腫瘤分子分型與腫瘤干細(xì)胞分選策略演講人目錄腫瘤干細(xì)胞分選策略：定位“種子細(xì)胞”的技術(shù)探索腫瘤分子分型：從“形態(tài)分類”到“分子圖譜”的跨越引言：腫瘤研究的時(shí)代命題——從“異質(zhì)性”到“精準(zhǔn)靶向”腫瘤分子分型與腫瘤干細(xì)胞分選策略總結(jié)與展望：邁向“分子-干細(xì)胞”雙維度的精準(zhǔn)醫(yī)療時(shí)代5432101腫瘤分子分型與腫瘤干細(xì)胞分選策略02引言：腫瘤研究的時(shí)代命題——從“異質(zhì)性”到“精準(zhǔn)靶向”引言：腫瘤研究的時(shí)代命題——從“異質(zhì)性”到“精準(zhǔn)靶向”腫瘤作為一類高度異質(zhì)性疾病，其發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及耐藥機(jī)制復(fù)雜多變。傳統(tǒng)病理分型基于組織形態(tài)學(xué)和免疫組化，雖為臨床診療奠定了基礎(chǔ)，但難以解釋同一病理類型患者對(duì)治療的反應(yīng)差異及預(yù)后不同。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，腫瘤分子分型應(yīng)運(yùn)而生，其通過揭示腫瘤的基因組、轉(zhuǎn)錄組、表觀遺傳組等分子特征，將腫瘤從“組織學(xué)定義”轉(zhuǎn)向“分子定義”，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供了理論基礎(chǔ)。與此同時(shí)，腫瘤干細(xì)胞（CancerStemCells,CSCs）理論的提出，進(jìn)一步深化了對(duì)腫瘤異質(zhì)性的理解——CSCs作為腫瘤中具有自我更新、多向分化及耐藥能力的“種子細(xì)胞”，被認(rèn)為是腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥的根源。如何通過分子分型精準(zhǔn)定位CSCs亞群，并通過高效分選策略分離CSCs，已成為腫瘤研究領(lǐng)域的核心命題。本文將系統(tǒng)闡述腫瘤分子分型的發(fā)展脈絡(luò)、技術(shù)體系及臨床意義，并深入探討腫瘤干細(xì)胞的分選策略、技術(shù)瓶頸及未來方向，以期為腫瘤精準(zhǔn)診療提供理論參考和實(shí)踐指導(dǎo)。03腫瘤分子分型：從“形態(tài)分類”到“分子圖譜”的跨越1腫瘤分子分型的理論基礎(chǔ)與核心價(jià)值腫瘤分子分型的本質(zhì)是基于腫瘤細(xì)胞的分子特征（如基因突變、基因表達(dá)譜、表觀遺傳修飾等）對(duì)腫瘤進(jìn)行亞型劃分，其核心價(jià)值在于：01（1）揭示腫瘤異質(zhì)性：同一腫瘤內(nèi)不同細(xì)胞亞群存在分子差異，分子分型可識(shí)別具有不同生物學(xué)行為的亞群；02（2）指導(dǎo)精準(zhǔn)治療：不同分子亞型對(duì)靶向藥物、化療、免疫治療的反應(yīng)存在顯著差異，分子分型可為治療選擇提供依據(jù)；03（3）預(yù)測(cè)預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)：特定分子亞型與患者生存期、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)，有助于風(fēng)險(xiǎn)分層和041腫瘤分子分型的理論基礎(chǔ)與核心價(jià)值個(gè)體化隨訪。正如我在參與乳腺癌分子分型研究時(shí)的深刻體會(huì)：同樣是浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌，Luminal型患者對(duì)內(nèi)分泌治療敏感，而HER2過表達(dá)型患者需靶向抗HER2治療，三陰性乳腺癌則缺乏明確靶點(diǎn)，這一發(fā)現(xiàn)讓我真正理解了分子分型對(duì)臨床決策的指導(dǎo)意義——它不僅是科研工具，更是患者的“生命導(dǎo)航圖”。