檢驗(yàn)技術(shù)資格考試指南濃縮筆記RBC計(jì)數(shù)液中硫酸鈉用于提高相對(duì)比密防止粘連，氯化高汞是防腐劑。HiCN法的缺點(diǎn)：KCN有毒，HbC。轉(zhuǎn)化慢，高白血球和高球蛋白易混濁。試驗(yàn)后處理應(yīng)加入（先用水稀釋，再用次氯酸鈉混勻敞開放置15小時(shí)使CN氧化為N2和C02或C03和NH4。遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的小細(xì)胞中生理性中心淡染區(qū)消失。堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞多見于鉛秘汞中毒，是鉛中毒的篩選指標(biāo)?？úㄊ檄h(huán)是胞質(zhì)中脂蛋白變性所致，常與染色體小體同在，見于巨幼紅和鉛中毒。LFR,MFR,HMR分別是低，中，高熒光率。良性腫瘤ESR多正常，惡性腫瘤ESR多增加，低色素性貧血，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥,鐮狀貧血時(shí)ESR減低。桿狀核過5%或有幼稚細(xì)胞為核左移，中性粒分葉5葉以上超3%為核右移。鉤蟲病E細(xì)胞可達(dá)90%以上。E細(xì)胞白血病時(shí)亦可，但以幼稚為主。E計(jì)中乙醇或丙酮是保護(hù)E細(xì)胞而破壞其它，伊紅或石楠紅是使E著色，一小時(shí)內(nèi)計(jì)數(shù)。中性粒細(xì)胞毒性變化有：中毒顆粒，空泡，Doles小體，退行性變。異形淋巴細(xì)胞多為T淋，分空泡，不規(guī)則，幼稚三型。淋巴細(xì)胞有衛(wèi)星核，即微核,是射線損傷后較為特殊的形態(tài)。白血病時(shí)血小板（MPV）增高是骨髓恢復(fù)的第一征兆。ABO遺傳基因位于第9號(hào)染色體長臂三區(qū)四帶，腦脊液中無血型物質(zhì)，抗A與抗B主要是IgM,。型血中以IgG為主。新生兒不宜做反向定型。新生兒溶血的直接實(shí)驗(yàn)依據(jù)：紅細(xì)胞直接抗人球蛋白陽性。HLA分型的方法主要有：1淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)，一類抗原用T或外周淋，二類抗原用B。2混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)3HLA基因分析。強(qiáng)直性脊椎炎有91%帶有B27抗原而正常人只有6%。血液保存液有：1,ACD（A枸椽酸C枸椽酸三鈉D葡萄糖）2,CPD（C枸椽酸三鈉P磷酸鹽D葡萄糖腺喋吟枸椽酸）。枸椽酸是防止葡萄糖在消毒中焦化，腺噪吟促進(jìn)ATP合成延長紅細(xì)胞壽命，磷酸鹽提高PH。輸粒細(xì)胞時(shí)用ABO和Rh血型相同的血液，一般BPC小于二萬時(shí)可輸血。糖尿病酮癥：爛蘋果味，泌尿系感染和膀胱癌：腐敗臭味，苯丙酮尿癥：老鼠屎味。尿液滲透濃度（OSM）是檢查尿中可滲透溶質(zhì)各質(zhì)點(diǎn)實(shí)際濃度的一種指標(biāo)，與粒子大小及電荷無關(guān)，主要取決于小分子物質(zhì)的濃度，是評(píng)價(jià)腎濃縮功能的良好指標(biāo)。晨尿比密不過1.018,或差值在0.001-0.002間,或恒定在1.010時(shí)說明腎濃縮功能已完。低血鉀堿中毒尿酸性高，高血鉀酸中毒呈堿性尿，變形桿菌感染呈堿性，腎小管性酸中毒時(shí)尿PH值不低于6。本周氏蛋白多見于多發(fā)性骨髓瘤，尿肌紅蛋白多見于骨骼肌嚴(yán)重創(chuàng)傷大面積心梗。