1、生長激素發(fā)展史生長激素產(chǎn)品的發(fā)展歷程1995-, E. Coli 分泌型表達(dá)技術(shù)和蛋白質(zhì)水相穩(wěn)定技術(shù)相結(jié)合1987年-, E. Coli 和小鼠C127細(xì)胞分泌型表達(dá)技術(shù)1985-2004, E. Coli 包涵體技術(shù)1958-1985, 人垂體中提取人垂體源性GH192AA-rhGH 粉劑帶注射裝置的191AA-rhGH粉劑191AA-rhGH 水劑長效 制劑1999年-微球，透明質(zhì)酸、PEG 化學(xué)修飾等長效技術(shù)的應(yīng)用191AA-rhGH 粉劑90年代至今：配套注射裝置技術(shù)不斷發(fā)展抗體的減少和注射裝置的進(jìn)步滿足了對安全性和依從性的需求，推動了生長激素的發(fā)展長效制劑水劑帶預(yù)混裝置的粉劑使用注射

2、器的粉劑依從性減少外源病毒帶來的安全隱患從人垂體提取到基因工程192AA減少因一級結(jié)構(gòu)不一致帶來的抗體從192AA到191AA避免了使用過程中的細(xì)菌，微生物及玻璃碎屑帶來的污染注射裝置技術(shù)的發(fā)展減少與天然空間結(jié)構(gòu)不一致帶來的抗體從粉劑到水劑192AA粉劑191AA粉劑配套注射裝置191AA水劑長效制劑賽高路（深圳科興）（2010年退市）Protropin（羅氏）(2004年退市）賽增（金賽藥業(yè)）Nutropin（羅氏）Norditropin（諾和諾德） Humatrope（禮來）Omnitrope（山德士）Genotropin（輝瑞）Saizen（雪蘭諾）Eutropin（LG）TEV-TRO

3、PIN（輝靈）Nutropin AQ Pen/ NuSpin（羅氏）NordiPen/Flexpro（諾和諾德）Humatropen（禮來）Omnitrope Pen（山德士）Genotropin Pen/Mixer（輝瑞） Cool-click/ Easypod（雪蘭諾）賽增（金賽藥業(yè)）Nutropin AQ（羅氏）Norditropin（諾和諾德）Saizen/Serostim LQ（雪蘭諾）金賽增（金賽藥業(yè)）Nutropin Depot（羅氏）Eutropin Plus（LG）在研中：PEG-GH（美國Ambrx公司）PEG-GH（德國Ascendis公司）微粒技術(shù)（英國Critical

4、公司）融合鈦技術(shù)：美國Versartis公司）國內(nèi)外主要生長激素廠家產(chǎn)品發(fā)展歷程金賽的產(chǎn)品發(fā)展史與國際趨勢一致2014年2005年1998年 國際第一支PEG化長效水劑-金賽增抗體零檢出，免疫原性更低避免短效制劑用藥后濃度的波動，療效更穩(wěn)定注射頻率大幅度降低，長期用藥依從性更好第一階段第二階段第三階段亞洲第一支rhGH注射液-賽增水劑抗體零檢出，活性更高、起效更快、長期使用更安全。國內(nèi)第一支注射用rhGH-賽增粉劑國家標(biāo)準(zhǔn)品原料：比其他國產(chǎn)粉劑，純度更高、安全性更好。臨床數(shù)據(jù)表明rhGH水劑均不產(chǎn)生抗體劑型產(chǎn)品生產(chǎn)廠家抗體發(fā)生率粉劑Nutropin 1Roche( Genentech)8/41

5、3=1.9 %Humatrope 1Eli Lilly 1.6 %思真 1 Merck SeronoGHD: 3/226=1.33 %TS: 1/84=1.19 %水劑Nutropin AQ 1(Roche)Roche（Genetnech )GHD: 0/107=0 %CRI: 0/125=0 % TS: 0/112=0 %ISS: 0/117=0 %賽增水劑 2金賽藥業(yè)0/111=0 %PEG化長效生長激素 2金賽藥業(yè)0/291=0 % 1.數(shù)據(jù)來自國外廠家的注冊臨床試驗2.數(shù)據(jù)來自金賽PEG化長效II和III臨床試驗國內(nèi)外近千例臨床研究數(shù)據(jù)顯示：目前已上市的rhGH水劑均不產(chǎn)生抗體。rhG