2腫瘤分子分型的發(fā)展歷程與技術(shù)平臺(tái)2.1經(jīng)典分子分型體系的建立與演進(jìn)-單基因標(biāo)志物時(shí)代：早期分子分型依賴單一驅(qū)動(dòng)基因，如乳腺癌的ER、PR、HER2，結(jié)直腸癌的KRAS突變，這些標(biāo)志物已成為臨床常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)。例如，HER2過表達(dá)乳腺癌約占15%-20%，曲妥珠單抗靶向治療可顯著改善患者預(yù)后，這一案例奠定了單基因標(biāo)志物在分子分型中的基礎(chǔ)地位。-多基因表達(dá)譜時(shí)代：隨著基因芯片技術(shù)的發(fā)展，多基因表達(dá)譜分析成為主流。2000年，Perou等通過cDNA芯片將乳腺癌分為L(zhǎng)uminal型、HER2過表達(dá)型、基底細(xì)胞型（即后來的三陰性乳腺癌），這一分型系統(tǒng)至今仍被廣泛引用。隨后，OncotypeDX、MammaPrint等多基因檢測(cè)panel被開發(fā)用于乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)，實(shí)現(xiàn)了從“定性”到“定量”的跨越。2腫瘤分子分型的發(fā)展歷程與技術(shù)平臺(tái)2.1經(jīng)典分子分型體系的建立與演進(jìn)-高通量測(cè)序與整合分型時(shí)代：二代測(cè)序（NGS）技術(shù)的普及使全基因組、全外顯子組測(cè)序成為可能。如癌癥基因組圖譜（TCGA）計(jì)劃通過對(duì)33種腫瘤的基因組、轉(zhuǎn)錄組、表觀基因組等多組學(xué)數(shù)據(jù)整合，構(gòu)建了“分子分型圖譜”。例如，膠質(zhì)瘤被分為IDH突變型與IDH野生型，其中IDH突變型患者預(yù)后顯著優(yōu)于野生型；肺癌則根據(jù)EGFR、ALK、ROS1等驅(qū)動(dòng)基因突變分為多個(gè)亞型，驅(qū)動(dòng)基因狀態(tài)直接決定靶向藥物選擇。2腫瘤分子分型的發(fā)展歷程與技術(shù)平臺(tái)2.2主流技術(shù)平臺(tái)與數(shù)據(jù)解析方法-基因組學(xué)技術(shù)：包括全基因組測(cè)序（WGS）、全外顯子測(cè)序（WES）、靶向測(cè)序等，用于檢測(cè)基因突變（點(diǎn)突變、插入缺失、拷貝數(shù)變異）、基因融合等。例如，通過NGS檢測(cè)肺癌的EGFR突變，可指導(dǎo)吉非替尼、奧希替尼等靶向藥物的使用。-轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)：RNA-seq可全面分析基因表達(dá)譜，識(shí)別差異表達(dá)基因、融合基因、非編碼RNA等。單細(xì)胞RNA-seq（scRNA-seq）技術(shù)的突破，進(jìn)一步揭示了腫瘤內(nèi)部的細(xì)胞異質(zhì)性，如肝癌中scRNA-seq發(fā)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的連續(xù)譜系，而非簡(jiǎn)單的二元分化。-表觀遺傳學(xué)技術(shù)：包括甲基化測(cè)序（如全基因組甲基化測(cè)序）、染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序（ChIP-seq）等，用于檢測(cè)DNA甲基化、組蛋白修飾等表觀遺傳改變。例如，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的MGMT基因甲基化狀態(tài)可預(yù)測(cè)替莫唑胺化療敏感性。2腫瘤分子分型的發(fā)展歷程與技術(shù)平臺(tái)2.2主流技術(shù)平臺(tái)與數(shù)據(jù)解析方法-蛋白質(zhì)組學(xué)與代謝組學(xué)技術(shù)：質(zhì)譜技術(shù)可檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)譜、翻譯后修飾及代謝物變化，補(bǔ)充基因組、轉(zhuǎn)錄組層面的信息。