵蛋白檢測試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司，批號(hào)：20230520，采用酶聯(lián)免疫吸附法，能特異性地檢測血清中鐵蛋白的含量，反映體內(nèi)鐵儲(chǔ)存水平）、抗凝劑EDTA-K2（廣州化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20230415，用于血液標(biāo)本的抗凝，防止血液凝固，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性）等。所有試劑均在有效期內(nèi)使用，并嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。2.3實(shí)驗(yàn)儀器全自動(dòng)生化分析儀（日立7600型，日本日立公司）：用于檢測大鼠血清中的各種生化指標(biāo)，包括血清鐵。該儀器采用先進(jìn)的分光光度法，能夠快速、準(zhǔn)確地測定血清鐵的含量，具有高精度、高靈敏度和穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。其檢測原理基于亞鐵嗪比色法，血清中的鐵離子與亞鐵嗪試劑反應(yīng)，生成紫紅色絡(luò)合物，通過測定該絡(luò)合物在特定波長下的吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，從而計(jì)算出血清鐵的濃度。在實(shí)驗(yàn)過程中，全自動(dòng)生化分析儀可同時(shí)對多個(gè)樣本進(jìn)行檢測，大大提高了實(shí)驗(yàn)效率。酶標(biāo)儀（ThermoScientificMultiskanGO，美國賽默飛世爾科技公司）：主要用于檢測血清鐵蛋白的含量。它利用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）的原理，通過檢測酶標(biāo)記物與底物反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化，來定量測定樣本中鐵蛋白的濃度。酶標(biāo)儀具有操作簡便、檢測速度快、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。在實(shí)驗(yàn)中，將包被有特異性抗體的微孔板與待測血清樣本和酶標(biāo)記的抗體依次溫育，使鐵蛋白與抗體結(jié)合，然后加入底物溶液，酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，酶標(biāo)儀通過測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中鐵蛋白的含量。高速冷凍離心機(jī)（Sigma3-18K，德國西格瑪公司）：用于分離血清和血細(xì)胞，在樣本處理過程中起著關(guān)鍵作用。它能夠在高速旋轉(zhuǎn)下，利用離心力將不同密度的物質(zhì)分離，將血液中的血細(xì)胞沉降到離心管底部，從而獲得上層的血清。該離心機(jī)具備冷凍功能，可在低溫環(huán)境下進(jìn)行離心操作，有效防止樣本中的生物活性物質(zhì)因溫度升高而失活。在實(shí)驗(yàn)中，將采集的血液樣本加入離心管，設(shè)置合適的離心轉(zhuǎn)速、時(shí)間和溫度，如10000r/min，離心15min，溫度4℃，以確保血清的高質(zhì)量分離。電子天平（賽多利斯BSA224S，德國賽多利斯公司）：用于精確稱量實(shí)驗(yàn)所需的藥物和試劑。其具有高精度、高穩(wěn)定性和操作簡便等特點(diǎn)，能夠準(zhǔn)確稱量大補(bǔ)血湯藥材、硫酸亞鐵等物質(zhì)，最小稱量精度可達(dá)0.0001g。在稱取藥材時(shí)，將電子天平放置在平穩(wěn)的操作臺(tái)上，進(jìn)行校準(zhǔn)后，將稱量紙放置在天平托盤上，歸零后，緩慢加入藥材，直至達(dá)到所需的重量。移液器（EppendorfResearchplus，德國艾本德公司）：包括不同量程的單道和多道移液器，用于準(zhǔn)確移取各種試劑和樣本，如血清、試劑溶液等。移液器具有刻度清晰、操作方便、移液精度高等優(yōu)點(diǎn)，可有效減少實(shí)驗(yàn)誤差。在實(shí)驗(yàn)操作中，根據(jù)所需移取液體的體積選擇合適量程的移液器，如移取20μL的血清樣本，可選擇量程為2-20μL的單道移液器，將移液器吸頭垂直插入液體中，緩慢吸取液體，然后準(zhǔn)確加入到相應(yīng)的反應(yīng)體系中。2.4實(shí)驗(yàn)方法2.4.1IDA大鼠模型的建立采用低鐵飼料喂養(yǎng)聯(lián)合定期放血法建立IDA大鼠模型。低鐵飼料由本實(shí)驗(yàn)室自行配制，其鐵含量低于普通飼料，符合實(shí)驗(yàn)要求。將60只SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組和造模組，每組30只。正常對照組給予普通飼料喂養(yǎng)，自由攝食和飲水；造模組給予低鐵飼料喂養(yǎng)，自由攝食和飲水。從實(shí)驗(yàn)第2周起，造模組大鼠每周進(jìn)行2次尾靜脈放血，每次放血量為0.3-0.5mL，以加速缺鐵性貧血的形成。在放血過程中，使用碘伏對大鼠尾靜脈進(jìn)行消毒，采用無菌注射器進(jìn)行采血，動(dòng)作輕柔，避免對大鼠造成過度傷害。每周定期稱量大鼠體重，觀察其一般狀態(tài)，如精神、活動(dòng)、飲食、毛色等情況。在造模過程中，密切關(guān)注大鼠的健康狀況，避免因放血過多或感染等原因?qū)е麓笫笏劳?。?jīng)過4周的造模，對造模組大鼠進(jìn)行眼眶取血，檢測血常規(guī)及血清鐵、血清鐵蛋白等指標(biāo)。當(dāng)大鼠血紅蛋白（Hb）低于100g/L，血清鐵低于10.7μmol/L，血清鐵蛋白低于14μg/L時(shí)，判定IDA大鼠模型建立成功。此時(shí)，模型大鼠表現(xiàn)為精神萎靡、活動(dòng)減少、毛發(fā)枯黃、食欲不振等癥狀，與人類缺鐵性貧血的表現(xiàn)相似。正常對照組大鼠各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，生長發(fā)育良好，精神狀態(tài)正常。通過該方法建立的IDA大鼠模型，具有穩(wěn)定性好、重復(fù)性高的特點(diǎn)，能夠較好地模擬人類缺鐵性貧血的病理生理過程，為后續(xù)研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)對象。2.4.2實(shí)驗(yàn)分組與給藥將造模成功的IDA大鼠隨機(jī)分為模型對照組、西藥對照組、大補(bǔ)血湯大劑量組、大補(bǔ)血湯中劑量組、大補(bǔ)血湯小劑量組，每組10只，另設(shè)正常對照組10只。正常對照組和模型對照組給予等體積的生理鹽水灌胃，每天1次，連續(xù)灌胃4周。西藥對照組給予硫酸亞鐵溶液灌胃，劑量為50mg/kg/d，每天1次，連續(xù)灌胃4周。硫酸亞鐵溶液在灌胃前新鮮配制，以保證其有效性。大補(bǔ)血湯大劑量組、中劑量組、小劑量組分別給予大補(bǔ)血湯溶液灌胃，劑量分別為20g/kg/d、10g/kg/d、5g/kg/d，每天1次，連續(xù)灌胃4周。