植物組織培養(yǎng)試題庫(含答案)一、名詞解釋（每題3分，共30分）1.植物組織培養(yǎng)：在無菌條件下，將植物的細(xì)胞、組織、器官（外植體）接種到人工配制的培養(yǎng)基上，在適宜的環(huán)境條件下培養(yǎng)，使其增殖、分化或再生完整植株的技術(shù)體系。2.外植體：從植物體上切取的用于組織培養(yǎng)的活的細(xì)胞、組織或器官，如莖尖、葉片、花藥等。3.愈傷組織：外植體在離體培養(yǎng)過程中，細(xì)胞脫分化后形成的一團(tuán)無特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞群體。4.脫分化：已分化的植物細(xì)胞在離體條件下失去原有形態(tài)和功能，恢復(fù)分裂能力，形成愈傷組織的過程。5.再分化：脫分化后的細(xì)胞或愈傷組織在特定條件下重新分化為具有特定結(jié)構(gòu)和功能的組織或器官（如根、芽）的過程。6.玻璃化現(xiàn)象：植物組織培養(yǎng)中，試管苗出現(xiàn)半透明、水漬狀、質(zhì)地脆弱的異?，F(xiàn)象，主要因環(huán)境濕度高、細(xì)胞分裂素濃度過大或透氣性差導(dǎo)致。7.繼代培養(yǎng)：將初代培養(yǎng)獲得的培養(yǎng)物（如愈傷組織、叢芽）分割后轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)的過程，目的是擴(kuò)大繁殖或誘導(dǎo)分化。8.原生質(zhì)體：植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后形成的裸露細(xì)胞，具有全能性，可用于細(xì)胞融合、遺傳轉(zhuǎn)化等研究。9.褐變：外植體或愈傷組織在培養(yǎng)過程中，細(xì)胞內(nèi)酚類物質(zhì)被氧化形成褐色醌類物質(zhì)，導(dǎo)致組織褐化甚至死亡的現(xiàn)象。10.胚狀體：在組織培養(yǎng)中，由體細(xì)胞或生殖細(xì)胞經(jīng)脫分化和再分化形成的類似合子胚的結(jié)構(gòu)，可直接發(fā)育成完整植株。二、填空題（每空1分，共20分）1.植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞全能性。2.MS培養(yǎng)基中大量元素包括N、P、K、Ca、Mg、S（寫出6種），微量元素包括Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo（寫出6種）。3.植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)中，常用的生長素類有2,4-D、IAA、NAA（寫出3種），細(xì)胞分裂素類有6-BA、KT、ZT（寫出3種）。4.外植體滅菌常用的化學(xué)試劑是75%酒精（表面消毒）和0.1%升汞（HgCl?）或2%次氯酸鈉（NaClO）（深度滅菌）。5.培養(yǎng)基滅菌常用方法是高壓蒸汽滅菌（121℃，20min），而不耐高溫的物質(zhì)（如激素、維生素）需用過濾滅菌（0.22μm濾膜）。6.愈傷組織誘導(dǎo)階段通常需要較高比例的生長素/細(xì)胞分裂素（填激素類型），而芽分化階段需要較高比例的細(xì)胞分裂素/生長素。7.試管苗移栽的關(guān)鍵是逐步降低環(huán)境濕度和提高光照強(qiáng)度，使試管苗適應(yīng)外界環(huán)境。8.玻璃化苗的防治措施包括降低培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素濃度、增加培養(yǎng)基中瓊脂濃度、改善培養(yǎng)容器透氣性（寫出3條）。三、選擇題（每題2分，共20分）單項(xiàng)選擇1.植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的pH一般調(diào)節(jié)為（）。A.4.0-5.0B.5.8-6.2C.7.0-7.5D.8.0-8.5答案：B2.下列激素中，誘導(dǎo)愈傷組織效果最顯著的是（）。A.IAAB.6-BAC.2,4-DD.GA?答案：C3.外植體滅菌時(shí)，75%酒精的處理時(shí)間通常為（）。A.30s-1minB.5-10minC.15-20minD.30min以上答案：A4.下列材料中，脫毒效果最好的外植體是（）。A.莖尖（0.1-0.5mm）B.葉片C.莖段D.花藥答案：A5.原生質(zhì)體分離常用的酶是（）。A.纖維素酶+果膠酶B.蛋白酶+淀粉酶C.脂肪酶+蔗糖酶D.纖維素酶+蛋白酶答案：A多項(xiàng)選擇6.影響植物組織培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素包括（）。A.外植體類型與生理狀態(tài)B.培養(yǎng)基成分C.培養(yǎng)環(huán)境（溫度、光照）D.操作無菌程度答案：ABCD7.褐變的防治措施有（）。A.選擇幼嫩外植體B.培養(yǎng)基中添加活性炭C.縮短轉(zhuǎn)接周期D.提高培養(yǎng)溫度答案：ABC8.試管苗移栽前需進(jìn)行煉苗，目的是（）。A.增強(qiáng)光合作用能力B.降低細(xì)胞含水量C.提高抗逆性D.促進(jìn)根系發(fā)育答案：ABCD9.下列屬于器官發(fā)生途徑的是（）。A.愈傷組織分化出芽和根B.莖尖直接分化出叢芽C.體細(xì)胞胚發(fā)育成植株D.原生質(zhì)體分裂形成愈傷組織答案：AB10.下列培養(yǎng)基中，屬于常用基本培養(yǎng)基的是（）。A.MS培養(yǎng)基B.B5培養(yǎng)基C.N6培養(yǎng)基D.LB培養(yǎng)基答案：ABC四、判斷題（每題1分，共10分）1.外植體越大，越容易誘導(dǎo)成功。（×）2.MS培養(yǎng)基適合所有植物的組織培養(yǎng)。