生物膜系統(tǒng)與細(xì)胞工程sun_第1頁
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文檔簡介

1、細(xì)胞中有膜的結(jié)構(gòu)有:細(xì)胞中有膜的結(jié)構(gòu)有:細(xì)胞膜、細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、液泡、溶酶體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、液泡、溶酶體核膜、線粒體、葉綠體、核膜、線粒體、葉綠體、組成成分相似,結(jié)構(gòu)大致相同,因而統(tǒng)稱為組成成分相似,結(jié)構(gòu)大致相同,因而統(tǒng)稱為“生物膜生物膜”。: : 細(xì)胞內(nèi)由細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高細(xì)胞內(nèi)由細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高爾基體膜、線粒體膜、質(zhì)體膜等膜結(jié)構(gòu)組成的統(tǒng)一爾基體膜、線粒體膜、質(zhì)體膜等膜結(jié)構(gòu)組成的統(tǒng)一整體。整體。一、細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)一、細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)生物膜生物膜蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)脂類脂類糖類糖類人紅細(xì)胞膜人紅細(xì)胞膜49%43%8%大鼠肝細(xì)胞核膜大鼠肝細(xì)胞核膜59%35%2.9%內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

2、膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜67%33%很少線粒體外膜線粒體外膜52%48%很少線粒體內(nèi)膜線粒體內(nèi)膜76%24%很少各種生物膜的成分及含量各種生物膜的成分及含量組成生物膜的成分:蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類組成生物膜的成分:蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類 不同膜結(jié)構(gòu)上的各成分的種類和數(shù)量不同;不同膜結(jié)構(gòu)上的各成分的種類和數(shù)量不同;生物膜都具有流動性和選擇透過性生物膜都具有流動性和選擇透過性膜的功能越復(fù)雜,蛋白質(zhì)含量越高膜的功能越復(fù)雜,蛋白質(zhì)含量越高二、生物膜在結(jié)構(gòu)上的聯(lián)系二、生物膜在結(jié)構(gòu)上的聯(lián)系(1 1)外層核膜)外層核膜-內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜-細(xì)胞膜細(xì)胞膜(2 2)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和線粒體膜有聯(lián)系。)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和線粒體膜有聯(lián)系。(3 3)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

3、膜和高爾基體不直接相連)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體不直接相連小結(jié)小結(jié): :內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜可通可通過過小泡小泡轉(zhuǎn)化成轉(zhuǎn)化成高爾高爾基體膜基體膜;高爾基體膜又可通高爾基體膜又可通過分泌過分泌小泡小泡形成形成細(xì)細(xì)胞膜胞膜;細(xì)胞膜可以內(nèi)陷形細(xì)胞膜可以內(nèi)陷形成小泡形成高爾基成小泡形成高爾基體體 液泡、葉綠體的膜與其它具膜的結(jié)構(gòu)液泡、葉綠體的膜與其它具膜的結(jié)構(gòu)之間也有一定聯(lián)系之間也有一定聯(lián)系細(xì)胞內(nèi)的生物膜在結(jié)構(gòu)上具有一細(xì)胞內(nèi)的生物膜在結(jié)構(gòu)上具有一定的連續(xù)性。定的連續(xù)性。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向內(nèi)向內(nèi)直接直接向外向外直接直接細(xì)胞膜細(xì)胞膜線粒體線粒體高爾基體高爾基體核膜核膜直接直接間接間接間接間接科學(xué)家用科學(xué)家用標(biāo)記亮氨酸供

4、給豚鼠的胰腺細(xì)胞以標(biāo)記亮氨酸供給豚鼠的胰腺細(xì)胞以合成蛋白質(zhì)。合成蛋白質(zhì)。三、生物膜在功能上的聯(lián)系三、生物膜在功能上的聯(lián)系時時 間間位位 置置3分鐘后分鐘后有核糖體的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有核糖體的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)17分鐘分鐘后后高爾基體高爾基體117分鐘分鐘細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的小泡和釋細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的小泡和釋放到細(xì)胞外的分泌物中放到細(xì)胞外的分泌物中2 2、細(xì)胞的生物膜在功能上的聯(lián)系、細(xì)胞的生物膜在功能上的聯(lián)系核糖體核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小泡小泡高爾基體高爾基體小泡小泡細(xì)胞膜細(xì)胞膜細(xì)胞外細(xì)胞外線粒體線粒體(供能)(供能)(形成蛋白質(zhì))(形成蛋白質(zhì))(粗加工(粗加工)(較成熟的蛋白質(zhì))(較成熟的蛋白質(zhì))(再加工)(再加工)(成熟蛋白質(zhì))(

