微生物學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文精品論文中藥雄黃微生物浸出及其浸出液對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用研究關(guān)鍵詞雄黃微生物浸礦肝癌氧化亞鐵硫桿菌抗腫瘤作用摘要雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。正文內(nèi)容雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊?，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊?，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊?，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細(xì)菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達(dá)2664，比無菌對照提高了約23個百分點(diǎn)。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進(jìn)雄黃中砷的溶出。無機(jī)的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機(jī)砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關(guān)的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細(xì)胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應(yīng)，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內(nèi)條件下，ER/AF對肝癌H22實(shí)體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強(qiáng)的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達(dá)1188，對實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達(dá)4278。分別采用透射電鏡技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)研究了ER/AF對H22實(shí)體瘤細(xì)胞以及體外培養(yǎng)H22細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導(dǎo)肝癌荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織H22細(xì)胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細(xì)胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用愈強(qiáng)。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強(qiáng)的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于生理鹽水，可達(dá)到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數(shù)致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導(dǎo)致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點(diǎn)嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術(shù)用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進(jìn)行生物化學(xué)溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結(jié)果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/