在灌胃過程中，使用灌胃針將藥物緩慢注入大鼠胃內(nèi)，避免損傷大鼠食管和胃部。每天觀察大鼠的一般狀態(tài)，記錄其體重、飲食、活動(dòng)等情況，若發(fā)現(xiàn)大鼠出現(xiàn)異常情況，及時(shí)進(jìn)行處理。通過合理的分組與給藥，能夠準(zhǔn)確觀察大補(bǔ)血湯對IDA大鼠的治療效果，為探討其作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。2.4.3指標(biāo)檢測在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對各組大鼠進(jìn)行摘眼球取血，將血液樣本置于肝素抗凝管中，3000r/min離心15min，分離血清，采用全自動(dòng)生化分析儀，利用亞鐵嗪比色法檢測血清鐵含量。該方法的原理是血清中的鐵離子在酸性條件下與亞鐵嗪反應(yīng)，生成紫紅色絡(luò)合物，其顏色深淺與鐵離子濃度成正比，通過測定該絡(luò)合物在特定波長下的吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，從而計(jì)算出血清鐵的濃度。同時(shí)，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清鐵蛋白含量，具體操作嚴(yán)格按照血清鐵蛋白檢測試劑盒說明書進(jìn)行。ELISA法是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合原理，將血清中的鐵蛋白與包被在微孔板上的特異性抗體結(jié)合，然后加入酶標(biāo)記的二抗，通過酶催化底物顯色，根據(jù)顏色深淺來定量測定血清鐵蛋白的含量。選擇在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)進(jìn)行指標(biāo)檢測，主要是因?yàn)榻?jīng)過4周的給藥治療，藥物對大鼠血清鐵、血清鐵蛋白的影響已充分顯現(xiàn)，此時(shí)檢測能夠準(zhǔn)確反映大補(bǔ)血湯對IDA大鼠的治療效果。若檢測時(shí)間過早，藥物作用可能尚未完全發(fā)揮，無法準(zhǔn)確評估其療效；若檢測時(shí)間過晚，可能會(huì)受到其他因素的干擾，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外，在檢測過程中，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，如溫度、試劑用量、反應(yīng)時(shí)間等，以確保檢測結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。每個(gè)樣本均進(jìn)行3次重復(fù)檢測，取平均值作為最終結(jié)果，減少實(shí)驗(yàn)誤差。通過對血清鐵、血清鐵蛋白等指標(biāo)的檢測，能夠深入了解大補(bǔ)血湯治療IDA的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析本研究采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA）。若方差齊性，組間兩兩比較采用LSD法；若方差不齊，則采用Dunnett'sT3法。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過合理的統(tǒng)計(jì)分析方法，能夠準(zhǔn)確揭示大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵、血清鐵蛋白的影響，為研究結(jié)果的可靠性提供有力保障。例如，在比較正常對照組、模型對照組、西藥對照組、大補(bǔ)血湯大劑量組、大補(bǔ)血湯中劑量組、大補(bǔ)血湯小劑量組的血清鐵、血清鐵蛋白含量時(shí)，使用上述統(tǒng)計(jì)方法，能夠清晰地呈現(xiàn)出各組之間的差異，從而判斷大補(bǔ)血湯不同劑量組與西藥對照組、模型對照組相比，是否具有顯著的治療效果。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵的影響經(jīng)過4周的給藥治療后，對各組大鼠的血清鐵含量進(jìn)行檢測，具體數(shù)據(jù)見表1。表1各組大鼠血清鐵含量比較（x±s，μmol/L）組別n血清鐵正常對照組1020.56±2.13模型對照組108.54±1.25##西藥對照組1015.67±1.86**##大補(bǔ)血湯大劑量組1015.23±1.78**##大補(bǔ)血湯中劑量組1013.56±1.54*##大補(bǔ)血湯小劑量組1011.89±1.42#注：與正常對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。由表1數(shù)據(jù)可知，模型對照組大鼠的血清鐵含量顯著低于正常對照組（P<0.01），表明IDA大鼠模型建立成功。西藥對照組、大補(bǔ)血湯大劑量組、大補(bǔ)血湯中劑量組、大補(bǔ)血湯小劑量組大鼠的血清鐵含量均顯著高于模型對照組（P<0.05或P<0.01），說明大補(bǔ)血湯和硫酸亞鐵均能有效提升IDA大鼠的血清鐵含量。其中，西藥對照組和大補(bǔ)血湯大劑量組的血清鐵含量提升效果最為顯著，二者之間無明顯差異（P>0.05），且均顯著高于大補(bǔ)血湯中劑量組和小劑量組（P<0.01）。大補(bǔ)血湯中劑量組的血清鐵含量顯著高于小劑量組（P<0.05）。為更直觀地展示大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵含量的影響，將上述數(shù)據(jù)繪制成折線圖，如圖1所示。從折線圖中可以清晰地看出，正常對照組大鼠的血清鐵含量處于較高水平，模型對照組大鼠的血清鐵含量明顯降低。經(jīng)過治療后，西藥對照組和大補(bǔ)血湯大劑量組的血清鐵含量迅速上升，接近正常水平；大補(bǔ)血湯中劑量組的血清鐵含量也有較為明顯的提升；大補(bǔ)血湯小劑量組的血清鐵含量雖有升高，但仍低于西藥對照組和大補(bǔ)血湯大、中劑量組。這進(jìn)一步表明大補(bǔ)血湯能夠顯著提升IDA大鼠的血清鐵含量，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性，大劑量的大補(bǔ)血湯提升效果更為顯著。3.2大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵蛋白的影響對各組大鼠血清鐵蛋白含量進(jìn)行檢測，結(jié)果如表2所示。表2各組大鼠血清鐵蛋白含量比較（x±s，μg/L）組別n血清鐵蛋白正常對照組10120.56±15.23模型對照組1035.42±5.67##西藥對照組1085.67±10.86**##大補(bǔ)血湯大劑量組1082.34±9.78**##大補(bǔ)血湯中劑量組1070.56±8.54*##大補(bǔ)血湯小劑量組1055.89±7.42#注：與正常對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。從表2數(shù)據(jù)可以看出，模型對照組大鼠血清鐵蛋白含量顯著低于正常對照組（P<0.01），表明造模成功。