精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)1/7孕婦血清中乙型肝炎病毒DNA含量與胎兒宮內(nèi)感染的關(guān)系【摘要】目的探討孕婦血清中乙型肝炎病毒DNAHBVDNA含量與胎兒宮內(nèi)感染發(fā)生率的關(guān)系。方法用斑點雜交法檢測185例乙型肝炎病毒表面抗原（HBSAG）陽性孕婦血清中HBVDNA及新生兒HBSAG。結(jié)果胎兒發(fā)生宮內(nèi)感染與其母親血清HBVDNA含量有關(guān)，隨著孕婦血清中HBVDNA含量的增高，胎兒發(fā)生宮內(nèi)感染的危險性也呈增高的趨勢。結(jié)論孕婦血清HBVDNA含量升高是胎兒發(fā)生乙型肝炎病毒感染的重要因素之一?！娟P(guān)鍵詞】肝炎病毒，乙型疾病傳播，垂直DNA,病毒肝炎，乙型THERELATIONSHIPOFSERUMHEPATITISBVIRUSDNALOADINHBSAGPOSITIVEPREGNANTWOMENTOTHEINTRAUTERINEINFECTIONOFNEWBORNSLIUZHIHUA,XUDEZHONG,YANYONGPING,ETALFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY,XIAN710033【ABSTRACT】OBJECTIVETOSTUDYTHERELATIONSHIPOFSERUMHEPATITISBVIRUSHBVDNALOADINHBSAGPOSITIVEPREGNANTWOMENTOINTRAUTERINEINFECTIONOFTHEIRNEWBORNSMETHODSSERUMHBVDNAWEREDETERMINEDBYDOTBLOT精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)2/7HYBRIDIZATIONIN185HBSAGPOSITIVEPREGNANTWOMENSERUMHBSAGWERETESTEDBYELISAINTHEIRNEWBORNSWITHIN24HOURSAFTERBIRTHRESULTSTHEPREVALENCEOFINTRAUTERINEHBVINFECTIONOFTHENEWBORNSWASASSOCIATEDWITHTHEHBVDNALEVELOFTHEMOTHERSWITHTHEINCREASEOFSERUMHBVDNALOAD,THERISKOFFETALINTRAUTERINEINFECTIONWASINCREASINGCONCLUSIONFETALEXPOSURETOHIGHLEVELOFMATERNALHBVDNAISONEOFTHEIMPORTANTDETERMINANTOFINTRAUTERINEINFECTION【KEYWORDS】HEPATITISBVIRUSDISEASETRANSMISSION，VERTICALDNA,VIRUSHEPATITISB乙型肝炎乙肝病毒HBV可經(jīng)垂直傳播感染胎兒。新生兒出生后即使接種乙肝疫苗和乙肝高效價免疫球蛋白，也不能阻止其發(fā)展成為慢性HBV攜帶者，仍然是HBV的潛在傳染源1。因此，宮內(nèi)感染在世界上的乙肝高發(fā)區(qū)是一個重大的公共衛(wèi)生問題。HBVDNA是衡量傳染性的直接指標。我們用斑點雜交法檢測孕婦血清中的HBVDNA含量，探討孕婦血清HBVDNA含量與胎兒宮內(nèi)感染的關(guān)系。資料和方法一、研究對象精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)3/719951997年在陜西省婦幼保健院產(chǎn)前門診篩選乙型肝炎表面抗原HBSAG陽性的孕婦185例為研究對象。于孕婦分娩前采集靜脈血，將分離的血清貯存于20，其新生兒于分娩后24小時內(nèi)注射乙肝疫苗之前采股靜脈血檢測HBSAG。新生兒出生后24小時內(nèi)HBSAG陽性為胎兒宮內(nèi)感染。二、方法1血清學檢測孕婦血清HBSAG指標檢測，新生兒HBSAG檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），試劑盒購自上海實業(yè)科華生物技術(shù)公司，操作按說明書進行，陽性與陰性之比為陽性。DNA斑點雜交（1）HBVDNA全基因探針的制備由PCP19重組質(zhì)粒中分離。（2）探針的標記采用地高辛標記試劑盒購自德國BOEHRINGERMANNHEIM公司）。HBV探針的標記用隨機引物法，顯色法檢測標記活性。（3）血清標本處理采用酚氯仿抽提法2。（4）斑點雜交試驗按試劑盒操作程序進行。（5）孕婦血清HBVDNA定量方法將標準HBVDNA樣品（1NG/L）按如下稀釋度進行稀釋，1100、1200、11000、12000、110000、1100000。