5、成熟蛋白質(zhì))(小泡與細(xì)胞膜融合)(小泡與細(xì)胞膜融合)由此可見,細(xì)由此可見,細(xì)胞內(nèi)的各種生物膜胞內(nèi)的各種生物膜不但在結(jié)構(gòu)上互相不但在結(jié)構(gòu)上互相連系,在功能上也連系,在功能上也是既有分工又相互是既有分工又相互聯(lián)系的。各種生物聯(lián)系的。各種生物膜的分工合作、相膜的分工合作、相互配合是細(xì)胞生命互配合是細(xì)胞生命活動協(xié)調(diào)進(jìn)行的結(jié)活動協(xié)調(diào)進(jìn)行的結(jié)構(gòu)與功能的基礎(chǔ)。構(gòu)與功能的基礎(chǔ)。細(xì)胞內(nèi)由細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞內(nèi)由細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高爾基體膜、線粒體膜、質(zhì)膜、高爾基體膜、線粒體膜、質(zhì)體膜等膜結(jié)構(gòu)組成的統(tǒng)一整體。體膜等膜結(jié)構(gòu)組成的統(tǒng)一整體。生物膜系統(tǒng)的概念生物膜系統(tǒng)的概念11:使細(xì)胞具有一個相對穩(wěn)定的內(nèi)使細(xì)

6、胞具有一個相對穩(wěn)定的內(nèi)部環(huán)境。在物質(zhì)的運(yùn)輸、能量交換及部環(huán)境。在物質(zhì)的運(yùn)輸、能量交換及信息傳遞中起決定性作用。信息傳遞中起決定性作用。22:增大膜的面積,供酶、核糖體等增大膜的面積,供酶、核糖體等附著在上面。使各種化學(xué)反應(yīng)有序進(jìn)行。附著在上面。使各種化學(xué)反應(yīng)有序進(jìn)行。33:將細(xì)胞分隔成許多小區(qū)室,使各將細(xì)胞分隔成許多小區(qū)室,使各種化學(xué)反應(yīng)能同時進(jìn)行而不互相干擾。種化學(xué)反應(yīng)能同時進(jìn)行而不互相干擾。有助于闡明細(xì)胞的生命活動規(guī)律。有助于闡明細(xì)胞的生命活動規(guī)律。如細(xì)胞與環(huán)境的物質(zhì)交換、細(xì)胞內(nèi)各如細(xì)胞與環(huán)境的物質(zhì)交換、細(xì)胞內(nèi)各種有機(jī)物的合成各運(yùn)輸?shù)取7N有機(jī)物的合成各運(yùn)輸?shù)?。研究生物膜系統(tǒng)的意義:研究生物

7、膜系統(tǒng)的意義:凈化裝置:模擬生物膜選擇性透過原凈化裝置:模擬生物膜選擇性透過原理,對海水、污水進(jìn)行凈化獲得純凈淡水。理,對海水、污水進(jìn)行凈化獲得純凈淡水。農(nóng)業(yè)上農(nóng)業(yè)上農(nóng)作物的抗寒、抗旱、農(nóng)作物的抗寒、抗旱、耐鹽等,均可從膜的結(jié)構(gòu)上找到解耐鹽等,均可從膜的結(jié)構(gòu)上找到解決的方法。決的方法。如,透析型人工腎如,透析型人工腎醫(yī)學(xué)上醫(yī)學(xué)上根據(jù)生物膜的結(jié)構(gòu)、功根據(jù)生物膜的結(jié)構(gòu)、功能原理,可以研制出許多種代用的能原理,可以研制出許多種代用的人體組織與器官。人體組織與器官。鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)1 1、下列屬于分泌蛋白的是、下列屬于分泌蛋白的是(1 1)唾液淀粉酶)唾液淀粉酶 (2 2)抗體)抗體 (3 3)載體)