6、H粉劑無論是采用E.coli 或小鼠C127體系技術(shù)，都會有抗體產(chǎn)生。水劑無需冷凍干燥，保持了蛋白質(zhì)天然構(gòu)象粉劑的生產(chǎn)工藝：冷凍使水分子體積增大擠壓蛋白質(zhì)，造成空間結(jié)構(gòu)的改變；干燥失水破壞蛋白質(zhì)表面的水化膜，暴露極性基團(tuán)，易發(fā)生聚合，增加聚合體的產(chǎn)生。水劑的生產(chǎn)工藝：無需冷凍干燥，保持了蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象，不增加聚合體的產(chǎn)生，抗體零檢出。蛋白質(zhì)液體穩(wěn)定技術(shù) 冷凍干燥技術(shù) 空間結(jié)構(gòu)一致 不增加聚合體 空間結(jié)構(gòu)改變 增加聚合體抗體零檢出易產(chǎn)生抗體水劑粉劑原液粉劑傅里葉紅外光譜圖水劑傅里葉紅外光譜圖凍干過程使GH結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,螺旋減少，折疊增加水劑保持了100%的天然結(jié)構(gòu)-折疊-螺旋分子間-折疊1、E

7、ffect of Excipients on the Stability and Structure of Lyophilized Recombinant Human Growth Hormone (HENRY R.COSTANTINO, etal. Journal of Pharmaceutical Sciences,Vol.87,No.11,November 1998)水劑保持天然結(jié)構(gòu)的直接證據(jù)-冷凍干燥會對GH的空間結(jié)構(gòu)造成破壞紅外光譜試驗證據(jù)顯示：凍干過程會使蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)造成不可逆的破壞，-螺旋比例僅為29%3。水針劑型未經(jīng)凍干過程，-螺旋比例為57%3，與天然結(jié)構(gòu)一致（60%）任

8、何凍干保護(hù)劑都不能替代水分子，無法完全保持蛋白質(zhì)的天然結(jié)構(gòu)。 -螺旋比例最高一組只達(dá)到48%保護(hù)劑:rhGH=131:1（D乳糖）添加凍干保護(hù)劑后測定-螺旋比例-螺旋1、 GUIDELINE ON IMMUNOGENICITY ASSESSMENT OF BIOTECHNOLOGY-DERIVED THERAPEUTIC PROTEINS.Doc. Ref. EMEA/CHMP/BMWP/14327/2006,London, 24 January 2007.抗體導(dǎo)致的免疫原性是評價生物制品安全性的關(guān)鍵因素1生長激素藥物的免疫原性應(yīng)以風(fēng)險管理為基礎(chǔ)，需要長期評估目前市場上的生長激素粉劑均有抗體產(chǎn)

9、生，無法避免免疫原性的風(fēng)險，臨床需要長期評估歐盟藥品評審中心在2007年頒布的生物來源治療性蛋白質(zhì)藥物免疫原性評價指導(dǎo)原則中指出：生物來源治療性蛋白質(zhì)藥物可能會導(dǎo)致臨床免疫反應(yīng)，應(yīng)以風(fēng)險管理為基礎(chǔ)，收集有效性和安全性數(shù)據(jù)以充分了解免疫反應(yīng)的臨床后果。處方制劑選擇的原則是：最佳的保持治療性蛋白質(zhì)藥物的天然結(jié)構(gòu)。兒童是抗體發(fā)生的高危人群，免疫復(fù)合物的危害可能嚴(yán)重到威脅生命。粉劑注射過程中會帶來玻璃碎屑、細(xì)菌微生物的污染1、關(guān)于淘汰直頸安瓿等落后包裝的決定中國醫(yī)藥管理局 國藥物字88第311號2、J Nurs UFPE on line., Recife, 7(spe):4899-909, July.

10、, 2013 安瓿瓶打開藥品溶解國家醫(yī)藥管理局指出：“使用安瓿等玻璃容器包裝注射劑，在折斷時產(chǎn)生玻璃屑落入藥液中，危及人民身體健康” 1抽取注射用水配套裝置的進(jìn)步降低了注射過程的風(fēng)險生長激素水針劑配套裝置的演變配套裝置的更新?lián)Q代也體現(xiàn)了與生長激素注射方式相關(guān)安全性的提升Nutropin AQ Pen（2002年）-配合卡式瓶使用，可替換卡式瓶Nutropin AQ NuSpin-GH預(yù)裝填-卡式瓶不能替換NordiLet-一次性多劑量注射筆，預(yù)灌rhGHNordiPen-多次用注射筆，與卡式瓶配套使用FlexPro插針頭即用式注射筆，預(yù)灌rhGHGenentech（Roche）公司粉劑注射系統(tǒng)發(fā)展Novo Nordisk公司粉劑注射系統(tǒng)發(fā)展NordiFlex一次性多劑量注射筆，預(yù)灌rhGH水劑的卡式瓶包裝和注射筆系統(tǒng)確保使用過程更安全避免了微粒、微生物污染避免注