青島農(nóng)業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目5種藥劑對(duì)蘋(píng)果枝條剪鋸口腐爛病防治效果持效期研究姓名張傳杰學(xué)院農(nóng)學(xué)與植物保護(hù)學(xué)院專業(yè)植物保護(hù)班級(jí)1104班學(xué)號(hào)20114271指導(dǎo)教師李保華2015年5月30日畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）誠(chéng)信聲明本人聲明所呈交的畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，論文中引用他人的文獻(xiàn)、數(shù)據(jù)、圖表、資料均已作明確標(biāo)注，論文中的結(jié)論和成果為本人獨(dú)立完成，真實(shí)可靠，不包含他人成果及已獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。論文（設(shè)計(jì)）作者簽名日期年月日畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）作者同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文（設(shè)計(jì)）的復(fù)印件和電子版，允許論文（設(shè)計(jì)）被查閱和借閱。本人授權(quán)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）。本人離校后發(fā)表或使用該畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）或與該論文（設(shè)計(jì)）直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，單位署名為青島農(nóng)業(yè)大學(xué)。論文（設(shè)計(jì)）作者簽名日期年月日指導(dǎo)教師簽名日期年月日目錄摘要1ABSTRACT2引言31材料與方法711試驗(yàn)地概況712實(shí)驗(yàn)材料7121供試蘋(píng)果7122供試菌株7123供試藥劑7124實(shí)驗(yàn)儀器及所需物品813實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)914實(shí)驗(yàn)方法141藥劑施用142枝條接種143材料觀察2結(jié)果與分析9215天持效期結(jié)果與分析92210天持效期結(jié)果與分析2320天持效期結(jié)果與分析2440天持效期結(jié)果與分析3結(jié)論與討論1致謝22參考文獻(xiàn)235種藥劑對(duì)蘋(píng)果枝條剪鋸口腐爛病防治效果持效期研究植物保護(hù)專業(yè)張傳杰指導(dǎo)教師李保華摘要由于蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的長(zhǎng)期大面積的流行，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為探討蘋(píng)果腐爛病的有效防治方法，本研究比較了用甲基硫菌靈、戊唑醇、代森錳鋅、吡唑醚菌酯、波爾多液5種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果腐爛病的防治效果，結(jié)果表明戊唑醇和代森錳鋅對(duì)蘋(píng)果腐爛病的防治效果最好；吡唑醚菌酯防效次之；甲基硫菌靈和波爾多液防效較低。蘋(píng)果腐爛病防治適期為早春蘋(píng)果發(fā)芽前，病害發(fā)生之前或發(fā)生初期，試驗(yàn)期間未發(fā)現(xiàn)各供試藥劑對(duì)果樹(shù)有不良影響。目前，市場(chǎng)上治療腐爛病的藥劑種類非常多，藥效不一，為指導(dǎo)果農(nóng)選擇適宜藥劑，筆者選取5種作用方式不同的藥劑進(jìn)行藥效試驗(yàn)，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。關(guān)鍵詞蘋(píng)果腐爛病；藥效；持效期STUDYONTHEEFFECTIVEDURATIONOF5PESTICIDESINAPPLESHOOTROTDISEASEPREVENTIONEFFECTSTUDENTMAJORINGINPLANTPROTECTIONCHUANJIEZHANGTUTORBAOHUALIABSRACTBECAUSEOFTHELARGEAREAOFTHEAPPLETREEROTDISEASE,ITHASCAUSEDHUGEECONOMICLOSSESTOEXPLORETHEEFFECTIVEPREVENTIONANDCUREMETHODSOFAPPLETREECANKER,THISSTUDYCOMPAREDWITHMETHYLTHIOPHANATE,TEBUCONAZOLE,MANCOZEB,DERBYPYRAZOLEKRESOXIM,BORDEAUXMIXTURE,5KINDSOFFUNGICIDECONTROLEFFECTONAPPLEROTDISEASETHERESULTSSHOWEDTHATTEBUCONAZOLEANDMANCOZEBAPPLEROTDISEASEPREVENTIONANDTREATMENTEFFECTOFTHEBESTPYRACLOSTROBINANTIEFFECTTIMESTHIOPHANATEMETHYLANDBORDEAUXMIXTUREANTIEFFECTISLOWTHEOPTIMALPERIODOFTHEAPPLEROTDISEASECONTROLWASBEFORETHEGERMINATIONOFTHEAPPLESBEFORETHESPRING,ANDTHETESTPERIODWASNOTFOUNDTOHAVEBADEFFECTSONTHEFRUITTREESATPRESENT,TREATMENTONTHEMARKETROTDISEASEDRUGCLASSESVERYMUCH,EFFICACY,GUIDINGFARMERSTOCHOOSESUITABLECHEMICALS,THEAUTHORSELECTED5EFFECTSOFDIFFERENTDRUGEFFICACYTRIALS,TESTRESULTSAREREPORTEDASFOLLOWSNOWKEYWORDSAPPLETREEVALSACANKEREFFICACYEFFECTIVEDURATION引言一、蘋(píng)果腐爛病的研究現(xiàn)狀中國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和現(xiàn)狀蘋(píng)果是聞名世界的四大水果之一，也是我國(guó)出口創(chuàng)匯較多水果品種之一1。蘋(píng)果在我國(guó)有比較悠久的栽培歷史，據(jù)史料記載我國(guó)的蘋(píng)果栽培至少已有2000多年歷史，司馬相如在其上林賦的詩(shī)篇中既有關(guān)于“柰”（NAI）的記載，據(jù)考證，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為“柰”即為中國(guó)蘋(píng)果的古稱。近代我國(guó)的蘋(píng)果生產(chǎn)大體經(jīng)歷了以下五個(gè)不同的發(fā)展階段，即發(fā)生于十九世紀(jì)末期和二十世紀(jì)初期的早期引種階段，19501952年的生產(chǎn)恢復(fù)階段，5060年代的蘋(píng)果業(yè)的興起階段，和目前的蘋(píng)果商品化基地建設(shè)與發(fā)展階段，并形成了三個(gè)主要的蘋(píng)果生產(chǎn)基地，即環(huán)渤海地區(qū)，主要包括遼寧，河北，山東；黃河故道地區(qū)，包括河南西部，山西南部地區(qū)；和黃土高原地區(qū)，包括甘肅，陜西和山西北部地區(qū)。近年來(lái)，我國(guó)的蘋(píng)果生產(chǎn)呈現(xiàn)出不斷增長(zhǎng)的趨勢(shì)。農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，2005年，我國(guó)蘋(píng)果栽培面積達(dá)到189萬(wàn)公頃，蘋(píng)果產(chǎn)量達(dá)到2400萬(wàn)噸，分別占世界蘋(píng)果總量的五分之二和三分之一。2009年，全國(guó)的蘋(píng)果總產(chǎn)量已經(jīng)達(dá)到了3300萬(wàn)噸。陜西，遼寧，山東和山西四個(gè)省份已經(jīng)成為我國(guó)蘋(píng)果最重要的生產(chǎn)基地。我國(guó)已經(jīng)成為世界上最大的蘋(píng)果生產(chǎn)國(guó)2。蘋(píng)果在提高果區(qū)農(nóng)民收入，改善農(nóng)村經(jīng)濟(jì)現(xiàn)狀和提高人民的生活水平上發(fā)揮了重要作用3。而且，由于蘋(píng)果種植業(yè)而帶動(dòng)的配套產(chǎn)業(yè)，如農(nóng)機(jī)、農(nóng)藥、化肥、包裝、運(yùn)輸、貯藏、銷售等，和深加工產(chǎn)業(yè)，如果汁，果脯，果飲等產(chǎn)業(yè)也逐步的發(fā)展起來(lái)。這些產(chǎn)業(yè)的興旺和發(fā)達(dá)，對(duì)于安排農(nóng)村剩余勞動(dòng)力再就業(yè)，改變農(nóng)村現(xiàn)有的經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)等諸多方面都發(fā)揮了重要作用。二、蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的發(fā)生和危害蘋(píng)果樹(shù)腐爛病（APPLETREEVALSACANKERVALSAMALI）俗稱臭皮病、爛皮病，是我國(guó)各主要蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生且危害嚴(yán)重的一種真菌病害。該病主要危害蘋(píng)果樹(shù)的主枝、主干，以及小枝的皮層部分，使皮層腐爛壞死4。當(dāng)蘋(píng)果樹(shù)枝干上的病斑環(huán)繞枝干一周時(shí)，病部以上的枝條全部死亡。病皮以下的淺層木質(zhì)部也會(huì)受害，組織會(huì)發(fā)生變褐繼而壞死，影響?zhàn)B分、水分的輸導(dǎo)。因此，當(dāng)病害危害輕時(shí)會(huì)造成主枝、主干枯死，使果樹(shù)的結(jié)果量和結(jié)果年限銳減，從而影響蘋(píng)果的產(chǎn)量和質(zhì)量；當(dāng)病害危害重時(shí)會(huì)造成全株枯死，甚至全園毀滅5。病原菌在條件適宜的情況下也可以直接危害果實(shí)，造成嚴(yán)重的產(chǎn)量損失。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病在我國(guó)的發(fā)生，具有比較長(zhǎng)的歷史，在蘋(píng)果引種成功后即有大面積爆發(fā)的記錄。我國(guó)最早于1916年在遼寧省南部地區(qū)發(fā)現(xiàn)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病，并與19481949和1960年兩度在遼寧南部地區(qū)大流行，造成大批的果樹(shù)死亡6。