1、第四章第四章 滅菌與空氣凈化技術滅菌與空氣凈化技術第一節(jié)、滅菌法一、概述1 、滅菌：指用物理或化學等方法殺滅或除去所有微生物的繁殖體和芽孢的過程。2 、滅菌法：指殺滅或除去所有微生物繁殖體和芽孢的方法或技術?？刂朴泻ξ⑸镏饕幸韵聨追N措施：抑制害菌殺滅抑制徹底殺滅滅菌部分殺滅消毒抑制霉腐微生物防腐抑制宿主體內(nèi)的病原菌化療3、無菌：指在任一指定物體、介質或環(huán)境中，不存在任何活的微生物。4、無菌操作法：指在整個操作過程中利用或控制一定條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一各操作方法或技術。適用對象：不耐熱藥物的注射劑、無菌眼用制劑、皮試液及生物制劑、海綿劑、創(chuàng)傷制劑等。無菌操作場所：無菌潔凈室滅菌法（

2、藥劑）物理滅菌法化學滅菌法5、防腐：指用物理或化學方法抑制微生物的生長與繁殖的手段，也可稱抑菌.6、消毒：指用物理或化學方法殺滅或除去病原微生物的手段。對病原微生物具有殺滅或除去作用的物質稱消毒劑。二、滅菌與無菌技術1 、目的：殺滅或除去所有微生物繁殖體和芽孢，最大限度地提高藥物制劑的安全性，保護制劑的穩(wěn)定性，保證制劑的臨床療效。2 、滅菌法分類：物理滅菌法、化學滅菌法、無菌操作法。 三、物理滅菌法及其主要設備（一）物理滅菌技術是指利用加熱、射線、過濾等物理方法殺滅或除去微生物的方法。1 、干熱滅菌法2 、濕熱滅菌法（藥物制劑最常用方法）3 、過濾滅菌法4 、射線滅菌法日光曝曬紫外線臭氧火焰滅

3、菌法干熱空氣滅菌法干熱濕熱熱壓滅菌法煮沸滅菌法 低溫間歇滅菌法流通蒸汽消毒法1、干熱滅菌法是指利用火焰或干熱空氣進行滅菌的方法。l干熱空氣滅菌法 是指利用高溫干熱空氣進行滅菌的方法。 一般認為繁殖型細菌在100以上干熱1小時即被殺死。耐熱性細菌芽孢在120以下長時間加熱也不死亡，在140前后則殺菌效率急劇增長。 干熱空氣滅菌條件 (1)干熱滅菌條件，藥典規(guī)定為180-200 ，1小時以上；160-170，2-4小時；135-145 ，3-5小時,此是大致的標準而已，必須通過實驗， 在保證滅菌完全同時對滅菌物品無損害的前提下，制訂該物品的干熱滅菌條件。 (2)時間必須由滅菌物品全部達到特定溫度的

4、計算。 應用適用于耐高溫的玻璃制品、金屬制品以及不允許濕氣透過的油脂類(如油性軟膏基質、注射用油等)和耐高溫的粉末化學藥品等。缺點是穿透力弱，溫度不易均勻，需長時間高熱作用才能滅菌。而且由于滅菌溫度過高，不適用橡膠、塑料及大部分藥品。 9 l火焰滅菌法 系指火焰直接灼燒滅菌的方法。 一般需滅菌的器具在火焰中反復灼燒20s以上，或用少量酒精擦拭后，然是即可。 滅菌迅速、可靠、簡便，適用于耐火材質(如金屬、玻璃及瓷器等)的物品與用具，不適合于藥物。 系指利用飽和水蒸氣、流通蒸氣和沸水進行滅菌的方法。 由于蒸氣比熱大，穿透力強，容易使蛋白變性，同時還有作用可靠，操作簡便等優(yōu)點，濕熱滅菌法是應用最廣泛

5、的一種滅菌方法，本法包括熱壓滅菌法，流通蒸氣滅菌法、煮沸滅菌法和低溫間歇滅菌等方法。根據(jù)藥品性質進行選用。 2、濕熱滅菌法 、熱壓滅菌法 系指利用高壓飽和水蒸氣加熱法殺滅微生物的方法。 本法一般公認為最可靠的濕熱滅菌法。 熱壓滅菌所需的溫度及與溫度相應的壓力及時間 115，1.7atm(67kPa，7.1kg/cm2)，30min； 121，2.0atm(97kPa，11kg/cm2)，20min； 126，2.4atm(139kPa，14.1kg/cm2)，15min。 應用大于常壓的水蒸氣，能殺滅所有細菌增殖體和芽孢。熱壓滅菌條件12 應用 熱壓滅菌適用于耐高溫和耐高壓蒸氣的所有藥物制劑、

