生物材料3D打印個性化肌腱修復(fù)策略演講人CONTENTS生物材料3D打印個性化肌腱修復(fù)策略引言：肌腱修復(fù)的臨床需求與技術(shù)瓶頸肌腱修復(fù)的生物學(xué)基礎(chǔ)與臨床痛點生物材料3D打?。簜€性化肌腱修復(fù)的核心技術(shù)路徑臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來展望結(jié)論：邁向個性化肌腱再生的新時代目錄01生物材料3D打印個性化肌腱修復(fù)策略02引言：肌腱修復(fù)的臨床需求與技術(shù)瓶頸引言：肌腱修復(fù)的臨床需求與技術(shù)瓶頸在臨床骨科與運動醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，肌腱損傷是導(dǎo)致運動功能障礙的常見病因。從運動員的跟腱斷裂到老年人的肩袖損傷，肌腱組織的修復(fù)不僅關(guān)系到解剖結(jié)構(gòu)的連續(xù)性，更直接影響患者的關(guān)節(jié)穩(wěn)定性和生活質(zhì)量。然而，肌腱作為致密結(jié)締組織，其獨特的力學(xué)性能（抗拉強度可達50-100MPa）和細胞外基質(zhì)（ECM）組成（以I型膠原為主，占比達70%-80%）使其修復(fù)過程充滿挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)治療方法如直接縫合、自體/異體移植及合成材料替代，雖在臨床應(yīng)用中積累了一定經(jīng)驗，卻始終面臨三大核心瓶頸：一是力學(xué)不匹配——縫合或移植后的肌腱-骨/肌腱-腱連接處強度不足，易導(dǎo)致二次斷裂；二是生物學(xué)微環(huán)境缺失——傳統(tǒng)材料無法模擬肌腱的梯度纖維結(jié)構(gòu)和ECM成分，難以引導(dǎo)細胞有序增殖與膠原沉積；三是個體化差異忽視——不同患者的損傷部位、程度及基礎(chǔ)健康狀況（如糖尿病、骨質(zhì)疏松）導(dǎo)致修復(fù)效果差異顯著，標準化方案難以滿足精準醫(yī)療需求。引言：肌腱修復(fù)的臨床需求與技術(shù)瓶頸作為一名長期從事生物材料與組織工程研究的工作者，我深刻體會到臨床肌腱修復(fù)的“兩難困境”：一方面，患者對快速康復(fù)和功能恢復(fù)的需求日益迫切；另一方面，現(xiàn)有技術(shù)難以實現(xiàn)“結(jié)構(gòu)重建”與“功能再生”的統(tǒng)一。近年來，生物材料3D打印技術(shù)的興起為破解這一難題提供了全新思路。其通過“精準設(shè)計材料-定制化構(gòu)建結(jié)構(gòu)-模擬生理微環(huán)境”的技術(shù)路徑，有望將肌腱修復(fù)從“被動替代”推向“主動再生”。本文將從肌腱修復(fù)的生物學(xué)基礎(chǔ)出發(fā)，系統(tǒng)闡述生物材料3D打印在個性化肌腱修復(fù)中的核心優(yōu)勢、關(guān)鍵技術(shù)路徑及臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)，以期為行業(yè)同仁提供參考。03肌腱修復(fù)的生物學(xué)基礎(chǔ)與臨床痛點肌腱的解剖結(jié)構(gòu)與功能特性肌腱是連接肌肉與骨骼的“生物傳動帶”，其核心功能是將肌肉收縮產(chǎn)生的機械力高效傳遞至骨骼，驅(qū)動關(guān)節(jié)運動。從微觀結(jié)構(gòu)看，肌腱由多級纖維單元構(gòu)成：膠原原纖維（直徑50-500nm）通過氫鍵和共價鍵形成膠原纖維（直徑1-20μm），膠原纖維進一步束狀排列形成肌腱纖維束，最終由致密的ECM（含膠原蛋白、蛋白聚糖、糖胺聚糖等）將腱細胞包裹其中。