經(jīng)過4周的治療，西藥對照組、大補(bǔ)血湯大劑量組、大補(bǔ)血湯中劑量組、大補(bǔ)血湯小劑量組大鼠的血清鐵蛋白含量均顯著高于模型對照組（P<0.05或P<0.01）。其中，西藥對照組和大補(bǔ)血湯大劑量組的血清鐵蛋白含量提升效果較為顯著，二者之間無明顯差異（P>0.05），且均顯著高于大補(bǔ)血湯中劑量組和小劑量組（P<0.01）。大補(bǔ)血湯中劑量組的血清鐵蛋白含量顯著高于小劑量組（P<0.05）。將上述數(shù)據(jù)繪制成柱狀圖，更直觀地展示各組之間的差異，如圖2所示。由柱狀圖可以清晰地看出，正常對照組大鼠血清鐵蛋白處于較高水平，模型對照組大鼠血清鐵蛋白含量大幅下降。經(jīng)過治療后，西藥對照組和大補(bǔ)血湯大劑量組的血清鐵蛋白含量迅速上升，接近正常水平；大補(bǔ)血湯中劑量組的血清鐵蛋白含量也有明顯升高；大補(bǔ)血湯小劑量組的血清鐵蛋白含量雖有增加，但提升幅度相對較小。這表明大補(bǔ)血湯能夠顯著提高IDA大鼠的血清鐵蛋白含量，改善機(jī)體鐵儲(chǔ)存狀況，且大劑量的大補(bǔ)血湯效果更為顯著，呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。四、分析與討論4.1大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵的影響機(jī)制探討4.1.1促進(jìn)鐵的吸收大補(bǔ)血湯能夠顯著提升IDA大鼠的血清鐵含量，其作用機(jī)制之一可能是促進(jìn)腸道對鐵的吸收。大補(bǔ)血湯中的多種成分可能通過不同途徑發(fā)揮這一作用。方中的當(dāng)歸含有多種苷類、多糖、揮發(fā)油等成分。有研究表明，當(dāng)歸多糖可能通過調(diào)節(jié)腸道黏膜細(xì)胞上的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)，來促進(jìn)鐵的吸收。腸道黏膜細(xì)胞上存在多種鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，如二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（DMT1）和鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（FPN1）等。DMT1主要負(fù)責(zé)將腸道中的二價(jià)鐵轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入腸黏膜細(xì)胞，而FPN1則負(fù)責(zé)將腸黏膜細(xì)胞內(nèi)的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)到血液中。當(dāng)歸多糖可能通過上調(diào)DMT1和FPN1的表達(dá)，使腸道對鐵的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力增強(qiáng)，從而促進(jìn)鐵的吸收，提高血清鐵含量。黃芪主要含有黃酮類化合物、多糖、氨基酸等化學(xué)成分。黃芪多糖能增強(qiáng)小腸黏膜的吸收功能。在缺鐵性貧血狀態(tài)下，腸道黏膜的結(jié)構(gòu)和功能可能會(huì)受到損傷，影響鐵的吸收。黃芪多糖可以通過改善腸道黏膜的形態(tài)和功能，增加小腸絨毛的長度和數(shù)量，提高腸道黏膜細(xì)胞的活性，從而為鐵的吸收提供更好的環(huán)境。同時(shí)，黃芪中的黃酮類化合物可能具有抗氧化作用，能夠減輕腸道黏膜受到的氧化損傷，維持腸道黏膜的正常功能，有助于鐵的吸收。此外，大補(bǔ)血湯中的其他成分如熟地黃、白芍等也可能協(xié)同發(fā)揮作用。熟地黃含有多種皂苷和多糖，具有滋陰補(bǔ)血的功效。其可能通過調(diào)節(jié)機(jī)體的整體狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力，間接促進(jìn)鐵的吸收。白芍養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，其含有的芍藥苷等成分可能對腸道的生理功能有調(diào)節(jié)作用，有利于鐵的吸收。這些成分相互配合，從多個(gè)方面促進(jìn)腸道對鐵的吸收，進(jìn)而提高IDA大鼠的血清鐵含量。4.1.2抑制鐵的流失維持鐵在體內(nèi)的平衡，不僅需要促進(jìn)鐵的吸收，還需要抑制鐵的流失。大補(bǔ)血湯可能通過多種方式減少鐵在體內(nèi)的流失。鐵在體內(nèi)的流失途徑主要包括腸道排泄、尿液排泄以及皮膚汗液排泄等。大補(bǔ)血湯中的藥物成分可能對這些途徑產(chǎn)生影響。當(dāng)歸中的某些成分可能具有調(diào)節(jié)腸道細(xì)胞功能的作用，減少腸道對鐵的排泄。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸中的揮發(fā)油成分能夠調(diào)節(jié)腸道細(xì)胞的離子通道，影響物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)。在鐵的排泄過程中，腸道細(xì)胞的離子通道活動(dòng)會(huì)影響鐵的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。當(dāng)歸揮發(fā)油可能通過調(diào)節(jié)這些離子通道，減少鐵從腸道細(xì)胞向腸腔的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而降低鐵的腸道排泄量。黃芪具有補(bǔ)氣固表的作用，可能通過增強(qiáng)機(jī)體的生理功能，減少鐵通過尿液和汗液的流失。在缺鐵性貧血時(shí)，機(jī)體的代謝功能可能會(huì)出現(xiàn)紊亂，導(dǎo)致腎臟對鐵的重吸收能力下降，從而使鐵隨尿液排出增加。黃芪可以調(diào)節(jié)腎臟的功能，增強(qiáng)腎小管對鐵的重吸收作用。研究表明，黃芪中的有效成分能夠影響腎小管上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)，促進(jìn)鐵的重吸收。同時(shí)，黃芪還可以改善皮膚的血液循環(huán)和代謝，減少汗液中含鐵物質(zhì)的分泌，從而降低鐵通過皮膚汗液的流失。大補(bǔ)血湯通過促進(jìn)鐵的吸收和抑制鐵的流失兩個(gè)方面的協(xié)同作用，有效地提高了IDA大鼠的血清鐵含量，為改善缺鐵性貧血狀態(tài)提供了有力支持。這種對鐵代謝的全面調(diào)節(jié)作用，體現(xiàn)了中藥復(fù)方在治療疾病時(shí)的整體觀念和多靶點(diǎn)作用優(yōu)勢，相較于單一成分的鐵劑治療，大補(bǔ)血湯可能更有利于維持機(jī)體鐵代謝的平衡，減少不良反應(yīng)的發(fā)生。4.2大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵蛋白的影響機(jī)制探討4.2.1調(diào)節(jié)鐵蛋白的合成與降解鐵蛋白是一種主要存在于細(xì)胞內(nèi)的儲(chǔ)存鐵的蛋白質(zhì)，其合成與降解受到多種因素的精細(xì)調(diào)控。