再生醫(yī)學(xué)基因編輯研究員助理崗位考試試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.以下哪種基因編輯技術(shù)最常用？（）A.ZFNsB.TALENsC.CRISPR/Cas9D.Meganucleases2.基因編輯中sgRNA的作用是（）A.識(shí)別靶基因B.切割DNAC.連接DNAD.修飾蛋白3.細(xì)胞培養(yǎng)常用的血清是（）A.小牛血清B.胎牛血清C.馬血清D.羊血清4.PCR技術(shù)的創(chuàng)始人是（）A.桑格B.穆利斯C.沃森D.克里克5.以下哪種堿基不是DNA的組成部分（）A.腺嘌呤B.尿嘧啶C.鳥(niǎo)嘌呤D.胸腺嘧啶6.基因載體不包括（）A.質(zhì)粒B.噬菌體C.病毒D.核糖體7.細(xì)胞凍存常用的保護(hù)劑是（）A.DMSOB.乙醇C.甘油D.丙酮8.Westernblot檢測(cè)的是（）A.DNAB.RNAC.蛋白質(zhì)D.多糖9.以下哪種酶用于DNA連接（）A.限制性內(nèi)切酶B.DNA聚合酶C.DNA連接酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶10.基因編輯的主要目的是（）A.改造基因B.擴(kuò)增基因C.克隆基因D.表達(dá)基因二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.基因編輯技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域包括（）A.疾病治療B.農(nóng)業(yè)育種C.藥物研發(fā)D.生物制藥2.以下屬于基因編輯工具的有（）A.Cas9B.Cas12C.BaseeditorD.Primeeditor3.細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件有（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.氣體環(huán)境D.無(wú)菌操作4.基因克隆的步驟包括（）A.目的基因獲取B.載體構(gòu)建C.轉(zhuǎn)化D.篩選鑒定5.常用的核酸檢測(cè)方法有（）A.PCRB.qPCRC.SouthernblotD.Northernblot6.蛋白質(zhì)純化的方法有（）A.離子交換色譜B.凝膠過(guò)濾色譜C.親和色譜D.疏水色譜7.基因編輯可能面臨的風(fēng)險(xiǎn)有（）A.脫靶效應(yīng)B.倫理問(wèn)題C.免疫反應(yīng)D.遺傳不穩(wěn)定8.以下哪些是常用的細(xì)胞系（）A.HEK293B.HeLaC.NIH3T3D.SH-SY5Y9.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液有（）A.Tris-HClB.PBSC.SDS緩沖液D.TE緩沖液10.基因表達(dá)調(diào)控的層次包括（）A.轉(zhuǎn)錄水平B.轉(zhuǎn)錄后水平C.翻譯水平D.翻譯后水平三、判斷題（每題2分，共20分）1.CRISPR/Cas9系統(tǒng)只能編輯動(dòng)物基因。（）2.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，CO?的作用是維持培養(yǎng)液的pH。（）3.基因編輯一定會(huì)導(dǎo)致生物表型改變。（）4.限制性內(nèi)切酶可以隨意切割DNA。（）5.RNA比DNA更不穩(wěn)定。（）6.所有基因編輯技術(shù)都需要Cas蛋白。（）7.蛋白質(zhì)在SDS中的遷移速度只與分子量有關(guān)。（）8.基因載體必須有復(fù)制原點(diǎn)。（）9.逆轉(zhuǎn)錄是將RNA轉(zhuǎn)化為DNA的過(guò)程。（）10.細(xì)胞凍存的溫度越低越好。（）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述CRISPR/Cas9基因編輯的基本原理。