近年來(lái)，伴隨著蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展和種植面積的擴(kuò)大，加之原有的蘋(píng)果生產(chǎn)區(qū)果樹(shù)不斷進(jìn)入老齡化階段，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的發(fā)生逐年加重7。在我國(guó)其它的蘋(píng)果產(chǎn)地，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病總體上也呈中度偏重發(fā)生。趙書(shū)華針對(duì)河南省三門(mén)峽市蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的危害情況進(jìn)行了調(diào)查，全市病株率10以下的果園占全市果園的14，病株率1030的約占40，病株率3050的約占32，病株率在50以上的約占148。曹克強(qiáng)等（2009）對(duì)陜西、甘肅、山東、遼寧、河南、北京、河北、云南、山西、江蘇10個(gè)省區(qū)的蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的發(fā)生情況做了較為詳細(xì)的調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在調(diào)查的3675株蘋(píng)果樹(shù)中，有1937株發(fā)生了腐爛病，總體發(fā)病率達(dá)到了527，主枝的發(fā)病率達(dá)到了2139。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病在我國(guó)的分布比較廣泛，幾乎發(fā)生于我國(guó)所有的蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)。東北、華北、西北、以及華東、中南、和西南的部分蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)是我國(guó)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的主要發(fā)生區(qū)域。其中尤以黃河以北的蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)發(fā)生普遍，受害嚴(yán)重10。在國(guó)外，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病也有較為廣泛的分布，亞洲，歐洲，北美洲均有分布。其中以東亞的日本，朝鮮發(fā)生最為嚴(yán)重，而美國(guó)、加拿大、英國(guó)、俄羅斯的發(fā)生較輕，只有在某些區(qū)域有零星的分布。19101925年蘋(píng)果樹(shù)腐爛病曾在日本北海道大面積流行，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。1972年，北海道的蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的發(fā)生面積占到了栽培面積的943，不少果園瀕于毀滅。美國(guó)只有在1952年，新墨西哥州報(bào)道有蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的發(fā)生。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病是一種枝干病害，其主要危害果樹(shù)主枝和主桿的皮層部分，幼樹(shù)和苗木也可以被侵染11。其癥狀可以分為潰瘍和枝枯兩種類型，這兩種類型在田間都比較常見(jiàn)，在發(fā)病盛期，病斑多為潰瘍型；而在發(fā)病末期，病斑則以枝枯型為主。潰瘍型腐爛的典型癥狀是樹(shù)皮的受害部位變?yōu)榧t褐色，呈水浸狀軟腐，病部稍腫脹，手壓病部凹陷并流出有酒糟味的黃色汁液。病皮易撕裂，腐爛皮層鮮紅褐色，有酒糟味。病部以后干縮凹陷，呈灰褐色或者棕褐色，表面彌生大量的小黑點(diǎn)，即病菌的子實(shí)體12。枝枯型的癥狀主要發(fā)生于45年生以下的小枝上。其病部開(kāi)始呈現(xiàn)紅褐色，略潮濕腫起，很快變干、下限，邊緣不明顯，形狀不規(guī)則。病組織褐色或暗褐色，質(zhì)地松散，糟爛，往往爛到相接的大枝上，引起大枝發(fā)病，或者繞小枝爛到一圈，使病部以上小枝枯死。發(fā)病后期，病皮表面長(zhǎng)出較密的小黑點(diǎn)，即病菌的子座，天氣潮濕時(shí)，從中涌出黃色的絲狀孢子角13。秋季，當(dāng)果實(shí)受到雹傷后，傷口處偶爾也會(huì)發(fā)生腐爛病。病斑近圓形或不規(guī)整形，暗紅褐色，軟腐，略具酒糟氣味，病部常形成小黑點(diǎn)，潮濕時(shí)從中涌出桔黃色孢子角。三、蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的病原學(xué)研究蘋(píng)果樹(shù)腐爛病最早于1903年于日本發(fā)現(xiàn)，1909年，宮布、山田證實(shí)這種病害是一種真菌病害，并將其病原菌命名為VALSAMALIMIYABEETYAMADA，其無(wú)性型產(chǎn)生殼囊孢屬（CYTOSPORA）的分生孢子器。隨后，被三浦、富樫浩吾所證實(shí)，并為各國(guó)所采用。