6、玻璃容器、金屬容器、瓷器、橡皮塞、濾膜過濾器等。13 熱壓滅菌器熱壓滅菌用的滅菌器種類很多，但其基本結構大同小異。 熱壓滅菌器密閉耐壓，有排氣口安全閥，壓力表和溫度計等部件。 有的通蒸氣加熱，有的用煤氣、電熱或木炭等加熱。常用的有手提式熱壓滅菌器等。 14 熱壓滅菌器使用時應注意的問題： (1) 應先進行滅菌條件實驗，確保滅菌效果。滅菌器的構造、被滅菌物體積、數(shù)量、排布均對滅菌的濕度有一定影響。 (2)必須將滅菌器內(nèi)的空氣排出。 如果滅菌器內(nèi)的空氣存在，則壓力表上所表示的壓力是滅菌器內(nèi)蒸氣和空氣二者的總壓而非單純的蒸氣壓力。結果壓力雖然到達預定的水平，但溫度達不到。 若表指示一致。則有可能空氣

7、沒有排盡，也可能壓力表失靈，也可能不是飽和蒸氣，應找出原因，加以解決。 由于水蒸氣被空氣稀釋，妨礙了水蒸氣與滅菌物品的充分接觸，而降低了水蒸氣的滅菌效果。附有真空裝置的熱壓滅菌器，在通入蒸氣前將室內(nèi)空氣抽出，可加快預熱過程，縮短滅菌時間。減壓還可有效地將多孔性物質中空氣驅除，有利于水蒸氣的穿透，同時滅菌器內(nèi)溫度均勻。(3)滅菌時間必須由全部藥液溫度達到所要求的溫度時算起，在開始升溫時，要求一定的預熱時間。 例如250-500ml輸液瓶，預熱時間為15-30分鐘。 一般滅菌器上，均裝有壓力表和溫度計，但通常是測定滅菌器內(nèi)的溫度，而不是被滅菌物內(nèi)的溫度，因此最好能設計直接測定被滅菌物內(nèi)溫度的裝置。

8、 方法是將少量的藥物封裝于安瓿內(nèi)，與滅菌物一起放入滅菌器的上下部位滅菌，滅菌后觀察藥品是否熔化?；瘜W藥品指示劑不能表明保持該溫度的確切時間。將耐熱的芽孢封裝于安瓿內(nèi)浸透于干紙條中，制成生物性指示劑，廣泛地試驗滅菌設備及方法。但用于藥劑的常規(guī)生產(chǎn)中，應使用非致病性、有抵抗力、不產(chǎn)生熱原的菌種，此外，國內(nèi)現(xiàn)已采用滅菌溫度和時間自動控制記錄的裝置。 （4）滅菌完畢后，停止加熱，一般必須使壓力表 所指示的壓力逐漸下降到0，才能放出鍋內(nèi)蒸氣，使鍋內(nèi)壓力與大氣壓相等后，稍稍打開滅菌鍋待1015分鐘，再全部打開。這樣可避免內(nèi)外壓力差太大而使物品沖出鍋外和使玻璃瓶炸裂。這點必須注意，以免發(fā)生工傷事故。為了縮短

9、滅菌周期，也有對滅菌器內(nèi)盛有溶液的容器噴霧水冷卻，以加速冷卻。 流通蒸氣滅菌是在不密閉的容器內(nèi)，用蒸氣滅菌。壓力與大氣壓相等， 即 100的蒸氣滅菌，時間30-60min。 該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌。 缺點：不能保證殺滅所有的芽孢，如破傷風等厭氣性菌的芽孢，制備過程中要盡可能避免污染，這點必須充分注意。 目前我國藥廠生產(chǎn)注射劑，特別是 1-2 ml注射劑及不耐高熱的品種，可考慮采用這種滅菌法。、流通蒸氣滅菌煮沸滅菌法就是把安瓿或其他物品(如注射器、注射針頭等)放入水中煮沸滅菌，一般是100，30-60min。 此法滅菌效果差，必要時加入抑菌劑。、煮沸滅菌法 低溫間歇滅菌法：將待滅菌

10、的制劑或藥品，用60-80加熱1小時，將其中的細菌繁殖體殺死，然后在室溫或孵卵箱中放置 24 小時，讓其中的芽孢發(fā)育成為繁殖體，再二次加熱將其消滅為止。加熱和放置需連續(xù)操作三次以上，至全部芽孢消滅為止。 、低溫間歇滅菌法低溫間歇滅菌法適用于必須用加熱法滅菌但又不耐較高溫度的制劑或藥品。 缺點：時間長，消滅芽孢的效果不夠完全。 應用本法滅菌的制劑或藥品，除本身具有抑菌能力外，須加適量抑菌劑，以增加滅菌效力。1)微生物的種類和數(shù)量：各類細菌對熱的抵抗力相差很大，處于不同發(fā)育階段，所需滅菌的溫度與時間也不相同，繁殖期的微生物對高溫比衰老時期的抵抗力大。、影響濕熱滅菌的因素每個容器的細菌數(shù)，控制在10