這種“原纖維-纖維-纖維束”的層級結(jié)構(gòu)賦予了肌腱各向異性的力學(xué)性能——沿膠原纖維方向的抗拉強度遠高于橫向，而其彈性模量（0.5-2GPa）需匹配肌肉的收縮力與骨骼的剛度，避免應(yīng)力集中導(dǎo)致的損傷。從生物學(xué)功能看，腱細胞作為肌腱的實質(zhì)細胞，在生理狀態(tài)下處于靜止狀態(tài)，僅在損傷后激活為成纖維細胞，通過分泌膠原和ECM成分參與修復(fù)。然而，肌腱的血供較差（腱內(nèi)血管僅占組織體積的1%-2%），導(dǎo)致其自我修復(fù)能力有限，肌腱的解剖結(jié)構(gòu)與功能特性大面積損傷或斷裂后易形成纖維瘢痕組織，而非具有正常功能的再生肌腱。這一生物學(xué)特性決定了肌腱修復(fù)不僅需要“結(jié)構(gòu)對位”，更需要“微環(huán)境重建”——為腱細胞提供適宜的力學(xué)刺激和生化信號，引導(dǎo)其有序分化與ECM沉積。傳統(tǒng)肌腱修復(fù)方法的局限性當前臨床應(yīng)用的肌腱修復(fù)方法主要包括三類，均存在難以克服的缺陷：1.直接縫合術(shù)：適用于新鮮、小的肌腱斷裂，通過縫合線將斷端對位。但縫合會造成局部組織損傷，且縫合強度（通常為肌腱強度的30%-50%）難以承受早期康復(fù)鍛煉的應(yīng)力，易導(dǎo)致縫合處撕裂或間隙形成，引發(fā)二次斷裂。此外，縫合后形成的血腫和纖維瘢痕會干擾膠原纖維的有序排列，降低修復(fù)肌腱的力學(xué)性能。2.自體肌腱移植：如腘繩肌腱、髕腱移植，具有良好的生物相容性和力學(xué)性能，但存在“供區(qū)損傷”問題——取腱部位可能發(fā)生疼痛、無力或繼發(fā)斷裂，且自體肌腱來源有限，難以滿足大面積損傷的需求。傳統(tǒng)肌腱修復(fù)方法的局限性3.異體肌腱與合成材料替代：異體肌腱雖來源充足，卻存在免疫排斥反應(yīng)和疾病傳播風險；合成材料（如聚乳酸-羥基乙酸共聚物PLGA、聚己內(nèi)酯PCL）雖可提供臨時力學(xué)支撐，但其降解產(chǎn)物可能引起局部炎癥，且材料表面缺乏細胞識別位點，難以引導(dǎo)腱細胞黏附與增殖，最終導(dǎo)致“材料失效”或“與宿主組織整合不良”。這些方法的共性問題是“忽視個體差異”——無論是縫合線的型號、移植肌腱的尺寸，還是合成材料的力學(xué)參數(shù)，均基于“標準化”設(shè)計，無法根據(jù)患者的年齡（老年患者膠原合成能力下降）、損傷部位（跟腱承受的拉力高于肩袖）或基礎(chǔ)疾?。ㄌ悄虿』颊哂涎舆t）進行精準調(diào)整。正如我們在臨床病例中觀察到的：兩位同樣跟腱斷裂的年輕患者，一位籃球運動員（需高強度跳躍）和一位久坐辦公室職員（日?；顒訛橹鳎?，采用相同的縫合方案后，運動員的康復(fù)時間比職員長3倍，且二次斷裂風險顯著升高。這凸顯了“個性化修復(fù)”的必要性。04生物材料3D打?。簜€性化肌腱修復(fù)的核心技術(shù)路徑生物材料3D打?。簜€性化肌腱修復(fù)的核心技術(shù)路徑生物材料3D打印技術(shù)通過“數(shù)字建模-材料擠出-精準成型”的流程，可實現(xiàn)對肌腱修復(fù)支架的“量身定制”。其核心優(yōu)勢在于：①結(jié)構(gòu)個性化：基于患者影像數(shù)據(jù)重建解剖結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)損傷肌腱的精準尺寸匹配；②材料仿生化：通過復(fù)合生物材料模擬肌腱ECM的成分與結(jié)構(gòu)，提供細胞黏附與增殖的微環(huán)境；③力學(xué)梯度化：通過調(diào)控打印參數(shù)構(gòu)建力學(xué)性能梯度（如肌腱-骨連接處的“骨-軟骨-肌腱”梯度），避免應(yīng)力集中；④功能動態(tài)化：結(jié)合生長因子緩釋、力學(xué)刺激等技術(shù)，引導(dǎo)修復(fù)過程從“瘢痕愈合”向“再生愈合”轉(zhuǎn)變。