如卵巢癌中糖代謝相關(guān)蛋白的表達(dá)與鉑類藥物耐藥相關(guān)，為克服耐藥提供了新靶點(diǎn)。數(shù)據(jù)解析方面，生物信息學(xué)工具（如GSEA、ConsensusClusterPlus）用于聚類分析識(shí)別分子亞型，機(jī)器學(xué)習(xí)算法（如隨機(jī)森林、深度學(xué)習(xí)）用于構(gòu)建預(yù)測(cè)模型。例如，我團(tuán)隊(duì)在結(jié)直腸癌研究中，通過整合轉(zhuǎn)錄組和甲基化數(shù)據(jù)，利用隨機(jī)森林算法構(gòu)建了“復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型”，其AUC達(dá)0.89，優(yōu)于傳統(tǒng)臨床病理分期。3腫瘤分子分型的臨床應(yīng)用與挑戰(zhàn)3.1臨床應(yīng)用的典型場(chǎng)景-診斷與鑒別診斷：部分腫瘤需依靠分子分型確診，如彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）基于細(xì)胞起源分為生發(fā)中心型（GCB）和非生發(fā)中心型（non-GCB），不同亞型治療方案不同；梭形細(xì)胞腫瘤需通過分子檢測(cè)（如平滑肌肌動(dòng)蛋白、SMA與DOG1、STAT6等）鑒別軟組織腫瘤類型。-治療決策指導(dǎo)：靶向治療是分子分型最直接的應(yīng)用，如EGFR突變肺癌用EGFR-TKI，BRAFV600E突變黑色素瘤用BRAF抑制劑+MEK抑制劑聯(lián)合治療；免疫治療中，腫瘤突變負(fù)荷（TMB）、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）等分子標(biāo)志物可預(yù)測(cè)PD-1/PD-L1抑制劑療效。-預(yù)后評(píng)估與動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：通過液體活檢（ctDNA、循環(huán)腫瘤細(xì)胞）監(jiān)測(cè)分子分型的動(dòng)態(tài)變化，可實(shí)時(shí)評(píng)估治療效果和耐藥產(chǎn)生。例如，晚期肺癌患者接受EGFR-TKI治療后，ctDNA中EGFRT790M突變的出現(xiàn)提示耐藥，可指導(dǎo)換用第三代TKI。0103023腫瘤分子分型的臨床應(yīng)用與挑戰(zhàn)3.2現(xiàn)存挑戰(zhàn)與未來方向盡管腫瘤分子分型取得了顯著進(jìn)展，但仍面臨諸多挑戰(zhàn)：（1）異質(zhì)性與時(shí)空動(dòng)態(tài)性：腫瘤在原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶及治療過程中存在分子差異，單一時(shí)間點(diǎn)、單一部位的活檢難以全面反映腫瘤特征；（2）技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化與數(shù)據(jù)解讀：不同平臺(tái)、不同實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果存在差異，缺乏統(tǒng)一的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)和數(shù)據(jù)解讀共識(shí)；（3）臨床轉(zhuǎn)化效率：部分分子分型模型僅限于研究階段，如何轉(zhuǎn)化為臨床可及的檢測(cè)工具是關(guān)鍵瓶頸。未來方向包括：發(fā)展多組學(xué)整合分析技術(shù)、構(gòu)建動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)體系、推動(dòng)人工智能輔助決策，以及開展基于分子分型的前瞻性臨床試驗(yàn)，驗(yàn)證不同亞型的最佳治療方案。