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文檔簡介
2026屆延安中學生物高三上期末考試模擬試題考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內,不得在試卷上作任何標記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內,第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.公元前400年的《黃帝內經》中記載過“消渴癥”,即糖尿病。糖尿病在現(xiàn)代社會的發(fā)病率越來越高。下列有關血糖調節(jié)和糖尿病的說法錯誤的是()A.胰島素的作用結果反過來導致胰島素的分泌減少屬于反饋調節(jié)B.胰島素和胰高血糖素通過協(xié)同作用,共同維持血糖含量的穩(wěn)定C.糖尿病的防治應控制進食糖類食物,適當運動并避免暴飲暴食D.食物豐沛而少節(jié)制,血糖長期處于高位是誘發(fā)糖尿病的重要因素2.下列關于原核生物的敘述,錯誤的是()A.大腸桿菌的細胞內有核糖體 B.細胞對物質的吸收具有選擇性C.擬核區(qū)中含有環(huán)狀的DNA分子 D.藍藻細胞的葉綠體中含有葉綠素3.科研人員研究棉花細胞核中一個DNA分子中a、b、c三個連續(xù)基因,其分布狀況如圖所示,圖中Ⅰ、Ⅱ為基因間的序列。有關敘述正確的是()A.a、b、c所攜帶的遺傳信息不可能同時得到執(zhí)行B.圖中堿基對替換發(fā)生在a區(qū)段屬于基因突變,發(fā)生在Ⅰ區(qū)段不屬于基因突變C.該DNA分子含n個堿基,其轉錄的mRNA分子的堿基數(shù)是n/2個D.Ⅰ中插入一個抗蟲基因以提高植物的抗蟲性,這種變異屬于染色體結構變異4.收獲的糧食要先晾曬,使含水量降到行業(yè)標準規(guī)定的值以下,再入庫儲藏,這樣可以減少或避免霉爛的發(fā)生,延長儲藏時間。其理由不成立的是()A.水是細胞內大量化學反應的反應物B.水為細胞內的化學反應提供了水溶液環(huán)境C.結合水是細胞結構的重要組成成分D.水是細胞內良好的溶劑,運輸養(yǎng)料和廢物5.抽血化驗是醫(yī)生進行診斷的重要依據(jù),下表是某男子血液化驗單中的部分數(shù)據(jù),相關敘述不正確的是()項目測定值單位參考范圍鈣離子1.81mmol/L2.02~2.60胰島素1.7mIU/L3.0~4.0游離甲狀腺激素33pmoI/Ll2~22A.血液中每種成分的含量都是固定不變的B.該男子可能出現(xiàn)抽搐等癥狀C.該男子的組織細胞攝取和利用葡萄糖的能力較差D.該男子促甲狀腺激素的分泌可能受到抑制6.下列關于光合作用的敘述,錯誤的是A.魯賓和卡門用同位素標記法證明了光合作用釋放的氧氣來自水B.一般情況下,光合作用所利用的光都是可見光C.在暗反應階段,C3可被[H]還原為C5和糖類D.溫度的變化不會影響光合作用的光反應階段二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)“中國柑橘之鄉(xiāng)”常德石門縣由于獨特的土壤氣候環(huán)境,具有得天獨厚的優(yōu)質果品生產的資源優(yōu)勢,被國際果業(yè)界認定為“蜜橘絕佳產地”。但由于缺乏農產品的深加工企業(yè),近幾年柑橘滯銷現(xiàn)象嚴重。(1)當?shù)卣胍胍粋€大型的果酒加工廠。分離純化上述菌種所用的培養(yǎng)基屬于_________(填液體或固體)培養(yǎng)基。對于頻繁使用的菌種,可以將菌種接種到試管的____________培養(yǎng)基上臨時保藏。(2)橘皮可用作提取胡蘿卜素和橘皮精油的原料。提取胡蘿卜素常采用________法,需安裝冷凝回流裝置,其目的是______________________;提取橘皮精油時,為避免___________時有效成分水解和使用_________(填水中蒸餾或水上蒸餾或水氣蒸餾)法產生原料焦糊的問題,常采用___________法。(3)為了保持某橘子品種的品質,可用組織培養(yǎng)技術繁殖試管苗。培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值_________(填高或低)時,有利于芽的分化。8.(10分)2020年初新型冠狀病毒感染的肺炎患者的臨床表現(xiàn)與普通流感患者的臨床表現(xiàn)差別并不大,因此運用核酸檢測試劑盒進行確診十分必要,其檢測原理是采集患者的血液,肺部分泌物或咽拭子等樣本,提取樣本中的RNA,與試劑盒中的DNA片段進行配對,如果為陽性就可以確診。該檢測方法靈敏度很高,測試出結果只需要幾個小時。請回答下列相關問題:(1)新型冠狀病毒在人體內增殖所需的原料、能量來自于_______。對病毒基因組測序是制備核酸檢測試劑盒必不可少的步驟,該病毒的基因組是指病毒體內以核苷酸序列形式存儲的_______________。(2)試劑盒中的DNA片段是以新型冠狀病毒的RNA分子為模板,經_________過程形成。