8、載體 (4 4)呼吸酶)呼吸酶 (5 5)性激素)性激素 (6 6)胰島素)胰島素A A、(、(1 1)()(2 2)()(3 3)()(4 4)B B、(、(2 2)()(3 3)()(4 4)()(5 5)C C、(、(1 1)()(2 2)()(6 6)D D、(、(1 1)()(4 4)C C 右圖是某種淋巴細(xì)胞,膜外顆粒狀右圖是某種淋巴細(xì)胞,膜外顆粒狀物質(zhì)為抗體。據(jù)圖回物質(zhì)為抗體。據(jù)圖回 答:答:(1 1)這是)這是細(xì)胞,它是由細(xì)胞,它是由 分化而來。分化而來。(2 2)抗體從開始合成到分泌出細(xì))抗體從開始合成到分泌出細(xì)胞,經(jīng)過的細(xì)胞結(jié)構(gòu)順序是(填標(biāo)胞,經(jīng)過的細(xì)胞結(jié)構(gòu)順序是(填標(biāo)號)

9、號) ??贵w的分。抗體的分泌說明細(xì)胞的各種生物膜在泌說明細(xì)胞的各種生物膜在 上上具有具有一定的連續(xù)性。并以。并以 的形式轉(zhuǎn)變。的形式轉(zhuǎn)變。 (4 4)抗體的化學(xué)本質(zhì)是)抗體的化學(xué)本質(zhì)是,它能與,它能與 發(fā)發(fā)生特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫效應(yīng)。該過程屬于生特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫效應(yīng)。該過程屬于免免疫的疫的階段。階段。效應(yīng)效應(yīng)B BB B細(xì)胞或記憶細(xì)胞或記憶B B細(xì)胞細(xì)胞結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)小泡小泡線粒體線粒體(3 3)在分泌抗體時要消耗由)在分泌抗體時要消耗由 提供的能量。提供的能量。球蛋白球蛋白相應(yīng)的抗原相應(yīng)的抗原體液體液效應(yīng)效應(yīng)第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)胞工程簡介細(xì)胞工程簡介細(xì)胞工程細(xì)胞工程原理和方法原理和方法研究水平研究

10、水平研究目的研究目的細(xì)胞生物學(xué)和分細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)子生物學(xué)細(xì)胞整體水平細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平或細(xì)胞器水平按照人們的意愿來改按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品或獲得細(xì)胞產(chǎn)品概念概念分類分類植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交 1 1、細(xì)胞細(xì)胞的全能性的全能性概念概念原因原因大小大小受精卵受精卵生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞生物體的生物體的每一個細(xì)胞都含有本物種每一個細(xì)胞都含有本物種的全套遺傳物質(zhì),的全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成完整都有發(fā)育成完整個體的潛能。個體的潛能。生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形生

11、物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成成完整個體的潛能完整個體的潛能。生物體內(nèi)全能性不能表達(dá)的原因:生物體內(nèi)全能性不能表達(dá)的原因:是基因選是基因選 擇性表達(dá)的結(jié)果擇性表達(dá)的結(jié)果全能性表達(dá)的條件全能性表達(dá)的條件離體離體營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)激素激素其他外界條件其他外界條件下列實例中能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是(下列實例中能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是( )用懸浮培養(yǎng)的胡蘿卜單個細(xì)胞也培養(yǎng)成了用懸浮培養(yǎng)的胡蘿卜單個細(xì)胞也培養(yǎng)成了可育的植株可育的植株 植物用種子進(jìn)行繁殖后代植物用種子進(jìn)行繁殖后代煙草組織培養(yǎng)的單個組織培養(yǎng)出了可育的煙草組織培養(yǎng)的單個組織培養(yǎng)出了可育的完整植物。完整植物。A A B B C C D DB (1 1)水和

12、礦質(zhì)元素(大量元素、微量元素)水和礦質(zhì)元素(大量元素、微量元素)(2 2)蔗糖)蔗糖(3 3)維生素)維生素(4 4)有機(jī)添加物(甘氨酸等)有機(jī)添加物(甘氨酸等)(5 5)植物激素(生長素、細(xì)胞分裂素)植物激素(生長素、細(xì)胞分裂素)(6 6)瓊脂)瓊脂1.培養(yǎng)基培養(yǎng)基(固體固體)的成分的成分:愈傷愈傷組織組織根、芽根、芽試管苗試管苗完整完整植株植株脫分化脫分化再分化再分化2過程過程從胡蘿卜根部從胡蘿卜根部切下組織切片切下組織切片組織組織培養(yǎng)培養(yǎng)應(yīng)用應(yīng)用快速繁殖快速繁殖, ,培育無病毒植株培育無病毒植株; ;生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素(如:紫草素)和殺蟲劑;素

