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高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1四川省川南地區(qū)名校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中一、選擇題:本題共15小題,每小題3分,共45分。在每小題給出的四個選項中,只有一項是符合題目要求的。1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物,且需嚴格控制發(fā)酵條件。下列敘述正確的是()A.腐乳易于消化的原因是豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成了小分子肽和氨基酸B.制作果醋需要醋酸菌,糖源不足時,醋酸菌通過無氧呼吸將乙醇分解為醋酸C.家庭制作泡菜時為了避免雜菌污染,泡菜壇、菜刀、菜料均需嚴格滅菌處理D.與傳統(tǒng)發(fā)酵一樣,發(fā)酵工程所用菌種絕大多數(shù)為混合菌種【答案】A〖祥解〗(1)參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖;在無氧條件下,酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。(2)參與果醋制作微生物是醋酸菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷#?)參與腐乳制作的微生物主要是毛霉,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理是毛霉等微生物分泌的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸;脂肪酶把脂肪分解為甘油和脂肪酸。(4)泡菜的制作原理:泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?!驹斘觥緼、腐乳制作中,毛霉等微生物分泌的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸,使其更易消化,A正確;B、醋酸菌為嚴格好氧菌,即使糖源不足,其將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸的過程仍需有氧條件,屬于有氧呼吸而非無氧呼吸,B錯誤;C、家庭制作泡菜利用是乳酸菌的天然發(fā)酵,泡菜壇需密封創(chuàng)造無氧環(huán)境,菜刀和菜料只需清洗干凈,無需嚴格滅菌(滅菌會破壞乳酸菌的天然接種),C錯誤;D、傳統(tǒng)發(fā)酵多依賴混合菌種,而發(fā)酵工程通常采用單一純種菌種以確保生產(chǎn)可控,D錯誤。故選A。2.植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)形成完整植株的技術(shù)。下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.MS培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)過程中常用的一種培養(yǎng)基B.無論是脫分化還是再分化都需要光照和適宜的溫度C.菊花植物組織培養(yǎng)過程中,誘導(dǎo)形成愈傷組織、生根、生芽的培養(yǎng)基為不同的培養(yǎng)基D.用植物頂端分生區(qū)附近的組織作為外植體,可培育獲得脫毒苗【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的不同階段需調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例:高生長素/細胞分裂素促進生根,低比值促進生芽,適中比例誘導(dǎo)愈傷組織?!驹斘觥緼、MS培養(yǎng)基含有植物生長所需的大量元素、微量元素、有機物等,是植物組織培養(yǎng)的常用培養(yǎng)基,A正確;B、脫分化過程通常在避光條件下進行(避免細胞分化),而再分化階段(如生根、生芽)可能需要光照(如葉綠體形成及形態(tài)建成),因此并非兩者均需光照,B錯誤;C、不同階段需調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例:高生長素/細胞分裂素促進生根,低比值促進生芽,適中比例誘導(dǎo)愈傷組織,C正確;D、頂端分生區(qū)細胞分裂活躍,病毒含量少甚至無,利用其作為外植體可減少病毒傳遞,獲得脫毒苗,D正確。故選B。3.某實驗小組完成了“土壤中分解纖維素的細菌的分離與計數(shù)”實驗,操作流程如圖所示,下列相關(guān)敘述正確的是()A.培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源,其上生長的都是能分解纖維素的細菌B.接種后的培養(yǎng)基如果未長出菌落則可以直接丟棄C.4號試管的結(jié)果表明每克土壤中的活菌數(shù)約為1.1×108個D.接種時,用涂布器蘸取少量菌液并均勻地涂布在培養(yǎng)基表面【答案】C〖祥解〗用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)時,在每一個梯度濃度內(nèi),至少要涂布3個平板,選擇菌落數(shù)在30~300的進行記數(shù),求其平均值,再通過計算得出土壤中細菌總數(shù)?!驹斘觥緼、以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,能篩選出分解纖維素的細菌,但也可能有一些微生物能利用空氣中的二氧化碳等作為碳源在其上生長,A錯誤;B、接種后的培養(yǎng)基未長出菌落,不能直接丟棄,可能存在雜菌污染等情況,需要進行適當(dāng)處理,比如高壓蒸汽滅菌后再丟棄,B錯誤;C、4號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù),三個平板的菌落數(shù)分別為113、106、111,平均值為(113+106+111)÷3=110個。4號試管的稀釋倍數(shù)為105,接種量為0.1mL,每克土壤中的活菌數(shù)約為110÷0.1×105=1.1×108個,C正確;D、接種時,應(yīng)將菌液滴加到培養(yǎng)基表面,然后用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面,而不是用涂布器蘸取少量菌液涂布,D錯誤。故選C。4.安莎霉素主要用于治療結(jié)核分枝桿菌導(dǎo)致的肺部感染,該抗生素是由一種產(chǎn)自深海的賴氨酸缺陷型放線菌所產(chǎn)生的。為篩選出能產(chǎn)安莎霉素的菌種,科研工作者用紫外線對采自深海的放線菌進行誘變與選育,實驗的部分流程如下圖所示。下列敘述錯誤的是()A.利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同B.進行C操作時必須先將無菌絨布轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基③,再轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基④C.對比兩種培養(yǎng)基中的菌落情況,培養(yǎng)基④為缺少賴氨酸的不完全培養(yǎng)基D.由培養(yǎng)結(jié)果可推斷,E菌落不能產(chǎn)生安莎霉素,D菌落能產(chǎn)生安莎霉素【答案】C〖祥解〗影印培養(yǎng)法是指確保在一系列平板培養(yǎng)基相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大小(或略?。┑哪局茍A柱體上,輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下,把細菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上,然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上,獲得與原始平板完全相同的接種平板。待培養(yǎng)后,比對各培養(yǎng)皿在相同位置出現(xiàn)相同的菌落,從而篩選出適當(dāng)?shù)木??!驹斘觥緼、影印培養(yǎng)法主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大?。ɑ蚵孕。┑哪局茍A柱體上,輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下,把細菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上,然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上,獲得與原始平板完全相同的接種平板。利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同,A正確;B、為了防止將特定營養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基,故進行過程C操作時,先將無菌絨布轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基③(缺乏賴氨酸的培養(yǎng)基),再轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基④(含有賴氨酸的培養(yǎng)基),B正確;C、對比兩種培養(yǎng)基中的菌落情況,培養(yǎng)基③中菌落數(shù)目少,為缺少賴氨酸的不完全培養(yǎng)基,C錯誤;D、E在③和④中都存在,所以不是賴氨酸缺陷型,D在④中存在,在③中不存在,所以是賴氨酸缺陷型,能產(chǎn)安莎霉素,D正確。故選C。5.大腸桿菌、沙門氏菌能引起家禽和家畜的腸道疾病。暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物具有廣譜抗菌性,為檢測其代謝產(chǎn)物對沙門氏菌和大腸桿菌的抑菌能力,進行圖示實驗。下列說法正確的是()A.圖中接種后的培養(yǎng)基需要進行滅菌處理B.從抑菌圈邊緣挑取菌落涂布平板重復(fù)實驗,抑菌圈的平均直徑會變小C.圖中X為離心后得到的下層沉淀,含有暹羅芽孢桿菌D.抑菌圈邊緣的菌種與暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物接觸后發(fā)生突變從而產(chǎn)生抗性【答案】B〖祥解〗本實驗的思路為:將含暹羅芽孢桿菌代謝物的濾紙片放到接種了大腸桿菌或者沙門氏菌的平板培養(yǎng)基上,濾紙片周圍會出現(xiàn)抑菌圈,在抑菌圈邊緣生長的細菌可能是耐藥菌;若抗生素對細菌起選擇作用,則隨著培養(yǎng)次數(shù)增多,耐藥菌的比例增大,在連續(xù)培養(yǎng)幾代后,抑菌圈的平均直徑變小?!驹斘觥緼、培養(yǎng)基的滅菌要在接種操作之前,接種后的培養(yǎng)基進行滅菌處理則菌種也被殺死,A錯誤;B、在抑菌圈邊緣生長的細菌可能是耐藥菌,從抑菌圈邊緣挑取菌落涂布平板重復(fù)實驗,抑菌圈平均直徑變小,B正確;C、依題意,實驗?zāi)康氖菣z測暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物對沙門氏菌和大腸桿菌的抑菌能力,故圖示X應(yīng)為離心后得到的上清液,C錯誤;D、暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物接觸只是對菌種起到選擇作用,D錯誤。故選B。6.不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞供體細胞的染色質(zhì),與未經(jīng)射線照射的受體細胞融合,所得融合細胞含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)。