用核酸檢測試劑盒檢測靈敏度較高的原因是______________________。(3)在2003年的“非典”中,核酸檢測試劑盒技術尚未普及,當時對“非典”的臨床診斷主要是在患者產生抗體后,通過抗原與抗體雜交實驗來完成免疫學測定,該檢測方法的原理是__________________。抗體在患者體內的作用是_______________________。9.(10分)通過細胞工程技術,利用甲、乙兩種植物的各自優(yōu)勢(甲耐鹽、乙高產),培育高產耐鹽的雜種植株。請完善下列實驗流程并回答問題:(1)A是_____________酶,B是______________。D是具有耐鹽優(yōu)良性狀的幼芽,D長成的幼苗需要選擇的原因________________________________________________。(2)由C形成植株的過程利用了__________________________技術,形成愈傷組織需要經過________過程,愈傷組織在分化形成幼苗,整個培養(yǎng)過程要在________的條件下進行。(3)植物體細胞融合成功的標志是____________________________。目前,植物體細胞雜交還存在許多問題沒有解決,如________________________________,盡管如此,這項新技術在克服___________________________________________障礙等方面取得的重大突破還是震撼人心的。(4)已知甲、乙植物分別為四倍體、二倍體,則“甲—乙植株”屬于________倍體植株。10.(10分)蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用,而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉基因大腸桿菌作為微生物農藥,做了相關研究。(1)研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質粒,得到重組質粒,再將重組質粒置于經_________處理的大腸桿菌細胞懸液中,獲得轉基因大腸桿菌。(2)檢測發(fā)現(xiàn),轉入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低,研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好,因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物(引物B和C中都替換了一個堿基),并按圖2方式依次進行4次PCR擴增,以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物?請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”,若不選用該引物則劃“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質粒和_________分別導入大腸桿菌,提取培養(yǎng)液中的蛋白質,用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物,判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產物的生物活性,研究者將上述各組表達產物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,比較_________的大小,以確定表達產物的生物活性大小。(4)作為微生物農藥,使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產物而不是轉蛋白A基因的大腸桿菌,其優(yōu)點是_________。11.(15分)艾滋?。ˋIDS)是目前威脅人類生命的重要疾病之一,能導致艾滋病的HIV病毒是一種球形的RNA病毒。HIV最初侵入人體時,人的免疫系統(tǒng)可以摧毀大多數(shù)病毒,接著少數(shù)HIV在體內潛伏下來,經過2~10年的潛伏期,發(fā)展為艾滋病。下圖甲簡單表示HIV的化學組成,圖乙表示HIV感染人體后,體液中HIV濃度和人體內主要的免疫細胞——T細胞的濃度變化過程。請據(jù)圖回答:(1)圖甲中小分子b是指_____,②過程所需的酶主要是_____。(2)圖乙中表示HIV濃度變化的曲線是_________。在曲線Ⅱ中ED段呈上升狀態(tài)的原因是_________,曲線Ⅰ中的BC段中,效應T細胞作用于_____細胞,經過一系列變化,最終導致該細胞裂解死亡。(3)如果HIV中決定某一性狀的一段RNA中含堿基U=21%,C=24%,G=30%,則通過逆轉錄過程形成的雙鏈DNA含堿基A的比例為_____。(4)脊髓灰質炎病毒的遺傳物質與HIV相同,但其所寄生的細胞與HIV不同(主要是下圖丙中的c細胞),其寄生和破壞的細胞是神經元,患者c細胞受破壞后,相關下肢會無反應,原因是_____。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、B【解析】