13、(如:紫草素)和殺蟲劑;人工種子人工種子轉(zhuǎn)基因植物的培育轉(zhuǎn)基因植物的培育過程過程原理原理植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性離體的器離體的器官、組織官、組織或細(xì)胞或細(xì)胞愈傷愈傷組織組織根、莖根、莖完整完整植株植株脫分化脫分化再分化再分化單倍體育種單倍體育種6,植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交培養(yǎng)基培養(yǎng)基植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交 將兩種植物的體細(xì)胞融合成一個雜種細(xì)胞,將兩種植物的體細(xì)胞融合成一個雜種細(xì)胞,再通過組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成新植物再通過組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成新植物體體= 細(xì)胞融合細(xì)胞融合 + 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)1.概念概念2.原理原理:植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性3.植物植物體

14、細(xì)胞雜交體細(xì)胞雜交與傳統(tǒng)的與傳統(tǒng)的有性雜交有性雜交相同嗎?相同嗎?無性生殖無性生殖 有性生殖有性生殖去除細(xì)胞壁去除細(xì)胞壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體 A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體 B B原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合再生出細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株( (大豆花生大豆花生) )42、誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法物理法:離心、振動、電刺激化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)3.植物體細(xì)胞雜交的意義:植物體細(xì)胞雜交的意義: 克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙,培育出自克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙,培育出自然界中沒有的、具有優(yōu)良品質(zhì)的新品種。然界中沒有的、具有優(yōu)良品質(zhì)的新品種。 實例實例番茄番茄-

15、-馬鈴薯馬鈴薯 白菜白菜甘藍(lán)甘藍(lán)A A種植物的細(xì)胞和種植物的細(xì)胞和B B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如右種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如右圖所示(僅顯示細(xì)胞核),將圖所示(僅顯示細(xì)胞核),將A A、B B兩種植兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合,形成單核的雜種細(xì)胞,若經(jīng)過組體融合,形成單核的雜種細(xì)胞,若經(jīng)過組織培養(yǎng)后得到了雜種植株,則該雜種植株織培養(yǎng)后得到了雜種植株,則該雜種植株是(是( ) A A二倍體;基因型是二倍體;基因型是DdYyRr DdYyRr B B三倍體;基因型是三倍體;基因型是DdYyRrDdYyRrC C四倍體;基因型是四倍體;基因型是DdYyRr

16、DdYyRr D D四倍體;基因型是四倍體;基因型是DDddYYyyRRrrDDddYYyyRRrrC常常用用的的技技術(shù)術(shù)手手段段動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)基礎(chǔ)動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合單克隆抗體單克隆抗體胚胎移植胚胎移植核移植核移植動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細(xì)胞工程技技術(shù)是其他動物細(xì)胞工程技術(shù)的術(shù)的基礎(chǔ)。基礎(chǔ)。1、培養(yǎng)液的成分( (一一) )、動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞培養(yǎng)(1 1)無機(jī)鹽)無機(jī)鹽(2 2)葡萄糖)葡萄糖(3 3)氨基酸)氨基酸(4 4)維生素)維生素(5 5)動物血清)動物血清2 2、培養(yǎng)過程:、培養(yǎng)過程:動物胚胎或幼齡動物動物胚胎或幼齡動物 的組織、器官的組織、器

17、官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液剪碎剪碎 胰蛋白酶胰蛋白酶動物組織細(xì)胞間隙中含有動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組具有一定彈性和韌性的組織和器官??椇推鞴?。10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無限傳代無限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)改變,遺傳物質(zhì)改變,能無限增殖能無限增殖接觸抑制接觸抑制(分解彈性纖維)(分解彈性纖維)4動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用v 生產(chǎn)有價值的蛋白質(zhì)制品,(如病毒疫苗、干生產(chǎn)有價值的蛋白質(zhì)制品,(如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體、動物激素

18、)擾素、單克隆抗體、動物激素)v 檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì)v 3.用于某些器官移植用于某些器官移植P70教材實驗原理:實驗原理:_ 有毒物質(zhì)會使動物細(xì)胞發(fā)生染色體變異有毒物質(zhì)會使動物細(xì)胞發(fā)生染色體變異 制備細(xì)胞懸浮液制備細(xì)胞懸浮液實驗步驟:實驗步驟: 進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng) 制作臨時裝片制作臨時裝片 鏡檢和統(tǒng)計鏡檢和統(tǒng)計結(jié)果分析與結(jié)論結(jié)果分析與結(jié)論 設(shè)計實驗:設(shè)計實驗:驗證某有毒物質(zhì)能使細(xì)胞驗證某有毒物質(zhì)能使細(xì)胞 發(fā)生染色體變異。發(fā)生染色體變異。(3 3)動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較)動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較 原理原理 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 目的目的 應(yīng)用應(yīng)用植物植物組織組織培養(yǎng)培養(yǎng)動物