紅豆杉的次生代謝產(chǎn)物紫杉醇是一種高效抗癌藥物,但由于紅豆杉野生資源匱乏,且紅豆杉植株紫杉醇含量極低,導(dǎo)致了紫杉醇的供應(yīng)嚴重不足。因此,研究人員嘗試運用不對稱體細胞雜交將紅豆杉(2n=24)與柴胡(2n=12)進行融合,培育能產(chǎn)生紫杉醇的柴胡,過程如下圖。下列敘述錯誤的是()A.過程②需要加入適量的纖維素酶和果膠酶B.過程③融合成功的標志是再生出新的細胞壁C.雜種植株的培育打破了生殖隔離,實現(xiàn)了遠緣雜交育種D.過程④的培養(yǎng)流程為誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生根→誘導(dǎo)生芽→移栽【答案】D〖祥解〗植物體細胞雜交是將不同種的植物體細胞,在一定條件下融合成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。在這個過程中,涉及到去除細胞壁、原生質(zhì)體融合、再生細胞壁以及植物組織培養(yǎng)等關(guān)鍵步驟?!驹斘觥緼、過程②是去除植物細胞壁獲得原生質(zhì)體的過程,植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠,所以需要加入適量的纖維素酶和果膠酶,A正確;B、過程③原生質(zhì)體融合成功的標志是再生出新的細胞壁,這是植物體細胞雜交的一個重要特征,B正確;C、雜種植株的培育通過體細胞雜交技術(shù),打破了生殖隔離,實現(xiàn)了遠緣雜交育種,C正確;D、過程④是植物組織培養(yǎng)過程,其培養(yǎng)流程應(yīng)為誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→誘導(dǎo)生根→移栽,而不是先誘導(dǎo)生根再誘導(dǎo)生芽,D錯誤。故選D。7.人體心肌細胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。下列敘述錯誤的是()A.可用滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合B.多次注射抗原的目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多可以分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細胞C.經(jīng)過篩選培養(yǎng),甲、乙、丙中只含雜交瘤細胞的是丙D.過程②的原理是細胞增殖和抗原—抗體特異性結(jié)合【答案】C〖祥解〗克隆抗體的制備過程:首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi),使其發(fā)生免疫,小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,單克隆抗體制備過程中的兩次篩選:第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細胞,即AB型細胞(A為B淋巴細胞,B為骨髓瘤細胞),不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選:利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選,獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。【詳析】A、B淋巴細胞和骨髓瘤細胞是動物細胞,可以用滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)融合,A正確;B、多次注射抗原刺激小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng),從而刺激小鼠產(chǎn)生更多可以分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細胞,B正確;C、乙和丙都含有雜交瘤細胞,C錯誤;D、過程②包括克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,原理是細胞增殖和抗原—抗體特異性結(jié)合,D正確。故選C。8.下列關(guān)于細胞工程的敘述,錯誤的是()A.動物細胞和癌細胞在培養(yǎng)過程中均會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象B.滅活病毒能使細胞膜上的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)重新排布,誘導(dǎo)細胞融合C.單倍體是進行體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料D.愈傷組織和小鼠iPS細胞的誘導(dǎo)形成過程中均發(fā)生了基因的選擇性表達【答案】A〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的條件下,讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)?!驹斘觥緼、動物細胞培養(yǎng)時,正常細胞會出現(xiàn)貼壁生長和接觸抑制,但癌細胞因失去接觸抑制特性,會持續(xù)分裂堆積,不會出現(xiàn)接觸抑制,A錯誤;B、滅活病毒通過表面糖蛋白促進細胞膜蛋白和脂質(zhì)重組,誘導(dǎo)細胞融合,B正確;C、單倍體只有一套染色體,發(fā)生突變后更容易表現(xiàn)出來,是進行體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料,C正確;D、愈傷組織是植物細胞脫分化形成的,小鼠iPS細胞是誘導(dǎo)多能干細胞,其誘導(dǎo)形成過程中均發(fā)生了基因的選擇性表達,D正確。故選A。9.胚胎工程的許多技術(shù),實際上是在體外條件下,對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作。下列有關(guān)哺乳動物受精和早期胚胎發(fā)育的說法,正確的是()A.在自然條件下,哺乳動物的受精一般在子宮內(nèi)完成B.在實際胚胎工程操作中,常以觀察到兩個極體成者雌、雄原核作為受精的標志C.聚集在桑葚胚一端的細胞形成內(nèi)細胞團,它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤D.胚胎發(fā)育過程中,胚胎的內(nèi)部會出現(xiàn)囊胚腔、這個時期的胚胎叫作原腸胚【答案】B〖祥解〗胚胎發(fā)育過程:(1)卵裂期:細胞進行有絲分裂,數(shù)量增加,胚胎總體積不增加。(2)桑葚胚:32個細胞左右的胚胎(現(xiàn)囊胚腔[注:囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫孵化)。(4)原腸胚:內(nèi)細胞團表層形成外胚層,下方細胞形成內(nèi)胚層,由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。【詳析】A、哺乳動物的自然受精發(fā)生在輸卵管中,A錯誤;B、胚胎工程中,受精的標志是觀察到卵細胞膜和透明帶之間的兩個極體,或雌、雄原核的形成,B正確;C、桑葚胚的細胞尚未分化,內(nèi)細胞團的形成發(fā)生在囊胚階段,且內(nèi)細胞團發(fā)育為胎兒的組織器官,滋養(yǎng)層細胞才形成胎膜和胎盤,C錯誤;D、囊胚腔是囊胚期的特征,出現(xiàn)囊胚腔的時期的胚胎叫作囊胚期,D錯誤。故選B。10.單峰駱駝在野外幾乎滅絕,科學(xué)家欲通過胚胎工程技術(shù)拯救野化單峰駱駝,進行了如圖所示研究。據(jù)圖分析,下列說法錯誤的是()A.在卵裂過程中,細胞的數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體積并不增加B.胚胎工程可以大幅縮短供體本身的繁殖周期C.經(jīng)受體孕育的后代,其遺傳特性與供體保持一致,即胚胎的遺傳物質(zhì)一半來自A個體,一半來自B個體D.對A個體應(yīng)用外源促性腺激素,誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子【答案】C〖祥解〗胚胎移植主要包括供體、受體的選擇和處理,配種或人工授精,胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存,胚胎的移植,以及移植后的檢查等步驟。胚胎移植的優(yōu)勢是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力?!驹斘觥緼、在卵裂過程中,細胞進行有絲分裂,數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體積并不增加,甚至略微減小,A正確;B、胚胎工程中,供體只需要提供胚胎,而胚胎在受體中發(fā)育,這樣可以大幅縮短供體本身的繁殖周期,B正確;C、經(jīng)受體孕育的后代,核遺傳物質(zhì)一半來自提供精子的B個體,一半來自提供卵細胞的A個體,但細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)幾乎全部來自提供卵細胞的A個體,C錯誤;D、對A個體應(yīng)用外源促性腺激素,誘發(fā)其超數(shù)排卵,誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子,D正確。故選C。11.基因工程是指按照人們的愿望,通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。下列有關(guān)基因工程的敘述,錯誤的是()A.科學(xué)家利用質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入受體細胞中成功表達,標志著基因工程正式問世B.限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并斷開特定部位的磷酸二酯鍵C.E.coliDNA連接酶連接具有平末端的DNA片段的效率要遠遠低于T4DNA連接酶D.質(zhì)粒DNA分子上有一個至多個限制酶切割位點,便于重組DNA分子的篩選【答案】D〖祥解〗基因工程的操作程序主要包括四個核心步驟:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建(核心步驟)、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定?!驹斘觥緼、科學(xué)家利用質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入受體細胞成功表達,標志著基因工程正式問世。1973年科恩等人的實驗首次實現(xiàn)重組DNA在受體細胞中的表達,A正確;B、限制酶能識別雙鏈DNA的特定核苷酸序列,并切割特定部位的磷酸二酯鍵,形成黏性末端或平末端,B正確;C.E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端,不能連接平末端,而T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端。因此,E.coliDNA連接酶連接具有平末端的DNA片段的效率要遠遠低于T4DNA連接酶,C正確;D.質(zhì)粒DNA分子上的限制酶切割位點的作用是便于目的基因的插入;而重組DNA分子的篩選依賴于質(zhì)粒上的標記基因(如抗生素抗性基因、熒光基因等),而非切割位點,D錯誤。故選D。12.某生物的W基因可編碼一種營養(yǎng)價值極高的W物質(zhì)。