1、第十九章免疫學(xué)檢測第十九章免疫學(xué)檢測第十九章免疫學(xué)檢測課件第十九章免疫學(xué)檢測課件（二）抗原抗體反應(yīng)的主要影響因素 1.抗原、抗體反應(yīng)的濃度、比例 2.電解質(zhì) 3.溫度 4.酸堿度第十九章免疫學(xué)檢測課件第十九章免疫學(xué)檢測課件三、血清學(xué)反應(yīng)的種類（一）凝集反應(yīng)（agglutination） 1.直接凝集反應(yīng)（direct agglutination） 是指顆粒性抗原（凝集原）與相應(yīng)的抗體（凝集素）直接結(jié)合所呈現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。如紅細(xì)胞ABO血型的測定，細(xì)菌凝集試驗。第十九章免疫學(xué)檢測課件 2.間接凝集反應(yīng) （indirect passive agglutination） 是可溶性抗原或抗體吸附于與免疫

2、無關(guān)的微球載體上，形成致敏顆粒，與相應(yīng)的抗體或抗原在電解質(zhì)存在的條件下進(jìn)行反應(yīng)，出現(xiàn)凝集。第十九章免疫學(xué)檢測課件第十九章免疫學(xué)檢測課件（二）沉淀反應(yīng)（precipetation） 是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在合適的電解質(zhì)存在下，出現(xiàn)肉眼可見的沉淀現(xiàn)象。 1.單向瓊脂擴(kuò)散試驗 2.火箭電泳 3.雙向瓊脂擴(kuò)散試驗 4.對流免疫電泳（二）沉淀反應(yīng)（precipetation）第十九章免疫學(xué)檢測課件第十九章免疫學(xué)檢測課件第十九章免疫學(xué)檢測課件第十九章免疫學(xué)檢測課件（三）補(bǔ)體結(jié)合試驗 （complement fixation test，CFT) 是在補(bǔ)體參與下，以綿羊紅細(xì)胞和溶血素作為指示系統(tǒng)，來檢測未知

3、抗原或抗體的試驗。第十九章免疫學(xué)檢測課件（四）中和反應(yīng)（nertralization） 毒素、酶、激素或病毒等與其相應(yīng)的抗體結(jié)合后，導(dǎo)致生物活性的喪失。 1.病毒中和反應(yīng) 2.毒素中和反應(yīng) 第十九章免疫學(xué)檢測課件（五）免疫標(biāo)記技術(shù) 1.免疫酶技術(shù) 2.免疫熒光技術(shù) 3.放射免疫測定 4.免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)（五）免疫標(biāo)記技術(shù)第十九章免疫學(xué)檢測課件 第二節(jié) 免疫細(xì)胞的檢測一、免疫細(xì)胞的分離（一）外周血單個核細(xì)胞的分離（二）T、B及其它免疫細(xì)胞的純化（三）免疫磁珠分離法（四）熒光激活細(xì)胞分離儀分離法二、免疫細(xì)胞的計數(shù)（一）花環(huán)形成試驗（二）熒光抗體染色 第二節(jié) 免疫細(xì)胞的檢測第十九章免疫學(xué)檢測課件三

4、、免疫細(xì)胞功能的檢測（一）T細(xì)胞功能的測定 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗:T細(xì)胞在體外受特異性抗原或有絲分裂原（PHA、ConA等）刺激后，能轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。試驗時取外周血，分離淋巴細(xì)胞，加入有絲分裂原或特異性抗原，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)72小時，經(jīng)涂片染色后鏡檢計算轉(zhuǎn)化百分率。三、免疫細(xì)胞功能的檢測（二）B細(xì)胞功能的檢測1.空斑形成細(xì)胞檢測（plaque formingcell，PFC） 是動物體外檢測B細(xì)胞功能的方法。2.定量溶血分光光度法（QHS） 又稱B細(xì)胞介導(dǎo)的紅細(xì)胞定量溶血分光光度法，反映機(jī)體的體液免疫功能。3.酶聯(lián)免疫斑點試驗（二）B細(xì)胞功能的檢測（三）其他淋巴細(xì)胞功能的檢測 1.NK 細(xì)胞活性測定 （1）NK細(xì)胞自然殺傷功能的檢測 （2）ADCC試驗 2.LAK細(xì)胞活性測定（四）吞噬細(xì)胞功能檢測 1.中性粒細(xì)胞吞噬功能的測定 2.大吞噬細(xì)胞的檢測（三）其他淋巴細(xì)胞功能的檢測 第三節(jié) 細(xì)胞因子的檢測一、細(xì)胞生物學(xué)活性檢測法二、免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)法三、分子生物學(xué)方法 人類干擾素的檢測 白細(xì)胞介素-1