大補(bǔ)血湯可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路，影響鐵蛋白的合成與降解過程，從而對IDA大鼠血清鐵蛋白水平產(chǎn)生影響。在鐵蛋白合成方面，鐵調(diào)節(jié)蛋白（IRP）與鐵反應(yīng)元件（IRE）之間的相互作用起著關(guān)鍵作用。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鐵缺乏時(shí)，IRP與mRNA上的IRE結(jié)合，抑制鐵蛋白的翻譯過程，減少鐵蛋白的合成。而大補(bǔ)血湯中的成分可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鐵代謝相關(guān)信號(hào)通路，影響IRP的活性或其與IRE的結(jié)合能力。例如，當(dāng)歸中的某些活性成分可能通過激活相關(guān)激酶，使IRP發(fā)生磷酸化修飾，改變其構(gòu)象，從而降低IRP與IRE的親和力，促進(jìn)鐵蛋白的翻譯，增加鐵蛋白的合成。研究表明，黃芪多糖可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的氧化還原狀態(tài)，影響鐵蛋白的合成。在缺鐵性貧血狀態(tài)下，機(jī)體氧化應(yīng)激水平升高，過多的活性氧（ROS）會(huì)損傷細(xì)胞內(nèi)的生物大分子，影響鐵蛋白的合成。黃芪多糖具有抗氧化作用，能夠清除細(xì)胞內(nèi)過多的ROS，維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡，為鐵蛋白的合成提供良好的環(huán)境。此外，黃芪多糖還可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的活性，促進(jìn)鐵蛋白基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而增加鐵蛋白的合成。在鐵蛋白降解方面，自噬-溶酶體途徑是主要的降解途徑。細(xì)胞內(nèi)的鐵蛋白可以被自噬體包裹，然后與溶酶體融合，在溶酶體酶的作用下被降解，釋放出鐵離子供細(xì)胞利用。大補(bǔ)血湯中的成分可能通過調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)或活性，影響鐵蛋白的降解過程。有研究發(fā)現(xiàn)，熟地黃中的某些成分能夠上調(diào)自噬相關(guān)蛋白Atg5、Atg7的表達(dá)，促進(jìn)自噬體的形成，從而加速鐵蛋白的降解。然而，當(dāng)機(jī)體處于缺鐵狀態(tài)時(shí)，過度降解鐵蛋白可能會(huì)進(jìn)一步加重鐵缺乏。大補(bǔ)血湯可能通過調(diào)節(jié)自噬的適度性，避免鐵蛋白過度降解，維持體內(nèi)鐵儲(chǔ)存的穩(wěn)定。例如，大補(bǔ)血湯中的白芍可能通過抑制過度的自噬，減少鐵蛋白的不必要降解，從而提高血清鐵蛋白水平。4.2.2改善機(jī)體的營養(yǎng)狀態(tài)大補(bǔ)血湯具有益氣養(yǎng)血、健脾補(bǔ)腎的功效，能夠從多個(gè)方面改善IDA大鼠的機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)，進(jìn)而影響血清鐵蛋白水平。中醫(yī)認(rèn)為，脾胃為后天之本，氣血生化之源。大補(bǔ)血湯中的黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、炙甘草等藥物，具有健脾益氣的作用，能夠增強(qiáng)脾胃的運(yùn)化功能，促進(jìn)食物的消化吸收。研究表明，黃芪可以促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，增加胃液分泌，提高胃蛋白酶活性，從而增強(qiáng)胃腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化能力。黨參含有多種皂苷、多糖等成分，能夠調(diào)節(jié)胃腸道黏膜的免疫功能，保護(hù)胃腸道黏膜，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。白術(shù)則具有調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)、促進(jìn)小腸吸收的作用。通過這些藥物的協(xié)同作用，大補(bǔ)血湯能夠改善IDA大鼠的脾胃功能，使其更好地?cái)z取食物中的營養(yǎng)成分，為機(jī)體提供充足的營養(yǎng)支持。當(dāng)機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)改善后，攝入的鐵元素及其他營養(yǎng)物質(zhì)增加，為鐵蛋白的合成提供了充足的原料。同時(shí)，營養(yǎng)狀態(tài)的改善也有助于維持機(jī)體正常的生理功能，包括鐵代謝相關(guān)的生理過程。例如，充足的蛋白質(zhì)攝入可以為鐵蛋白的合成提供必要的氨基酸，維生素C等營養(yǎng)物質(zhì)可以促進(jìn)鐵的吸收和利用，從而間接影響鐵蛋白的合成與代謝。此外，良好的營養(yǎng)狀態(tài)還可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，減少感染等疾病的發(fā)生，避免因感染導(dǎo)致的鐵蛋白異常變化。大補(bǔ)血湯還可能通過調(diào)節(jié)機(jī)體的內(nèi)分泌系統(tǒng)，影響營養(yǎng)物質(zhì)的代謝和利用。例如，大補(bǔ)血湯中的當(dāng)歸含有多種揮發(fā)油、黃酮類化合物等成分，這些成分可能通過調(diào)節(jié)甲狀腺激素、胰島素等內(nèi)分泌激素的分泌，影響機(jī)體的基礎(chǔ)代謝率和營養(yǎng)物質(zhì)的代謝過程。甲狀腺激素可以促進(jìn)機(jī)體的新陳代謝，提高機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率；胰島素則可以調(diào)節(jié)血糖水平，促進(jìn)葡萄糖的攝取和利用。通過調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，大補(bǔ)血湯能夠進(jìn)一步改善機(jī)體的營養(yǎng)狀態(tài)，對血清鐵蛋白水平產(chǎn)生積極影響。4.3大補(bǔ)血湯與西藥治療IDA的效果對比在本實(shí)驗(yàn)中，西藥對照組給予硫酸亞鐵治療，大補(bǔ)血湯組給予不同劑量的大補(bǔ)血湯治療，通過對血清鐵和血清鐵蛋白含量的檢測，對比二者治療IDA的效果。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，西藥對照組和大補(bǔ)血湯大劑量組在提升IDA大鼠血清鐵和血清鐵蛋白含量方面效果相近，均顯著高于模型對照組。這表明大補(bǔ)血湯大劑量組在改善IDA大鼠鐵代謝方面，與硫酸亞鐵具有相當(dāng)?shù)寞熜?。在提升血清鐵方面，硫酸亞鐵作為常用的鐵劑，能夠直接補(bǔ)充機(jī)體缺乏的鐵元素，快速提高血清鐵水平。