為了大批量獲得W物質(zhì),某研究小組構(gòu)建了W基因的表達載體,并利用工程菌生產(chǎn)W物質(zhì)。質(zhì)粒、含W基因的DNA片段及有關(guān)限制酶識別序列和切割位點如下所示。下列說法正確的是()部分限制酶識別序列限制酶BamHⅠEcoRⅠMfeⅠKpnⅠHindⅢ識別序列和切割位點(5′→3′)G↓GATTCG↓AATTCC↓AATTGGGTAC↓CA↓AGCTTA.若圖中W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,最好使用限制酶MfeⅠ、HindⅢ切割圖中質(zhì)粒,使用限制酶EcoRⅠ、HindⅢ切割圖中含W基因的DNA片段B.啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是DNA聚合酶識別和結(jié)合的部位C.若圖中W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,則W基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈是a鏈D.利用PCR技術(shù)擴增W基因,N次循環(huán)后,參與合成的引物總數(shù)為2N+1個【答案】A〖祥解〗一個基因表達載體的組成,除目的基因、標記基因外,還必須有啟動子、終止子等。啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的上游緊挨轉(zhuǎn)錄的起始位點,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達出人類需要的蛋白質(zhì)?!驹斘觥緼、據(jù)圖2可知,W基因不能用MfeI處理,MfeI會破壞W基因結(jié)構(gòu),W基因的右側(cè)只有HindⅢ的識別序列,只能用HindⅢ處理,則質(zhì)粒也要用HindⅢ處理,W基因的左側(cè)有BamHI、EcoRI、KpnI三種序列,又W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,因此,質(zhì)粒和W基因不能再用KpnI處理,否則質(zhì)粒與W基因會反向連接,質(zhì)粒也不能用BamHI、EcoRI處理,否則會影響基因表達載體的功能,結(jié)合表中信息可知,MfeI與EcoRI獲得的切口相同,因此,質(zhì)粒用MfeI、HindⅢ處理,W基因用EcoRI、HindⅢ處理,A正確;B、啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,B錯誤;C、轉(zhuǎn)錄時,按照模板鏈3’端到5’端方向轉(zhuǎn)錄,若圖中W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,則W基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈是b鏈,B錯誤;D、利用PCR技術(shù)擴增W基因,N次循環(huán)后,合成的DNA鏈數(shù)為2N+1個,但是W基因原有的兩條鏈不需要引物,因此參與合成的引物總數(shù)為2N+1-2個,D錯誤。故選A。13.研究人員將一種海魚的抗凍蛋白基因(afp)整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上,然后用它侵染番茄細胞,獲得了抗凍的番茄品種。下列說法正確的是()A.農(nóng)桿菌能在自然條件下侵染單子葉植物和裸子植物,而對大多數(shù)雙子葉植物沒有侵染能力B.抗凍番茄培育是否成功除了通過分子水平的鑒定外,還需要進行個體生物學(xué)水平的鑒定,只有番茄具有抗凍性才能代表培育成功C.將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌導(dǎo)入番茄細胞是培育轉(zhuǎn)基因抗凍番茄的核心工作D.通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的結(jié)果時,抗凍蛋白基因的遷移速率與其分子的大小和構(gòu)象有關(guān),與凝膠的濃度無關(guān)【答案】B【詳析】本題考察基因工程中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、轉(zhuǎn)基因植物的鑒定及PCR產(chǎn)物檢測的相關(guān)知識?!枷榻狻紸.農(nóng)桿菌在自然條件下主要侵染雙子葉植物和裸子植物,而對大多數(shù)單子葉植物無侵染能力,需人工輔助感染,A錯誤;B.轉(zhuǎn)基因植物的鑒定需分子水平檢測(如目的基因是否插入)和個體生物學(xué)水平檢測(如抗凍性驗證),只有性狀表現(xiàn)才能確認成功,B正確;C.基因工程的核心是構(gòu)建基因表達載體,而非將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞,C錯誤;D.瓊脂糖凝膠電泳中,DNA遷移速率與分子大小、構(gòu)象及凝膠濃度均有關(guān),凝膠濃度影響孔隙大小從而改變遷移速率,D錯誤;故選B。14.基因工程自20世紀70年代興起后,得到了飛速的發(fā)展,在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面展示出廣闊的前景。下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的說法,錯誤的是()A.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M獲得低乳糖的牛乳可以解決乳糖不耐受問題B.我國批準生產(chǎn)的重組人干擾素α-1b是我國批準生產(chǎn)的第一個基因工程藥物C.用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達的菌類一般稱為基因工程菌D.用動物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素,該動物體內(nèi)只有乳腺細胞中含有人胰島素基因【答案】D【詳析】本題考察基因工程的應(yīng)用相關(guān)知識,需結(jié)合各選項的具體描述判斷正誤?!枷榻狻紸.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M后,該基因可在乳腺細胞中表達,分解乳汁中的乳糖,從而降低乳糖含量,緩解乳糖不耐受問題,A正確;B.我國批準的第一個基因工程藥物確實是重組人干擾素α-1b,符合實際生產(chǎn)應(yīng)用,B正確;C.基因工程菌的定義即為通過基因工程改造、外源基因高效表達的菌類(如生產(chǎn)胰島素的大腸桿菌),C正確;D.動物乳腺生物反應(yīng)器的構(gòu)建需將目的基因(如人胰島素基因)整合到動物基因組中,所有體細胞均含該基因,但僅在乳腺細胞中因特異性啟動子調(diào)控而表達,D錯誤;故選D。15.蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上,延伸出來的第二代基因工程,目前,它已成為研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的重要手段,并將廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和其他工業(yè)生產(chǎn)中。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的說法,正確的是()A.人類主要通過直接改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)來生產(chǎn)新的蛋白質(zhì)B.要合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)首先應(yīng)設(shè)計基因結(jié)構(gòu)C.利用蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)干擾素的過程遵循了中心法則D.蛋白質(zhì)工程實施過程中可對關(guān)鍵氨基酸直接置換或增刪【答案】C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造新蛋白質(zhì),以滿足人類需求的技術(shù)。本質(zhì)是間接改造基因(而非直接改造蛋白質(zhì)),屬于基因工程的延伸和發(fā)展。【詳析】A、蛋白質(zhì)工程通過改造基因來間接改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),而非直接修改蛋白質(zhì),A錯誤;B、合成新蛋白質(zhì)需先設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),再推測并設(shè)計相應(yīng)基因結(jié)構(gòu),而非首先設(shè)計基因,B錯誤;C、蛋白質(zhì)工程通過修改基因后,仍需通過轉(zhuǎn)錄和翻譯(DNA→mRNA→蛋白質(zhì))生產(chǎn)干擾素,符合中心法則,C正確;D、蛋白質(zhì)工程需通過基因修飾改變氨基酸序列,不能直接置換或增刪氨基酸,D錯誤。故選C。二、非選擇題:本題共5小題,共55分。16.圖1是果酒和果醋的制作流程,圖2是制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖1中b過程所用到的菌種與醋酸發(fā)酵過程中所用到的菌種在細胞結(jié)構(gòu)上最本質(zhì)的區(qū)別是______。(2)當(dāng)缺少糖源時,醋酸發(fā)酵產(chǎn)生d的反應(yīng)式為______。(3)圖2中排氣口在果酒發(fā)酵時排出的氣體是______;排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接的原因是______。(4)利用圖2裝置進行果酒發(fā)酵時,充氣口軟管夾應(yīng)______(填“打開”或“關(guān)閉”);由果酒發(fā)酵轉(zhuǎn)為果醋發(fā)酵時,需要改變的條件是______(答出兩點)。(5)下圖是發(fā)酵過程中培養(yǎng)液pH可能的變化情況,能表示整個發(fā)酵過程中pH變化情況的是曲線______;菌體代謝過程中的產(chǎn)物使發(fā)酵液pH改變至菌體耐受極限后,即使?fàn)I養(yǎng)充足,菌體的生長也會受到抑制,此時可進行的處理是______(答出一點即可)?!敬鸢浮浚?)有以核膜為界限的細胞核(2)(3)①.CO2②.防止空氣中的微生物污染(4)①.關(guān)閉②.升高溫度(到30~35℃)、通入(無菌)空氣(或氧氣)(5)①.②②.調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH、及時排出代謝產(chǎn)物〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:(1)在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖;(2)在無氧條件下,酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳;參與果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿??!窘馕觥浚?)據(jù)題干信息和題圖1可知,圖1是利用葡萄進行果酒和果醋的制作流程,b過程由酵母菌完成酒精發(fā)酵,而醋酸發(fā)酵是由醋酸菌完成的發(fā)酵,酵母菌是真核生物,醋酸菌是原核生物,故酵母菌與醋酸菌在細胞結(jié)構(gòu)上最本質(zhì)的區(qū)別是有以核膜為界限的細胞核。