小林享夫根據(jù)子囊菌分類的變遷和對(duì)日本間座殼科（DIAPORTHACEAE）各屬形態(tài)特征的比較，并結(jié)合無(wú)性型子囊和子囊孢子的研究，認(rèn)為蘋(píng)果屬植物上的VALSAMALI與闊葉樹(shù)上的VCERATOSPERMA在形態(tài)、培養(yǎng)性狀、寄主范圍上一致，以前認(rèn)為的VALSAMALI，應(yīng)該歸納于VCERATOSPERMA之中，所以，其主張VALSAMALI不能做為單獨(dú)的種存在，應(yīng)該和VALSACERATOSPERMATODEETFRMARIE視為同一個(gè)種。因此，其將蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌的學(xué)名更名為VALSACERATOSPERMATODEETFRMAIRE14。然而，隨后越來(lái)越多的研究認(rèn)為來(lái)自于蘋(píng)果樹(shù)的VCERATOSPERMA和來(lái)自于其它闊葉樹(shù)的VCERATOSPERMA分離株并不是同一個(gè)物種，它們?cè)谥T多方面存在較大的差異。KANEHIRA通過(guò)研究分別來(lái)自于蘋(píng)果樹(shù)的VCERATOSPERMA分離株和來(lái)自于其它闊葉樹(shù)的分離株所產(chǎn)生的同工酶譜，認(rèn)為這兩者存在比較大的差異15。關(guān)于我國(guó)蘋(píng)果樹(shù)的起源問(wèn)題，現(xiàn)在還沒(méi)有定論。李美娜研究認(rèn)為我國(guó)蘋(píng)果樹(shù)的來(lái)源主要有兩個(gè)方面。一是從日本進(jìn)口的苗木上帶有蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌，二是我國(guó)的某些野生蘋(píng)果屬植物上本身就帶有這種病菌16。臧睿等根據(jù)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌在不同的生長(zhǎng)環(huán)境下的生長(zhǎng)特性，將我國(guó)的蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌分為3個(gè)不同的種類，即黃褐色類群，乳白色類群和灰褐色易產(chǎn)孢類群。這三個(gè)類群對(duì)不同的溫度、PH、光照等條件都有不同的要求。黃褐色類群在532范圍內(nèi)均可以生長(zhǎng)，其最適的生長(zhǎng)溫度為2528；乳白色類群和灰褐色易產(chǎn)孢類群的生長(zhǎng)范圍為535，其對(duì)高溫的耐受力要較前者高一些。黃褐色類群和乳白色類群在PH49的條件下均可以生長(zhǎng)，而灰褐色易產(chǎn)孢類群的PH生長(zhǎng)范圍則較前兩者寬廣，為PH210。而光照條件對(duì)三種類群的菌落生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用17。四、蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的侵染循環(huán)我國(guó)幅員遼闊，各地的氣候差異也非常大，所以蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌在各地的侵染時(shí)期的早晚上有一定的差異，但其基本的侵染發(fā)病規(guī)律相似。據(jù)江蘇省農(nóng)科院植物保護(hù)研究所在徐州地區(qū)觀察，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌全年均可以侵染果樹(shù)。每年12月翌年4月均為發(fā)病盛期，13月是病菌集中侵染期，以后隨著蘋(píng)果樹(shù)發(fā)芽、展葉進(jìn)入生長(zhǎng)季，樹(shù)體抗病力逐漸增強(qiáng)，發(fā)病銳減，擴(kuò)展停頓，發(fā)病盛期隨即結(jié)束。511月間，有極少量新病發(fā)生，初冬蘋(píng)果樹(shù)進(jìn)入落葉期，發(fā)病盛期隨又開(kāi)始。在山東省，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病全年都可能發(fā)生，而以24月間發(fā)病數(shù)量最多，約占全年發(fā)病數(shù)量的50左右，在此期間病斑擴(kuò)展迅速，危害最大。隨著蘋(píng)果樹(shù)進(jìn)入生長(zhǎng)旺期，樹(shù)體抗病力逐漸增強(qiáng)，發(fā)病數(shù)量減少，病斑干縮下陷。910月份，氣候條件合適病斑擴(kuò)展，病害又有回升，形成全年的第二次發(fā)病高峰，但不如初級(jí)病斑數(shù)量多，擴(kuò)展快。此外，79月間在新形成的落皮層上逐漸形成一些表面潰瘍，以后在其下面產(chǎn)生一些壞死的斑點(diǎn)，而這些壞死的斑點(diǎn)到春季就會(huì)發(fā)展成潰瘍型的病斑18。大量的研究表明，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病在一年當(dāng)中會(huì)有兩次發(fā)病的高峰期19。第一次發(fā)病高峰期出現(xiàn)在每年的二月底或者三月初，五月份進(jìn)入發(fā)病的盛期。在這個(gè)時(shí)期果園內(nèi)的病株率高，病斑擴(kuò)展的比較迅速，為害較為嚴(yán)重；第二次發(fā)病高峰期出現(xiàn)在果樹(shù)生長(zhǎng)的后期即晚秋時(shí)節(jié)。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌是寄生性很弱的兼性寄生菌。病菌只能從蘋(píng)果樹(shù)的表皮傷口入侵已經(jīng)死亡的皮層組織20。這種傷口包括自然因素造成的傷口和人為因素制造的傷口兩大類，自然因素造成的傷口，主要包括葉痕、果柄痕、芽眼、皮孔，以及因?yàn)榈蜏囟斐傻膬鰝途植扛邷卦斐傻淖苽欢藶橐蛩卦斐傻膫?