11、個以內(nèi)為宜。 最初菌數(shù)愈少，達到滅菌時間愈短。 最初菌數(shù)增多也增加了耐熱個體出現(xiàn)的機率。即使細菌全部殺滅，而注射液中細菌體過多，亦會引起臨床上的不良反應，所以整個生過過程應盡可能避免微生物污染，盡可能縮短生產(chǎn)過程，并力求在灌封后立即滅菌。 抗熱能力 芽孢繁殖體衰老體。 2）蒸氣性質：蒸氣有飽和、濕飽和、過熱蒸汽三種，飽和水蒸汽滅菌效果最好。 3）注射液的性質：注射液若含有營養(yǎng)物質，如糖類,蛋白質等，對微生物可能有一種保護作用，能增強其抗熱性。4)pH：藥液pH對細菌的活性也有影響。 一般微生物在中性液中耐熱性最大，在堿性溶液中次之；酸性不利于微生物的發(fā)育。所以，一般在生物堿鹽類的注射液，因pH

12、 較低，用流通蒸氣滅菌即可。26 加有適當抑菌劑時，藥液經(jīng)100，30分鐘加熱， 可殺死抵抗力強芽孢。 所用的抑菌劑：甲酚(0.1-0.3%)、氯甲酚(0.05-0.1%)、三氯叔丁醇(0.2-0.5%)、苯酚(0.1-0.5%) 、 硝酸苯汞或醋酸苯汞(0.001-0.002%)。 27 溫度增高，化學反應速度增加，時間愈長，起反應的物質愈多。因此，不能只看到滅菌殺死細菌的一面，也要看到保證藥物有效性的一面。為此在能達到滅菌的前提下，可適當降低溫度或縮短滅菌時間。 實踐證明在力求避免微生物污染和嚴格質量控制的條件下，維生素C注射液用流通蒸氣滅菌15分鐘，氯化鈉注射液用115，滅菌30分鐘是可

13、行的。 5)藥物的穩(wěn)定性：3、射線滅菌 系采用輻射、微波和紫外線殺死微生物和芽孢的方法。 1）、輻射滅菌 系采用放射性同位素素 (60Co和137Cs)放射的射線殺死微生物和芽孢的方法，射線可破壞細菌DNA而致其死亡。 輻射滅菌劑量一般為2.5104Gy(戈瑞)。應用與特點 適合于熱敏物料和制劑，常用于維生素、抗生素、激素、生物制品、中藥材和中藥制劑、醫(yī)療器械、藥用包裝材料及藥用高分子材料等。 不升高產(chǎn)品溫度，穿透力強，滅菌效率高，但設備貴，有潛在危險性， 對某些藥物(特別是溶液型） 可能產(chǎn)生藥效降低或產(chǎn)生毒性物質和發(fā)熱物質等。 2）、微波滅菌 系采用微波(頻率為300MHz-300kMHz)

14、照射產(chǎn)生熱能殺死微生物和芽孢的方法。 適合于液體和固體物料，對固體物料有干燥作用。 特點是能穿透到介質和物料深部，表里加熱一致， 且具有低溫、常壓、高效、快速(2-3min)、低能耗、無污染、易操作、易維護，產(chǎn)品保質期長(可延長1/3以上)等。 濕度過大可降低滅菌效果，相對濕度以45-60比較適宜。溫度宜于10-55范圍。 紫外線燈管必須保證無塵油垢，否則輻射強度將大力為降低。 普通玻璃可吸收紫外線，因此安瓿中藥物不能用此法滅菌。 3）紫外線滅菌法一般用于滅菌的紫外線波長是200-300nm，滅菌力最強的是波長為254nm的紫外線。 紫外線進行直線傳播，其強度與距離平方成比例地減弱，并可被不同

15、的表面反射。其穿透作用微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水，其中懸浮物或水中鹽類增多時，則穿透程度顯著下降。所以紫外線廣泛作空氣滅菌和表面滅菌之用。紫外線對人體如照射過久，能產(chǎn)生結膜炎及皮膚燒灼等現(xiàn)象。一般均在操作前開啟紫外線燈約半小時至一小時，然后進行操作。 各種規(guī)格的紫外線燈，皆規(guī)定了有效使用時間，一般為3000小時。故每次使用應登記開啟時間，并定期進行滅菌效果的檢查，也可用具有對254nm靈敏的照度計，來測定其輻射強度。 紫外線的殺菌效率，還取決于微生物的敏感性。如在一平面上輻射強度為通常應用的最小強度 2mw/cm2 (30瓦紫外線燈于距1米處強度為85mw/cm2) 時殺死枯草桿菌芽孢

16、需1100秒，而對溶血性鏈球菌，則僅需275秒。 可粗略認為在紫外線燈下直接暴露，一般繁殖型微生物約3-5分鐘，芽孢約10分鐘即可死亡。紫外線對酵母特別是霉菌殺菌力較弱。4、過濾除菌法 過濾除菌法是使藥物溶液通過無菌的特定濾器，除去活的或死的微生物而得到不含微生物的濾液。 適于不耐熱的藥液的滅菌。 (1)能有效除凈微生物，溶液通過濾器順暢，濾器容易清洗，操作簡便。 (2)孔徑大小必須足以阻止細菌和芽孢進入濾孔之內(nèi)，大約為0.2m（芽孢體積大小約0.5m)。 過濾除菌的濾器要求： (3)采用微孔薄膜作滅菌濾器，一般選用孔徑 0.22m的濾膜。 (4) G6號垂熔玻璃漏斗，其濾孔直徑在0.15m以