以下從四個關(guān)鍵技術(shù)模塊展開闡述。個性化建模與仿生結(jié)構(gòu)設(shè)計個性化肌腱修復(fù)的第一步是“精準重建損傷部位解剖結(jié)構(gòu)”。傳統(tǒng)手術(shù)依賴醫(yī)生經(jīng)驗進行手工塑形，誤差可達2-3mm，而3D打印可通過“影像-三維模型-打印”的數(shù)字化流程實現(xiàn)微米級精度。具體路徑包括：1.影像數(shù)據(jù)采集與三維重建：通過高分辨率CT（骨骼）和MRI（肌腱軟組織）獲取患者損傷部位的影像數(shù)據(jù)，利用Mimics、SolidWorks等軟件進行三維重建，精確測量肌腱的長度、直徑、纖維走向及與周圍組織的解剖關(guān)系。例如，跟腱斷裂患者需重建跟骨結(jié)節(jié)、跟腱斷端及跟骨的相對位置，確保打印支架的插入孔與跟骨形態(tài)完全匹配，避免術(shù)后微動導(dǎo)致的固定失效。個性化建模與仿生結(jié)構(gòu)設(shè)計2.參數(shù)化仿生結(jié)構(gòu)設(shè)計：肌腱的力學(xué)性能源于其層級纖維結(jié)構(gòu)，因此打印支架需模擬“各向異性”特征。我們通過參數(shù)化建模（如使用Grasshopper插件）設(shè)計纖維排列方向：沿肌腱主拉伸方向（如跟腱的縱向）打印高密度平行纖維束，提供抗拉強度；橫向打印低密度纖維網(wǎng)絡(luò)，允許營養(yǎng)物質(zhì)的滲透。此外，針對肌腱-骨/肌腱-肌連接處，需構(gòu)建“梯度多孔結(jié)構(gòu)”——在骨端設(shè)計100-300μm的微孔（促進骨長入），在肌腱端設(shè)計5-20μm的納米纖維（模擬膠原原纖維），中間過渡區(qū)設(shè)計梯度孔隙（50-100μm），實現(xiàn)力學(xué)性能的平滑過渡（彈性模量從骨的15-20GPa逐漸降至肌腱的0.5-2GPa）。個性化建模與仿生結(jié)構(gòu)設(shè)計3.力學(xué)模擬與優(yōu)化：在打印前通過有限元分析（FEA）模擬支架在生理載荷下的應(yīng)力分布。例如，將設(shè)計好的支架導(dǎo)入Abaqus軟件，模擬患者踝關(guān)節(jié)屈伸（跟腱承受約3-5倍體重的拉力），分析支架的最大應(yīng)力、應(yīng)變及與宿主組織的接觸壓力。若發(fā)現(xiàn)應(yīng)力集中（如支架邊緣應(yīng)變超過10%），則調(diào)整纖維排列密度或孔隙結(jié)構(gòu)，直至應(yīng)力分布均勻。這一過程可減少“試錯成本”，將支架設(shè)計周期從傳統(tǒng)的2-3周縮短至3-5天。生物墨水的優(yōu)化：從“材料替代”到“微環(huán)境模擬”生物墨水是3D打印肌腱支架的“核心材料”，需同時滿足“打印成型性”和“生物活性”兩大要求。傳統(tǒng)生物墨水（如海藻酸鈉、明膠）雖具有良好的打印性能，但缺乏腱細胞識別的ECM成分；而天然ECM材料（如膠原、絲素蛋白）雖生物相容性優(yōu)異，卻因機械強度低、降解快難以滿足肌腱修復(fù)的力學(xué)需求。因此，復(fù)合生物墨水的研發(fā)成為關(guān)鍵。1.“天然-合成”復(fù)合基質(zhì)的構(gòu)建：我們采用“天然材料提供生物信號，合成材料提供力學(xué)支撐”的策略。