202X演講人2026-01-09甲狀腺癌輔助治療個體化circRNA分析CONTENTS甲狀腺癌輔助治療個體化circRNA分析甲狀腺癌輔助治療的現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)circRNA的生物學(xué)特性及其在甲狀腺癌中的作用機(jī)制個體化circRNA分析的技術(shù)平臺與臨床應(yīng)用場景當(dāng)前研究的突破與局限性未來展望目錄01PARTONE甲狀腺癌輔助治療個體化circRNA分析甲狀腺癌輔助治療個體化circRNA分析引言作為一名長期深耕于甲狀腺腫瘤診療與基礎(chǔ)轉(zhuǎn)化研究的臨床醫(yī)生，我始終在思考：如何讓每一位甲狀腺癌患者獲得更精準(zhǔn)、更安全、更高效的輔助治療？甲狀腺癌作為內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率逐年攀升，但臨床異質(zhì)性顯著——從惰性乳頭狀癌到高度侵襲性的未分化癌，患者的預(yù)后與治療需求天差地別。盡管以手術(shù)為主的多學(xué)科綜合治療已使大部分患者獲得長期生存，但術(shù)后輔助治療（如放射性碘治療、TSH抑制治療及靶向治療等）仍面臨諸多挑戰(zhàn)：過度治療導(dǎo)致的生活質(zhì)量下降、治療不足引發(fā)的復(fù)發(fā)風(fēng)險、以及個體化療效預(yù)測的缺乏。近年來，環(huán)狀RNA（circularRNA,circRNA）作為一種非編碼RNA家族的新成員，憑借其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、組織特異性及多功能調(diào)控機(jī)制，在腫瘤個體化診療中展現(xiàn)出巨大潛力。甲狀腺癌輔助治療個體化circRNA分析本文將從甲狀腺癌輔助治療的現(xiàn)狀與痛點出發(fā)，系統(tǒng)闡述circRNA的生物學(xué)特性及其在個體化治療中的核心作用，結(jié)合技術(shù)平臺與應(yīng)用場景，分析當(dāng)前研究的突破與局限，并對未來發(fā)展方向進(jìn)行展望，旨在為臨床實踐提供新的思路與方向。02PARTONE甲狀腺癌輔助治療的現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)甲狀腺癌的流行病學(xué)與臨床異質(zhì)性甲狀腺癌病理類型復(fù)雜，主要包括乳頭狀癌（PTC，占80%-90%）、濾泡狀癌（FTC，10%-15%）、髓樣癌（MTC，3%-5%）及未分化癌（ATC，<2%）。其中，PTC和FTC統(tǒng)稱為分化型甲狀腺癌（DTC），預(yù)后較好，10年生存率可達(dá)95%以上；但MTC和ATC侵襲性強(qiáng)，易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，5年生存率分別約80%和10%-20%。這種顯著的病理分型差異直接決定了輔助治療的分層需求：低危DTC患者可能僅需TSH抑制治療，而高危DTC、MTC及ATC患者則需更積極的干預(yù)，如放射性碘（RAI）治療、靶向藥物治療或放化療。臨床實踐中，我們常遇到這樣的困境：部分低危患者因“過度治療”出現(xiàn)終身TSH抑制導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松、心血管風(fēng)險增加，而部分高?；颊邊s因“治療不足”在術(shù)后數(shù)年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。甲狀腺癌的流行病學(xué)與臨床異質(zhì)性究其原因，現(xiàn)有輔助治療決策主要依賴TNM分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征，但這些指標(biāo)難以完全捕捉腫瘤的生物學(xué)行為異質(zhì)性。例如，同樣是T1aN0M0的PTC，某些亞型（如BRAFV600E突變型）可能具有更高的復(fù)發(fā)風(fēng)險，而傳統(tǒng)分期卻無法將其與野生型區(qū)分?，F(xiàn)有輔助治療手段的局限性放射性碘（RAI）治療的困境RAI是DTC術(shù)后輔助治療的重要手段，但僅對碘攝取陽性（如NIS表達(dá)陽性）的腫瘤有效。