(2)當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將果酒中的乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛轉(zhuǎn)變?yōu)閐醋酸,反應(yīng)式為:(3)在果酒發(fā)酵時酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳,故圖2中排氣口在果酒發(fā)酵時排出的氣體是二氧化碳;圖2裝置的排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連,這樣可防止空氣中微生物的污染。(4)利用圖2裝置進行果酒發(fā)酵時,需要的是無氧條件,因此充氣口軟管夾應(yīng)關(guān)閉,防止空氣進入;醋酸菌是好氧菌,氧氣必須充足才能發(fā)酵產(chǎn)生醋酸,因此由果酒轉(zhuǎn)變成果醋的制作時,需要升高溫度(到30~35℃)和打開軟管夾通入(無菌)空氣(或氧氣)。(5)據(jù)題圖可知,能表示整個發(fā)酵過程中pH變化情況的是曲線②,因為果酒發(fā)酵過程中有二氧化碳產(chǎn)生,而果醋發(fā)酵過程中有醋酸產(chǎn)生,因而pH逐漸下降。菌體代謝過程中的產(chǎn)物使發(fā)酵液pH改變至菌體耐受極限后,即使?fàn)I養(yǎng)充足,菌體的生長也會受到抑制,此時需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH,及時排出代謝產(chǎn)物等,為發(fā)酵菌種提供較合適的環(huán)境條件。17.在某地的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,研究人員發(fā)現(xiàn)了一種含碳有機物A,有機物A在土壤中不易被降解,且含量高時會導(dǎo)致土壤被污染。為修復(fù)被該有機物污染的土壤,可按下圖流程選育能降解該有機物A的細菌B(目標菌),已知含一定量有機物A的培養(yǎng)基不透明。回答下列問題:(1)按物理性質(zhì)分類,該實驗中所用培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基配制時除水和各種所需營養(yǎng)成分外,還需加入______;配制好的培養(yǎng)基通常用______法滅菌,檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法是______。(2)若要判斷Ⅲ中培養(yǎng)基是否起到選擇作用,其對照實驗是______。(3)圖中Ⅲ所用的接種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目會比活菌實際數(shù)目少,原因是______。(4)圖中Ⅲ出現(xiàn)的無透明圈菌落,其代謝類型最可能是______;在挑選菌落時,應(yīng)挑選______(填“有”或“無”)透明圈的菌落?!敬鸢浮浚?)①.固體②.瓊脂(或凝固劑)③.高壓蒸汽滅菌(或濕熱滅菌)④.在相同條件下設(shè)置一個未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)(2)用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或基礎(chǔ)培養(yǎng)基)接種后在相同條件下培養(yǎng)(3)當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落(4)①.自養(yǎng)(需氧)型②.有〖祥解〗選擇培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物生長。分析題意可知,“該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明”,說明培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源,并且降解后培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈?!窘馕觥浚?)按物理性質(zhì)分類,培養(yǎng)基分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基,從圖中可知該實驗要在培養(yǎng)基上形成菌落,所以所用培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基配制時除水和各種所需營養(yǎng)成分外,還需加入瓊脂(或凝固劑);配制好的培養(yǎng)基通常用高壓蒸汽滅菌(或濕熱滅菌),這種方法滅菌效果好,能殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物,檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法是在相同條件下設(shè)置一個未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),若沒有菌落生長,說明培養(yǎng)基滅菌徹底,不存在雜菌。(2)該實驗的目的是選育能降解該有機物A的細菌B(目標菌),若要判斷Ⅲ中培養(yǎng)基是否起到選擇作用,對照實驗應(yīng)是用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或基礎(chǔ)培養(yǎng)基)接種后在相同條件下培養(yǎng),若在該培養(yǎng)基上生長的菌落種類和數(shù)量比Ⅲ中培養(yǎng)基上多,就說明Ⅲ中的培養(yǎng)基起到了選擇能降解有機物A的細菌的作用。(3)圖中Ⅲ所用的接種方法是稀釋涂布平板法,用這種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目會比活菌實際數(shù)目少,原因是當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落。(4)圖中Ⅲ出現(xiàn)的無透明圈菌落,說明這些菌不能降解有機物A,不能利用有機物A作為碳源,其代謝類型最可能是自養(yǎng)(需氧)型(利用無機碳源合成自身物質(zhì)),因為我們要選育能降解有機物A的細菌B,而能降解有機物A的細菌會使周圍的有機物A被降解,從而形成透明圈,所以在挑選菌落時,應(yīng)挑選有透明圈的菌落。18.細胞工程在藥物生產(chǎn)和育種等領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛。閱讀下列材料,回答下列問題:材料一:人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白。如圖是制備抗HCG單克隆抗體的流程示意圖。材料二:花椰菜(2n=18)種植時容易遭受病菌侵害形成病斑,紫羅蘭(2n=14)具有一定的抗病性??蒲腥藛T利用植物體細胞雜交技術(shù)培育具有抗病性狀的花椰菜新品種。(1)動物細胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營養(yǎng)成分外,往往還需加入一定量的______,以滿足動物細胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要;動物細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的主要作用是______(2)圖中過程②篩選的雜交瘤細胞具有______的特點,過程③篩選的目的是獲得______。(3)單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑,如科學(xué)家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體,制作出了早孕試紙,該試紙可以利用尿液診斷早孕的理由是______。(4)材料二中提到的植物體細胞雜交技術(shù)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是______,此環(huán)節(jié)運用的生物學(xué)原理是______培育出的花椰菜新品種體細胞中最多含有______條染色體?!敬鸢浮浚?)①.動物血清②.維持培養(yǎng)液的pH(2)①.既能迅速大量(或無限)增殖,又能產(chǎn)生抗體②.能產(chǎn)生抗HCG抗體(或所需抗體)的雜交瘤細胞(3)懷孕后尿液中含有HCG,單克隆抗體可以與它特異性結(jié)合,從而診斷早孕(4)①.原生質(zhì)體的融合②.細胞膜具有一定的流動性③.64〖祥解〗單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!窘馕觥浚?)動物細胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要營養(yǎng)成分外,往往還需加入一定量的動物血清,因為血清中含有多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子等,能滿足動物細胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要;動物細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。(2)圖中過程②篩選的雜交瘤細胞具有既能迅速大量(或無限)增殖,又能產(chǎn)生抗體的特點。過程③篩選的目的是獲得能產(chǎn)生抗HCG抗體(或所需抗體)的雜交瘤細胞。(3)因為女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌人絨毛膜促性腺激素(HCG),該激素會通過尿液排出體外,單克隆抗體可以與它特異性結(jié)合,從而診斷早孕,所以利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體制作的早孕試紙可以利用尿液診斷早孕。(4)植物體細胞雜交技術(shù)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是原生質(zhì)體的融合以得到雜種細胞,原生質(zhì)體融合運用的生物學(xué)原理是細胞膜具有一定的流動性?;ㄒ耍?n=18),紫羅蘭(2n=14),培育出的花椰菜新品種體細胞中染色體數(shù)為18+14=32條,在有絲分裂后期染色體數(shù)目加倍,最多含有64條染色體。19.杜泊羊以其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點,成為受廣大消費者喜歡的綿羊品種??蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖中的a、b代表的生物技術(shù)分別是______、______。(2)若用體外受精技術(shù)獲得試管良種杜泊羊,需要將采集到的卵母細胞和精子,分別在體外進行______和______,然后才能用于體外受精。(3)若用胚胎移植技術(shù)繁育良種杜泊羊,需要對______(填圖中字母)兩類羊進行同期發(fā)情處理,原因是______。(4)若用胚胎分割技術(shù)獲得同卵良種杜泊羊,在進行胚胎分割時,應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的______或囊胚;在分割囊胚階段的胚胎時,要注意將______均等分割;在胚胎移植前,若要進行性別鑒定、遺傳病篩查等,則應(yīng)選擇______細胞進行取樣?!敬鸢浮浚?)①.(體外/早期)胚胎培養(yǎng)②.胚胎移植(2)①.成熟培養(yǎng)②.獲能處理(3)①.A和C②.保證供體和受體生殖器官的生理變化相同,為胚胎移入提供相同生理環(huán)境(4)①.桑葚胚②.內(nèi)細胞團③.