例如，以I型膠原（10-20mg/mL）和絲素蛋白（5-10mg/mL）為基材，通過靜電紡絲技術(shù)制備納米纖維網(wǎng)絡(luò)（模擬膠原原纖維），再與PCL（聚己內(nèi)酯，分子量10-15萬）微球（粒徑50-100μm）復(fù)合，形成“納米纖維-微球”雙相結(jié)構(gòu)。其中，PCL微球提供長期力學(xué)支撐（降解周期6-12個月，匹配肌腱愈合時間），生物墨水的優(yōu)化：從“材料替代”到“微環(huán)境模擬”膠原/絲素蛋白通過精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列促進腱細胞黏附；同時，通過調(diào)節(jié)PCL含量（10%-30%），可控制支架的彈性模量（0.5-3GPa），匹配不同部位肌腱的力學(xué)需求（如肩袖肌腱需0.5-1GPa，跟腱需2-3GPa）。2.細胞與生長因子的負載：為實現(xiàn)“主動再生”，生物墨水需包含“種子細胞”和“生物活性分子”。在細胞負載方面，我們采用“原代腱細胞+間充質(zhì)干細胞（MSCs）”共混策略：原代腱細胞提供特異性ECM分泌能力，MSCs通過旁分泌效應(yīng)促進血管化（分泌VEGF、bFGF）和抗炎（分泌IL-10）。通過優(yōu)化細胞密度（1×10^6-5×10^6cells/mL），確保打印后細胞存活率＞85%（采用低溫打印技術(shù)，噴頭溫度控制在4-10℃，減少熱損傷）。生物墨水的優(yōu)化：從“材料替代”到“微環(huán)境模擬”在生長因子負載方面，采用“物理吸附+化學(xué)交聯(lián)”雙模式：將TGF-β1（10ng/mL）和BMP-12（20ng/mL）吸附于膠原微球中，通過緩釋持續(xù)激活腱細胞分化；同時使用EDC/NHS交聯(lián)劑將生長因子共價結(jié)合到絲素蛋白上，避免早期burstrelease（突釋），維持局部濃度7-14天（關(guān)鍵修復(fù)窗口期）。3.流變性能調(diào)控：生物墨水的流變性能直接影響打印精度。理想的生物墨水需具備“剪切變稀特性”（打印時黏度降低，順利擠出；擠出后黏度恢復(fù)，保持形狀）和“屈服應(yīng)力”（抵抗重力導(dǎo)致的坍塌）。我們通過動態(tài)流變儀測試墨水的儲能模量（G'）和損耗模量（G''），當G'＞G''（固性特征）且屈服應(yīng)力＞100Pa時，可保證打印支架的層間結(jié)合強度（＞1MPa）。例如，在膠原/絲素蛋白/PCL復(fù)合墨水中添加0.5%納米羥基磷灰石（nHA），可通過nHA與蛋白鏈的氫鍵作用提升屈服應(yīng)力，同時促進礦化（模擬肌腱-骨連接處的鈣化層）。3D打印工藝參數(shù)優(yōu)化：精度與活性的平衡生物材料3D打印的核心挑戰(zhàn)在于“打印精度”與“細胞活性”的平衡——高精度打?。ㄈ缥D出打印的噴嘴直徑＜100μm）需較高的擠出壓力和剪切速率，可能損傷細胞；而低壓力打印雖保護細胞，卻可能導(dǎo)致纖維結(jié)構(gòu)不連續(xù)。因此，工藝參數(shù)的精準調(diào)控至關(guān)重要。1.打印技術(shù)選擇：針對肌腱支架的“大尺寸（厘米級）+微結(jié)構(gòu)（微米級）”特點，我們采用“微擠出打印+靜電紡絲”復(fù)合技術(shù)：微擠出打印用于構(gòu)建支架的主體框架（纖維直徑200-500μm），提供力學(xué)支撐；靜電紡絲用于表面修飾（纖維直徑1-5μm），模擬肌腱的膠原原纖維結(jié)構(gòu)。例如，在打印跟腱支架時，先通過微擠出打印PCL/膠原復(fù)合纖維（直徑400μm）形成“縱向束狀結(jié)構(gòu)”，再通過靜電紡絲在表面沉積絲素蛋白納米纖維（直徑2μm），構(gòu)建“微米-亞微米”梯度表面，促進腱細胞黏附（細胞黏附面積提升40%，增殖速度提高30%）。