選擇性蛋白尿指數(shù)（SPI）即測(cè)定尿及血中IgG或白蛋白的比值來求得，大于0.2為選擇性差，小于0.1為選擇性好，尿中白蛋白/球蛋白大于5時(shí)為選擇性蛋白尿。80%飽和硫酸鏤可沉淀其它蛋白而不能沉淀肌紅蛋白可用來簽別。管型的基質(zhì)蛋白為Tamm-Horsall蛋白。腎靜脈血栓形成時(shí)紅細(xì)胞管型可能是唯一的表現(xiàn)。尿PH（甲基紅或漠麝香草酚），尿比密（多聚電解質(zhì)：甲乙烯酸馬來酎），尿蛋白（濱酚藍(lán)），尿糖（色原：碘化鉀，鄰甲聯(lián)苯胺），尿酮體（亞硝基鐵氟化鈉），尿膽紅素（2,4二氯苯胺重氮鹽），尿膽原（二甲氨基甲醛）尿亞硝酸鹽（對(duì)氨基苯碑酸和1234四羥基對(duì)苯唯琳3酚）尿白細(xì)胞（口引跺酚酯）尿血紅蛋白（過氧化氫茴香素或過氧化氫烯鉆和色原）尿維C（中性紅，緩沖劑，二氯酚靛酚鈉）。產(chǎn)后九天或人流25天后HCG恢復(fù)正常，產(chǎn)后四天人流十三天后HCG應(yīng)小于1000,男性尿中HCG增高要考慮睪丸腫瘤。鏡檢糞便中脂肪小滴大于6個(gè)/HP視為脂肪排泄過多。正常糞便中G+球菌與G-桿菌比值約1：10。隱抱子蟲是AIDS和兒童腹泄重要病原診斷要查到卵囊。正?？崭故r(shí)后胃液殘余量為50MLO腦脊液抽取時(shí)：第一管：作細(xì)菌學(xué)檢查，第二管:作生化免疫學(xué)檢查，第三管：作細(xì)胞計(jì)數(shù)。單純皰疹腦炎時(shí)腦脊液中淋巴樣細(xì)胞中可發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)包涵體。粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞漿細(xì)胞同時(shí)存在是結(jié)核性腦膜炎的特點(diǎn)。蛋白一細(xì)胞分離現(xiàn)象（Froin綜合癥）是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻所致梗阻腦脊液的特征。髓鞘堿性蛋白（MBP）增高見于多發(fā)性硬化癥。神經(jīng)性梅毒檢查首選試驗(yàn)是密螺旋體熒光抗體吸收試驗(yàn)（FTA—ABC）o漿膜積液常規(guī)及細(xì)胞學(xué)用EDTA抗凝，生化用肝素，一管不加抗凝用于觀察有無凝固。漏出液以淋，間皮細(xì)胞為主，滲出液以中粒，淋，嗜酸性為多。如見到纖毛柱狀上皮和塵細(xì)胞可確認(rèn)為痰液標(biāo)本。夏科一雷登結(jié)晶常與EC,庫施曼螺旋體共存，見于支哮喘和肺吸蟲。原粒胞質(zhì)少，透明天蘭色，無顆粒，早幼胞質(zhì)多含紫紅色非特異性的天青胺蘭顆粒。原紅邊際有鈍狀或瘤狀突起，有核周淡染區(qū)，網(wǎng)織紅內(nèi)含嗜堿性物質(zhì)，單核進(jìn)入組織內(nèi)形成巨噬細(xì)胞。正常骨髓片中原巨核為0,一張血片中可見巨核細(xì)胞為7—35個(gè)。正常過氧化物酶染色原粒陰性，嗜堿陰性，嗜酸陽性最強(qiáng)，單核只有幼單和單核呈弱陽性反應(yīng)，其它除吞噬細(xì)胞有陽性外都是陰性反應(yīng)，異常時(shí)急粒原粒陽性。過碘酸一雪夫氏反應(yīng)：巨核和血小板+為紅色斑塊，霍奇金+/-,戈謝+,尼曼—皮克：+/-且空泡中心為陰性反應(yīng)，腺癌++。堿性磷酸酶染色除成熟中性粒和巨噬外其它都是陰性，積分值(NAP)指100個(gè)中性粒中陽性比例，參考以一個(gè)加號(hào)為基準(zhǔn)，參考值是7—51。慢粒的NAP積分值常為零，類白血病時(shí)NAP顯著升高。酸性磷酸酶染色：戈謝氏+,尼克一皮克一，多毛細(xì)胞白血病+。