滋養(yǎng)層〖祥解〗胚胎工程是指對生殖細胞、受精卵或早期胚胎細胞進行多種顯微操作或處理,然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)產(chǎn)生后代,以滿足人類的各種需求。胚胎工程技術(shù)包括體外受精、胚胎移植和胚胎分割等?!窘馕觥浚?)從圖中可知,a過程是將受精卵培養(yǎng)成早期胚胎,這一生物技術(shù)是(體外/早期)胚胎培養(yǎng),b過程是將早期胚胎移植到當(dāng)?shù)仄胀ňd羊C體內(nèi),這一生物技術(shù)是胚胎移植。(2)若用體外受精技術(shù)獲得試管良種杜泊羊,采集到的卵母細胞需要在體外培養(yǎng),使其成熟,精子需要進行獲能處理,然后才能用于體外受精。(3)若用胚胎移植技術(shù)繁育良種杜泊羊,需要對供體羊A和受體羊C進行同期發(fā)情處理,因為同期發(fā)情處理可以保證供體和受體生殖器官的生理變化相同,為胚胎移入提供相同生理環(huán)境,提高胚胎移植的成功率。(4)若用胚胎分割技術(shù)獲得同卵良種杜泊羊,在進行胚胎分割時,應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚;在分割囊胚階段的胚胎時,要注意將內(nèi)細胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育;在胚胎移植前,若要進行性別鑒定、遺傳病篩查等,則應(yīng)選擇滋養(yǎng)層細胞進行取樣,因為滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤,取樣滋養(yǎng)層細胞不會影響胚胎的發(fā)育。20.某動物體內(nèi)含有研究者感興趣的目的基因,研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存。該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因(AmpR)、LacZ基因,其結(jié)構(gòu)和簡單的操作步驟如下圖所示。回答下列問題:注:LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍色物質(zhì),使菌落呈現(xiàn)藍色;否則菌落為白色。(1)在第②步中,應(yīng)選擇用______(填“相同”或“不相同”)的限制酶或切割能產(chǎn)生______(填“相同”或“不相同”)末端的限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段。(2)基因工程中常用的載體除質(zhì)粒外還有病毒,病毒可作為載體的原因與其具有______的特性有關(guān);在第③步中,為了使質(zhì)粒DNA與目的基因能連接,還需要在混合物中加入______。(3)β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal并產(chǎn)生藍色的物質(zhì),使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落為白色,利用這一特性,在構(gòu)建基因表達載體時,應(yīng)將目的基因插入______(填“AmpR”或“LacZ”)基因片段中,將大腸桿菌與基因表達載體混合培養(yǎng)一段時間后,將大腸桿菌接種到添加______的培養(yǎng)基上培養(yǎng),待長出菌落后,應(yīng)挑選______(填“藍色”或“白色”)的菌落作為工程菌,理由是______。(4)研究人員利用目的基因的mRNA進行逆轉(zhuǎn)錄得到了cDNA,已知其mRNA的序列為5′-UGAACG…(中間序列)…GACUCG-3′。為了將擴增后的基因和載體連接構(gòu)建重組質(zhì)粒,下列引物序列可用于PCR擴增的有______(填標號)。A.5′-TGAACG-3′ B.5′-CGAGTC-3′ C.3′-CGAGTC-5′ D.3′-TGAACG-5′【答案】(1)①.相同②.相同(2)①.能侵染宿主細胞,并將自己的核酸注入并整合到宿主細胞的基因組中②.DNA連接酶(3)①.LacZ②.氨芐青霉素和X-gal③.白色④.目的基因的插入破壞了LacZ基因的結(jié)構(gòu),使其不能正常表達,無法形成β-半乳糖苷酶,底物X-gal也就不會被分解,菌落呈白色(4)AB〖祥解〗(1)基因工程是指按照人們的意愿,進行嚴格的設(shè)計,并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。(2)基因工程技術(shù)的基本步驟:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建(核心工作)、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。(3)基因工程的工具:限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。運載體:常用的運載體有質(zhì)粒、動植物病毒等?!窘馕觥浚?)第②步是基因表達載體的構(gòu)建階段,用限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,使其露出相同的末端,以便于連接。選擇限制酶應(yīng)注意:選擇用相同的限制酶或切割能產(chǎn)生相同末端的限制酶(同尾酶),并且注意限制酶的切割位點不能位于目的基因的內(nèi)部,以防破壞目的基因,限制酶也不能破壞質(zhì)粒的啟動子、終止子、標記基因、復(fù)制原點等結(jié)構(gòu)。(2)做為運載體需具有的特點:能夠在宿主細胞中獨立復(fù)制并穩(wěn)定地保存;具有多個限制性內(nèi)切酶切點,以便與外源基因連接;具有某些標記基因,便于進行篩選等。病毒能侵染宿主細胞,并將自己的核酸注入并整合到宿主細胞的基因組中。經(jīng)分析可知,使用DNA連接酶,連接質(zhì)粒DNA與目的基因。(3)由題意可知,LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal并產(chǎn)生藍色的物質(zhì),使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落為白色,根據(jù)這一特性,應(yīng)將目的基因插入LacZ基因片段中。為達到雙重鑒定的目的,將大腸桿菌接種到添加到氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。由于目的基因的插入,破壞了LacZ基因的結(jié)構(gòu),使其不能正常表達形成β-半乳糖苷酶,底物X-gal也就不會被分解,因此,含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落呈白色,故待長出菌落后,應(yīng)挑選白色的菌落為工程菌。(4)由于mRNA的序列5′-UGAACG…(中間序列)…GACUCG-3′,是經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄得來,故cDNA的序列為3′-ACTTGC…(中間序列)…CTGAGC-5′,另一條cDNA序列為5′-TGAACG…(中間序列)…GACTCG-3′,2種引物分別與DNA分子的3′端的堿基互補配對,故為5′-TGAACG-3′和5′-CGAGTC-3′。四川省川南地區(qū)名校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中一、選擇題:本題共15小題,每小題3分,共45分。在每小題給出的四個選項中,只有一項是符合題目要求的。1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物,且需嚴格控制發(fā)酵條件。下列敘述正確的是()A.腐乳易于消化的原因是豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成了小分子肽和氨基酸B.制作果醋需要醋酸菌,糖源不足時,醋酸菌通過無氧呼吸將乙醇分解為醋酸C.家庭制作泡菜時為了避免雜菌污染,泡菜壇、菜刀、菜料均需嚴格滅菌處理D.與傳統(tǒng)發(fā)酵一樣,發(fā)酵工程所用菌種絕大多數(shù)為混合菌種【答案】A〖祥解〗(1)參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖;在無氧條件下,酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。(2)參與果醋制作微生物是醋酸菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷#?)參與腐乳制作的微生物主要是毛霉,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理是毛霉等微生物分泌的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸;脂肪酶把脂肪分解為甘油和脂肪酸。(4)泡菜的制作原理:泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?!驹斘觥緼、腐乳制作中,毛霉等微生物分泌的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸,使其更易消化,A正確;B、醋酸菌為嚴格好氧菌,即使糖源不足,其將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸的過程仍需有氧條件,屬于有氧呼吸而非無氧呼吸,B錯誤;C、家庭制作泡菜利用是乳酸菌的天然發(fā)酵,泡菜壇需密封創(chuàng)造無氧環(huán)境,菜刀和菜料只需清洗干凈,無需嚴格滅菌(滅菌會破壞乳酸菌的天然接種),C錯誤;D、傳統(tǒng)發(fā)酵多依賴混合菌種,而發(fā)酵工程通常采用單一純種菌種以確保生產(chǎn)可控,D錯誤。故選A。2.植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)形成完整植株的技術(shù)。下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.MS培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)過程中常用的一種培養(yǎng)基B.無論是脫分化還是再分化都需要光照和適宜的溫度C.菊花植物組織培養(yǎng)過程中,誘導(dǎo)形成愈傷組織、生根、生芽的培養(yǎng)基為不同的培養(yǎng)基D.用植物頂端分生區(qū)附近的組織作為外植體,可培育獲得脫毒苗【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的不同階段需調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例:高生長素/細胞分裂素促進生根,低比值促進生芽,適中比例誘導(dǎo)愈傷組織?!驹斘觥緼、MS培養(yǎng)基含有植物生長所需的大量元素、微量元素、有機物等,是植物組織培養(yǎng)的常用培養(yǎng)基,A正確;B、脫分化過程通常在避光條件下進行(避免細胞分化),而再分化階段(如生根、生芽)可能需要光照(如葉綠體形成及形態(tài)建成),因此并非兩者均需光照,B錯誤;C、不同階段需調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例:高生長素/細胞分裂素促進生根,低比值促進生芽,適中比例誘導(dǎo)愈傷組織,C正確;D、頂端分生區(qū)細胞分裂活躍,病毒含量少甚至無,利用其作為外植體可減少病毒傳遞,獲得脫毒苗,D正確。故選B。3.某實驗小組完成了“土壤中分解纖維素的細菌的分離與計數(shù)”實驗,操作流程如圖所示,下列相關(guān)敘述正確的是()A.培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源,其上生長的都是能分解纖維素的細菌B.