，主要是指在人們?cè)诠麡?shù)管理過(guò)程中不可避免的造成的修剪傷口和機(jī)械損傷。這些傷口的類型多樣，各類傷口的性質(zhì)也有相當(dāng)大的差異，但確切的說(shuō)，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌是經(jīng)帶有死組織的傷口或經(jīng)死組織侵入寄主組織21。當(dāng)病菌的孢子到達(dá)適于侵染的傷口部位，并遇到適宜的溫度、濕度和營(yíng)養(yǎng)條件時(shí)，孢子即萌發(fā)并侵入死組織中。菌絲首先在死組織中生長(zhǎng)，分泌毒素和各種酶類物質(zhì)殺死周?chē)募?xì)胞，菌絲則進(jìn)一步擴(kuò)展到這些被殺死的細(xì)胞中，逐漸擴(kuò)大危害的范圍，造成皮層的腐爛。從病菌與組織接觸并侵入到形成腐爛病斑，適宜條件下一般需要715天，有時(shí)需要35天甚至更長(zhǎng)時(shí)間。臧睿等研究認(rèn)為溫度、濕度、PH、以及光照條件對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌孢子的萌發(fā)具有一定的影響。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌孢子在1528的范圍內(nèi)均可以萌發(fā)，最佳的萌發(fā)溫度為2528。低于15時(shí)，其孢子萌發(fā)率明顯降低；超過(guò)32則孢子敗育不能萌發(fā)。相對(duì)飽和的濕度有利于腐爛病菌孢子的萌發(fā)；PH5160是腐爛病菌分生孢子萌發(fā)的最適宜的PH條件，而這個(gè)PH條件剛好與蘋(píng)果樹(shù)樹(shù)皮的浸出液PH相吻合，說(shuō)明蘋(píng)果樹(shù)傷口的浸出液可以為病原菌的萌發(fā)提供合適的酸堿條件，有利于病菌的萌發(fā)和侵染，而光照條件對(duì)孢子萌發(fā)的影響較小22。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌主要以菌絲體、分生孢子器、孢子角、子囊殼以及子囊孢子等在田間病株和修剪下來(lái)的殘枝上越冬。發(fā)生再侵染的主要是分生孢子，而春季是分生孢子產(chǎn)生的特大高峰期23。腐爛病菌主要通過(guò)風(fēng)雨傳播。由于腐爛病菌的孢子常與膠體物質(zhì)一起形成分生孢子角，所以很難被風(fēng)力所吹散；只有在水滴中，孢子角才能充分的溶解并分散，并且隨著雨露的流淌和雨滴的飛濺而擴(kuò)大病菌的傳播范圍。另外，粘質(zhì)的孢子也可以粘附于一些昆蟲(chóng)的體表，并隨著昆蟲(chóng)的活動(dòng)而得到傳播。所謂的蘋(píng)果樹(shù)潛伏侵染是指腐爛病菌侵入寄主后，先在樹(shù)皮的表層死傷組織中定殖，當(dāng)樹(shù)體健壯時(shí)，病菌可以較長(zhǎng)時(shí)間呈潛伏狀態(tài)，不立即擴(kuò)展致?。划?dāng)樹(shù)體或者局部組織衰弱時(shí)，潛伏的病菌便向健康的組織擴(kuò)展為害，引起病部皮層腐爛。腐爛病菌的這一侵染特性，被稱之為潛伏侵染24。外觀無(wú)癥狀的蘋(píng)果樹(shù)皮，往往帶有病菌。蘋(píng)果枝條帶菌，各地普遍存在，即使在腐爛病罕見(jiàn)的地區(qū)，枝條也帶有病菌。15年生的枝條，帶菌率隨著枝條年齡增長(zhǎng)而提高25。劉福昌等通過(guò)反復(fù)冷凍的方法，使枝條的抗病力下降，同時(shí)用藥劑涂布枝條表面以防絕樹(shù)皮表面可能附著的腐爛病菌孢子，最后將處理過(guò)的枝條放置在適當(dāng)?shù)臏囟?、濕度條件下，在枝條上就有明顯的腐爛病菌的癥狀表現(xiàn)處來(lái)。但是，如果不進(jìn)行殺傷組織的處理就很難誘發(fā)枝條發(fā)病。這種現(xiàn)象表明蘋(píng)果樹(shù)皮上帶有潛伏腐爛病菌。一般情況下，蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌侵入寄主后，并不立即擴(kuò)展顯示出潰瘍癥狀，當(dāng)寄主生長(zhǎng)勢(shì)比較強(qiáng)時(shí)，侵入的病菌能夠長(zhǎng)時(shí)間的處于潛伏狀態(tài)，只有當(dāng)寄主生長(zhǎng)勢(shì)衰弱時(shí)，病菌才開(kāi)始活躍起來(lái)26。蘋(píng)果樹(shù)潛伏侵染現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，說(shuō)明腐爛病菌的分布要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于病菌的流行區(qū)域，而且，潛伏侵染現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，也為提高蘋(píng)果樹(shù)的樹(shù)勢(shì)來(lái)防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病提供了有力的理論依據(jù)。五、本研究的目的及意義篩選當(dāng)前已有的化學(xué)殺菌劑來(lái)防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病，提出防治方案，是解決當(dāng)前所面臨問(wèn)題的有效方法。作為一名植保人員，有義務(wù)為農(nóng)民推薦實(shí)用的藥劑。本研究針對(duì)目前生產(chǎn)上用藥混亂的問(wèn)題，從眾多常用殺菌劑中篩選高效低毒防治蘋(píng)果腐爛病病的藥劑，提出有效地解決方案，為蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的奠定理論基礎(chǔ)。