鐵染色可作為診斷缺鐵貧和指導(dǎo)鐵劑的臨床，鐵粒幼貧血時(shí)多有環(huán)鐵粒紅細(xì)胞，其中難治性貧血占15%以上。2P35表示2號(hào)染色體短臂3區(qū)5帶，人類染色體在有絲分裂中期基本特征最典型清晰。核型：指用顯微攝影的方法得到的單個(gè)細(xì)胞中所有染色體的形態(tài)特點(diǎn)和數(shù)目，它代表該個(gè)體的一切細(xì)胞的染色體組成。其核型中符號(hào)代表的意義：t：易位，inv：倒位，iso：等臂染色體，ins：插入，丟失，+：增加，P：短臂，q：長臂，接下第一括號(hào)內(nèi)是累及染色體的號(hào)數(shù)，第二括號(hào)內(nèi)是累及染色體的區(qū)帶?；兎?jǐn)?shù)目和結(jié)構(gòu),原發(fā)和繼發(fā)。培養(yǎng)的羊水細(xì)胞有三種形態(tài)：上皮，成纖維，羊水。特異性染色體有：慢粒時(shí)的ph染色體：，急早幼粒：t(15;17)(q22;q21),Burkitt淋巴瘤：t(8;14)(q24;q32)0貧血時(shí)：極重度：《30G/L,重度：30—60,中度：60—90,輕度：90—120o血漿游離蛋白(40MG/L,管內(nèi)溶血時(shí)上升。血清結(jié)合珠蛋白(HP)：0o8—2o7G/L增高見于妊娠，慢感，惡性腫瘤，減低見于溶血，肝病，巨幼貧等。AGLT50:指酸化甘油溶血試驗(yàn)中溶血率按光密度減至50%所需的時(shí)間來計(jì)算.蔗糖溶血試驗(yàn)為PHN簡易重要試驗(yàn)(+),酸化血清溶血試驗(yàn)是PHN的確正試驗(yàn).抗堿血紅蛋白測(cè)定又稱堿變性試驗(yàn),胎兒血紅蛋白(HBF)具有抗堿和抗酸作用.總鐵結(jié)合力與血清鐵的臨床意義基本相反:缺鐵則總鐵結(jié)合力增高,肝臟腎臟疾病時(shí)血清鐵有可能升高.血清鐵/總鐵結(jié)合力*100%=轉(zhuǎn)鐵蛋白包和度(20—55%),臨床缺鐵分三期:缺鐵期，缺鐵性紅細(xì)胞生成期，缺鐵性貧血期.紅細(xì)胞既有低色素又有正色素為“雙形性”，是缺鐵粒幼細(xì)胞貧血的特征，且環(huán)形鐵粒幼占15%以上.急性白血病:某一原始細(xì)胞大于30%預(yù)后小于六個(gè)月.慢性白血病:某一系白細(xì)胞增多接近成熟為主,原始細(xì)胞不過10%.中國急性白血病分型:M1,原始粒細(xì)胞白血病未分化型，原粒大于或等于90%,早幼粒少，中幼以下階段不見或少見,POX,SBC(+)的原粒大于3%.M2,原始粒細(xì)胞白血病部分分化型，有M2a,M2b兩型,M2a中原粒大于30%小于90%,單核小于20%,早幼粒以下階段大于10%,M2b以異常的中性中幼粒增生為主大于30%,有Phi@小體存在.M3急性早幼粒細(xì)胞白血病，心顆粒增多的異常早幼粒細(xì)胞增生為主，大于30%可見束狀A(yù)ner小體，依顆?？煞諱3a,M3b,M4,粒一單核細(xì)胞白血病,按粒單比例可分M4a,M4b,M4c,M4e（嗜酸性細(xì)胞5—3%）,M5,單核細(xì)胞白血病,以分化程度分M5A,未分化型，原單大于或等于80%M5B,部分分化型,M6紅白血病，紅系大于或等于50%,紅系PAS陽性，原粒大于30%異常幼紅細(xì)胞大于10%時(shí)也可診斷.M7,巨核細(xì)胞白血病原巨核大于30%.CD:即細(xì)胞表面分化抗原.CD7,CyCD3同屬檢測(cè)T—急淋的最敏感指標(biāo)，但只表達(dá)CD7+不能診斷,CD25是激活T.B細(xì)胞的標(biāo)記,Smlg（細(xì)胞膜表面免疫球蛋白）和EM（小鼠紅細(xì)胞受體）是B細(xì)胞成熟的特征性標(biāo)志CD19反應(yīng)譜廣，是鑒別全B系的敏感而又特異的標(biāo)記CD10,為診斷Common—ALL的必需標(biāo)記,CyCD22用于檢測(cè)早期B細(xì)胞來源的急性白血病是相當(dāng)特異和敏感的,CD14,為單核細(xì)胞特有，抗髓過氧化物酶（MPO）為髓系特有,CD34為造血干細(xì)胞標(biāo)記,CD38為造血祖細(xì)胞標(biāo)志,CD41a,CD41b,CD61,血小板過氧化物酶（PPO）為巨核系特有,Cylg+,PC—1+FCA+是漿細(xì)胞的胞質(zhì)特點(diǎn).急淋可分為:L1,L2,L3三型,AML1基因重排可作為本病基因診斷的標(biāo)志.漿細(xì)胞白血?。篧BC高BPC少血片中漿細(xì)胞多至20%以上骨髓增生活躍，糖原與核糖核酸染色均陽性。多毛細(xì)胞白血?。喝?xì)胞少，多毛細(xì)胞的特征：胞體大小不一直徑為10-20微米（似大淋）毛發(fā)突出的特點(diǎn)是邊緣不整齊有許多不規(guī)則纖絨突起，活體染色時(shí)優(yōu)。約有48—60%病例呈干抽，POX,NAP,SB染色陰性ACP陽性。骨髓增生異常（MDS）：貧血BPC,WBC少。有異形粒細(xì)胞（Pelgerbuet樣變），可有大而畸形的火焰血小板。非霍奇金淋巴瘤的組織病理：淋巴細(xì)胞型，組織細(xì)胞型（網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤），混合細(xì)胞型，未分化型。玫瑰花結(jié)試驗(yàn)：綿羊陽為T淋，小鼠和EAC陽為B淋。多發(fā)性骨髓瘤:單一漿細(xì)胞增生,紅細(xì)胞常呈“緡前狀”，早期骨髓呈灶性分布，異常漿細(xì)胞一般5—10%。尿中可有漿細(xì)胞和B—J蛋白（除不分沁型），CA高P和ALP正?；蚋?，可伴尿毒癥，免疫電泳有“M”成份：70%lgG,23—27%IGA,IgD少，IgE罕見。血小板上有鈉泵和鈣泵。細(xì)胞器主要有：A顆粒，致密顆粒，溶酶體顆粒。TXA2是腺甘酸環(huán)化酶的重要抑制劑促進(jìn)血管收縮。血小板功能：黏附，聚集，釋放，促凝，收縮，維護(hù)內(nèi)皮完整性。血小板糖蛋白測(cè)定：GP舊缺乏見于巨大血小板綜合征，GPIIB/IIIA缺乏見于血小板無力癥。依賴維生素K凝血因子：Fil,FVII,FIX,FXo接觸凝血因子：FXILFXI,PK（激肽釋放酶原）。對(duì)凝血酶敏感的凝血因子：Fl,FV,FVIII,FXIIIo內(nèi)源途徑指FXII被激活到FIXA-VIIIA-CA-PF3o外源途徑指從TF到TF-FVIIA-CA。PT11秒到14秒，過3秒異常。PTR（凝血酶原比值，受檢值/正常對(duì)照），INR（國際標(biāo)準(zhǔn)化比值）：要先求ISI（國際敏感指數(shù)）：所用組織凝血活酶與ISI已知的國際參比品相比較的值。ISI二已知ISI*斜率。ISI值低,試劑敏感度高。INR=PTRISI。血友病是VIII,IX,XI因子異變。DIC時(shí)，優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間（ELT）?？s短小于70分，血漿魚精蛋白副凝固試驗(yàn)（3P）在DIC失代償時(shí)為陽性，血清FDP高大于40mg/l,是DIC診斷中最敏感指標(biāo)之一。ATTP是監(jiān)測(cè)普通肝素的首選指標(biāo)。PT是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的首選指標(biāo)。生化學(xué)：糖酵解：葡萄糖至乳糖。