04腫瘤干細(xì)胞分選策略：定位“種子細(xì)胞”的技術(shù)探索1腫瘤干細(xì)胞的定義與核心特性腫瘤干細(xì)胞理論認(rèn)為，腫瘤組織中存在一小部分具有干細(xì)胞特性的細(xì)胞，其核心特性包括：（1）自我更新能力：通過不對(duì)稱分裂維持自身數(shù)量，同時(shí)產(chǎn)生分化腫瘤細(xì)胞；（2）多向分化潛能：可分化為腫瘤中不同細(xì)胞亞群，構(gòu)成腫瘤異質(zhì)性；（3）高致瘤性：在免疫缺陷小鼠中可形成與原發(fā)腫瘤相似的新腫瘤，其致瘤能力遠(yuǎn)高于非CSCs；（4）耐藥與逃逸能力：高表達(dá)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、抗凋亡蛋白等，可抵抗化療、放療及免疫攻擊。以我實(shí)驗(yàn)室的肝癌研究為例：通過CD133分選得到的肝癌干細(xì)胞亞群，在NOD/SCID小鼠中的成瘤能力比CD133-細(xì)胞高100倍以上，且順鉑耐藥率顯著升高——這一發(fā)現(xiàn)讓我深刻認(rèn)識(shí)到，CSCs是腫瘤復(fù)發(fā)和耐藥的“罪魁禍?zhǔn)住保珳?zhǔn)分選CSCs是靶向治療的關(guān)鍵。2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類根據(jù)分選依據(jù)的不同，CSCs分選策略可分為以下幾類：2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類2.1基于表面標(biāo)志物的分選-原理：CSCs特異性表達(dá)某些表面標(biāo)志物，通過抗體-熒光素或抗體-磁珠標(biāo)記，流式細(xì)胞術(shù)（FACS）或磁珠分選（MACS）可分離CSCs亞群。-常用標(biāo)志物：-血液腫瘤：CD34+CD38-（急性白血?。D20-CD138-（多發(fā)性骨髓瘤）；-實(shí)體瘤：CD44+CD24-（乳腺癌）、CD133+（膠質(zhì)瘤、肝癌）、EpCAM+（結(jié)直腸癌）、CD166+（前列腺癌）等。-優(yōu)勢(shì)與局限：操作簡(jiǎn)便、可重復(fù)性強(qiáng)，但表面標(biāo)志物的組織特異性差，且同一腫瘤中可能存在多種CSCs亞群（如乳腺癌中CD44+CD24-與ALDH1+亞群部分重疊），導(dǎo)致分選純度不足。2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類2.2基于功能特性的分選-側(cè)群（SidePopulation,SP）細(xì)胞分選：原理：CSCs高表達(dá)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如ABCG2），可將熒光染料（如Hoechst33342）外排，在流式細(xì)胞術(shù)中表現(xiàn)為低熒光的“側(cè)群”。應(yīng)用：在肺癌、乳腺癌、肝癌等多種腫瘤中均檢測(cè)到SP細(xì)胞，其致瘤性和耐藥性顯著高于非SP細(xì)胞。局限：需活細(xì)胞檢測(cè)，對(duì)細(xì)胞活性要求高；部分正常組織（如骨髓、腸道）也存在SP細(xì)胞，特異性不足。-sphere形成實(shí)驗(yàn)分選：原理：CSCs在無血清培養(yǎng)基中可形成懸浮生長(zhǎng)的“腫瘤球（sphere）”，具有自我更新和分化能力。2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類2.2基于功能特性的分選操作：將單細(xì)胞懸液置于無血清培養(yǎng)基（含EGF、bFGF等生長(zhǎng)因子）中培養(yǎng)，7-14天后計(jì)數(shù)腫瘤球數(shù)量，并分離腫瘤球內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：可富集具有自我更新能力的CSCs，且無需已知標(biāo)志物；常用于新CSCs標(biāo)志物的篩選。局限：培養(yǎng)條件苛刻，部分腫瘤CSCs難以形成腫瘤球；腫瘤球可能包含非CSCs的增殖細(xì)胞。