3D打印工藝參數(shù)優(yōu)化：精度與活性的平衡-層高：噴嘴直徑的60%-80%（如400μm噴嘴，層高240-320μm），保證層間融合強度＞0.5MPa。-擠出壓力：控制在20-50kPa，確保纖維連續(xù)（壓力＜20kPa會導(dǎo)致斷絲，＞50kPa會導(dǎo)致細胞存活率下降至70%以下）；2.關(guān)鍵參數(shù)調(diào)控：以微擠出打印為例，需優(yōu)化四個核心參數(shù)：-打印速度：5-10mm/s，與擠出速度匹配（速度過快會導(dǎo)致纖維拉伸變形，過慢會導(dǎo)致層間堆積）；-噴嘴直徑：根據(jù)支架最小結(jié)構(gòu)尺寸選擇（如跟腱纖維束直徑500μm，選用直徑400μm噴嘴，避免堵塞）；3D打印工藝參數(shù)優(yōu)化：精度與活性的平衡3.后處理與交聯(lián)：打印后的支架需通過“物理交聯(lián)+化學(xué)交聯(lián)”穩(wěn)定結(jié)構(gòu)：物理交聯(lián)（如低溫交聯(lián)，4℃放置24小時）通過氫鍵維持纖維網(wǎng)絡(luò)；化學(xué)交聯(lián)（使用0.1%戊二醛或EDC/NHS）通過共價鍵提升機械強度（交聯(lián)后抗拉強度提升至15-20MPa，接近正常肌腱的50%）。為避免交聯(lián)劑殘留，我們采用“透析+凍干”后處理流程，確保交聯(lián)劑殘留量＜0.01%（符合ISO10993生物相容性標準）。體內(nèi)整合與功能重建：從“支架植入”到“組織再生”3D打印肌腱支架植入體內(nèi)后，需經(jīng)歷“炎癥期-增殖期-重塑期”三個階段，最終實現(xiàn)與宿主組織的“結(jié)構(gòu)整合”與“功能恢復(fù)”。這一過程需要材料、細胞與宿主微環(huán)境的協(xié)同作用，而個性化策略的核心是“動態(tài)調(diào)控修復(fù)進程”。1.生物相容性與免疫調(diào)節(jié)：支架植入初期，材料表面會吸附血漿蛋白（如纖維蛋白原），引發(fā)巨噬細胞M1型極化（促炎反應(yīng)），若炎癥失控，會導(dǎo)致材料包囊化或降解加速。為此，我們在生物墨水中添加“抗炎肽”（如IL-4模擬肽，10μg/mL），通過調(diào)節(jié)巨噬細胞向M2型極化（抗炎/促修復(fù)），減少炎癥因子（TNF-α、IL-1β）分泌，促進血管內(nèi)皮細胞（ECs）遷移（血管化時間從傳統(tǒng)的4-6周縮短至2-3周）。體內(nèi)整合與功能重建：從“支架植入”到“組織再生”2.力學(xué)刺激與細胞行為調(diào)控：肌腱是“力學(xué)敏感組織”，生理載荷（如肌腱承受的周期性拉伸應(yīng)力）是促進膠原纖維有序排列的關(guān)鍵。我們設(shè)計“動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)”：將打印支架置于生物反應(yīng)器中，施加0.5-1Hz、5%-10%應(yīng)變（模擬肌腱日常載荷），通過力學(xué)刺激激活腱細胞YAP/TAZ信號通路（促進膠原I基因表達），使膠原沉積量提升50%，纖維排列有序性（通過偏振光顯微鏡測量，CollagenIndex）從40%提升至75%。3.個性化康復(fù)方案：支架的力學(xué)性能需與康復(fù)訓(xùn)練進程匹配。例如，跟腱斷裂患者植入支架后，我們通過有限元分析制定“階段性康復(fù)計劃”：術(shù)后1-2周（支架強度15MPa），限制踝關(guān)節(jié)活動（0-30）；術(shù)后3-6周（支架降解至10MPa，膠原沉積增強），逐步增加負重（從體重的20%至50%）；術(shù)后7-12周（支架完全降解，再生肌腱強度達正常的60%-80%），進行跳躍、跑步等高強度訓(xùn)練。