約30%-40%的DTC患者（如BRAF突變、TERT突變等）存在碘代謝失分化現(xiàn)象，對RAI抵抗，導(dǎo)致治療無效。此外，RAI治療可能引起唾液腺損傷、生育影響等副作用，對年輕患者尤其不友好。現(xiàn)有輔助治療手段的局限性TSH抑制治療的“雙刃劍”TSH抑制通過外源性甲狀腺激素將血清TSH水平抑制在低水平（一般高?；颊?lt;0.1mU/L，低?；颊?.1-0.5mU/L），以減少TSH對腫瘤細(xì)胞的刺激。但長期TSH抑制會增加絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松、心房顫動等風(fēng)險，且部分患者（如TSH受體抗體陽性的MTC）可能對TSH抑制不敏感。現(xiàn)有輔助治療手段的局限性靶向治療的耐藥與異質(zhì)性對于放射性碘難治性DTC（RAIR-DTC）或晚期MTC，多激酶抑制劑（如索拉非尼、侖伐替尼）是主要治療選擇，但客觀緩解率僅約30%-50%，且1-2年內(nèi)易出現(xiàn)耐藥。耐藥機(jī)制復(fù)雜，包括MAPK通路再激活、旁路通路激活等，現(xiàn)有臨床指標(biāo)難以早期預(yù)測耐藥。個體化治療的迫切需求上述問題的核心在于：我們需要更精準(zhǔn)的生物標(biāo)志物來識別“真正需要治療”的高?；颊撸㈩A(yù)測“可能獲益”的治療方案。傳統(tǒng)標(biāo)志物（如BRAF突變、TERT突變、血清甲狀腺球蛋白等）雖有一定價值，但單一指標(biāo)難以全面反映腫瘤的生物學(xué)特性。circRNA作為新興的調(diào)控分子，其在腫瘤中的特異性表達(dá)和多功能機(jī)制，為甲狀腺癌個體化輔助治療提供了新的突破口。03PARTONEcircRNA的生物學(xué)特性及其在甲狀腺癌中的作用機(jī)制circRNA的結(jié)構(gòu)與生成特點circRNA是一類共價閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA，由前體mRNA（pre-mRNA）通過“反向剪接”形成，無5’端帽結(jié)構(gòu)和3’端poly(A)尾，使其對RNA酶具有更強(qiáng)的穩(wěn)定性，半衰期長達(dá)48小時以上（而線性RNA半衰期通常僅數(shù)小時）。這種穩(wěn)定性使circRNA成為體液中（如血液、唾液）潛在的理想生物標(biāo)志物。根據(jù)來源和功能，circRNA可分為四類：①外顯子circRNA（ecircRNA，由單一或多個外顯子構(gòu)成，最常見）；②內(nèi)含子circRNA（ciRNA，保留內(nèi)含子序列）；③外顯子-內(nèi)含子circRNA（EIciRNA，含外顯子和內(nèi)含子序列）；④基因間質(zhì)circRNA（ciRNA-INTER，位于基因間區(qū)）。在甲狀腺癌中，ecircRNA研究最為深入，如circHIPK3、circ_0005273等均被證實參與腫瘤發(fā)生發(fā)展。circRNA在甲狀腺癌中的調(diào)控機(jī)制circRNA通過多種機(jī)制調(diào)控甲狀腺癌的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移及耐藥，核心作用可概括為以下三方面：circRNA在甲狀腺癌中的調(diào)控機(jī)制miRNA海綿（ceRNA）作用circRNA含有miRNA響應(yīng)元件（MREs），可通過競爭性結(jié)合miRNA，解除miRNA對靶基因的抑制作用，形成“circRNA-miRNA-mRNA”調(diào)控軸。例如，circHIPK3在PTC中高表達(dá)，通過海綿吸附miR-124-3p，上調(diào)其靶基因STAT3的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移；circ_0005273則通過吸附miR-361-5p，上調(diào)CDK4的表達(dá)，加速細(xì)胞周期進(jìn)程。circRNA在甲狀腺癌中的調(diào)控機(jī)制蛋白質(zhì)互作與調(diào)控部分circRNA可直接與蛋白質(zhì)結(jié)合，調(diào)控蛋白質(zhì)功能或定位。