1、同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院檢驗科免疫組項目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ511第2版標(biāo)題：葉酸(FOL)測定第5章 第11號第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的：測定血清或其它體液中葉酸(FOL)的含量。2. 適用范圍：同濟醫(yī)院檢驗科免疫室。3. 項目名稱：葉酸(FOL)測定。4 檢測方法：電化學(xué)發(fā)光法。檢測原理：使用Elecsys 2010電化學(xué)發(fā)光分析儀，采用夾心法。用釕標(biāo)記抗體,通過抗原-抗體反應(yīng)與待測抗原結(jié)合，再加入生物素標(biāo)記的抗體和鏈霉親和素包被的微磁粒子，通過生物素-親和素反應(yīng)形成釕標(biāo)-抗體-待測抗原-生物素-鏈霉親和素-微磁粒子復(fù)合物。在電場作用下，通過加

2、入TPA產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，反應(yīng)釋放出的光子量與待測抗原的濃度相關(guān)，在參照標(biāo)準(zhǔn)曲線后可以由機器自動測算出待測抗原（FOL）的濃度。6 試劑：6.1 品牌：德國Roche公司。6.2 包裝規(guī)格：100人份。6.3 內(nèi)含物：6.3.1 鏈霉親和素包被的微磁粒子溶液（透明蓋子），1瓶，6.5ml；6.3.2 生物素結(jié)合的抗FOL抗體（灰色蓋子），1瓶，10ml；6.3.3 釕標(biāo)記的抗FOL抗體（黑色蓋子），1瓶，10ml；7 儀器：Elecsys 2010電化學(xué)發(fā)光分析儀。8 操作步驟：8.1 打印工作單：8.1.1 打開電腦及打印機電源,8.1.2 雙擊齊效檢驗系統(tǒng),登入自己的工號與密碼；8.1.

3、3 雙擊報告處理,單擊標(biāo)本申請信息打開標(biāo)本申請明細(xì)信息查詢,打開左上角的所有信息,選擇未生成報告信息。8.1.4 在檢驗項目處選擇FOL執(zhí)行查詢,點擊打印申請單，打印出工作單。8.2 上機操作：8.2.1 開機前準(zhǔn)備：從冰箱中取出FOL試劑置于室溫中預(yù)溫。8.2.2 打開Elecsys 2010主機電源，等待系統(tǒng)自檢，系統(tǒng)自檢結(jié)束后在Status菜單中輸入操作者ID號。8.2.3 檢查庫存：從主菜單選擇Inventory，檢查并補充Tip、Cup，蒸餾水，ProCell，CleanCell；將ProCell和CleanCell的蓋子打開。8.2.4 裝載試劑：打開試劑艙蓋，裝入檢測項目試劑，注

4、意先打開試劑瓶蓋及開蓋方向，關(guān)閉試劑艙蓋，進入Inventory菜單中進行Reagent Scan（試劑掃描）。8.2.5 裝載標(biāo)本：在Orders菜單中從Sample ID欄輸入樣本號，確認(rèn)；從Disk欄輸入盤號（預(yù)先已設(shè)置為多盤），確認(rèn)；從Pos欄輸入位置號，確認(rèn)；選擇所需檢測的項目，Register。將樣本按照設(shè)置的順序放到樣本架中。8.2.6 使用條形碼的標(biāo)本管按以下步驟操作：在LIS系統(tǒng)中按工作單給與樣本號，選擇生成報告單儀器讀取數(shù)據(jù)條碼排樣選擇儀器下載排樣上傳儀器。8.2.7 測試：按Start鍵開始測試，測試過程中通過Status菜單監(jiān)控工作狀態(tài)。8.2.8 在加樣全部結(jié)束后，按

5、smpl.stop鍵停止繼續(xù)掃描樣本架或在樣本最后位置放置終止條碼。8.2.9 查看結(jié)果：當(dāng)天測試結(jié)果可以在Status菜單點擊位置號查看；過往結(jié)果可以在Results菜單中根據(jù)樣本號及序列號查看。8.2.10 檢測全部結(jié)束后，按stop鍵，待機器回到stand by狀態(tài)后，在在Utility菜單中選擇Maintenance，執(zhí)行Finalization Maintenance。8.3 儀器自動操作流程：樣本20ul生物素結(jié)合的抗FOL抗體釕標(biāo)記的抗FOL抗體鏈霉親和素包被的微磁粒子孵育9分鐘復(fù)合物吸入檢測池ProCell清洗檢測CleanCell清洗（檢測用時9分鐘）。8.4 結(jié)果：儀器自動記錄結(jié)果并傳輸?shù)絃IS系統(tǒng)后發(fā)送報告。9 線性范圍：0-20ng/ml。10參考范圍：4.2-19.9ng/ml。11臨床意義：葉酸降低見于巨幼紅細(xì)胞貧血；攝入不足或需要量增加；腸吸收不良；利用障礙；惡性貧血和再生障礙性貧血等疾?。?2病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：標(biāo)本為血清時最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。13注意事項：13.1 血液采集后，應(yīng)盡快分離血清。當(dāng)日不能測定者應(yīng)置-20以下保存，避免反復(fù)凍溶。