17、下，可以除去細菌，對藥物不吸附， 也不影響藥液的pH，是常用滅菌濾器。四、化學滅菌法 本法是指用化學藥品直接作用于微生物而將其殺死，同時不應損害制品的質量，常用的方法有： (一)氣體滅菌法 采用氣態(tài)或蒸汽狀態(tài)殺菌劑進行滅菌的方法。(1)環(huán)氧乙烷 環(huán)氧乙烷沸點為10.9，室溫下為氣體， 在水中溶解度很大，1ml水中可溶195ml(20，760mmHg)，易穿透塑料，紙板及固體粉末，暴露于空氣中環(huán)氧乙烷就可從這些物質消散，環(huán)氧乙烷對大多數(shù)固體呈惰性。環(huán)氧乙烷的殺菌作用，由于其為烷化劑的性質，使菌體蛋白的-COOH、-NH2、-SH、-OH的H，被-CH2-CH2-OH所取代。 可用于塑料容器、對熱

18、敏感的固體藥物、紙或塑料包裝的藥物、橡膠制品、注射筒、注射針頭、衣著敷料及器械等。但是，一些塑料、皮革及橡膠與環(huán)氧乙烷有強親和力，故需長達12-24小時通空氣驅除。環(huán)氧乙烷具可燃可爆，用時需用惰性氣體二氧化碳或氟利昂稀釋。 環(huán)氧乙烷的吸入毒性較大與氨相近，無氨樣的剌激嗅味，損害皮膚及眼粘膜，可產(chǎn)生水泡或結膜炎，故應用時要注意。 用環(huán)氧乙烷滅菌的程序：將滅菌物品置于滅菌器內(nèi)后，減壓排除空氣，預熱，環(huán)氧乙烷采用混合氣，一般用環(huán)氧乙烷12氟利昂88或用環(huán)氧乙烷10二氧化碳90，在減下輸入混合氣，保持一定濃度、濕度、及溫度，經(jīng)過一定時間后，抽真空排除環(huán)氧乙烷，然后送入無菌空氣完全排除環(huán)氧乙烷的濃度為8

19、50-900mg/L(3小時、45)，45mg/L(5小時，45)，相對濕度以40-60為宜濕度為22-55。 (2)臭氧滅菌法臭氧是一種強氧化劑，滅菌過程屬生物化學氧化反應。O3滅菌有以下3種形式：1.臭氧能氧化分解細菌內(nèi)部葡萄糖所需的酶，使細菌滅活死亡。 2.直接與細菌、病毒作用，破壞它們的細胞器和DNA、RNA，使細菌的新陳代謝受到破壞，導致細菌死亡。 3.透過細胞膜組織，侵入細胞內(nèi)，作用于外膜的脂蛋白和內(nèi)部的脂多糖，使細菌發(fā)生通透性畸變而溶解死亡。 臭氧滅菌的優(yōu)點：臭氧滅菌為溶菌級方法，殺菌徹底，無殘留，殺菌廣譜，可 殺滅細菌繁殖體和芽孢、病毒、真菌等，并可破壞肉毒桿菌毒素。另外，O3

20、對霉菌也有極強的殺滅作用。O3由于穩(wěn)定性差，很快會自行分解為氧氣或單個氧原子，而單個氧原子能自行結合成氧分子，不存在任何有毒殘留物，所以，O3是一種無污染的消毒劑。O3為氣體，能迅速彌漫到整個滅菌空間，滅菌無死角。而傳統(tǒng)的滅菌消毒方法，無論是紫外線，還是化學熏蒸法，都有不徹底、有死角、工作量大、有殘留污染或有異味等缺點，并有可能損害人體健康。如用紫外線消毒，在光線照射不到的地方?jīng)]有效果，有衰退、穿透力弱、使用壽命不長等缺點?；瘜W熏蒸法也存在不足之處，如對抗藥性很強的細菌和病毒，則殺菌效果不明顯。 (3)氣化雙氧水滅菌法又稱氣化過氧化氫，對細菌及其芽孢具有較強的殺滅作用，濃度為35%的雙氧水通過

21、雙氧水發(fā)生器氣化，即可對被滅菌物進行殺菌。滅菌溫度范圍：4-80，一般室溫即可。（二）、應用化學殺菌劑 在制劑工業(yè)上應用化學殺菌劑，其目的在于減少微生物的數(shù)目，以控制無菌狀況至一定水平。 化學殺菌劑并不能殺死芽孢，僅對繁殖體有效。 化學殺菌劑的效果，依賴于微生物的種類及數(shù)目，物體表面光滑或多孔與否，以及化學殺菌劑的性質。 常用的有0.1-0.2新潔爾滅溶液，75酒精等。 由于化學殺菌劑常施用于物體表面，也要注意其濃度不要過高，以防其化學腐蝕作用。 五、無菌操作法 無菌操作法在技術上并非滅菌操作，是整個過程控制在無菌條件下進行的一種操作方法。 適用于一些不耐熱藥物的注射劑、眼用劑、皮試液、海綿劑