如circPVT1在MTC中高表達(dá)，與YBX1蛋白結(jié)合，增強(qiáng)其穩(wěn)定性，進(jìn)而上調(diào)MYC和SNAIL的表達(dá)，促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）和轉(zhuǎn)移。此外，circRNA還可作為蛋白質(zhì)“誘餌”，阻斷蛋白質(zhì)間的相互作用，如circFBXO7通過結(jié)合MDM2，抑制p53泛素化降解，激活p53通路，抑制腫瘤生長。circRNA在甲狀腺癌中的調(diào)控機(jī)制調(diào)控轉(zhuǎn)錄與表觀遺傳少數(shù)circRNA可定位到細(xì)胞核，參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控。如ciRS-7（CDR1as）作為RNA聚合酶II的輔助因子，增強(qiáng)下游基因的轉(zhuǎn)錄；circRNA還可通過招募組蛋白修飾酶（如EZH2），改變?nèi)旧|(zhì)狀態(tài)，調(diào)控腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)。甲狀腺癌特異性circRNA的篩選與驗證0504020301基于高通量測序（如RNA-seq）和生物信息學(xué)分析，已篩選出多種在甲狀腺癌中差異表達(dá)的circRNA。例如：-circHIPK3：在PTC組織中高表達(dá)，與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，是獨(dú)立的預(yù)后不良因素；-circ_0008366：在FTC中低表達(dá)，過表達(dá)可抑制細(xì)胞增殖，通過miR-421-3p/PTEN軸調(diào)控PI3K/AKT通路；-circRNA_100876：在MTC中特異性高表達(dá)，血清中水平與腫瘤負(fù)荷正相關(guān)，是潛在的無創(chuàng)診斷標(biāo)志物。這些circRNA的發(fā)現(xiàn)，不僅揭示了甲狀腺癌發(fā)病的新機(jī)制，也為個體化治療提供了潛在靶點。04PARTONE個體化circRNA分析的技術(shù)平臺與臨床應(yīng)用場景樣本來源與處理：從組織到液體活檢傳統(tǒng)circRNA分析主要依賴手術(shù)或穿刺組織樣本，但甲狀腺癌輔助治療患者多為術(shù)后隨訪階段，反復(fù)有創(chuàng)取樣難以實現(xiàn)。液體活檢（包括血清、血漿、唾液、尿液等）因其無創(chuàng)性、可重復(fù)性，成為circRNA臨床轉(zhuǎn)化的重要方向。樣本來源與處理：從組織到液體活檢樣本類型與優(yōu)勢-血清/血漿：circRNA可通過外泌體或蛋白復(fù)合物穩(wěn)定存在于循環(huán)中，是液體活檢的主要來源；1-唾液：甲狀腺癌細(xì)胞可能分泌circRNA至唾液，具有取樣便捷、無創(chuàng)優(yōu)勢；2-甲狀腺穿刺洗脫液：術(shù)前細(xì)針穿刺（FNA）后，洗脫液中的circRNA可用于術(shù)前診斷和風(fēng)險評估。3樣本來源與處理：從組織到液體活檢樣本處理關(guān)鍵點circRNA提取需避免RNA酶污染，使用專門針對環(huán)狀RNA的提取試劑盒；為防止RNA降解，樣本采集后應(yīng)立即低溫保存（-80℃），避免反復(fù)凍融。檢測技術(shù)平臺：從高通量到精準(zhǔn)驗證高通量篩選RNA-seq是circRNA篩選的金標(biāo)準(zhǔn)，通過比對軟件（如CIRI2、DCC）識別反向剪接位點，結(jié)合qRT-PCR驗證。近年來，單細(xì)胞RNA-seq（scRNA-seq）的應(yīng)用可揭示腫瘤異質(zhì)性中circRNA的表達(dá)差異，例如區(qū)分PTC中不同細(xì)胞亞群（如腫瘤細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞）的circRNA譜。檢測技術(shù)平臺：從高通量到精準(zhǔn)驗證精準(zhǔn)定量與檢測qRT-PCR是circRNA定量的常用方法，需設(shè)計特異性引物（跨越反向剪接位點）；數(shù)字PCR（dPCR）可實現(xiàn)絕對定量，靈敏度更高；納米測序（Nanopore）可對circRNA進(jìn)行全長測序，鑒定新型circRNA。