接種后的培養(yǎng)基如果未長出菌落則可以直接丟棄C.4號試管的結(jié)果表明每克土壤中的活菌數(shù)約為1.1×108個D.接種時,用涂布器蘸取少量菌液并均勻地涂布在培養(yǎng)基表面【答案】C〖祥解〗用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)時,在每一個梯度濃度內(nèi),至少要涂布3個平板,選擇菌落數(shù)在30~300的進行記數(shù),求其平均值,再通過計算得出土壤中細菌總數(shù)?!驹斘觥緼、以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,能篩選出分解纖維素的細菌,但也可能有一些微生物能利用空氣中的二氧化碳等作為碳源在其上生長,A錯誤;B、接種后的培養(yǎng)基未長出菌落,不能直接丟棄,可能存在雜菌污染等情況,需要進行適當(dāng)處理,比如高壓蒸汽滅菌后再丟棄,B錯誤;C、4號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù),三個平板的菌落數(shù)分別為113、106、111,平均值為(113+106+111)÷3=110個。4號試管的稀釋倍數(shù)為105,接種量為0.1mL,每克土壤中的活菌數(shù)約為110÷0.1×105=1.1×108個,C正確;D、接種時,應(yīng)將菌液滴加到培養(yǎng)基表面,然后用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面,而不是用涂布器蘸取少量菌液涂布,D錯誤。故選C。4.安莎霉素主要用于治療結(jié)核分枝桿菌導(dǎo)致的肺部感染,該抗生素是由一種產(chǎn)自深海的賴氨酸缺陷型放線菌所產(chǎn)生的。為篩選出能產(chǎn)安莎霉素的菌種,科研工作者用紫外線對采自深海的放線菌進行誘變與選育,實驗的部分流程如下圖所示。下列敘述錯誤的是()A.利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同B.進行C操作時必須先將無菌絨布轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基③,再轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基④C.對比兩種培養(yǎng)基中的菌落情況,培養(yǎng)基④為缺少賴氨酸的不完全培養(yǎng)基D.由培養(yǎng)結(jié)果可推斷,E菌落不能產(chǎn)生安莎霉素,D菌落能產(chǎn)生安莎霉素【答案】C〖祥解〗影印培養(yǎng)法是指確保在一系列平板培養(yǎng)基相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大?。ɑ蚵孕。┑哪局茍A柱體上,輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下,把細菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上,然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上,獲得與原始平板完全相同的接種平板。待培養(yǎng)后,比對各培養(yǎng)皿在相同位置出現(xiàn)相同的菌落,從而篩選出適當(dāng)?shù)木??!驹斘觥緼、影印培養(yǎng)法主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大?。ɑ蚵孕。┑哪局茍A柱體上,輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下,把細菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上,然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上,獲得與原始平板完全相同的接種平板。利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同,A正確;B、為了防止將特定營養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基,故進行過程C操作時,先將無菌絨布轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基③(缺乏賴氨酸的培養(yǎng)基),再轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)基④(含有賴氨酸的培養(yǎng)基),B正確;C、對比兩種培養(yǎng)基中的菌落情況,培養(yǎng)基③中菌落數(shù)目少,為缺少賴氨酸的不完全培養(yǎng)基,C錯誤;D、E在③和④中都存在,所以不是賴氨酸缺陷型,D在④中存在,在③中不存在,所以是賴氨酸缺陷型,能產(chǎn)安莎霉素,D正確。故選C。5.大腸桿菌、沙門氏菌能引起家禽和家畜的腸道疾病。暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物具有廣譜抗菌性,為檢測其代謝產(chǎn)物對沙門氏菌和大腸桿菌的抑菌能力,進行圖示實驗。下列說法正確的是()A.圖中接種后的培養(yǎng)基需要進行滅菌處理B.從抑菌圈邊緣挑取菌落涂布平板重復(fù)實驗,抑菌圈的平均直徑會變小C.圖中X為離心后得到的下層沉淀,含有暹羅芽孢桿菌D.抑菌圈邊緣的菌種與暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物接觸后發(fā)生突變從而產(chǎn)生抗性【答案】B〖祥解〗本實驗的思路為:將含暹羅芽孢桿菌代謝物的濾紙片放到接種了大腸桿菌或者沙門氏菌的平板培養(yǎng)基上,濾紙片周圍會出現(xiàn)抑菌圈,在抑菌圈邊緣生長的細菌可能是耐藥菌;若抗生素對細菌起選擇作用,則隨著培養(yǎng)次數(shù)增多,耐藥菌的比例增大,在連續(xù)培養(yǎng)幾代后,抑菌圈的平均直徑變小?!驹斘觥緼、培養(yǎng)基的滅菌要在接種操作之前,接種后的培養(yǎng)基進行滅菌處理則菌種也被殺死,A錯誤;B、在抑菌圈邊緣生長的細菌可能是耐藥菌,從抑菌圈邊緣挑取菌落涂布平板重復(fù)實驗,抑菌圈平均直徑變小,B正確;C、依題意,實驗?zāi)康氖菣z測暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物對沙門氏菌和大腸桿菌的抑菌能力,故圖示X應(yīng)為離心后得到的上清液,C錯誤;D、暹羅芽孢桿菌代謝產(chǎn)物接觸只是對菌種起到選擇作用,D錯誤。故選B。6.不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞供體細胞的染色質(zhì),與未經(jīng)射線照射的受體細胞融合,所得融合細胞含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)。紅豆杉的次生代謝產(chǎn)物紫杉醇是一種高效抗癌藥物,但由于紅豆杉野生資源匱乏,且紅豆杉植株紫杉醇含量極低,導(dǎo)致了紫杉醇的供應(yīng)嚴重不足。因此,研究人員嘗試運用不對稱體細胞雜交將紅豆杉(2n=24)與柴胡(2n=12)進行融合,培育能產(chǎn)生紫杉醇的柴胡,過程如下圖。下列敘述錯誤的是()A.過程②需要加入適量的纖維素酶和果膠酶B.過程③融合成功的標志是再生出新的細胞壁C.雜種植株的培育打破了生殖隔離,實現(xiàn)了遠緣雜交育種D.過程④的培養(yǎng)流程為誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生根→誘導(dǎo)生芽→移栽【答案】D〖祥解〗植物體細胞雜交是將不同種的植物體細胞,在一定條件下融合成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。在這個過程中,涉及到去除細胞壁、原生質(zhì)體融合、再生細胞壁以及植物組織培養(yǎng)等關(guān)鍵步驟。【詳析】A、過程②是去除植物細胞壁獲得原生質(zhì)體的過程,植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠,所以需要加入適量的纖維素酶和果膠酶,A正確;B、過程③原生質(zhì)體融合成功的標志是再生出新的細胞壁,這是植物體細胞雜交的一個重要特征,B正確;C、雜種植株的培育通過體細胞雜交技術(shù),打破了生殖隔離,實現(xiàn)了遠緣雜交育種,C正確;D、過程④是植物組織培養(yǎng)過程,其培養(yǎng)流程應(yīng)為誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→誘導(dǎo)生根→移栽,而不是先誘導(dǎo)生根再誘導(dǎo)生芽,D錯誤。故選D。7.人體心肌細胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。下列敘述錯誤的是()A.可用滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合B.多次注射抗原的目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多可以分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細胞C.經(jīng)過篩選培養(yǎng),甲、乙、丙中只含雜交瘤細胞的是丙D.過程②的原理是細胞增殖和抗原—抗體特異性結(jié)合【答案】C〖祥解〗克隆抗體的制備過程:首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi),使其發(fā)生免疫,小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,單克隆抗體制備過程中的兩次篩選:第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細胞,即AB型細胞(A為B淋巴細胞,B為骨髓瘤細胞),不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選:利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選,獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞?!驹斘觥緼、B淋巴細胞和骨髓瘤細胞是動物細胞,可以用滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)融合,A正確;B、多次注射抗原刺激小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng),從而刺激小鼠產(chǎn)生更多可以分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細胞,B正確;C、乙和丙都含有雜交瘤細胞,C錯誤;D、過程②包括克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,原理是細胞增殖和抗原—抗體特異性結(jié)合,D正確。故選C。8.下列關(guān)于細胞工程的敘述,錯誤的是()A.動物細胞和癌細胞在培養(yǎng)過程中均會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象B.滅活病毒能使細胞膜上的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)重新排布,誘導(dǎo)細胞融合C.單倍體是進行體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料D.