CNAS-GL26醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在基因擴(kuò)增檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南GuidanceontheMedicalLaboratoryQualityandCompetenceAccreditationCriteriaintheFieldofGeneAmplificationTesting中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)CNAS-GL26：2008第1頁(yè)共4頁(yè)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)是中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)（英文縮寫：CNAS）對(duì)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的認(rèn)可領(lǐng)域之一。根據(jù)衛(wèi)生部衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔2002〕10號(hào)文件《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室開展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目需獲得許可證，并報(bào)省級(jí)衛(wèi)生行政部門備案。但這并不表明CNAS對(duì)持有許可證的基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室可以豁免評(píng)審。本文件是CNAS根據(jù)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的特性而對(duì)CNAS—CL02：2008《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》所作的解釋和說明，與CNAS—CL02：2008結(jié)合使用。本文件的條款編號(hào)同CNAS—CL02：2008的相應(yīng)條款編號(hào)。由于僅對(duì)部分條款進(jìn)行了解釋和說明，故條款號(hào)是不連續(xù)的。本文件用“宜”描述的內(nèi)容為建議性內(nèi)容，是期望醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室能夠達(dá)到的要求；用“需”描述的內(nèi)容為程度較強(qiáng)的建議，是期望醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室盡量能夠滿足的要求。本文件為建議性，但在本文件的使用過程中如果識(shí)別出了部分應(yīng)該強(qiáng)制的內(nèi)容，則會(huì)在將來進(jìn)行文件修訂時(shí)考慮將這些內(nèi)容進(jìn)行強(qiáng)制要求。CNAS-GL26：2008第2頁(yè)共4頁(yè)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在基因擴(kuò)增檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南本文件針對(duì)CNAS-CL02：2008《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》第5章中的相關(guān)技術(shù)要求在基因擴(kuò)增檢驗(yàn)領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用提供了建議。本文件適用于為醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室申請(qǐng)認(rèn)可以及評(píng)審員在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審時(shí)提供在基因擴(kuò)增檢驗(yàn)領(lǐng)域可以參考的相關(guān)建議，不作為強(qiáng)制性要求。三術(shù)語(yǔ)和定義四技術(shù)要求的指南5.1.1實(shí)驗(yàn)室需有明確的組織結(jié)構(gòu)圖和所有人員的崗位描述。5.1.3實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人至少具有以下資格：a)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷或培訓(xùn)2年以上；或醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)專業(yè)高級(jí)技術(shù)職稱；或b)檢驗(yàn)、生物化學(xué)、化學(xué)、生物科學(xué)等主修專業(yè)博士，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷或培訓(xùn)2年以上；或c)檢驗(yàn)、生物化學(xué)、化學(xué)、生物科學(xué)等主修專業(yè)碩士，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷或培訓(xùn)4年以上；或檢驗(yàn)、生物化學(xué)、化學(xué)、生物科學(xué)等主修專業(yè)學(xué)士，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷或培訓(xùn)8年以上。CNAS-GL26：2008第3頁(yè)共4頁(yè)當(dāng)基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室作為醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一部分申請(qǐng)認(rèn)可時(shí)，其負(fù)責(zé)人需有大學(xué)本科以上學(xué)歷或中級(jí)以上技術(shù)職稱，五年以上本專業(yè)工作經(jīng)歷。5.1.6實(shí)驗(yàn)室需每年對(duì)各級(jí)工作人員制定培訓(xùn)計(jì)劃并進(jìn)行質(zhì)量保證/質(zhì)量管理培訓(xùn)、客戶服務(wù)培訓(xùn)、安全培訓(xùn)、繼續(xù)教育培訓(xùn)。至少每6個(gè)月對(duì)人員進(jìn)行勝任該崗位的考核，沒有通過崗位職責(zé)考核人員需再培訓(xùn)和再考核，并記錄。5.1.7實(shí)驗(yàn)室各級(jí)人員所從事的工作需有實(shí)驗(yàn)室管理層的授權(quán)記錄。5.1.8實(shí)驗(yàn)室需針對(duì)各級(jí)人員設(shè)置不同的管理權(quán)限，并提供清單。5.1.10實(shí)驗(yàn)室需提供訓(xùn)練員工防止事故發(fā)生及控制事故后果惡化的培訓(xùn)記錄和/或5.1.11基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員需進(jìn)行上崗培訓(xùn)。經(jīng)培訓(xùn)合格者，由授權(quán)培訓(xùn)單位發(fā)給合格證書。從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作的人員需獲得培訓(xùn)合格證書。實(shí)驗(yàn)室使用人員時(shí)，宜考慮以下條件：a)有顏色視覺障礙的人員不能執(zhí)行某些涉及到辨色的試驗(yàn)。b)實(shí)驗(yàn)室人員熟悉生物檢測(cè)安全操作知識(shí)和消毒知識(shí)。5.2設(shè)施和環(huán)境條件5.2.1基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分四個(gè)分隔開的工作區(qū)域：a)試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)；b)標(biāo)本制備區(qū)；c)擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)；d)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。如使用全自動(dòng)分析儀（擴(kuò)增產(chǎn)物閉管檢測(cè)區(qū)域可適當(dāng)合并。5.2.4實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與環(huán)境基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室各分區(qū)宜配置移動(dòng)紫外線燈，波長(zhǎng)為254nm，照射時(shí)離實(shí)驗(yàn)臺(tái)的高度為60～90cm。標(biāo)本處理區(qū)宜有二級(jí)生物安全柜。5.2.6關(guān)于采取措施防止交叉污染基因擴(kuò)增檢驗(yàn)各工作區(qū)域需有明確的標(biāo)記，避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。進(jìn)入各工作區(qū)域需嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，即試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備CNAS-GL26：2008第4頁(yè)共4頁(yè)區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。不同的工作區(qū)域宜使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開各工作區(qū)域時(shí)，不能將工作服帶出。5.2.7基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室需有限制進(jìn)入的標(biāo)志。5.3實(shí)驗(yàn)室設(shè)備5.3.1基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室如從事RNA的檢測(cè)，需具備－70℃冷凍設(shè)備和臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)。在使用PCR-ELISA方法檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物時(shí)，需配置洗板機(jī)并使用洗板機(jī)洗板。一次性的加樣器吸頭需帶有濾芯。5.3.2基因?qū)嶒?yàn)室RNA檢測(cè)用水需除RNase。需定期對(duì)PCR儀、加樣器、溫度計(jì)和恒溫設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)。5.3.3用于基因試驗(yàn)的全血和骨髓標(biāo)本需進(jìn)行抗凝處理。EDTA和枸櫞酸鹽為首選抗凝劑。不應(yīng)用肝素抗凝。PCR試驗(yàn)用材料應(yīng)為一次性，容器需可密閉。5.5檢驗(yàn)程序5.5.1臨床用于RNA（如HCVRNA）擴(kuò)增檢測(cè)的血標(biāo)本宜進(jìn)行抗凝處理，并盡快（3小時(shí)內(nèi)）分離血漿，以避免RNA