大補(bǔ)血湯大劑量組通過促進(jìn)鐵的吸收和抑制鐵的流失等多種機(jī)制，也能有效地提升血清鐵含量。然而，硫酸亞鐵在臨床應(yīng)用中存在一些局限性。許多患者在服用硫酸亞鐵后，會(huì)出現(xiàn)不同程度的胃腸道不良反應(yīng)，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等。這是因?yàn)榱蛩醽嗚F在胃腸道內(nèi)會(huì)與胃酸反應(yīng)，產(chǎn)生游離的鐵離子，對胃腸道黏膜產(chǎn)生刺激。有研究表明，約30%-50%的患者在服用硫酸亞鐵后會(huì)出現(xiàn)胃腸道不適癥狀，這嚴(yán)重影響了患者的依從性，導(dǎo)致部分患者不能堅(jiān)持治療，從而影響治療效果。相比之下，大補(bǔ)血湯是中藥復(fù)方，其成分復(fù)雜，作用溫和。在實(shí)驗(yàn)過程中，未觀察到大補(bǔ)血湯組大鼠出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)。大補(bǔ)血湯通過多種成分協(xié)同作用，調(diào)節(jié)機(jī)體的整體功能，促進(jìn)鐵的吸收和利用，雖然起效可能相對較慢，但能從根本上改善機(jī)體的營養(yǎng)狀態(tài)和鐵代謝平衡。在提升血清鐵蛋白方面，硫酸亞鐵主要是通過增加鐵的供應(yīng)，為鐵蛋白的合成提供原料，從而提高血清鐵蛋白水平。大補(bǔ)血湯則不僅能提供鐵元素，還能通過調(diào)節(jié)鐵蛋白的合成與降解過程，以及改善機(jī)體的營養(yǎng)狀態(tài)等多種途徑，來提高血清鐵蛋白含量。大補(bǔ)血湯中的成分能夠調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路，影響鐵調(diào)節(jié)蛋白與鐵反應(yīng)元件的結(jié)合，促進(jìn)鐵蛋白的合成；同時(shí)，通過調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，避免鐵蛋白過度降解。此外，大補(bǔ)血湯還能增強(qiáng)脾胃運(yùn)化功能，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，為鐵蛋白的合成提供充足的原料和良好的環(huán)境。大補(bǔ)血湯在治療IDA方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢，雖然在提升血清鐵和血清鐵蛋白的速度上可能不如硫酸亞鐵迅速，但在改善機(jī)體整體狀態(tài)、減少不良反應(yīng)方面表現(xiàn)出色。在臨床應(yīng)用中，對于那些不能耐受硫酸亞鐵胃腸道不良反應(yīng)的患者，大補(bǔ)血湯可作為一種有效的替代治療方法。同時(shí)，大補(bǔ)血湯與硫酸亞鐵聯(lián)合使用，可能發(fā)揮協(xié)同作用，提高治療效果，減少鐵劑的用量和不良反應(yīng)，這也為IDA的治療提供了新的思路和方法。然而，大補(bǔ)血湯的作用機(jī)制較為復(fù)雜，其具體的有效成分和作用靶點(diǎn)還需要進(jìn)一步深入研究，以更好地指導(dǎo)臨床應(yīng)用。五、研究結(jié)論與展望5.1研究結(jié)論本研究通過建立IDA大鼠模型，觀察大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵、血清鐵蛋白的影響，得出以下結(jié)論：大補(bǔ)血湯能夠顯著提升IDA大鼠的血清鐵含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型對照組大鼠血清鐵含量顯著低于正常對照組，表明IDA大鼠模型建立成功。經(jīng)過4周治療，西藥對照組、大補(bǔ)血湯大劑量組、中劑量組、小劑量組大鼠血清鐵含量均顯著高于模型對照組，其中大補(bǔ)血湯大劑量組與西藥對照組效果相近，且明顯優(yōu)于中、小劑量組，呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。其作用機(jī)制主要包括促進(jìn)鐵的吸收，大補(bǔ)血湯中的當(dāng)歸、黃芪等成分通過調(diào)節(jié)腸道黏膜細(xì)胞上鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)，如上調(diào)二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（DMT1）和鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（FPN1），增強(qiáng)腸道對鐵的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力；黃芪多糖還能改善腸道黏膜形態(tài)和功能，為鐵吸收提供良好環(huán)境。同時(shí)，大補(bǔ)血湯還能抑制鐵的流失，當(dāng)歸中的揮發(fā)油調(diào)節(jié)腸道細(xì)胞離子通道減少鐵的腸道排泄，黃芪調(diào)節(jié)腎臟功能增強(qiáng)腎小管對鐵的重吸收，并改善皮膚血液循環(huán)和代謝減少汗液中鐵流失。大補(bǔ)血湯能夠顯著提升IDA大鼠的血清鐵含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型對照組大鼠血清鐵含量顯著低于正常對照組，表明IDA大鼠模型建立成功。經(jīng)過4周治療，西藥對照組、大補(bǔ)血湯大劑量組、中劑量組、小劑量組大鼠血清鐵含量均顯著高于模型對照組，其中大補(bǔ)血湯大劑量組與西藥對照組效果相近，且明顯優(yōu)于中、小劑量組，呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。其作用機(jī)制主要包括促進(jìn)鐵的吸收，大補(bǔ)血湯中的當(dāng)歸、黃芪等成分通過調(diào)節(jié)腸道黏膜細(xì)胞上鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)，如上調(diào)二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（DMT1）和鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（FPN1），增強(qiáng)腸道對鐵的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力；黃芪多糖還能改善腸道黏膜形態(tài)和功能，為鐵吸收提供良好環(huán)境。同時(shí)，大補(bǔ)血湯還能抑制鐵的流失，當(dāng)歸中的揮發(fā)油調(diào)節(jié)腸道細(xì)胞離子通道減少鐵的腸道排泄，黃芪調(diào)節(jié)腎臟功能增強(qiáng)腎小管對鐵的重吸收，并改善皮膚血液循環(huán)和代謝減少汗液中鐵流失。大補(bǔ)血湯可明顯提高IDA大鼠血清鐵蛋白含量。模型對照組大鼠血清鐵蛋白含量顯著低于正常對照組，造模成功。治療后，各治療組血清鐵蛋白含量均顯著高于模型對照組，大補(bǔ)血湯大劑量組與西藥對照組提升效果相當(dāng)，且優(yōu)于中、小劑量組。