1材料與方法11試驗(yàn)地概況試驗(yàn)于2014年6月2015年5月在山東省植物病蟲(chóng)害綜合防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)）進(jìn)行。青島農(nóng)業(yè)大學(xué)位于青島市城陽(yáng)區(qū)長(zhǎng)城路700號(hào)，城陽(yáng)區(qū)是青島市六個(gè)市轄區(qū)之一，東依嶗山區(qū)，南接李滄區(qū)，西臨膠州灣與膠州市相鄰，北與即墨市毗連。位于東經(jīng)12012，北緯3620，屬暖溫帶季風(fēng)大陸性氣候，年平均氣溫126，1月份最低，月平均氣溫2，8月份最高，月平均氣溫257，年平均降水量700毫米左右，四季分明，雨熱同季，光照充足。該地區(qū)氣候有利于生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)蘋(píng)果。12試實(shí)驗(yàn)材料121供試蘋(píng)果材料試驗(yàn)蘋(píng)果品種材料12生健康新鮮紅富士蘋(píng)果枝條，并剪成1020CM枝段。1212供試菌株供試蘋(píng)果腐爛病菌（080601）菌株采自蘋(píng)果樹(shù)腐爛病病枝，切取病健交界處的病組織轉(zhuǎn)入馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）中，分離獲得腐爛病菌VALSAMALI。用直徑08MM的毛細(xì)管，自菌落邊緣打取菌絲的端部轉(zhuǎn)入PDA中，獲得單菌絲分離菌株。并保存于4C的冰箱中。接種前，將保存的轉(zhuǎn)化菌株從冰箱中取出，接種于PDA培養(yǎng)基中，25C下黑暗培養(yǎng)35天，取菌落邊緣直徑5MM新鮮菌餅，接種于大麥粒培養(yǎng)基（浸泡大麥粒70G,蛋白胨1G,蜂蜜水6，滅菌2H），25C恒溫箱中培養(yǎng)15天，大麥粒上可產(chǎn)生大量分生孢子器。取產(chǎn)生分生孢子器的大麥粒，轉(zhuǎn)入含有1水瓊脂直徑為9CM培養(yǎng)皿中，25C下保濕培養(yǎng)3天，分生孢子器中溢出大量橘黃色分生孢子角19。用滅菌牙簽挑取新鮮孢子角置于純凈水中配置成106個(gè)/ML的孢子懸浮液，備用。的分生孢子懸浮液（106個(gè)/ML）。123供試藥劑藥劑做成三線表格70可濕性粉劑甲基硫菌靈（興農(nóng)藥業(yè)有限公司）、43懸浮劑戊唑醇（拜耳作物科學(xué)有限公司）、80可濕性粉劑代森錳鋅（印度印地菲爾化學(xué)公司）、25乳油吡唑醚菌酯（巴斯夫歐洲公司）、波爾多液（12100現(xiàn)用現(xiàn)配）。124實(shí)驗(yàn)儀器及所需物品化學(xué)藥品75的酒精溶液、吐溫、硫酸銅、生石灰、蒸餾水、次氯酸鈉溶液、氫氧化鉀溶液、01苯胺藍(lán)染液、土豆、蔗糖、瓊脂粉、潮霉素等實(shí)驗(yàn)儀器果枝剪、標(biāo)簽、記號(hào)筆、20ML小燒杯、50ML燒杯、1000ML燒杯、200UL移液器、1000UL移液器、20ML量筒、橡皮筋、電子天平、稱量紙、報(bào)紙、培養(yǎng)皿、濾紙、血球計(jì)數(shù)板、普通光學(xué)顯微鏡、噴壺、保濕盒、HM525冷凍切片機(jī)、DM2500熒光顯微鏡、25恒溫箱等。13實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)6個(gè)處理，處理1噴施70可濕性粉劑甲基硫菌靈，有效成分用量875UG/ML,處理2噴施43懸浮劑戊唑醇，有效成分用量66UG/ML，處理3噴施80可濕性粉劑代森錳鋅，有效成分用量800UG/ML,處理4噴施25乳油吡唑醚菌酯，有效成分用量250UG/ML,處理5噴施波爾多液（12100現(xiàn)用現(xiàn)配），處理6CK清水對(duì)照。3次重復(fù)。14試驗(yàn)方法保護(hù)效果與持效期的測(cè)定141藥劑施用選取樹(shù)齡相同，長(zhǎng)勢(shì)相近的富士蘋(píng)果樹(shù)，剪取12生新鮮蘋(píng)果枝條，并剪成1020CM枝段。采用蘸施剪鋸口的方法施藥，施藥后水培，所有枝條都放在室外，自然環(huán)境中，看藥效持效期。每種藥劑處理5個(gè)枝段，試驗(yàn)設(shè)置4個(gè)時(shí)間處理，5天，10天，20天，40天。采用先施藥后接種的方法，以清水為對(duì)照，測(cè)試了5種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果腐爛病的保護(hù)效果。3月下旬，在青島農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)園內(nèi)剪取富士蘋(píng)果樹(shù)的一年生健康枝條，并截成142枝條接種試驗(yàn)在不同時(shí)間重復(fù)3次。5天，10天，20天，40天后分別取回枝條，接種蘋(píng)果腐爛病菌孢子懸浮液（在配制之前的35天用1的水瓊脂進(jìn)行蘋(píng)果腐爛病菌大麥粒的保濕培養(yǎng)，使得每次接種都能得到新鮮致病力強(qiáng)的孢子），在相對(duì)濕度100環(huán)境中培養(yǎng)48小時(shí)。然后轉(zhuǎn)入相對(duì)濕度70環(huán)境中，25下培養(yǎng)2周。143材料觀察檢查接種2周后，自接種端截取05CM枝段從接種口下方05CM處，剪開(kāi)枝條，用HM525冷凍切片機(jī)切取30UM玻片，沿距剪鋸口05CM處橫切30UM橫切面，然后染色方法先用脫色液脫色，至橫切面較透明，用蒸餾水沖洗后，再用KOH溶液進(jìn)行透明大約35MIN,再用蒸餾水沖洗，最后用01苯胺藍(lán)染液進(jìn)行染色，加浮載劑用于觀察材料觀察后在DM2500熒光顯微鏡上觀察是否侵染是否有接種病菌菌絲，并記錄橫截面上菌絲量的多少。