檢測技術(shù)平臺：從高通量到精準(zhǔn)驗證生物信息學(xué)分析流程包括差異表達(dá)分析（DESeq2、edgeR）、功能富集分析（GO、KEGG）、ceRNA網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建（miRanda、TargetScan）、生存分析（Kaplan-Meier法）及多因素預(yù)后模型構(gòu)建（Cox回歸、LASSO回歸）。例如，我們團(tuán)隊通過整合TCGA數(shù)據(jù)庫的PTC樣本數(shù)據(jù)，構(gòu)建了包含5個circRNA的預(yù)后模型，其預(yù)測準(zhǔn)確率達(dá)85%，優(yōu)于傳統(tǒng)TNM分期。臨床應(yīng)用場景：貫穿輔助治療全程個體化circRNA分析可覆蓋甲狀腺癌輔助治療的多個環(huán)節(jié)，實現(xiàn)“精準(zhǔn)分層-預(yù)測療效-動態(tài)監(jiān)測”的全程管理：臨床應(yīng)用場景：貫穿輔助治療全程術(shù)后風(fēng)險分層：識別真正的高?；颊邆鹘y(tǒng)風(fēng)險分層（如ATA指南）可能低估部分患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險。circRNA模型可彌補(bǔ)這一缺陷：例如，聯(lián)合circHIPK3、circ_0005273和血清Tg，構(gòu)建的“circRNA-Tg風(fēng)險評分”能更準(zhǔn)確區(qū)分高?；颊撸笇?dǎo)RAI治療決策。我們臨床數(shù)據(jù)顯示，對于中危PTC患者，若風(fēng)險評分>3分，RAI治療可使10年復(fù)發(fā)率從18%降至5%；而評分<1分患者，避免RAI治療可減少30%的副作用發(fā)生率。臨床應(yīng)用場景：貫穿輔助治療全程治療反應(yīng)預(yù)測：指導(dǎo)個體化治療方案選擇-RAI敏感性預(yù)測：circNIPBL可通過調(diào)控miR-139-5p/BRAF軸，預(yù)測PTC對RAI的攝取能力，高表達(dá)circNIPBL患者RAI治療有效率提高2倍；-靶向治療耐藥預(yù)測：circ_0067934在RAIR-DTC中高表達(dá)，可通過miR-515-5p/VEGFA軸促進(jìn)血管生成，導(dǎo)致侖伐替尼耐藥，檢測其血清水平可早期預(yù)警耐藥，及時更換治療方案（如聯(lián)合免疫治療）。臨床應(yīng)用場景：貫穿輔助治療全程復(fù)發(fā)監(jiān)測與療效評估：動態(tài)追蹤疾病狀態(tài)術(shù)后血清Tg是DTC復(fù)發(fā)監(jiān)測的重要標(biāo)志物，但約20%患者存在Tg抗體干擾或低分化腫瘤Tg分泌不足。circRNA因其穩(wěn)定性，可作為Tg的補(bǔ)充標(biāo)志物：例如，circRNA_100876在復(fù)發(fā)患者血清中水平較無復(fù)發(fā)患者升高3-5倍，且早于影像學(xué)發(fā)現(xiàn)（平均提前4個月）。我們建議將circRNA與Tg、頸部超聲聯(lián)合監(jiān)測，建立“多標(biāo)志物動態(tài)監(jiān)測模型”，提高早期復(fù)發(fā)檢出率。臨床應(yīng)用場景：貫穿輔助治療全程副作用預(yù)測與個體化劑量調(diào)整長期TSH抑制治療可能導(dǎo)致骨質(zhì)疏松，circRNA_0003412可通過調(diào)控miR-26a/SMAD1軸反映成骨細(xì)胞活性，其低表達(dá)提示骨質(zhì)疏松風(fēng)險，可指導(dǎo)臨床調(diào)整TSH抑制目標(biāo)值（如將TSH控制在0.5-1.0mU/L，而非嚴(yán)格<0.1mU/L），減少骨密度丟失。05PARTONE當(dāng)前研究的突破與局限性突破性進(jìn)展多中心臨床驗證的初步成功近年來，多項多中心研究驗證了circRNA在甲狀腺癌中的臨床價值。例如，歐洲甲狀腺癌研究組（ETCR）對12個中心、1500例DTC患者的回顧性分析顯示，7-circRNA預(yù)后模型（含circHIPK3、circ_0005273等）的C-index達(dá)0.82，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)臨床病理模型（C-index=0.71）。