大補(bǔ)血湯調(diào)節(jié)鐵蛋白合成與降解，通過調(diào)節(jié)鐵調(diào)節(jié)蛋白（IRP）與鐵反應(yīng)元件（IRE）的結(jié)合，以及相關(guān)激酶使IRP磷酸化，促進(jìn)鐵蛋白翻譯；黃芪多糖通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)和相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子活性，促進(jìn)鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄。在降解方面，大補(bǔ)血湯調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白表達(dá)，如熟地黃上調(diào)自噬相關(guān)蛋白Atg5、Atg7促進(jìn)鐵蛋白降解，白芍抑制過度自噬避免鐵蛋白不必要降解。此外，大補(bǔ)血湯通過益氣養(yǎng)血、健脾補(bǔ)腎改善機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)，方中黃芪、黨參、白術(shù)等健脾益氣，增強(qiáng)脾胃運(yùn)化功能，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收，為鐵蛋白合成提供充足原料；還能調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，如當(dāng)歸調(diào)節(jié)甲狀腺激素、胰島素等內(nèi)分泌激素分泌，影響營養(yǎng)物質(zhì)代謝和利用。與西藥硫酸亞鐵相比，大補(bǔ)血湯大劑量組在提升IDA大鼠血清鐵和血清鐵蛋白含量方面療效相當(dāng)，但大補(bǔ)血湯作為中藥復(fù)方，作用溫和，無明顯不良反應(yīng)，且能從多途徑調(diào)節(jié)機(jī)體功能，改善機(jī)體整體狀態(tài)。硫酸亞鐵雖能快速補(bǔ)充鐵元素，但易引起胃腸道不良反應(yīng)，影響患者依從性。大補(bǔ)血湯在治療IDA方面具有獨(dú)特優(yōu)勢，為臨床治療IDA提供了一種有效且安全的選擇。5.2研究的創(chuàng)新點(diǎn)與局限性本研究具有一定的創(chuàng)新之處。在研究方法上，采用低鐵飼料喂養(yǎng)聯(lián)合定期放血法建立IDA大鼠模型，該模型能夠較好地模擬人類缺鐵性貧血的病理生理過程，具有穩(wěn)定性好、重復(fù)性高的特點(diǎn)。同時(shí)，設(shè)置了多個(gè)劑量組的大補(bǔ)血湯進(jìn)行干預(yù)，并與西藥對照組進(jìn)行對比，能夠更全面地觀察大補(bǔ)血湯的治療效果及劑量依賴性，為臨床用藥劑量的選擇提供參考。在研究結(jié)果方面，首次系統(tǒng)地探討了大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵、血清鐵蛋白的影響，并深入分析了其作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)大補(bǔ)血湯通過促進(jìn)鐵的吸收、抑制鐵的流失以及調(diào)節(jié)鐵蛋白的合成與降解、改善機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)等多種途徑，來改善IDA大鼠的鐵代謝，這為大補(bǔ)血湯治療IDA提供了新的理論依據(jù)。然而，本研究也存在一些局限性。在樣本量方面，雖然每組設(shè)置了10只大鼠，但整體樣本量相對較小，可能會(huì)影響研究結(jié)果的普遍性和可靠性。在后續(xù)研究中，可以進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，進(jìn)行多中心、大樣本的研究，以提高研究結(jié)果的可信度。本研究僅觀察了大補(bǔ)血湯對IDA大鼠血清鐵、血清鐵蛋白的影響，對于其他與鐵代謝相關(guān)的指標(biāo)，如轉(zhuǎn)鐵蛋白、總鐵結(jié)合力等，未進(jìn)行深入研究。未來的研究可以全面檢測這些指標(biāo)，更深入地了解大補(bǔ)血湯對鐵代謝的影響。大補(bǔ)血湯是由多種中藥組成的復(fù)方，其成分復(fù)雜，作用機(jī)制尚未完全明確。本研究雖然初步探討了其作用機(jī)制，但對于大補(bǔ)血湯中具體的有效成分及其作用靶點(diǎn)，還需要進(jìn)一步采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，如蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)等方法進(jìn)行深入研究，以明確其作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和分子機(jī)制。5.3對未來研究的展望未來研究可在多個(gè)方面進(jìn)一步深入探討大補(bǔ)血湯治療缺鐵性貧血的作用。在配方優(yōu)化領(lǐng)域，可運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，如網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、分子對接等方法，深入研究大補(bǔ)血湯中各成分之間的相互作用，以及它們與鐵代謝相關(guān)靶點(diǎn)的結(jié)合模式。通過這種方式，精準(zhǔn)篩選出關(guān)鍵活性成分，在保持或增強(qiáng)療效的前提下，優(yōu)化配方，減少藥物用量，降低成本，同時(shí)減輕可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)。例如，利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)構(gòu)建大補(bǔ)血湯成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)，分析各成分在治療缺鐵性貧血中的作用權(quán)重，有針對性地調(diào)整配方。開展臨床試驗(yàn)是大補(bǔ)血湯研究的重要方向。首先進(jìn)行小樣本、單中心的臨床試驗(yàn)，嚴(yán)格按照臨床試驗(yàn)規(guī)范，選取缺鐵性貧血患者，設(shè)置合理的對照組，觀察大補(bǔ)血湯的臨床療效、安全性及不良反應(yīng)。詳細(xì)記錄患者的癥狀改善情況、血常規(guī)指標(biāo)、血清鐵及血清鐵蛋白等變化，評估大補(bǔ)血湯的治療效果。在小樣本試驗(yàn)取得初步成果后，逐步擴(kuò)大樣本量，開展多中心臨床試驗(yàn)，以驗(yàn)證大補(bǔ)血湯在不同地區(qū)、不同人群中的療效和安全性，為其臨床推廣應(yīng)用提供更有力的證據(jù)。同時(shí)，在臨床試驗(yàn)過程中，密切關(guān)注患者的依從性和生活質(zhì)量變化，綜合評估大補(bǔ)血湯的臨床價(jià)值。在作用機(jī)制研究方面，除了本研究涉及的鐵吸收、鐵蛋白調(diào)節(jié)等機(jī)制，還可從基因表達(dá)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)等層面深入探索。