愈傷組織和小鼠iPS細胞的誘導(dǎo)形成過程中均發(fā)生了基因的選擇性表達【答案】A〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的條件下,讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。【詳析】A、動物細胞培養(yǎng)時,正常細胞會出現(xiàn)貼壁生長和接觸抑制,但癌細胞因失去接觸抑制特性,會持續(xù)分裂堆積,不會出現(xiàn)接觸抑制,A錯誤;B、滅活病毒通過表面糖蛋白促進細胞膜蛋白和脂質(zhì)重組,誘導(dǎo)細胞融合,B正確;C、單倍體只有一套染色體,發(fā)生突變后更容易表現(xiàn)出來,是進行體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料,C正確;D、愈傷組織是植物細胞脫分化形成的,小鼠iPS細胞是誘導(dǎo)多能干細胞,其誘導(dǎo)形成過程中均發(fā)生了基因的選擇性表達,D正確。故選A。9.胚胎工程的許多技術(shù),實際上是在體外條件下,對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作。下列有關(guān)哺乳動物受精和早期胚胎發(fā)育的說法,正確的是()A.在自然條件下,哺乳動物的受精一般在子宮內(nèi)完成B.在實際胚胎工程操作中,常以觀察到兩個極體成者雌、雄原核作為受精的標志C.聚集在桑葚胚一端的細胞形成內(nèi)細胞團,它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤D.胚胎發(fā)育過程中,胚胎的內(nèi)部會出現(xiàn)囊胚腔、這個時期的胚胎叫作原腸胚【答案】B〖祥解〗胚胎發(fā)育過程:(1)卵裂期:細胞進行有絲分裂,數(shù)量增加,胚胎總體積不增加。(2)桑葚胚:32個細胞左右的胚胎(現(xiàn)囊胚腔[注:囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫孵化)。(4)原腸胚:內(nèi)細胞團表層形成外胚層,下方細胞形成內(nèi)胚層,由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。【詳析】A、哺乳動物的自然受精發(fā)生在輸卵管中,A錯誤;B、胚胎工程中,受精的標志是觀察到卵細胞膜和透明帶之間的兩個極體,或雌、雄原核的形成,B正確;C、桑葚胚的細胞尚未分化,內(nèi)細胞團的形成發(fā)生在囊胚階段,且內(nèi)細胞團發(fā)育為胎兒的組織器官,滋養(yǎng)層細胞才形成胎膜和胎盤,C錯誤;D、囊胚腔是囊胚期的特征,出現(xiàn)囊胚腔的時期的胚胎叫作囊胚期,D錯誤。故選B。10.單峰駱駝在野外幾乎滅絕,科學(xué)家欲通過胚胎工程技術(shù)拯救野化單峰駱駝,進行了如圖所示研究。據(jù)圖分析,下列說法錯誤的是()A.在卵裂過程中,細胞的數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體積并不增加B.胚胎工程可以大幅縮短供體本身的繁殖周期C.經(jīng)受體孕育的后代,其遺傳特性與供體保持一致,即胚胎的遺傳物質(zhì)一半來自A個體,一半來自B個體D.對A個體應(yīng)用外源促性腺激素,誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子【答案】C〖祥解〗胚胎移植主要包括供體、受體的選擇和處理,配種或人工授精,胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存,胚胎的移植,以及移植后的檢查等步驟。胚胎移植的優(yōu)勢是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。【詳析】A、在卵裂過程中,細胞進行有絲分裂,數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體積并不增加,甚至略微減小,A正確;B、胚胎工程中,供體只需要提供胚胎,而胚胎在受體中發(fā)育,這樣可以大幅縮短供體本身的繁殖周期,B正確;C、經(jīng)受體孕育的后代,核遺傳物質(zhì)一半來自提供精子的B個體,一半來自提供卵細胞的A個體,但細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)幾乎全部來自提供卵細胞的A個體,C錯誤;D、對A個體應(yīng)用外源促性腺激素,誘發(fā)其超數(shù)排卵,誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子,D正確。故選C。11.基因工程是指按照人們的愿望,通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。下列有關(guān)基因工程的敘述,錯誤的是()A.科學(xué)家利用質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入受體細胞中成功表達,標志著基因工程正式問世B.限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并斷開特定部位的磷酸二酯鍵C.E.coliDNA連接酶連接具有平末端的DNA片段的效率要遠遠低于T4DNA連接酶D.質(zhì)粒DNA分子上有一個至多個限制酶切割位點,便于重組DNA分子的篩選【答案】D〖祥解〗基因工程的操作程序主要包括四個核心步驟:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建(核心步驟)、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定?!驹斘觥緼、科學(xué)家利用質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入受體細胞成功表達,標志著基因工程正式問世。1973年科恩等人的實驗首次實現(xiàn)重組DNA在受體細胞中的表達,A正確;B、限制酶能識別雙鏈DNA的特定核苷酸序列,并切割特定部位的磷酸二酯鍵,形成黏性末端或平末端,B正確;C.E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端,不能連接平末端,而T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端。因此,E.coliDNA連接酶連接具有平末端的DNA片段的效率要遠遠低于T4DNA連接酶,C正確;D.質(zhì)粒DNA分子上的限制酶切割位點的作用是便于目的基因的插入;而重組DNA分子的篩選依賴于質(zhì)粒上的標記基因(如抗生素抗性基因、熒光基因等),而非切割位點,D錯誤。故選D。12.某生物的W基因可編碼一種營養(yǎng)價值極高的W物質(zhì)。為了大批量獲得W物質(zhì),某研究小組構(gòu)建了W基因的表達載體,并利用工程菌生產(chǎn)W物質(zhì)。質(zhì)粒、含W基因的DNA片段及有關(guān)限制酶識別序列和切割位點如下所示。下列說法正確的是()部分限制酶識別序列限制酶BamHⅠEcoRⅠMfeⅠKpnⅠHindⅢ識別序列和切割位點(5′→3′)G↓GATTCG↓AATTCC↓AATTGGGTAC↓CA↓AGCTTA.若圖中W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,最好使用限制酶MfeⅠ、HindⅢ切割圖中質(zhì)粒,使用限制酶EcoRⅠ、HindⅢ切割圖中含W基因的DNA片段B.啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是DNA聚合酶識別和結(jié)合的部位C.若圖中W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,則W基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈是a鏈D.利用PCR技術(shù)擴增W基因,N次循環(huán)后,參與合成的引物總數(shù)為2N+1個【答案】A〖祥解〗一個基因表達載體的組成,除目的基因、標記基因外,還必須有啟動子、終止子等。啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的上游緊挨轉(zhuǎn)錄的起始位點,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達出人類需要的蛋白質(zhì)?!驹斘觥緼、據(jù)圖2可知,W基因不能用MfeI處理,MfeI會破壞W基因結(jié)構(gòu),W基因的右側(cè)只有HindⅢ的識別序列,只能用HindⅢ處理,則質(zhì)粒也要用HindⅢ處理,W基因的左側(cè)有BamHI、EcoRI、KpnI三種序列,又W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,因此,質(zhì)粒和W基因不能再用KpnI處理,否則質(zhì)粒與W基因會反向連接,質(zhì)粒也不能用BamHI、EcoRI處理,否則會影響基因表達載體的功能,結(jié)合表中信息可知,MfeI與EcoRI獲得的切口相同,因此,質(zhì)粒用MfeI、HindⅢ處理,W基因用EcoRI、HindⅢ處理,A正確;B、啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,B錯誤;C、轉(zhuǎn)錄時,按照模板鏈3’端到5’端方向轉(zhuǎn)錄,若圖中W基因的轉(zhuǎn)錄方向是從左向右,則W基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈是b鏈,B錯誤;D、利用PCR技術(shù)擴增W基因,N次循環(huán)后,合成的DNA鏈數(shù)為2N+1個,但是W基因原有的兩條鏈不需要引物,因此參與合成的引物總數(shù)為2N+1-2個,D錯誤。故選A。13.研究人員將一種海魚的抗凍蛋白基因(afp)整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上,然后用它侵染番茄細胞,獲得了抗凍的番茄品種。下列說法正確的是()A.農(nóng)桿菌能在自然條件下侵染單子葉植物和裸子植物,而對大多數(shù)雙子葉植物沒有侵染能力B.抗凍番茄培育是否成功除了通過分子水平的鑒定外,還需要進行個體生物學(xué)水平的鑒定,只有番茄具有抗凍性才能代表培育成功C.將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌導(dǎo)入番茄細胞是培育轉(zhuǎn)基因抗凍番茄的核心工作D.通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的結(jié)果時,抗凍蛋白基因的遷移速率與其分子的大小和構(gòu)象有關(guān),與凝膠的濃度無關(guān)【答案】B【詳析】本題考察基因工程中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、轉(zhuǎn)基因植物的鑒定及PCR產(chǎn)物檢測的相關(guān)知識?!枷榻狻紸.農(nóng)桿菌在自然條件下主要侵染雙子葉植物和裸子植物,而對大多數(shù)單子葉植物無侵染能力,需人工輔助感染,A錯誤;B.轉(zhuǎn)基因植物的鑒定需分子水平檢測(如目的基因是否插入)和個體生物學(xué)水平檢測(如抗凍性驗證),只有性狀表現(xiàn)才能確認成功,B正確;C.基因工程的核心是構(gòu)建基因表達載體,而非將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞,C錯誤;D.瓊脂糖凝膠電泳中,DNA遷移速率與分子大小、構(gòu)象及凝膠濃度均有關(guān),凝膠濃度影響孔隙大小從而改變遷移速率,D錯誤;故選B。