每種藥劑處理檢查3個(gè)枝條，1每個(gè)枝條切取5個(gè)玻片，一個(gè)玻片上5個(gè)樣本橫切面，進(jìn)行染色觀察。在DM2500熒光顯微鏡觀察視野中取菌絲量最多的進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，每一個(gè)枝條有一個(gè)最大值，最后根據(jù)觀察3個(gè)枝條橫切面的最大菌絲量取平均值。并根據(jù)橫截面菌絲量的平均個(gè)數(shù)進(jìn)行分級(jí)。橫截面無(wú)菌絲侵染為0級(jí)；12根菌絲為1級(jí)；25根菌絲為2級(jí)；510根菌絲為3級(jí)；1020根菌絲為4級(jí)；20根菌絲以上為5級(jí)。2結(jié)果與分析215天持效期結(jié)果與分析施藥5天后接種腐爛病菌分生孢子由表1可以看出，在5天的持效期里，戊唑醇與代森錳鋅對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病的防治效果最好，與對(duì)照相比有明顯的防治效果，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)都為5個(gè)，防治級(jí)數(shù)為二級(jí)；其次為吡唑醚菌酯，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為63個(gè)，防治級(jí)數(shù)為三級(jí)；甲基硫菌靈的橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為113個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)；與其它四種藥劑相比較波爾多液的防治效果最差，橫切面的菌絲個(gè)數(shù)為127個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)。表1不同藥劑處理對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病5天持效期效果TABLE1DIFFERENTTREATMENTSOFAPPLEROTINVITROSHOOT5DAYSEFFECTIVEEFFECT處理TREATMENTS橫切面菌絲的個(gè)數(shù)（平均數(shù)）THENUMBEROFCROSSSECTIONSHYPHAE防治級(jí)數(shù)PREVENTIONSERIES甲基硫菌靈METHYLTHIOPHANATE113四級(jí)戊唑醇TEBUCONAZOLE5二級(jí)代森錳鋅MANCOZEB5二級(jí)吡唑醚菌酯DERBYPYRAZOLEKRESOXIM63三級(jí)波爾多液BORDEAUXMIXTURE127四級(jí)對(duì)照CK20以上五級(jí)2210天持效期結(jié)果與分析由表2可以看出，在10天的持效期里，戊唑醇與吡唑醚菌酯對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病的防治效果最好，與對(duì)照相比有明顯的防治效果，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)都為2個(gè)，防治級(jí)數(shù)為一級(jí)；其次為代森錳鋅，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為27個(gè)，防治級(jí)數(shù)為二級(jí)；甲基硫菌靈的橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為6個(gè)，防治級(jí)數(shù)為三級(jí)；與其它四種藥劑相比較波爾多液的防治效果最差，橫切面的菌絲個(gè)數(shù)為103個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)。表2不同藥劑處理對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病10天持效期效果TABLE2DIFFERENTTREATMENTSOFAPPLEROTINVITROSHOOT10DAYSEFFECTIVEEFFECT處理TREATMENTS橫切面菌絲的個(gè)數(shù)（平均數(shù)）防治級(jí)數(shù)PREVENTIONSERIESTHENUMBEROFCROSSSECTIONSHYPHAE甲基硫菌靈METHYLTHIOPHANATE6三級(jí)戊唑醇TEBUCONAZOLE2一級(jí)代森錳鋅MANCOZEB27二級(jí)吡唑醚菌酯DERBYPYRAZOLEKRESOXIM2一級(jí)波爾多液BORDEAUXMIXTURE103四級(jí)對(duì)照CK20以上五級(jí)2320天持效期結(jié)果與分析由表3可以看出，在20天的持效期里，吡唑醚菌酯與代森錳鋅對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病的防治效果最好，與對(duì)照相比有明顯的防治效果，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)分別為33個(gè)和47個(gè)，防治級(jí)數(shù)都為二級(jí)；其次為戊唑醇，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為87個(gè)，防治級(jí)數(shù)為三級(jí)；甲基硫菌靈的橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為123個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)；與其它四種藥劑相比較波爾多液的防治效果最差，橫切面的菌絲個(gè)數(shù)為157個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)。