1、 沉淀反響沉淀反響precipetaiton是可溶性抗原與是可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合所出現(xiàn)的反響。相應(yīng)抗體特異性結(jié)合所出現(xiàn)的反響。 1905 凝膠內(nèi)沉淀實(shí)驗(yàn)?zāi)z內(nèi)沉淀實(shí)驗(yàn) 1946 試管免疫分散技術(shù)試管免疫分散技術(shù) 1965 單向免疫分散技術(shù)單向免疫分散技術(shù) 1967 散射比濁法散射比濁法 在瓊脂膠中混入一定量抗體，使待測(cè)的抗在瓊脂膠中混入一定量抗體，使待測(cè)的抗原溶液從部分向瓊脂內(nèi)自在分散，在抗原原溶液從部分向瓊脂內(nèi)自在分散，在抗原抗體比例適宜區(qū)域內(nèi)構(gòu)成可見(jiàn)的沉淀環(huán)。抗體比例適宜區(qū)域內(nèi)構(gòu)成可見(jiàn)的沉淀環(huán)。(抗原抗體反響時(shí)，只需其中一種成分發(fā)生抗原抗體反響時(shí)，只需其中一種成分發(fā)生分散分散 根

2、據(jù)實(shí)驗(yàn)方式可分為試管法和平板法兩種。根據(jù)實(shí)驗(yàn)方式可分為試管法和平板法兩種。 丈量沉淀環(huán)的直徑或計(jì)算環(huán)的面積。沉淀丈量沉淀環(huán)的直徑或計(jì)算環(huán)的面積。沉淀環(huán)直徑或面積的大小與抗原量相關(guān)，但不環(huán)直徑或面積的大小與抗原量相關(guān)，但不是直線相關(guān)，而是對(duì)數(shù)關(guān)系。同時(shí)，這種是直線相關(guān)，而是對(duì)數(shù)關(guān)系。同時(shí)，這種沉淀環(huán)與分子量和分散時(shí)間有關(guān)。沉淀環(huán)與分子量和分散時(shí)間有關(guān)。 試劑與器材試劑與器材 1.羊抗人羊抗人IgG診斷血清診斷血清 2.人人IgG規(guī)范液規(guī)范液30g/L 3.待測(cè)人血清待測(cè)人血清 4.瓊脂粉瓊脂粉 5.生理鹽水生理鹽水 6.載玻片載玻片(玻璃板、三角燒瓶、吸管、加玻璃板、三角燒瓶、吸管、加樣器、打孔

3、器、水浴箱、濕盒、直尺等樣器、打孔器、水浴箱、濕盒、直尺等 操作方法操作方法 1.制備瓊脂凝膠制備瓊脂凝膠 1生理鹽水配制瓊脂凝膠生理鹽水配制瓊脂凝膠15g/L，煮，煮沸溶化至廓清，置沸溶化至廓清，置56水浴中備用。水浴中備用。 2取適量溶化瓊脂，以瓊脂取適量溶化瓊脂，以瓊脂 抗體抗體4 1比例汲取相應(yīng)抗體，與瓊脂充分混合，比例汲取相應(yīng)抗體，與瓊脂充分混合，置置56水浴中備用。水浴中備用。 2.制板制板 1取干凈枯燥玻片，置于程度臺(tái)上取干凈枯燥玻片，置于程度臺(tái)上 2用吸管汲取用吸管汲取4ml瓊脂含抗體，瓊脂含抗體，于載玻片于載玻片1/3處澆注，使瓊脂凝膠均勻鋪滿處澆注，使瓊脂凝膠均勻鋪滿玻片，

4、不要留有氣泡。玻片，不要留有氣泡。 3.打孔打孔 待瓊脂凝固后，用直徑待瓊脂凝固后，用直徑3mm的打的打孔器打孔，孔距孔器打孔，孔距1012mm 4.加樣加樣 用微量加樣器汲取待檢血清用微量加樣器汲取待檢血清10l,參與相參與相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)孔中，做好標(biāo)志。應(yīng)的實(shí)驗(yàn)孔中，做好標(biāo)志。 將人將人IgG規(guī)范液規(guī)范液30g/L用生理鹽水分用生理鹽水分別做如下稀釋?zhuān)涸叮瑒e做如下稀釋?zhuān)涸叮?1:2， 1:5， 1:10， 1:20， 1:30，用微量加樣器汲取稀釋規(guī)范，用微量加樣器汲取稀釋規(guī)范液液10l,參與相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)孔中，做好標(biāo)志。參與相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)孔中，做好標(biāo)志。 5.分散分散 將加樣的瓊脂凝膠板平放于濕盒內(nèi)，置將加樣的瓊脂凝膠板平放于濕盒內(nèi)，置3724h后察看結(jié)果。后察看結(jié)果。 結(jié)果判別結(jié)果判別 準(zhǔn)確丈量各實(shí)驗(yàn)孔沉淀環(huán)的直徑，以沉準(zhǔn)確丈量各實(shí)驗(yàn)孔沉淀環(huán)的直徑，以沉淀環(huán)直徑為橫坐標(biāo)，相應(yīng)孔中淀環(huán)直徑為橫坐標(biāo)，相應(yīng)孔中IgG含量的對(duì)含量的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制規(guī)范曲線。數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制規(guī)范曲線。(logC/d=K) 本卷須知本卷須知 1.玻片須枯燥、干凈，邊緣無(wú)破損。置程度玻片須枯燥、干凈，邊緣無(wú)破損。置程度處。處。 2.澆制瓊脂板時(shí)動(dòng)作要?jiǎng)蛩贊仓骗傊鍟r(shí)動(dòng)作要?jiǎng)蛩?3.打孔時(shí)防止程度挪動(dòng)打孔時(shí)防止程度挪動(dòng) 4.加樣時(shí)防止氣泡或加至孔外，加樣要準(zhǔn)確加樣時(shí)