14.基因工程自20世紀70年代興起后,得到了飛速的發(fā)展,在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面展示出廣闊的前景。下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的說法,錯誤的是()A.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M獲得低乳糖的牛乳可以解決乳糖不耐受問題B.我國批準生產(chǎn)的重組人干擾素α-1b是我國批準生產(chǎn)的第一個基因工程藥物C.用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達的菌類一般稱為基因工程菌D.用動物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素,該動物體內(nèi)只有乳腺細胞中含有人胰島素基因【答案】D【詳析】本題考察基因工程的應(yīng)用相關(guān)知識,需結(jié)合各選項的具體描述判斷正誤?!枷榻狻紸.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M后,該基因可在乳腺細胞中表達,分解乳汁中的乳糖,從而降低乳糖含量,緩解乳糖不耐受問題,A正確;B.我國批準的第一個基因工程藥物確實是重組人干擾素α-1b,符合實際生產(chǎn)應(yīng)用,B正確;C.基因工程菌的定義即為通過基因工程改造、外源基因高效表達的菌類(如生產(chǎn)胰島素的大腸桿菌),C正確;D.動物乳腺生物反應(yīng)器的構(gòu)建需將目的基因(如人胰島素基因)整合到動物基因組中,所有體細胞均含該基因,但僅在乳腺細胞中因特異性啟動子調(diào)控而表達,D錯誤;故選D。15.蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上,延伸出來的第二代基因工程,目前,它已成為研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的重要手段,并將廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和其他工業(yè)生產(chǎn)中。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的說法,正確的是()A.人類主要通過直接改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)來生產(chǎn)新的蛋白質(zhì)B.要合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)首先應(yīng)設(shè)計基因結(jié)構(gòu)C.利用蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)干擾素的過程遵循了中心法則D.蛋白質(zhì)工程實施過程中可對關(guān)鍵氨基酸直接置換或增刪【答案】C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造新蛋白質(zhì),以滿足人類需求的技術(shù)。本質(zhì)是間接改造基因(而非直接改造蛋白質(zhì)),屬于基因工程的延伸和發(fā)展。【詳析】A、蛋白質(zhì)工程通過改造基因來間接改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),而非直接修改蛋白質(zhì),A錯誤;B、合成新蛋白質(zhì)需先設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),再推測并設(shè)計相應(yīng)基因結(jié)構(gòu),而非首先設(shè)計基因,B錯誤;C、蛋白質(zhì)工程通過修改基因后,仍需通過轉(zhuǎn)錄和翻譯(DNA→mRNA→蛋白質(zhì))生產(chǎn)干擾素,符合中心法則,C正確;D、蛋白質(zhì)工程需通過基因修飾改變氨基酸序列,不能直接置換或增刪氨基酸,D錯誤。故選C。二、非選擇題:本題共5小題,共55分。16.圖1是果酒和果醋的制作流程,圖2是制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置。回答下列問題:(1)圖1中b過程所用到的菌種與醋酸發(fā)酵過程中所用到的菌種在細胞結(jié)構(gòu)上最本質(zhì)的區(qū)別是______。(2)當(dāng)缺少糖源時,醋酸發(fā)酵產(chǎn)生d的反應(yīng)式為______。(3)圖2中排氣口在果酒發(fā)酵時排出的氣體是______;排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接的原因是______。(4)利用圖2裝置進行果酒發(fā)酵時,充氣口軟管夾應(yīng)______(填“打開”或“關(guān)閉”);由果酒發(fā)酵轉(zhuǎn)為果醋發(fā)酵時,需要改變的條件是______(答出兩點)。(5)下圖是發(fā)酵過程中培養(yǎng)液pH可能的變化情況,能表示整個發(fā)酵過程中pH變化情況的是曲線______;菌體代謝過程中的產(chǎn)物使發(fā)酵液pH改變至菌體耐受極限后,即使?fàn)I養(yǎng)充足,菌體的生長也會受到抑制,此時可進行的處理是______(答出一點即可)?!敬鸢浮浚?)有以核膜為界限的細胞核(2)(3)①.CO2②.防止空氣中的微生物污染(4)①.關(guān)閉②.升高溫度(到30~35℃)、通入(無菌)空氣(或氧氣)(5)①.②②.調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH、及時排出代謝產(chǎn)物〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:(1)在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖;(2)在無氧條件下,酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳;參與果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。【解析】?)據(jù)題干信息和題圖1可知,圖1是利用葡萄進行果酒和果醋的制作流程,b過程由酵母菌完成酒精發(fā)酵,而醋酸發(fā)酵是由醋酸菌完成的發(fā)酵,酵母菌是真核生物,醋酸菌是原核生物,故酵母菌與醋酸菌在細胞結(jié)構(gòu)上最本質(zhì)的區(qū)別是有以核膜為界限的細胞核。(2)當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將果酒中的乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛轉(zhuǎn)變?yōu)閐醋酸,反應(yīng)式為:(3)在果酒發(fā)酵時酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳,故圖2中排氣口在果酒發(fā)酵時排出的氣體是二氧化碳;圖2裝置的排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連,這樣可防止空氣中微生物的污染。(4)利用圖2裝置進行果酒發(fā)酵時,需要的是無氧條件,因此充氣口軟管夾應(yīng)關(guān)閉,防止空氣進入;醋酸菌是好氧菌,氧氣必須充足才能發(fā)酵產(chǎn)生醋酸,因此由果酒轉(zhuǎn)變成果醋的制作時,需要升高溫度(到30~35℃)和打開軟管夾通入(無菌)空氣(或氧氣)。(5)據(jù)題圖可知,能表示整個發(fā)酵過程中pH變化情況的是曲線②,因為果酒發(fā)酵過程中有二氧化碳產(chǎn)生,而果醋發(fā)酵過程中有醋酸產(chǎn)生,因而pH逐漸下降。菌體代謝過程中的產(chǎn)物使發(fā)酵液pH改變至菌體耐受極限后,即使?fàn)I養(yǎng)充足,菌體的生長也會受到抑制,此時需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH,及時排出代謝產(chǎn)物等,為發(fā)酵菌種提供較合適的環(huán)境條件。17.在某地的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,研究人員發(fā)現(xiàn)了一種含碳有機物A,有機物A在土壤中不易被降解,且含量高時會導(dǎo)致土壤被污染。為修復(fù)被該有機物污染的土壤,可按下圖流程選育能降解該有機物A的細菌B(目標菌),已知含一定量有機物A的培養(yǎng)基不透明。回答下列問題:(1)按物理性質(zhì)分類,該實驗中所用培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基配制時除水和各種所需營養(yǎng)成分外,還需加入______;配制好的培養(yǎng)基通常用______法滅菌,檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法是______。(2)若要判斷Ⅲ中培養(yǎng)基是否起到選擇作用,其對照實驗是______。(3)圖中Ⅲ所用的接種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目會比活菌實際數(shù)目少,原因是______。(4)圖中Ⅲ出現(xiàn)的無透明圈菌落,其代謝類型最可能是______;在挑選菌落時,應(yīng)挑選______(填“有”或“無”)透明圈的菌落?!敬鸢浮浚?)①.固體②.瓊脂(或凝固劑)③.高壓蒸汽滅菌(或濕熱滅菌)④.在相同條件下設(shè)置一個未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)(2)用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或基礎(chǔ)培養(yǎng)基)接種后在相同條件下培養(yǎng)(3)當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落(4)①.自養(yǎng)(需氧)型②.有〖祥解〗選擇培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物生長。分析題意可知,“該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明”,說明培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源,并且降解后培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈?!窘馕觥浚?)按物理性質(zhì)分類,培養(yǎng)基分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基,從圖中可知該實驗要在培養(yǎng)基上形成菌落,所以所用培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基配制時除水和各種所需營養(yǎng)成分外,還需加入瓊脂(或凝固劑);配制好的培養(yǎng)基通常用高壓蒸汽滅菌(或濕熱滅菌),這種方法滅菌效果好,能殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物,檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底的
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