（×）3.高壓蒸汽滅菌可用于激素溶液的滅菌。（×）4.脫分化過程需要光照。（×）5.玻璃化苗的葉片通常厚實(shí)濃綠。（×）6.愈傷組織的質(zhì)地可分為致密型和松散型，松散型更利于體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)。（√）7.莖尖培養(yǎng)脫毒的原理是病毒在莖尖分生組織中分布較少。（√）8.原生質(zhì)體融合前需用高滲溶液維持其形態(tài)。（√）9.繼代次數(shù)越多，試管苗的遺傳穩(wěn)定性越高。（×）10.移栽時(shí)，試管苗的根系需徹底清洗培養(yǎng)基，避免雜菌污染。（√）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的主要成分及各成分的作用。答案：培養(yǎng)基主要成分包括：（1）無機(jī)營養(yǎng)：大量元素（如N、P、K）和微量元素（如Fe、Mn），提供植物生長必需的礦質(zhì)元素；（2）有機(jī)營養(yǎng)：碳源（如蔗糖，提供能量和滲透調(diào)節(jié)）、維生素（如維生素B?，促進(jìn)代謝）、氨基酸（如甘氨酸，參與蛋白質(zhì)合成）；（3）植物生長調(diào)節(jié)劑：生長素（如2,4-D，誘導(dǎo)脫分化）和細(xì)胞分裂素（如6-BA，促進(jìn)芽分化）；（4）凝固劑（如瓊脂，固定培養(yǎng)基）；（5）其他添加物（如活性炭，吸附有害物質(zhì)）。2.外植體選擇與滅菌的關(guān)鍵注意事項(xiàng)有哪些？答案：（1）外植體選擇：優(yōu)先選擇幼嫩、生長旺盛的組織（如莖尖），避免老熟或帶菌材料；不同植物最佳外植體類型不同（如蘭花用莖尖，菊花用葉片）。（2）滅菌注意事項(xiàng)：先清洗外植體表面雜質(zhì)（自來水沖洗），再用75%酒精快速處理（30s-1min），后用0.1%升汞或2%次氯酸鈉滅菌（5-15min），最后用無菌水沖洗3-5次；滅菌時(shí)間需嚴(yán)格控制，避免外植體死亡或滅菌不徹底。3.愈傷組織誘導(dǎo)的主要影響因素有哪些？答案：（1）外植體類型：幼嫩組織（如莖尖）比老熟組織（如葉片）更易誘導(dǎo)；（2）培養(yǎng)基成分：生長素（尤其是2,4-D）濃度是關(guān)鍵，通常需較高生長素/細(xì)胞分裂素比例；（3）培養(yǎng)條件：暗培養(yǎng)或弱光利于脫分化，溫度一般25±2℃；（4）植物種類：草本植物比木本植物更容易誘導(dǎo)愈傷組織。4.玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生原因及防治措施是什么？答案：原因：（1）培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素濃度過高；（2）培養(yǎng)容器透氣性差，濕度長期高于90%；（3）培養(yǎng)基中瓊脂濃度低，滲透壓不足；（4）光照強(qiáng)度過低或時(shí)間過短。防治措施：（1）降低細(xì)胞分裂素濃度，適當(dāng)增加生長素比例；（2）使用透氣性好的封口膜（如棉塞）；（3）提高瓊脂濃度（7-8g/L）或添加蔗糖（30-40g/L）增加滲透壓；（4）增加光照強(qiáng)度（2000-3000lx）和時(shí)間（12-16h/d）。六、論述題（每題10分，共20分）1.試述從外植體選擇到試管苗移栽的完整組織培養(yǎng)流程及各環(huán)節(jié)技術(shù)要點(diǎn)。答案：完整流程包括：（1）外植體選擇與處理：選擇幼嫩、無病的組織（如莖尖0.5-1mm），自來水沖洗2h，75%酒精30s，0.1%升汞10min，無菌水沖洗5次；（2）初代培養(yǎng)：將滅菌外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基（如MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L），暗培養(yǎng)3d后轉(zhuǎn)16h光照（25℃），誘導(dǎo)愈傷組織或直接分化芽；（3）繼代培養(yǎng)：20-30d后，將愈傷組織分割（0.5cm3）或叢芽切分，轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基（如MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L），擴(kuò)大繁殖；（4）生根培養(yǎng)：將高2-3cm的無根苗轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基（1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.2mg/L），光照16h/d，促進(jìn)根系發(fā)育；（5）煉苗與移栽：生根苗閉瓶煉苗3d，開蓋煉苗2d（增加光照），洗凈培養(yǎng)基后移栽至基質(zhì)（泥炭:珍珠巖=3:1），保持濕度80%，逐漸降低濕度至自然水平。各環(huán)節(jié)關(guān)鍵：無菌操作（超凈臺(tái)酒精消毒、器械灼燒）、培養(yǎng)基優(yōu)化（根據(jù)植物調(diào)整激素比例）、環(huán)境控制（溫度、光照、濕度）。2.比較莖尖培養(yǎng)、葉片培養(yǎng)和花藥培養(yǎng)的特點(diǎn)及應(yīng)用價(jià)值。答案：（1）莖尖培養(yǎng)：特點(diǎn)是外植體?。?.1-0.5mm）、脫毒效果好（病毒難以侵入莖尖分生組織），但操作難度大（需解剖鏡）；應(yīng)用于脫毒苗生產(chǎn)（如馬鈴薯、香蕉）和快速繁殖。（2）葉片培養(yǎng)：外植體易獲?。ǔ墒熘仓耆~片），但誘導(dǎo)愈傷組織需較高生長素（如2,4-D2.0mg/L），分化能力因植物而異（如煙草易分化，木本植