22、和創(chuàng)傷制劑的制備。 無菌操作柜分小型無菌操作與聯(lián)合無菌操作兩種。 小型無菌操作柜又稱單人無菌柜，式樣有單面式與雙面式兩種。 聯(lián)合無菌操作柜是由幾個小型操作柜聯(lián)合制成，以使原料的精制，傳遞分裝及成品暫時存放等工作全部在柜內(nèi)進行。 近年來，采用層流潔凈工作臺作無菌操作，使用方便，效果可靠。無菌操作場所：(一)無菌操作前工作 無菌操作前無菌操作室或無菌操作所用的一切用具、材料以及環(huán)境均須應用滅菌法滅菌： 定期應用環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醇或乳酸等對空氣進行較徹底的滅菌。 每天工作前開啟紫外線一小時，中午休息時間也要開0.5-1小時。 ) 用3%酚溶液、2%煤酚皂溶液、0.2新潔爾滅溶液或75酒精等用對室

23、內(nèi)的空間、用具(桌椅等)、地面、墻壁等噴灑或擦試。 其它用具：盡量用熱壓滅菌法或干熱滅菌法滅菌。44 (二)無菌操作 操作人員進入操作之前要洗澡并換上已經(jīng)滅菌的工作服和清潔的鞋子，不使頭發(fā)、內(nèi)衣等露出來，以免造成污染機會。 安瓿要150-180，2-3小時干熱滅菌；橡皮塞要以121，1小時熱壓滅菌；有關器具、機器都要經(jīng)過滅菌。 用無菌操作法制備的注射劑， 大多要加入抑菌劑。 小量無菌制劑的制備，也可在無菌操作柜中進行。六、無菌檢查法 藥劑或藥品經(jīng)滅菌或無菌操作法處理后，需經(jīng)無菌檢驗證實已無微生物生存，方能使用。 滅菌效果，應以殺死芽孢為標準(細菌的芽孢具有較強的的抗熱力，不易殺死)。 在藥劑中

24、選擇滅菌方法，與微生物學上的要求不盡相同，要達到滅菌的目的，且要保證藥穩(wěn)定性。 法定的無菌檢查法，包括有試管接種法和薄膜過濾法。 薄膜過濾用于無菌檢查的突出優(yōu)點，在于可濾過較大量的樣品可濾除抑菌性物質，濾過后的薄膜，即可直接接種于培養(yǎng)基管中，或直接用顯微鏡觀察，故此法靈敏度高，不易產(chǎn)生假陰性結果，檢測次數(shù)減少，節(jié)省培養(yǎng)基，操作比較簡單。七、 滅菌參數(shù) 1、D值 D值為在一定溫度下殺死被滅菌物品中微生物90所需時間；也可定義為降低微生物一個十位數(shù)或一個對數(shù)值（如log100降低到log10）所需的時間。微生物致死時間曲線與D值微生物死亡速度屬一級過程。 dN/dt=-kt，即lgN0-lgNt=

25、kt/2.303 D=t=2.303(lg100-lg10)/k D值因微生物的種類、環(huán)境、滅菌溫度不同而各異。 2、Z值在不同溫度下對特定的微生物在特定介質或環(huán)境中求得D值后，Z值為降低一個lgD值所需升高的溫度數(shù)，即滅菌時間減少到原來的 1/10時所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需要提高的溫度。 Z=(T2-T1)/(lgD2-lgD1)，即D2/D1=10(T2-T1)/Z F(或F0)值可作用驗證滅菌可靠性的參數(shù)。 F值 F為在一定溫度(T)，給定Z值所產(chǎn)生的干熱滅菌效果與參比溫度(T0)給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當?shù)臅r間，以分為單位。3、F值與F0值 F

26、= t10(T-T0)/Z t是測量被滅菌物溫度的時間間隔，一般為0.5-1.0或更小，T是每個t測量被滅菌的溫度，T0是參比溫度。 F0值 F0值為在一定滅菌溫度(T)、Z值為10所產(chǎn)生的濕熱滅菌效果與121， Z值為10所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當?shù)臅r間(min)。 物理F0=t10(T-121)/Z 也就是說F0是將各種滅菌溫度使微生物的致死力轉換為滅菌物品完全暴露于121使微生物致死效力。 F0值的計算對于驗證滅菌效果極為有用，當產(chǎn)品以121濕熱滅菌時，滅菌器內(nèi)的溫度雖能迅速升到 121，而被滅菌物品內(nèi)部則不然，由于包裝材料性能及其他因素影響而使升溫度各異，而F0將隨著產(chǎn)品溫度(T)變