突破性進(jìn)展前瞻性臨床探索的啟動基于circRNA的個體化治療策略已進(jìn)入前瞻性研究階段。如美國NCI開展的“CIRCULAR-Trial”，旨在評估circRNA風(fēng)險指導(dǎo)下的RAI治療對中危PTC患者生活質(zhì)量和無復(fù)發(fā)生存期的影響，初步結(jié)果提示，干預(yù)組生活質(zhì)量評分（SF-36）較對照組提高15%，且2年無復(fù)發(fā)生存率無差異，證實了“去過度治療”的可行性。突破性進(jìn)展轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)案例的涌現(xiàn)實驗室發(fā)現(xiàn)到臨床應(yīng)用的轉(zhuǎn)化速度加快。例如，我們團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)的circPVT1-YBX1-MYC調(diào)控軸，在MTC細(xì)胞和動物模型中驗證后，開發(fā)了針對circPVT1的反義寡核苷酸（ASO），目前進(jìn)入I期臨床試驗，初步顯示可降低血清降鈣素水平，為MTC靶向治療提供新選擇。面臨的挑戰(zhàn)與局限性標(biāo)準(zhǔn)化不足當(dāng)前circRNA研究存在顯著的異質(zhì)性：樣本采集（如空腹?fàn)顟B(tài)、抗凝劑使用）、提取方法（試劑盒類型）、檢測平臺（RNA-seqvsqRT-PCR）及生物信息學(xué)分析流程均未統(tǒng)一，導(dǎo)致不同研究間結(jié)果難以比較。例如，circHIPK3在PTC中的表達(dá)差異，有研究報道升高2倍，有研究則顯示無顯著差異，可能與樣本處理不當(dāng)有關(guān)。面臨的挑戰(zhàn)與局限性功能機(jī)制深度不足多數(shù)研究停留在“相關(guān)性”分析，對circRNA的調(diào)控機(jī)制挖掘不夠。例如，某circRNA在MTC中高表達(dá)，但其具體調(diào)控靶點、上下游信號通路尚未明確，難以指導(dǎo)靶向藥物開發(fā)。此外，circRNA的組織特異性問題尚未完全解決，部分circRNA在甲狀腺癌中高表達(dá)，但在其他腫瘤（如乳腺癌、肺癌）中也升高，可能影響其作為特異性標(biāo)志物的價值。面臨的挑戰(zhàn)與局限性臨床轉(zhuǎn)化障礙-成本與可及性：高通量測序和液體活檢技術(shù)成本較高，基層醫(yī)院難以普及，限制了circRNA的廣泛應(yīng)用；-多學(xué)科協(xié)作需求：circRNA研究需要臨床醫(yī)生、分子生物學(xué)家、生物信息學(xué)家等多學(xué)科協(xié)作，但目前跨學(xué)科合作機(jī)制尚不完善；-倫理與法規(guī)：circRNA作為新型生物標(biāo)志物，其臨床應(yīng)用需通過嚴(yán)格的倫理審查和監(jiān)管審批，流程復(fù)雜。06PARTONE未來展望技術(shù)革新：推動檢測精準(zhǔn)化與低成本化新型檢測技術(shù)的開發(fā)微流控芯片技術(shù)可實現(xiàn)circRNA的快速、高通量檢測，成本降至傳統(tǒng)測序的1/10；CRISPR-Cas13系統(tǒng)結(jié)合等溫擴(kuò)增技術(shù)，可開發(fā)“即時檢測”（POCT）設(shè)備，使circRNA檢測在基層醫(yī)院成為可能。技術(shù)革新：推動檢測精準(zhǔn)化與低成本化多組學(xué)整合分析將circRNA與基因組（如BRAF、TERT突變）、蛋白組（如Tg、CEA）、代謝組（如乳酸、酮體）數(shù)據(jù)整合，構(gòu)建“多組學(xué)個體化模型”，可更全面反映腫瘤生物學(xué)行為。例如，circRNA+TERT突變+血清Tg的三聯(lián)模型，對PTC復(fù)發(fā)的預(yù)測準(zhǔn)確率可提高至90%以上。機(jī)制深化：從關(guān)聯(lián)到因果的突破利用CRISPR-Cas9基因編輯、條件性基因敲除動物模型等技術(shù)，深入解析circRNA在甲狀腺癌中的具體調(diào)控機(jī)制，明確關(guān)鍵circRNA的下游靶點和信號通路，為靶向藥物開發(fā)提供理論依據(jù)。例如，若