胰島素是人體內唯一降低血糖的激素,胰高血糖素和腎上腺素都可以促進肝糖原分解為葡萄糖進入血液,升高血糖濃度,二者具有協(xié)同作用。胰島素可胰高血糖素在生理作用上具有拮抗作用?!驹斀狻緼、胰島素的作用結果反過來導致胰島素的分泌減少,進而維持血糖的平衡,屬于負反饋調節(jié),A正確;B、胰島素和胰高血糖素通過拮抗作用,共同維持血糖含量的穩(wěn)定,B錯誤;C、糖尿病的防治應控制進食糖類食物,適當運動并避免暴飲暴食,C正確;D、食物豐沛而少節(jié)制,血糖長期處于高位可能會導致人身體狀況受損,是誘發(fā)糖尿病的重要原因,D正確。故選B?!军c睛】本題主要考查胰島素的分泌及糖尿病的形成,識記激素的作用和糖尿病的成因是解題的關鍵。2、D【解析】
真核細胞和原核細胞的比較類別原核細胞真核細胞細胞大小較小(一般1~10um)較大(1~100um)細胞核無成形的細胞核,無核膜、核仁、染色體,只有擬核有成形的細胞核,有核膜、核仁和染色體細胞質只有核糖體,沒有其它復雜的細胞器有核糖體、線粒體等,植物細胞還有葉綠體等細胞壁細細胞壁主要成分是肽聚糖細胞壁的主要成分是纖維素和果膠增殖方式二分裂有絲分裂、無絲分裂、減數(shù)分裂可遺傳變異來源基因突變基因突變、基因重組、染色體變異共性都含有細胞膜、核糖體,都含有DNA和RNA兩種核酸等【詳解】A、大腸桿菌屬于原核生物,其細胞中含有核糖體,A正確;B、細胞膜具有選擇透過性,因此細胞對物質的吸收具有選擇性,B正確;C、擬核區(qū)中含有環(huán)狀的DNA分子,C正確;D、藍藻屬于原核生物,其細胞中不含葉綠體,D錯誤。故選D。3、B【解析】
基因突變指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換、增添和缺失而引起基因結構的改變;染色體結構變異是指在細胞內的一個或幾個染色體發(fā)生片段的缺失、增添、倒位或易位?!驹斀狻緼、基因是一個相對獨立的結構單位和功能單位,細胞分化的實質是基因選擇性表達,a、b、c三個基因所攜帶的遺傳信息可以同時得到執(zhí)行,A錯誤;B、a區(qū)段為基因,Ⅰ區(qū)段為基因間序列,故堿基對替換發(fā)生在a區(qū)段屬于基因突變,發(fā)生在Ⅰ區(qū)段不屬于基因突變,B正確;C、由于真核生物基因的內含子和非編碼區(qū)不能轉錄出成熟的mRNA,所以若該DNA分子含n個堿基,轉錄出的mRNA分子堿基數(shù)少于n/2個,C錯誤;D、Ⅰ中插入一個抗蟲基因以提高植物的抗蟲性,這種變異屬于基因重組,D錯誤;故選B。4、C【解析】
水的存在形式及生理功能形式自由水結合水定義細胞中絕大部分的水以游離的形式存在,可以自由流動與細胞內的其他物質相結合的水含量約占細胞內全部水分的95%約占細胞內全部水分的4.5%功能①細胞內良好的溶劑;②參與生化反應;③為細胞提供液體環(huán)境;④運送營養(yǎng)物質和代謝廢物是細胞結構的重要組成成分聯(lián)系自由水和結合水能夠隨新陳代謝的進行而相互轉化【詳解】由于水既能為細胞內的化學反應提供水溶液環(huán)境,也可以參與細胞內的許多生化反應,且水是細胞內良好的溶劑,可以運輸養(yǎng)料和廢物。因此,降低糧食的含水量,可降低細胞的代謝作用,減少有機物的消耗和水分的產生,抑制微生物的繁殖,進而減少或避免霉爛的發(fā)生,延長儲藏時間,ABD正確;結合水是細胞結構的重要組成成分,曬干糧食的過程中不會丟失結合水,C錯誤。故選C?!军c睛】掌握水的存在形式及生理功能是解答本題的關鍵。5、A【解析】
內環(huán)境主要由組織液、血漿和淋巴等細胞外液組成,其成分和含量處于相對穩(wěn)定的動態(tài)平衡中;圖表中鈣離子含量明顯高于正常值,圖表中甲狀腺激素的含量明顯高于正常值,根據(jù)負反饋調節(jié)的機制,促甲狀腺激素分泌減少。圖表中胰島素的含量明顯低于正常值,可推測該男子在利用葡萄糖方面明顯不足?!驹斀狻緼、血液中每種成分的含量處于相對穩(wěn)定的范圍,并不是固定不變的,A錯誤;B、圖表中鈣離子含量明顯低于正常值,鈣離子含量過低可能會引起抽搐等癥狀,B正確;C、圖表中胰島素的含量明顯低于正常值,可推測該男子的組織細胞攝取和利用葡萄糖的能力較差,C正確;D、甲狀腺激素會抑制促甲狀腺激素的分泌,圖表中甲狀腺激素的含量明顯高于正常值,可推測促甲狀腺激素的分泌受到抑制,D正確。故選A?!军c睛】本題結合表格數(shù)據(jù),考查內環(huán)境的組成、內環(huán)境的理化性質,要求考生識記內環(huán)境的組成,明確內環(huán)境是細胞外液;識記內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的調節(jié)機制;掌握內環(huán)境的理化性質,能結合所學的知識準確判斷各選項。6、D【解析】