其濃度分別為10、5、1、PG/L。以系列稀釋的樣品為標準陽性對照，進行斑點雜交，根據(jù)精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)4/7雜交信號的強弱分為5個等級，0級PG/L。用薄層掃描儀（SHIMAZU,CS9000）對雜交斑點進行掃描，根據(jù)不同濃度的標準HBVDNA雜交斑點的掃描峰值作標準曲線，然后以樣品雜交斑點的掃描峰值在標準曲線上求出其HBVDNA含量。三、統(tǒng)計學方法等級資料采用線性趨式分析。數(shù)據(jù)用EPI（版）軟件處理。結(jié)果一、宮內(nèi)感染的發(fā)生情況185例HBSAG陽性孕婦所分娩的新生兒的血清經(jīng)ELISA檢測，有8例HBSAG陽性，宮內(nèi)感染率為。二、孕婦血清HBVDNA含量與胎兒宮內(nèi)感染胎兒宮內(nèi)感染率，隨著孕婦血清HBVDNA含量的增加而呈增高趨勢（2，P表1孕婦血清HBVDNA分級與胎兒宮內(nèi)感染的關(guān)系HBVDNA分級總例數(shù)宮內(nèi)感染OR值例數(shù)百分比0級390精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)5/71級7212級2913級1804級276討論新生兒普遍接種乙肝疫苗以來，新生兒乙肝的感染率已經(jīng)明顯下降。但對于發(fā)生宮內(nèi)感染的胎兒，出生后使用乙肝疫苗無效，極易成為慢性HBV攜帶者，并最終導致肝癌、肝硬化。宮內(nèi)感染的原因很復雜，目前尚不明確。以往文獻報道，與先兆早產(chǎn)、孕婦HBEAG陽性有關(guān)2，3。乙型肝炎E抗原HBEAG是存在于病毒顆粒之外的一種可溶性蛋白，實際上是傳染性的間接指標。雖然，HBEAG陽性是HBV復制的指標，但HBEAG陽性與HBVDNA并不一致。有研究證實，HBEAG陰性而抗HBE陽性的孕婦中，曾檢出乙肝病毒基因4，這些孕婦體內(nèi)存在有復制能力的突變株。突變發(fā)生于PREC的1896位點，突變形成終止密碼子，導致HBEAG不能合成與分泌；另一方面，一小部分HBEAG陽性而HBVDNA陰性的孕婦，其嬰兒被感染的危險性甚小5。血清HBVDNA是反映病毒在體內(nèi)復制和宿主傳染性的直接指標6。因此，用血清HBVDNA的含量估計宿主的精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)6/7傳染性更為直接可靠。本研究結(jié)果也表明，隨著孕婦血清HBVDNA含量的增加，胎兒發(fā)生宮內(nèi)傳染的危險性也增高。孕婦血清HBVDNA含量標志著其乙肝傳染性的強弱。由此推論，孕婦傳染性強是宮內(nèi)感染的重要原因。定量檢測母血中HBVDNA的含量，可以反映孕婦傳染性的強弱，進而估計HBSAG陽性孕婦的胎兒發(fā)生宮內(nèi)感染危險性的高低，然后針對高危人群采取適當措施，以降低宮內(nèi)感染的發(fā)生率。朱啟榕等7報道，攜帶HBV的孕婦產(chǎn)前給予多次注射乙肝高效價免疫球蛋白（HBIG）可以有效減少胎兒宮內(nèi)HBV感染，并推測其原理是降低了外周血HBV含量。這一問題尚待進一步研究。本課題受國家自然科學基金資助基金編號39370611作者單位710033西安，第四軍醫(yī)大學流行病學教研室（劉志華，徐德忠，閆永平，門可，張景霞）；陜西省婦幼保健院（徐劍秋，蔣美玲）參考文獻1GHENDONYPERINATALTRANSMISSIONOFHEPATITISBVIRUSINHIGHINCIDENCEVIROLMETH,1987，1769792林萬明主編臨床基因探針診斷實驗技術(shù)上海上海科學技術(shù)出版社,1993324325精品文檔2016全新精品資料全新公文范文全程指導寫作獨家原創(chuàng)7/73門可,王福生,徐德忠，等乙型肝炎病毒宮內(nèi)感染及其相關(guān)因素的研究第四軍醫(yī)大學學報,1996，1728294CARMANWF,HADZIYANNISS,MCGARVEYJJ,ETALMUTATIONPREVENTINGFORMATIONOFHEPATITISBEANTIGENINPATIENTSWITHCHRONICHEPATITISBINFECTIONLANCET,1989,25885915SCOTTJS,PANPE,PACERA,ETABSENCEOFHEPATITISBVIRUSDNAINHEPATITISBEANTIGENPOSITIVESERAFROMCHRONICHEPATITISBSURFACEANTIGENCARRIERSINMEDVIROL，1990，3