1、第34章 朊粒,* 又稱朊病毒，是一種由宿主細(xì)胞編碼的、構(gòu)象異常的具有自我復(fù)制能力的和傳染性。* 是人和動物傳染性海綿狀腦病（TSE）的病原體。,朊粒（prion）,Stanely B. Prusiner 1997諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎,Daniel C. Gajdusek 1976諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎,生物學(xué)性狀,朊粒的本質(zhì)是一種異常折疊的朊蛋白（prion protein，PrP）。異常蛋白在電鏡下呈纖維狀或桿狀（直徑為10-20nm），稱為羊瘙癢病相關(guān)纖維（scrapie associated fibril， SAF）。,PrPC 與 PrPSC,正常宿主細(xì)胞具有編碼產(chǎn)生朊蛋白的基因，人類

2、PrP基因位于第20號染色體，小鼠PrP基因位于第2號染色體。 PrPC與PrPSc由同一染色體基因編碼，其氨基酸序列完全一致（253254個氨基酸），根本的差別在于它們空間構(gòu)象上的差異。,正常情況下，細(xì)胞PrP基因編碼產(chǎn)生細(xì)胞朊蛋白（cellular prion protein, PrPC）， PrPC以螺旋為主，對蛋白酶K敏感，無致病性。,PrPC 與 PrPSC,螺旋,折疊,某些條件下，PrPC構(gòu)型發(fā)生異常變化（以折疊為主）形成致病的PrPSc（羊瘙癢病朊蛋白，scrapie prion protein），對蛋白酶K有抗性，具有致病性與傳染性。,螺旋,PrPC轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSC的因素,外源

3、性朊粒的侵入，和體內(nèi)PrPC結(jié)合催化轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，見于傳染性朊粒??； 體內(nèi)PrP基因突變使PrPC結(jié)構(gòu)失去穩(wěn)定性，自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，常見于遺傳性朊粒??； 自發(fā)性的PrPC異常折疊形成PrPSc，散發(fā)性朊粒病。,PrPC與PrPSc的主要區(qū)別,人類及動物prion病,* 動物TSE，如： 羊瘙癢?。╯crapie of sheep and goat） 牛海綿狀腦?。╞ovine spongiform encephalopathy, BSE）瘋牛病 * 人類TSE，如： 庫魯?。╧uru disease） 克雅病變種（variant CJD, v-CJD）,傳染性海綿狀腦病 （transm

4、issible spongiform encephalopathy, TSE）,Prion對理化因素有很強(qiáng)的抵抗力 * 抵抗蛋白酶K的消化作用； * 標(biāo)準(zhǔn)的高壓蒸氣滅菌（121.3,20 min）不能破壞Prion，需高壓蒸氣滅菌134、2 h，才能使其失去傳染性。 * 對輻射、紫外線、及常用消毒劑有很強(qiáng)的抗性。,抵 抗 力,* 傳染性（TSE）： 如庫魯病、克雅病變種 多種途徑傳播（消化道、血液、神經(jīng)及醫(yī)源性） * 遺傳性： 如家族性克雅病，與遺傳有關(guān)（PrP基因突變） * 散發(fā)性： 如散發(fā)性克雅病，傳播途徑尚不明,人類Prion病的傳播途徑,庫魯?。↘uru disease）,瘋牛病，與病

5、牛接觸或進(jìn)食病牛肉是人v-CJD最主要的發(fā)病原因。,瘋牛?。╩ad cow disease）,v-CJD病人大腦組織切片：示海綿狀病變（左）和淀粉樣蛋白沉淀（右）,變異型克雅病（variant CJD，vCJD）,免疫組化法：標(biāo)本先用蛋白酶K處理破壞PrPC，然后再用PrP單克隆抗體或多克隆抗體檢測對蛋白酶K有抗性的PrPSc。 Western blotting：目前國際上診斷Prion病最常用的有效方法。先用蛋白酶K處理組織標(biāo)本，電泳后轉(zhuǎn)印至硝酸纖維膜，再用PrP單克隆抗體或多克隆抗體檢測PrPSc。,病原學(xué)確診-檢測致病因子PrPSc,醫(yī)源性Prion病的預(yù)防 對污染物必須徹底滅菌：1mol/L NaOH處理1h，再高壓滅菌134，2 h。 BSE及vCJD的預(yù)防 禁止用牛羊等反芻動物的骨肉粉作為飼料添加劑喂養(yǎng)牛等反芻動物。對從有BSE的國家進(jìn)口的?；蚺Ｖ破罚仨殗?yán)格地進(jìn)