A、魯賓和卡門用同位素標記法標記水中的氧和二氧化碳中的氧,證明了光合作用釋放的氧氣來自水,A正確;B、一般情況下,光合作用所利用的光都是可見光,B正確;C、根據(jù)光合作用過程,在暗反應階段,C3可被[H]還原為C5和糖類,C正確;D、光合作用的光反應階段需要酶的參與,溫度會通過影響酶的活性,從而影響光合作用的光反應階段,D錯誤。故選D?!军c睛】學生對葉綠體中的色素及色素的吸收光譜理解不清葉綠體中的色素及色素的吸收光譜由圖可以看出:(1)葉綠體中的色素只吸收可見光,而對紅外光和紫外光等不吸收。(2)葉綠素對紅光和藍紫光的吸收量大,類胡蘿卜素對藍紫光的吸收量大,對其他波段的光并非不吸收,只是吸收量較少。二、綜合題:本大題共4小題7、固體固體斜面萃取防止加熱時有機溶劑揮發(fā)水蒸氣蒸餾水中蒸餾壓榨低【解析】
果酒的制作利用了酵母菌無氧呼吸產生酒精的原理。篩選分離目的微生物常用的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法。菌種的保藏方法有試管臨時保藏法和甘油管藏法。植物有效成分的提取常用的方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法。植物組織培養(yǎng)過程中,生長素和細胞分裂素是啟動脫分化和再分化的關鍵性植物激素?!驹斀狻浚?)果酒發(fā)酵常用的菌種是酵母菌。篩選、分離和純化酵母菌常用固體培養(yǎng)基進行接種培養(yǎng),菌種可以接種到固體斜面培養(yǎng)基中進行臨時保藏。(2)胡蘿卜素的提取方法常用萃取法,為防止加熱時有機溶劑揮發(fā)萃取時需安裝冷凝回流裝置。提取橘皮精油時,橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會產生原料焦糊的問題,所以一般采用壓榨法。(3)在組織培養(yǎng)過程中,生長素和細胞分裂素是啟動脫分化和再分化的關鍵性植物激素,培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值低時,有利于芽的分化。【點睛】本題主要考查有關植物有效成分提取相關知識,要求考生識記相關實驗的原理及操作步驟即可正確答題。8、人體(宿主)細胞全部遺傳信息逆(反)轉錄堿基之間的互補配對具有很強的專一性抗體只能與相應的抗原發(fā)生特異性免疫反應與病原體結合,從而抑制病原體的繁殖或對人體細胞的黏附【解析】
病毒沒有細胞結構,不能獨立生活,只能寄生在宿主活細胞中。【詳解】(1)新冠病毒需要在宿主細胞中進行增殖,所需要的原料和能量來自于人體(宿主)細胞;該病毒的基因組是指病毒體內以核苷酸序列形式存儲的遺傳信息。(2)以新型冠狀病毒的RNA分子為模板,經逆(反)轉錄過程形成DNA;用核酸檢測試劑盒檢測靈敏度較高的原因是逆轉錄過程遵循堿基互補配對的原則,具有很強的專一性。(3)患者產生抗體后,通過抗原與抗體雜交實驗來完成免疫學測定,該檢測方法的原理是抗體具有特異性,一種抗體只能與相應的抗原發(fā)生特異性免疫反應;抗體在患者體內當作用是抗體與病原體結合后會抑制病原體的繁殖或對人體細胞的黏附?!军c睛】注意逆轉錄過程的的堿基互補配對是U與A配對,A與T配對,C與G配對、G和C配對。9、纖維素酶和果膠融合的原生質體并非每個細胞都能表達出耐鹽性狀植物組織培養(yǎng)脫分化無菌再生出新的細胞壁不能按照人的意愿表達兩個親本的性狀遠緣雜交不親和六【解析】
植物體細胞雜交主要應用了細胞工程的技術,植物細胞壁的主要成分為纖維素和果膠,在去除細胞壁的時候常常使用酶解法,圖示中A為去除細胞壁獲得原生質體的過程,B表示用物理或化學方法誘導形成雜種細胞。利用植物組織培養(yǎng)技術可將雜種細胞培養(yǎng)成雜種植物,其過程包括脫分化和再分化形成幼苗?!驹斀狻浚?)植物細胞壁的成分為纖維素和果膠,因此A過程用到纖維素酶和果膠酶去除細胞壁;B是甲、乙兩個原生質體經過融合產生的,所以B是融合的原生質體;D是具有耐鹽優(yōu)良性狀的幼芽,D長成后有耐鹽高產和耐鹽不高產兩種,所以要進行選擇;(2)由雜種細胞形成植株的過程利用植物組織培養(yǎng)技術;形成愈傷組織需要經過脫分化過和,再經過再分化過程;整個過程都要在無菌條件下進行;(3)再生細胞壁的形成標志著細胞融合的成功,這意味著兩個融合的原生質體重新構成了一個植物細胞;植物體細胞雜交的優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和的障礙;不足之處是不能按照人的意愿表達兩個親本的性狀;(4)由于該項技術僅僅是對兩個原生質體進行了融合,那么原來的兩個細胞中的染色體組便進行了簡單的加和過程,即有6個染色體組,所以形成的植株為六倍體?!军c睛】該題的難點是通過圖示結合細胞工程的相關過程,分析圖示中各項環(huán)節(jié)的具體過程、操作步驟等,并識記植物組織培養(yǎng)的過程和注意事項是本題的解題關鍵。10、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒(pET質粒)抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農作物和自然環(huán)境安全;不會造成基因污染;有效成分純度較高【解析】