19、動物細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)大量大量新生新生細(xì)胞細(xì)胞或細(xì)或細(xì)胞產(chǎn)品胞產(chǎn)品單克隆抗單克隆抗體體細(xì)胞的細(xì)胞的全能性全能性固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基:成分:成分主要是礦質(zhì)元素、主要是礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、蔗糖、維生素、植植物激素物激素等等獲得獲得新個體新個體或細(xì)胞產(chǎn)品或細(xì)胞產(chǎn)品快速繁殖試管苗,快速繁殖試管苗,培育無病毒植株;培育無病毒植株;細(xì)胞產(chǎn)品;人工細(xì)胞產(chǎn)品;人工種子;轉(zhuǎn)基因植種子;轉(zhuǎn)基因植物的培育、花藥物的培育、花藥離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)細(xì)胞細(xì)胞的增的增殖殖液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基:成:成分主要是葡萄糖、分主要是葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、維生素、動物血動物血清清動物細(xì)胞融合過程動物細(xì)胞融合過程

20、雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株植物細(xì)胞植物細(xì)胞A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B 原生質(zhì)體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交去壁去壁融合融合組培組培物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法生物法:生物法:滅活的病毒滅活的病毒動物細(xì)胞動物細(xì)胞A動物細(xì)胞動物細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞有何同?不同?有何同?不同?主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用用 途途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法(同左)(同左)滅活的病毒滅活的病毒物理(離心、振物理(離心、振蕩、電刺激)蕩、電刺激)化學(xué)(聚乙二醇)化學(xué)(聚乙二醇)誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞

21、融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的原理動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項目比較項目比較項目比較項目4 4、植物、動物細(xì)胞融合的比較、植物、動物細(xì)胞融合的比較細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞物理法、物理法、化學(xué)法化學(xué)法滅活的病毒滅活的病毒小鼠骨髓瘤細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞篩選篩選 (特定的選擇性培養(yǎng)基)(特定的選擇性培養(yǎng)基)培養(yǎng)培養(yǎng)單克單克隆抗隆抗體體體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到

22、小鼠腹腔注射到小鼠腹腔2次篩選次篩選3次培養(yǎng)次培養(yǎng)培養(yǎng),篩選培養(yǎng),篩選分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞群細(xì)胞群骨髓瘤細(xì)胞?骨髓瘤細(xì)胞?選出能產(chǎn)特定抗體細(xì)胞群、繼續(xù)培養(yǎng)選出能產(chǎn)特定抗體細(xì)胞群、繼續(xù)培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)從培養(yǎng)液從培養(yǎng)液中獲取中獲取促融方法?促融方法?3.單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程原代培養(yǎng)(原代培養(yǎng)(10代)代)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)4050代代細(xì)胞株細(xì)胞株跨跨50代代細(xì)胞系細(xì)胞系用胰蛋白酶處用胰蛋白酶處理成單個細(xì)胞理成單個細(xì)胞抗原?抗原?淋巴細(xì)胞?淋巴細(xì)胞?體內(nèi)培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)從腹水中提取從腹水中提取單克隆抗體單克隆抗體細(xì)胞融合細(xì)胞融合、篩選、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)

23、胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計了一個生產(chǎn)破傷某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計了一個生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答:風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答:()該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?()該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?_原因是原因是_? 圖中圖中為為_過程,常用過程,常用_作誘導(dǎo)劑。作誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了該細(xì)胞繼承了_既能產(chǎn)生既能產(chǎn)生_,又能又能_圖中圖中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),目的是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),目的是_。 不能不能沒有將抗原注射沒有將抗原注射細(xì)胞融合細(xì)胞融合滅活的病毒滅活的病毒雙方細(xì)胞的遺傳物質(zhì)雙方細(xì)胞的遺傳物質(zhì) 大量增殖大量增殖特異性抗體特異性抗體破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可從破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可從_和和_中提取。中提取。選出能產(chǎn)生所

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