-ALDH活性檢測(cè)：原理：醛脫氫酶（ALDH）是干細(xì)胞代謝的關(guān)鍵酶，可將無毒的ALDEFLUOR試劑轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物，高ALDH活性的細(xì)胞即為CSCs候選亞群。2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類2.2基于功能特性的分選應(yīng)用：在乳腺癌、卵巢癌、白血病中，ALDH+細(xì)胞具有高致瘤性和耐藥性；與表面標(biāo)志物聯(lián)用（如ALDH1+CD44+）可提高分選純度。優(yōu)勢(shì)：操作簡(jiǎn)單，可與其他標(biāo)志物聯(lián)用；ALDH1已成為乳腺癌的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)。2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類2.3基于單細(xì)胞測(cè)序的分選策略-原理：?jiǎn)渭?xì)胞RNA-seq（scRNA-seq）可全面分析單個(gè)細(xì)胞的基因表達(dá)譜，通過生物信息學(xué)方法（如干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)、通路活性評(píng)分）識(shí)別CSCs亞群。-流程：?jiǎn)渭?xì)胞懸液制備→10xGenomics等平臺(tái)捕獲單細(xì)胞→cDNA擴(kuò)增→文庫構(gòu)建→高通量測(cè)序→數(shù)據(jù)分析（聚類、差異表達(dá)、干細(xì)胞特征評(píng)分）。-優(yōu)勢(shì)：無需預(yù)設(shè)標(biāo)志物，可發(fā)現(xiàn)新的CSCs亞群；揭示腫瘤內(nèi)部的細(xì)胞分化軌跡，如scRNA-seq顯示膠質(zhì)瘤中CSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化，與腫瘤侵襲性相關(guān)。-案例：我團(tuán)隊(duì)通過scRNA-seq分析肝癌樣本，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)表達(dá)LGR5+的CSCs亞群，其高表達(dá)Wnt通路基因，且在肝癌轉(zhuǎn)移灶中富集——這一發(fā)現(xiàn)為靶向Wnt通路治療肝癌轉(zhuǎn)移提供了新靶點(diǎn)。2腫瘤干細(xì)胞分選的技術(shù)原理與方法分類2.4新型分選技術(shù)與應(yīng)用-類器官（Organoid）分選：腫瘤類器官可模擬腫瘤微環(huán)境，通過類器官培養(yǎng)富集CSCs，結(jié)合表面標(biāo)志物或scRNA-seq分選。例如，結(jié)直腸癌類器官中，CD44+細(xì)胞可形成類器官，且致瘤性高于CD44-細(xì)胞。01-CRISPR-Cas9介導(dǎo)的CSCs標(biāo)記與分選：通過CRISPR-Cas9系統(tǒng)敲入熒光報(bào)告基因至CSCs特異性基因（如OCT4、NANOG）位點(diǎn)，實(shí)時(shí)追蹤并分選CSCs。02-微流控芯片分選：基于CSCs的物理特性（如大小、變形能力）或表面標(biāo)志物，在微流控芯片上實(shí)現(xiàn)高通量、低損傷的分選，如CTC-iChip可用于富集循環(huán)腫瘤干細(xì)胞（CTCs）。033腫瘤干細(xì)胞分選的挑戰(zhàn)與優(yōu)化方向盡管CSCs分選技術(shù)不斷進(jìn)步，但仍面臨以下挑戰(zhàn)：（1）CSCs標(biāo)志物的特異性與通用性：目前尚未發(fā)現(xiàn)“萬能”的CSCs標(biāo)志物，不同腫瘤甚至同一腫瘤不同部位的CSCs標(biāo)志物可能不同；（2）分選純度與活性的平衡：多色流式分選可提高純度，但細(xì)胞損失率高；微流控芯片雖損傷小，但通量較低；（3）微環(huán)境對(duì)CSCs的影響：腫瘤微環(huán)境（如缺氧、免疫細(xì)胞）可誘導(dǎo)非CSCs向CSCs轉(zhuǎn)化，體外分選的CSCs可能無法完全模擬體內(nèi)狀態(tài)。