【探究實(shí)踐：酵母菌的純培養(yǎng)】1.原理：采用平板劃線法和稀釋涂布平板法將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物形成的純培養(yǎng)物。2.步驟第一步：制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基—調(diào)節(jié)PH—滅菌—倒平板。①配制培養(yǎng)基：稱取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向?yàn)V液中加入20g葡萄糖、15-20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000ml.②滅菌：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加棉塞，包上牛皮紙，并用皮筋勒緊，再放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下，滅菌15-30min.將5-8套培養(yǎng)皿包成一包，用幾層牛皮紙包緊，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160-170℃滅菌2h.③倒平板：培養(yǎng)基冷卻到50℃左右，在酒精燈火焰旁倒平板倒平板注意事項(xiàng)：ａ．溫度：50℃左右（用手觸摸，剛剛不燙手）ｂ．操作：在酒精燈火焰附近（防止雜菌污染）c.倒平板時(shí)要使錐形瓶瓶口通過火焰的原因：灼燒滅菌，防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基d．冷凝后平板倒置（原因：可避免培養(yǎng)基中的水分過快蒸發(fā)；可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。）e.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，那么這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)微生物，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。第二步：接種和分離酵母菌：平板劃線法思考：接種劃線的操作過程中，接種環(huán)應(yīng)灼燒幾次？平板劃線法注意事項(xiàng):a.接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次;b.劃線首尾不能相接;c.每次劃線前接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，待冷卻后再開始畫線;d.劃線后,培養(yǎng)皿底部做好標(biāo)記，培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。e.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？請完善下方的表格。灼燒時(shí)期目的取菌種前殺死接種環(huán)上原有的微生物每次劃線前殺死上次劃線時(shí)殘留的菌種，使下一次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而使每次劃線時(shí)菌種數(shù)目逐漸減少，直至得到單個(gè)細(xì)胞接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者第三步：培養(yǎng)酵母菌：完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板（一般做三組，重復(fù)實(shí)驗(yàn)）和一個(gè)未接種的平板倒置，放入28℃左右（培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異）的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24—48h。第四步：結(jié)果分析與評價(jià)1.培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢測培養(yǎng)基是否被雜菌污染(或檢查培養(yǎng)基制備是否合格)。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明未被污染。2.在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面