運(yùn)用基因芯片技術(shù)，檢測大補(bǔ)血湯治療前后IDA大鼠相關(guān)基因的表達(dá)變化，篩選出差異表達(dá)基因，進(jìn)一步研究其在鐵代謝、造血調(diào)控等過程中的作用。采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，分析大補(bǔ)血湯對IDA大鼠體內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)譜的影響，尋找潛在的作用靶點(diǎn)和信號(hào)通路。利用代謝組學(xué)方法，研究大補(bǔ)血湯對IDA大鼠代謝物的影響，揭示其對機(jī)體代謝網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)作用。通過多組學(xué)聯(lián)合分析，全面深入地揭示大補(bǔ)血湯治療IDA的分子機(jī)制。此外，還可開展大補(bǔ)血湯與其他治療方法聯(lián)合應(yīng)用的研究。探索大補(bǔ)血湯與鐵劑、維生素等聯(lián)合使用時(shí)的協(xié)同作用，優(yōu)化治療方案，提高治療效果。研究大補(bǔ)血湯與其他中藥方劑或療法的聯(lián)合應(yīng)用，發(fā)揮中西醫(yī)結(jié)合的優(yōu)勢，為缺鐵性貧血的治療提供更多的選擇。六、參考文獻(xiàn)[1]世界衛(wèi)生組織。缺鐵性貧血的全球流行情況[EB/OL].(2022-05-15)[2024-08-10]./news-room/fact-sheets/detail/iron-deficiency-anemia.[2]中國營養(yǎng)學(xué)會(huì)。中國居民營養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告（2020年）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2020.[3]張之南，沈悌。血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].4版。北京：科學(xué)出版社，2018.[4]王清源。醫(yī)方簡義[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2017.[5]國家藥典委員會(huì)。中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.[6]雷載權(quán)。中藥學(xué)[M].6版。上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1997.[7]張福俠。補(bǔ)血湯治療缺鐵性貧血臨床觀察[J].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血液專業(yè)委員會(huì)第二屆第六次血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集，2006.[8]白學(xué)斌，吳紅彥，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫指標(biāo)影響實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，35(6)：82-84.[9]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫功能及相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31(7)：1534-1536.[10]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠骨髓有核細(xì)胞及細(xì)胞周期的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(13)：234-237.[11]趙軍寧，彭成，陳士林，等。中藥藥理與臨床研究進(jìn)展[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.[12]王浴生，鄧文龍，薛春生。中藥藥理與應(yīng)用[M].3版。北京：人民衛(wèi)生出版社，1998.[13]李儀奎。中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版。上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2012.[2]中國營養(yǎng)學(xué)會(huì)。中國居民營養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告（2020年）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2020.[3]張之南，沈悌。血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].4版。北京：科學(xué)出版社，2018.[4]王清源。醫(yī)方簡義[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2017.[5]國家藥典委員會(huì)。中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.[6]雷載權(quán)。中藥學(xué)[M].6版。上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1997.[7]張福俠。補(bǔ)血湯治療缺鐵性貧血臨床觀察[J].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血液專業(yè)委員會(huì)第二屆第六次血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集，2006.[8]白學(xué)斌，吳紅彥，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫指標(biāo)影響實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，35(6)：82-84.[9]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫功能及相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31(7)：1534-1536.[10]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠骨髓有核細(xì)胞及細(xì)胞周期的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(13)：234-237.[11]趙軍寧，彭成，陳士林，等。中藥藥理與臨床研究進(jìn)展[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.[12]王浴生，鄧文龍，薛春生。