(一)基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶(限制酶)(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。(3)結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:①相同點:都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別:E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵.DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。③具有標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質粒,它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲取1、目的基因是指:編碼蛋白質的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復制(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步:基因表達載體的構建1、目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因(1)啟動子:是一段有特殊結構的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質。(2)終止子:也是一段有特殊結構的DNA片段,位于基因的尾端。(3)標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來.常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步:將目的基因導入受體細胞1、轉化的概念:是目的基因進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉化方法:將目的基因導入植物細胞:采用最多的方法是農桿菌轉化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因導入動物細胞:最常用的方法是顯微注射技術.此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因導入微生物細胞:原核生物作為受體細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少,最常用的原核細胞是大腸桿菌,其轉化方法是:先用Ca2+處理細胞,使其成為感受態(tài)細胞,再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子,完成轉化過程。3、重組細胞導入受體細胞后,篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步:目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術。2、其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA,方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質,方法是從轉基因生物中提取蛋白質,用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定,如轉基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?!驹斀狻浚?)在基因工程中,利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質粒,得到重組質粒;大腸桿菌作為受體細胞,需要用氯化鈣處理,以便重組質粒的導入。(2)①根據(jù)題意和圖示分析,經過4次PCR技術后獲得了新的基因,這是一種定點的基因突變技術。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好,因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物(引物B和C中都替換了一個堿基),因此4次PCR應該分別選擇如圖所示的引物如下表所示:引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√(3)根據(jù)實驗中的對照原則,若要比較新蛋白A的表達效率是否提高,則需設置三組實驗實驗變量的處理分別為:僅含新蛋白質A的重組質粒,僅含蛋白A的重組質粒和空白對照(僅含空質粒,以排除空質???/p>
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