27、化而呈指數(shù)的變化，故溫度即使很小的差別(如0.1-1)將對F0 值產(chǎn)生顯著的影響。同時要求測定滅菌物品內(nèi)的實際溫度，故用F0 來監(jiān)測滅菌效果有重要的意義。由于F0 是將不同滅菌溫度折算到相當于 121濕熱滅菌時的效力，故F0 值可作為滅菌過程的比較參數(shù)。 影響F0值的因素： 容器大小、形狀及熱的穿透性等。 滅菌產(chǎn)品溶液的性質、填充量等。 容器在滅菌器中的數(shù)量及分布等。4、 F與F0值在滅菌中的意義與作用 主要原因：滅菌溫度多系測量滅菌器內(nèi)的溫度，不是滅菌物體內(nèi)的溫度；無菌檢驗方法也存在局限性，難以用現(xiàn)行的無菌檢驗法檢出微量的微生物。 無菌檢驗往往難以檢出極微量微生物，為了保證產(chǎn)品無菌，對滅菌方

28、法的可靠性進行驗證是很必要的。 第二節(jié)第二節(jié) 潔凈室與空氣凈化技術潔凈室與空氣凈化技術空氣潔凈技術:就是指為了達到必要的空氣潔凈度，而對空氣進行各種凈化處理，去除空氣中的塵粒，細菌，微生物，氣味等污染物質。使之滿足生產(chǎn)工藝和人體健康需要的一種手段。 空氣潔凈技術措施是一項涉及各專業(yè)的綜合性措施。不僅要采取合理的凈化空調措施，而且要求工藝、建筑、上下水、電氣等專業(yè)采取相應的措施，做到施工、安裝、生產(chǎn)、維護的嚴格要求。 空氣凈化：是以創(chuàng)造潔凈空氣為目的空氣調節(jié)措施 。 工業(yè)潔凈室以控制塵粒的為主。 潔凈室 生物潔凈室以控制細菌和微生物的為主。一、潔凈室的凈化標準及含塵濃度的測定1、潔凈室的凈化標準

29、潔凈室：對潔凈環(huán)境中空氣潔凈度（包括塵埃和微生物）、溫度、濕度、壓力和噪聲進行控制的密閉空間。 粒徑、數(shù)粒徑、數(shù)值潔凈值潔凈度級別度級別塵埃最大允許數(shù)塵埃最大允許數(shù)/ /立方米立方米微生物最大允許數(shù)微生物最大允許數(shù)0.5um0.5um5um5um浮游菌浮游菌/ /立方米立方米沉降菌沉降菌/ /皿皿100 100 級級3,5003,5000 05 51 110,000 10,000 級級350,000350,0002,0002,0001001003 3100,000 100,000 級級3,500,0003,500,00020,00020,0005005001010300,000 300,000

30、 級級10,500,00010,500,00060,00060,0001515我國GMP中潔凈空氣潔凈度標準醫(yī)藥工業(yè)潔凈室以空氣潔凈度為主要控制對象，同時還控制其他相關參數(shù)。注：潔凈室之間按潔凈度等級高低依次相連，潔凈室要保持正壓，彼此間需有壓差。室溫：18-26相對濕度： 45%-65%2、潔凈室含塵濃度和微生物的測定（1）含塵濃度測定光散射式粒子計數(shù)法濾膜顯微鏡計數(shù)法（2）活微生物測定是確定空氣中浮游的生物微粒濃度和生物沉降密度。沉降菌的測定通過自然沉降原理將空氣中的生物粒子收集于培養(yǎng)基平皿上，在30-35條件下培養(yǎng)48h，使其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，來判定潔凈環(huán)境內(nèi)活微生物數(shù)量。浮游菌

31、的測定浮游菌宜選用撞擊法機理的采樣器，一般采用狹縫式或離心式采樣器，利用真空或內(nèi)部風扇使空氣中的活微生物粒子撞擊并沉積在培養(yǎng)基上，然后培養(yǎng)計數(shù)。二、潔凈室的空氣凈化技術及主要設備空氣濾過法：當含塵空氣通過具有多孔過濾介質時，塵粒被孔壁吸附或截留而與空氣分離，達到空氣凈化的目的。1、 空氣過濾機理 空氣過濾的機理：屬于介質過濾，制藥工業(yè)空氣凈化所采用濾材有玻璃纖維、泡沫塑料、無紡布等，其過濾機理有下述幾種。 1）攔截作用：含塵氣流通過纖維層時，若塵粒的粒徑小于密集的纖維間隙時，或塵粒與纖維發(fā)生接觸時，塵粒即被纖維阻留。 2）慣性作用：含塵氣體通過纖維時，氣體流線發(fā)生繞流，但塵粒由于慣性作用徑直前

32、進與纖維碰撞而附著。這一作用隨氣速和粒徑的增大而增大。3）擴散作用：由于氣體分子熱運動對微粒的碰撞而使粒子產(chǎn)生布朗運動，因擴散作用便與纖維接觸而被附著。塵徑越小、氣速越低，擴散作用越明顯。4）靜電作用：含塵氣流通過纖維時，由于摩擦作用，塵粒和纖維都可能帶上電荷，由于電荷作用，塵?？赡艹练e在纖維上。5）其他：重力作用，分子間力等。影響過濾效果的因素 ：1）塵粒的粒徑：塵粒的粒徑越大，慣性作用和攔截作用越顯著，過濾效果越高；反之，粒徑越小，擴散作用越顯著。通常用0.3m左右的塵粒檢測高效過濾器的過濾效果。 2）過濾速度：隨著濾速的增加，慣性作用增大；反之，減小風速，擴散作用增大。對高效過濾器，為減