表3不同藥劑處理對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病20天持效期效果TABLE3DIFFERENTTREATMENTSOFAPPLEROTINVITROSHOOT20DAYSEFFECTIVEEFFECT處理TREATMENTS橫切面菌絲的個(gè)數(shù)（平均數(shù)）THENUMBEROFCROSSSECTIONSHYPHAE防治級(jí)數(shù)PREVENTIONSERIES甲基硫菌靈METHYLTHIOPHANATE123四級(jí)戊唑醇TEBUCONAZOLE87三級(jí)代森錳鋅MANCOZEB47二級(jí)吡唑醚菌酯DERBYPYRAZOLEKRESOXIM33二級(jí)波爾多液BORDEAUXMIXTURE157四級(jí)對(duì)照CK20以上五級(jí)2440天持效期結(jié)果與分析由表4可以看出，在40天的持效期里，代森錳鋅與戊唑醇對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病的防治效果最好，與對(duì)照相比有明顯的防治效果，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)分別為77個(gè)和9個(gè)，防治級(jí)數(shù)都為三級(jí)；其次為吡唑醚菌酯，橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為103個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)；甲基硫菌靈的橫切面的菌絲平均個(gè)數(shù)為14個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)；與其它四種藥劑相比較波爾多液的防治效果最差，橫切面的菌絲個(gè)數(shù)為163個(gè)，防治級(jí)數(shù)為四級(jí)。表4不同藥劑處理對(duì)蘋(píng)果離體枝條腐爛病40天持效期效果TABLE4DIFFERENTTREATMENTSOFAPPLEROTINVITROSHOOT40DAYSEFFECTIVEEFFECT處理TREATMENTS橫切面菌絲的個(gè)數(shù)（平均數(shù)）THENUMBEROFCROSSSECTIONSHYPHAE防治級(jí)數(shù)PREVENTIONSERIES甲基硫菌靈METHYLTHIOPHANATE14四級(jí)戊唑醇TEBUCONAZOLE9三級(jí)代森錳鋅MANCOZEB77三級(jí)吡唑醚菌酯DERBYPYRAZOLEKRESOXIM103四級(jí)波爾多液BORDEAUXMIXTURE163四級(jí)對(duì)照CK20以上五級(jí)3結(jié)論與討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，供試的幾種不同作用機(jī)理殺菌劑對(duì)蘋(píng)果腐爛病均有一定的防治效果。其中，戊唑醇和代森錳鋅對(duì)防治蘋(píng)果腐爛病具有較好的效果，顯著高于其它藥劑；吡唑醚菌酯防效次之；甲基硫菌靈和波爾多液防效在幾種供試農(nóng)藥中表現(xiàn)相對(duì)較低。試驗(yàn)期間有多次降雨，不同類型殺菌劑表現(xiàn)的藥效差異可能與藥劑本身性質(zhì)和各自殺菌作用機(jī)理不同有關(guān)。而且，不同藥劑對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病傷口愈合效果也不同。需特別注意的是三唑類殺菌劑施用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格掌握濃度，否則會(huì)抑制作物生長(zhǎng)或易產(chǎn)生藥害。致謝本論文是在李保華老師的親切關(guān)懷和悉心指導(dǎo)下完成的。在畢業(yè)實(shí)習(xí)期間，李老師給予了我熱情的關(guān)懷和精心的指導(dǎo)，使我有更大的發(fā)揮空間并能夠順利完成畢業(yè)論文。另外，李老師始終保持著嚴(yán)謹(jǐn)而又認(rèn)真的治學(xué)態(tài)度，以及勇于探索和一絲不茍的敬業(yè)精神，給我的學(xué)習(xí)和工作提供了模范作用。在生活中，李老師積極樂(lè)觀、平易近人的態(tài)度對(duì)我的人生觀、價(jià)值觀也產(chǎn)生了很大的影響。在完成畢業(yè)論文之際，謹(jǐn)此向李老師致以最崇高的敬意和最衷心的感謝本論文是在山東省植物病蟲(chóng)害綜合防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)）完成，在整個(gè)論文實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室的各位師兄師姐給予了我非常大的幫助，特別是陳沖師姐，在此向他們表示衷心的感謝此外，在大學(xué)四年的本科學(xué)習(xí)過(guò)程中，感謝母校提供了優(yōu)越的學(xué)習(xí)條件，使同學(xué)們有了更大的發(fā)展空間；同時(shí)，感謝各位任課老師的精心指導(dǎo)和諄諄教誨，使我能圓滿完成學(xué)業(yè)，并取得了不錯(cuò)的學(xué)習(xí)成績(jī)。最后，感謝參加論文答辯和評(píng)審