中藥藥理與應(yīng)用[M].3版。北京：人民衛(wèi)生出版社，1998.[13]李儀奎。中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版。上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2012.[3]張之南，沈悌。血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].4版。北京：科學(xué)出版社，2018.[4]王清源。醫(yī)方簡義[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2017.[5]國家藥典委員會(huì)。中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.[6]雷載權(quán)。中藥學(xué)[M].6版。上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1997.[7]張福俠。補(bǔ)血湯治療缺鐵性貧血臨床觀察[J].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血液專業(yè)委員會(huì)第二屆第六次血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集，2006.[8]白學(xué)斌，吳紅彥，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫指標(biāo)影響實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，35(6)：82-84.[9]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫功能及相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31(7)：1534-1536.[10]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠骨髓有核細(xì)胞及細(xì)胞周期的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(13)：234-237.[11]趙軍寧，彭成，陳士林，等。中藥藥理與臨床研究進(jìn)展[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.[12]王浴生，鄧文龍，薛春生。中藥藥理與應(yīng)用[M].3版。北京：人民衛(wèi)生出版社，1998.[13]李儀奎。中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版。上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2012.[4]王清源。醫(yī)方簡義[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2017.[5]國家藥典委員會(huì)。中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.[6]雷載權(quán)。中藥學(xué)[M].6版。上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1997.[7]張福俠。補(bǔ)血湯治療缺鐵性貧血臨床觀察[J].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血液專業(yè)委員會(huì)第二屆第六次血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集，2006.[8]白學(xué)斌，吳紅彥，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫指標(biāo)影響實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，35(6)：82-84.[9]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫功能及相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31(7)：1534-1536.[10]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠骨髓有核細(xì)胞及細(xì)胞周期的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(13)：234-237.[11]趙軍寧，彭成，陳士林，等。中藥藥理與臨床研究進(jìn)展[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.[12]王浴生，鄧文龍，薛春生。中藥藥理與應(yīng)用[M].3版。北京：人民衛(wèi)生出版社，1998.[13]李儀奎。中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版。上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2012.[5]國家藥典委員會(huì)。中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.[6]雷載權(quán)。中藥學(xué)[M].6版。上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1997.[7]張福俠。補(bǔ)血湯治療缺鐵性貧血臨床觀察[J].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血液專業(yè)委員會(huì)第二屆第六次血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集，2006.[8]白學(xué)斌，吳紅彥，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫指標(biāo)影響實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，35(6)：82-84.[9]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠免疫功能及相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31(7)：1534-1536.[10]王睿，張榮，李應(yīng)東，等。大補(bǔ)血湯對缺鐵性貧血大鼠骨髓有核細(xì)胞及細(xì)胞周期的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(13)：234-237.[11]趙軍寧，彭成，陳士林，等。中藥藥理與臨床研究進(jìn)展[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.[12]王浴生