33、小阻力，并充分利用擴散作用濾塵，所以濾速要小。3）纖維直徑和密實性：纖維直徑減小時，過濾效率提高，故高效過濾器的濾材選用直徑只有幾微米的纖維。纖維密實性增加，氣速增加，慣性和攔截作用提高，但阻力增加得比效率大得多，故過濾器的纖維密實性應適當。 4）附塵影響：隨著塵粒在纖維表面沉積，過濾效率有所增加。但積塵到一定程度后，塵?？赡苤匦嘛w散，效率不斷下降。舊過濾器積塵很多，既增加阻力又降低風量，故過濾器阻力或積塵量增加到一定程度后需要進行更換。 2、空氣過濾的影響因素3、空氣過濾器的特性b特性指標：過濾效率，穿透率和凈化系數(shù)，濾過器阻力，容塵量。（1）過濾效率反映過濾除去的含塵量 在一定風量下，過濾

34、前后空氣含塵濃度變化與過濾前含塵濃度之比。=（C1-C2）/C1越高，代表除塵能力越強。 （2）穿透率（K）與凈化系數(shù)（Kc） 穿透率指過濾后含塵濃度與過濾前含塵濃度之比，即： 穿透率表示微粒穿透過濾器的程度。凈化系數(shù)以穿透率的倒數(shù)表示：穿透率率越高，凈化系數(shù)越低，濾過效率則越低。（3）容塵量及壽命 容塵量：容塵量表示過濾器允許沾塵的最大量，超過此值過濾器阻力過大，效率下降。v 容塵量是指正常運行的過濾器阻力（終阻力）達到規(guī)定值（一般為初阻力的2倍）時，或效率下降到初始效率的 85以下時過濾器上沉積灰塵的質量。（4）濾過器阻力以濾過器進出口的壓差表示。濾器的阻力隨著積塵量的增加而增大，當增至最

35、初阻力的2倍時，需更換，此時阻力稱為終阻力。4、空氣過濾器的種類空氣過濾器，按其空氣過濾器的效率分為三種，即初效過濾器、中效過濾器和高效過濾器。 性能指標性能指標 名名 稱稱規(guī)定風量下的效率規(guī)定風量下的效率（% %）規(guī)定風量下的初規(guī)定風量下的初阻力（阻力（PaPa）粒徑（粒徑（mm）大氣塵計數(shù)大氣塵計數(shù)效率效率初效過濾器初效過濾器5.05.0808020205050中效過濾器中效過濾器1.01.0707020208080高中效過濾高中效過濾器器1.01.0999970701001001）初效過濾器：初效過濾器一般由粗、中孔泡沫塑料、滌綸無紡布、化纖組合濾料等作為濾材。初效過濾器主要靠塵粒的慣性

36、沉積，因此風速可稍大，濾速可采用0.41.2m/s。過濾效率一般在20一30。 初效過濾器可制成平板型、抽屜型、自動卷繞人字型等形狀。 初效過濾器（a）金屬網(wǎng)格濾網(wǎng)；（b）過濾器外形；（c）過濾器安裝方式2）中效過濾器：中效過濾器一般由中、細孔泡沫塑料、無紡布、玻璃纖維作為濾材。過濾效率一般在 3050。濾速可采用0.20.4m/s。圖為抽屜式及袋式中效過濾器。 3）高效過濾器和亞高效過濾器：v 高效過濾器主要采用超細玻璃纖維濾紙、石棉纖維濾紙作為濾材；亞高效過濾器用玻璃纖維濾紙或短棉絨纖維濾紙作濾材。前者過濾效率99.91，后者為9099.9。v 為提高對微小塵粒捕集效果，需采用低濾速，故濾

37、材需多次折疊，使其過濾面積為過濾器截面積的5060倍。v 過濾器形狀如圖。v 濾紙間以波紋板分隔。v 過濾器構造尺寸為：v 484mm X 484mm X 220mm，v 過濾面積為12m2，5、潔凈室空氣凈化系統(tǒng)初效風機中效中效潔凈室新風排風回風初效風機中效高效潔凈室新風排風回風中效空氣凈化系統(tǒng)高效空氣凈化系統(tǒng)三、潔凈室氣流組織v 氣流組織指對潔凈室內(nèi)的氣流流向和均勻度按一定要求進行組織。潔凈室凈化空調的氣流組織有單向流（層流）及非單向流（亂流）二種，其中單向流又可分為垂直單向流與水平單向流。對潔凈度100級需采用單向流，100級以下采用非單向流。v 單向流是指在潔凈室中空氣沿著平行流線，以