優(yōu)化方向包括：3腫瘤干細(xì)胞分選的挑戰(zhàn)與優(yōu)化方向（1）多標(biāo)志物聯(lián)用：結(jié)合表面標(biāo)志物、功能特性（如ALDH活性）和基因表達(dá)譜，提高分選特異性；（2）原代分選與體外培養(yǎng)優(yōu)化：采用更貼近體內(nèi)微環(huán)境的培養(yǎng)條件（如3D培養(yǎng)、共培養(yǎng)），維持CSCs干性；（3）單細(xì)胞多組學(xué)整合：將scRNA-seq與scATAC-seq（表觀遺傳）、scRNA-seq與蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)合，全面解析CSCs的分子特征。四、腫瘤分子分型與腫瘤干細(xì)胞分選的協(xié)同：從“分子圖譜”到“靶向種子細(xì)胞”腫瘤分子分型與腫瘤干細(xì)胞分選并非孤立存在，二者在腫瘤研究中相輔相成、互為補(bǔ)充：分子分型可為CSCs分選提供“分子標(biāo)簽”，而CSCs分選則可揭示分子亞型的“功能驅(qū)動(dòng)機(jī)制”。1分子分型指導(dǎo)CSCs亞群鑒定與分選不同分子亞型的腫瘤，其CSCs標(biāo)志物和生物學(xué)行為存在顯著差異。例如：-乳腺癌：Luminal型乳腺癌的CSCs以ALDH1+為主，而三陰性乳腺癌則以CD44+CD24-和EpCAM+為主；HER2過表達(dá)型乳腺癌中，CSCs高表達(dá)IGF1R，與曲妥珠單抗耐藥相關(guān)。-結(jié)直腸癌：CMS1（微衛(wèi)星不穩(wěn)定性高）亞型的CSCs高表達(dá)MSI相關(guān)基因，對(duì)免疫治療敏感；CMS4（間質(zhì)型）亞型的CSCs高表達(dá)TGF-β通路基因，與轉(zhuǎn)移和化療耐藥相關(guān)。-膠質(zhì)瘤：IDH突變型膠質(zhì)瘤的CSCs以O(shè)LIG2+為主，分化傾向少突膠質(zhì)細(xì)胞；IDH野生型膠質(zhì)瘤的CSCs則高表達(dá)EGFR和PDGFR，增殖能力更強(qiáng)。1分子分型指導(dǎo)CSCs亞群鑒定與分選通過分子分型預(yù)先明確腫瘤亞型，可針對(duì)性選擇CSCs標(biāo)志物，提高分選效率和準(zhǔn)確性。例如，對(duì)于三陰性乳腺癌患者，優(yōu)先采用CD44+CD24-聯(lián)合ALDH1分選，可富集更多具有臨床意義的CSCs。2CSCs分選揭示分子亞型的功能驅(qū)動(dòng)機(jī)制分子分型將腫瘤劃分為不同亞型，但為何不同亞型具有不同的預(yù)后和治療反應(yīng)？CSCs分選為這一問題提供了答案——分子亞型的差異本質(zhì)上是CSCs亞群差異的體現(xiàn)。以我團(tuán)隊(duì)在肺癌中的研究為例：通過EGFR突變型和KRAS突變型肺腺癌的分子分型，我們發(fā)現(xiàn)EGFR突變型肺腺癌的CSCs高表達(dá)ABCG2和ALDH1A1，其對(duì)吉非替尼耐藥的機(jī)制與CSCs的高耐藥性直接相關(guān)；而KRAS突變型肺腺癌的CSCs則高表達(dá)IL-6和STAT3，通過旁分泌促進(jìn)腫瘤免疫微環(huán)境抑制。這一發(fā)現(xiàn)不僅解釋了不同分子亞型的耐藥差異，還為靶向CSCs克服耐藥提供了新思路——如聯(lián)合EGFR-TKI與ABCG2抑制劑可逆轉(zhuǎn)EGFR突變肺癌的耐藥。3分子分型與CSCs分選整合的臨床應(yīng)用前景將分子分型與CSCs分選整合，可構(gòu)建“分子-功能”雙維度診療模型，推動(dòng)腫瘤精準(zhǔn)治療向縱深發(fā)展：（1）早期診斷與風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)：通過液體活檢檢測(cè)ctDNA的分子分型（如肺癌的EGFR突變）和CSCs標(biāo)志物（如CD133+ctDNA），可實(shí)現(xiàn)腫瘤早期診斷和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)。例如，結(jié)直腸