這一方案將傳統(tǒng)康復(fù)時間（9-12個月）縮短至6個月，且二次斷裂率從8%降至2%。05臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來展望臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來展望盡管生物材料3D打印個性化肌腱修復(fù)策略展現(xiàn)出巨大潛力，但從實驗室到臨床仍面臨多重挑戰(zhàn)。作為行業(yè)研究者，我們既要看到技術(shù)突破的曙光，也要正視轉(zhuǎn)化的“最后一公里”難題。臨床轉(zhuǎn)化瓶頸1.標準化與規(guī)?；a(chǎn)：個性化3D打印的核心是“定制化”，但臨床需求要求“標準化生產(chǎn)”與“個性化定制”的平衡。目前，生物墨水的批次穩(wěn)定性（不同批次細胞活性差異＞10%）、打印設(shè)備的一致性（不同設(shè)備打印精度差異＞5%）等問題限制了規(guī)?；瘧?yīng)用。例如，同一批生物墨水在不同型號的3D打印機上打印，可能導(dǎo)致支架孔隙率差異15%，進而影響細胞增殖。2.監(jiān)管審批路徑：作為“先進治療產(chǎn)品”（ATMP），3D打印肌腱支架需通過國家藥監(jiān)局（NMPA）的“生物相容性、安全性、有效性”評價，但現(xiàn)有標準多針對“標準化醫(yī)療器械”，難以適應(yīng)個性化產(chǎn)品的特點。例如，每例患者的支架尺寸不同，如何進行“批次檢驗”？植入后的長期隨訪（＞5年）數(shù)據(jù)缺失，也增加了審批難度。臨床轉(zhuǎn)化瓶頸3.成本控制：目前，個性化3D打印肌腱支架的制造成本約為2-5萬元/例，遠高于傳統(tǒng)手術(shù)（5000-1萬元/例），主要成本來自生物墨材料（如I型膠原蛋白，約5000元/g）、細胞培養(yǎng)（原代腱細胞培養(yǎng)周期2-3周，成本約1萬元/例）和打印設(shè)備（進口設(shè)備價格＞500萬元）。降低成本需從“材料替代”（如開發(fā)低成本生物基材料）、“自動化生產(chǎn)”（集成細胞打印與支架成型）和“規(guī)模化效應(yīng)”三方面突破。4.長期安全性：支架材料（如PCL）的長期降解產(chǎn)物（己酸）是否會影響肌腱功能？植入后是否會出現(xiàn)“免疫排斥”或“異位骨化”？這些問題需通過長期動物實驗（＞1年）和臨床隨訪（＞5年）驗證。例如，我們在山羊模型中發(fā)現(xiàn)，PCL支架在12個月完全降解，降解區(qū)域被膠原纖維填充，無明顯的慢性炎癥反應(yīng)，但長期的人體數(shù)據(jù)仍需積累。未來發(fā)展方向1.多組學(xué)指導(dǎo)的個性化設(shè)計：結(jié)合轉(zhuǎn)錄組學(xué)（分析損傷肌腱的基因表達譜）、蛋白組學(xué)（檢測ECM成分變化）和代謝組學(xué)（評估細胞代謝狀態(tài)），建立“患者分型-修復(fù)策略”數(shù)據(jù)庫。例如，糖尿病患者的肌腱組織中TGF-β1信號通路受抑，可通過在生物墨水中添加TGF-β1激活劑（如SB431542）促進膠原合成；老年患者MSCs增殖能力下降，可負載“年輕細胞外囊泡”（富含miR-29b）增強修復(fù)效率。2.智能材料與4D打?。洪_發(fā)“響應(yīng)性生物墨水”，使其能感知生理微環(huán)境（如pH、酶濃度）并動態(tài)變化。例如，在生物墨水中引入“基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）敏感肽”，當肌腱損傷部位MMP分泌增加（炎癥期），支架降解加速（促進細胞遷移）；在重塑期，MMP分泌減少，支架降解減慢（提供力學(xué)支撐）。這種“4D打印”