38、一定流速、單一通路、單一方向流動的氣流；v 非單向流是指具有多個通路循環(huán)特性或氣流方向不平行的，不滿足單向流定義的氣流。1.單向流潔凈室原理 最早的單向流（平行流）潔凈定是在1961年出現(xiàn)在美國，當時稱層流潔凈室。單向流潔凈室還可分為：垂直單向流潔凈室和水平單向流潔凈室兩大類，氣流流線示意圖如下垂直單向流潔凈室水平單向流潔凈室 單向流潔凈室不是靠潔凈氣流對室內(nèi)臟空氣摻混稀釋作用，而是靠潔凈氣流推出作用將室內(nèi)含塵空氣沿整個斷面排到室外，達到凈化室內(nèi)空氣的目的。單向流潔凈室原理示意垂直單向流潔凈室的主要特點1.能達到最高潔凈級別2.室內(nèi)工藝設備可以任意布置3.自凈能力強，簡化人身凈化設施4.造價高

39、水平單向流潔凈室的主要特點1.對建筑高度要求不高2.潔凈室兩端長度較長，沿氣流方向潔凈度不同垂直單向流的斷面風速需在025m/s以上，故室內(nèi)換氣次數(shù)400次/h左右，因此造價、運轉費用了高。為克服塵粒中途沉降，斷面風速不小于0.35m/s。 亂流潔凈室原理示意圖 亂流潔凈室的作用原理是：當一般干凈氣流從送風口送入室內(nèi)時，迅速向四周擴散、摻混，同時把差不多同樣的氣流從回風口排走，這股干凈氣流稀釋著室內(nèi)污染的空氣，把原來含塵濃度很多的室內(nèi)空氣沖淡，保證室內(nèi)所需要的空氣潔凈度等級。所以氣流擴散得越快，越均勻，稀釋的效果就越好。一句話，亂流潔凈室的原理就是稀釋作用。室內(nèi)潔凈度也就與稀釋程度有關，亦即與

40、換氣次數(shù)有關。10000級潔凈度的換氣次數(shù)25次/h，100000級則15次/h。 2.亂流（非單向流）潔凈室原理亂流（非單向流）流型D密集流線型激流器頂送雙側下回；E孔板頂送雙側下回；F上側送同側下回；G帶擴散板高效過濾器風口頂送下側回H無擴散板高效過濾器風口頂送下側3.局部凈化局部凈化方案： 以凈化空調器或局部凈化設備(如潔凈工作臺、棚式垂直層流單元、層流罩等)，在一般環(huán)境中造成局部區(qū)域具有一定潔凈度級別環(huán)境的凈化處理方式叫局部凈化。 這種方式適合于生產(chǎn)批量較小或利用原有廠房進行技術改造的場所。局部凈化比較經(jīng)濟，當全室凈化不能滿足要求或沒必要全室都這高要求時，可采用全室空氣凈化與局部空氣凈

41、化相結合的方式。超凈凈工作臺和空氣自凈器是常用的局部凈化裝置。右圖為潔凈工作臺 ，在一般環(huán)境下局部潔凈度可達100級。四、潔凈室基本布局及其他凈化措施1、潔凈室建筑結構要求v 潔凈區(qū)的內(nèi)表面v 潔凈區(qū)的密封性v 潔凈區(qū)門的設置v 工藝流程布局v 潔凈區(qū)內(nèi)水電設施v 潔凈區(qū)的照明v 潔凈區(qū)內(nèi)的操作臺要求v 潔凈區(qū)內(nèi)使用的壓縮空氣的要求v 水池、地漏等2、潔凈室主要控制參數(shù)1）溫濕度 一般溫度控制在18-26，濕度45%-65%。2）壓差 相鄰房間靜壓差5Pa,潔凈室與室外大氣壓的靜壓差大于10Pa，產(chǎn)塵量達到操作室保持負壓。3）照明 潔凈室根據(jù)生產(chǎn)需求提供足夠的照明。廠房有應急照明設施。4）新風量 保持一定量的新鮮空氣。3、人員和物料凈化措施1）人員凈化非無菌及可滅菌產(chǎn)品生產(chǎn)潔凈室人員凈化程序：換鞋 脫外衣 洗手 穿潔凈工作服 手消毒 氣閘室 非無菌區(qū)潔凈室不可滅菌產(chǎn)品生產(chǎn)潔凈室（區(qū)）人員凈化程序：換鞋 脫外衣 脫內(nèi)衣 洗手臉腕 穿無菌內(nèi)衣 穿無菌外衣 換無菌鞋 手消毒 氣閘室 無菌潔凈室2）物料凈化進入潔凈室的原輔料、包裝材料必須有一定的凈化措施。u 脫包u 傳遞u 傳輸4、潔凈室消毒1）紫外消毒2）臭氧消毒3）氣體熏蒸法4）化學藥液及其他滅菌五、不同劑型的空氣潔凈度級別要求 根據(jù)各種劑型質量要求及其生產(chǎn)過程的特點，其生產(chǎn)環(huán)境潔凈度要求有所不同。見表4-2和表4-3（4）滅菌完畢