答案：CRISPR/Cas9系統(tǒng)中，sgRNA識(shí)別并結(jié)合靶基因特定序列，引導(dǎo)Cas9蛋白到該位點(diǎn)，Cas9蛋白發(fā)揮核酸酶活性，切割雙鏈DNA，形成雙鏈斷裂，細(xì)胞通過(guò)非同源末端連接或同源重組修復(fù)機(jī)制修復(fù)斷裂，實(shí)現(xiàn)基因敲除、插入或替換等編輯。2.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中如何防止污染？答案：保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔，定期消毒；操作在超凈工作臺(tái)進(jìn)行，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范；所用培養(yǎng)基、試劑等需無(wú)菌處理；定期觀察細(xì)胞狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)污染及時(shí)處理；操作人員做好個(gè)人防護(hù)，如戴口罩、手套等。3.簡(jiǎn)述基因克隆的關(guān)鍵步驟及要點(diǎn)。答案：關(guān)鍵步驟：目的基因獲取，需選合適方法如PCR擴(kuò)增；載體構(gòu)建，選合適載體并與目的基因連接；轉(zhuǎn)化，將重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞；篩選鑒定，用合適方法挑出含目的基因的陽(yáng)性克隆。要點(diǎn)是各步驟保證準(zhǔn)確性和高效性。4.簡(jiǎn)述Westernblot的主要實(shí)驗(yàn)流程。答案：先制備蛋白樣品，進(jìn)行SDS電泳分離蛋白；然后將蛋白轉(zhuǎn)印到膜上；封閉膜上非特異性結(jié)合位點(diǎn)；加入一抗與目的蛋白結(jié)合；洗膜后加二抗；最后用顯色或發(fā)光試劑檢測(cè)目的蛋白條帶。五、討論題（每題5分，共20分）1.談?wù)劵蚓庉嬙诩膊≈委煼矫娴膽?yīng)用前景與挑戰(zhàn)。答案：應(yīng)用前景廣闊，可用于治療遺傳性疾病，通過(guò)修復(fù)致病基因從根源治療；還能用于癌癥治療，編輯免疫細(xì)胞增強(qiáng)抗癌能力。但面臨挑戰(zhàn)，如脫靶效應(yīng)可能導(dǎo)致意外基因突變；倫理爭(zhēng)議大，涉及人類生殖細(xì)胞編輯等問(wèn)題；免疫反應(yīng)也可能影響治療效果和安全性。2.如何評(píng)估基因編輯技術(shù)的安全性？答案：評(píng)估需多方面考慮。從技術(shù)角度，檢測(cè)脫靶效應(yīng)，分析編輯位點(diǎn)周圍及全基因組變化；評(píng)估對(duì)基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的影響。從生物角度，觀察編輯生物的生理、病理變化。從環(huán)境角度，評(píng)估對(duì)生態(tài)平衡潛在影響。還需考慮倫理風(fēng)險(xiǎn)，綜合判斷其安全性。3.舉例說(shuō)明基因編輯在農(nóng)業(yè)育種中的優(yōu)勢(shì)。答案：比如在抗病蟲(chóng)害育種方面，通過(guò)基因編輯可使作物獲得抗蟲(chóng)抗病基因，減少農(nóng)藥使用。在品質(zhì)改良上，編輯相關(guān)基因能提高作物營(yíng)養(yǎng)成分含量。優(yōu)勢(shì)在于精準(zhǔn)、高效，能快速定向改良目標(biāo)性狀，相比傳統(tǒng)育種周期短，且不引入外源基因，減少消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因的擔(dān)憂。4.對(duì)于基因編輯技術(shù)的倫理問(wèn)題，你認(rèn)為應(yīng)該如何應(yīng)對(duì)？答案：應(yīng)建立完善的倫理審查制度，對(duì)基因編輯研究和應(yīng)用進(jìn)行嚴(yán)格審查。加強(qiáng)公眾教育，提高大眾對(duì)基因編輯的認(rèn)識(shí)和理解，促進(jìn)公眾參與討論和決策。制定明確的法律法規(guī)，規(guī)范基因編輯行為，明確禁止的領(lǐng)域和界限。科研人員要增強(qiáng)倫理意識(shí)，在符合倫理前提下開(kāi)展研究。答案一、單項(xiàng)選擇題1.C2.A3.B4.B5.B6.D