葡萄糖一葡萄糖6磷酸（已糖激酶，不可逆，1ATP）—果糖6磷酸（磷酸已糖異構(gòu)酶）一1,6果糖二磷酸（6磷酸果糖激酶，最重要點(diǎn)，不可逆，1ATP）-磷酸丙糖（醛縮酶，可逆）---3磷酸甘油醛一磷酸烯醇式丙酮酸一（經(jīng)丙酮酸激酶）-烯醇式丙酮酸和ATP（不可逆）。可生成2分子ATPo糖有氧氧化：糖酵解產(chǎn)物NADH進(jìn)入線粒體一丙酮酸經(jīng)其脫氫酶復(fù)合體氧化脫竣一乙酰COA（關(guān)鍵不可逆）是進(jìn)入三竣酸循環(huán)的開端（特點(diǎn)：檸檬酸合成A-酮成二酸為不可逆，故三竣亦不可逆，無凈分解也無凈合成，氧化乙酰COA的效率取決于草酰乙酸的濃度，限速步驟是異檸檬酸脫氫酶，是變構(gòu)酶ADP是激活劑，ATP和NADH是其抑制劑?？缮?6或38ATPO糖異生：非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)為葡萄糖。肝臟，是體內(nèi)單糖生物合成唯一途徑，有四個(gè)關(guān)鍵酶：葡萄糖6磷酸酶，果糖1,6二磷酸酶，丙酮酸竣化酶，磷酸烯醇式丙酮酸激酶。血糖受神經(jīng)，激素，器官調(diào)節(jié)。升高血糖：胰高血糖素，糖皮質(zhì)激素，生長激素，腎上腺素。降低血糖：胰島素（B細(xì)胞分泌，其靶細(xì)胞受體是酪氨酸特異蛋白激酶，糖尿病分型：1型：內(nèi)生胰島素或C肽缺，易出酮癥酸中毒，高鉀血癥，多發(fā)于青年人。2型：多肥胖，具有較大遺傳性，病因有生物活性低,基因突變，分泌功能障礙。3特異型4妊娠期糖尿病。LPL（脂蛋白脂肪酶）活性依賴胰/胰高比值。慢性糖尿病人可有：A-晶體蛋白糖基化而白內(nèi)障，并發(fā)血管病變以心腦腎最重。糖尿病急性代謝合并癥有：酮癥酸中毒（DKA,高血糖，高酮血癥，代謝性酸中毒），高血糧高滲性糖尿病昏迷（NHHDC腎功能損害，腦血組織供血不足），乳酸酸中毒（LA）o血漿滲透壓二2（NA+K）+血糖濃度。靜脈血糖〈毛細(xì)血管血糖〈動(dòng)脈血糖。不能立即檢查應(yīng)加含氟化鈉的抗凝劑。腎糖閾：8.82—9.92O了解腎糖閾的方法：六點(diǎn)空腹取血,尿，餐后七點(diǎn)，八點(diǎn)再取血，尿分別測(cè)血糖，尿糖。如果三次血糖都小于8.82而測(cè)出血糖，說明腎糖閾低,如果都大于11.02而無尿糖，則高。糖耐量試驗(yàn)：禁食10—16,5分鐘內(nèi)250毫升75克葡萄糖水每30分鐘取血一次。糖化蛋白與糖尿病血管合并癥有正相關(guān)。糖化Hb：可分為HbAIA,HbAIB,HbAIC（能與葡萄糖結(jié)合），測(cè)定時(shí)主要測(cè)HbAI組份或HbAIC（4%-6%）,反映前8周水平，主要用于評(píng)定控制程度和判斷預(yù)后。糖化血清蛋白：類似果糖胺，2—3周，用硝基四氮哇籃法或酮胺氧化酶法，C肽的測(cè)定可以更好地反映B細(xì)胞生成和分泌胰島素的能力。乳酸測(cè)定時(shí)加入L-谷氨酸使之與丙酮酸反應(yīng)隨時(shí)除去反應(yīng)產(chǎn)物使反應(yīng)向右。血糖恒定主要是保證中樞神經(jīng)供能（腦細(xì)胞用能完全來自糖）。血糖降低反應(yīng)的閾值是：4.6o低血糖癥狀是指腦缺糖和交感神經(jīng)興奮。胰島B細(xì)胞瘤臨床特點(diǎn)：空腹或餐后4—5發(fā)作，腦缺糖比交感神經(jīng)興奮明顯，有嗜睡或昏迷，30%自身進(jìn)食可緩解故多肥胖。糖分解代謝異常：丙酮酸激酶（PK）缺乏病,丙酮酸脫氫酶復(fù)合物缺乏癥，磷酸果糖代謝異常。血脂由中性脂肪和類脂。電泳圖：乳糜微粒，B-脂蛋白,前B脂蛋白，A-脂蛋白。超速離心法：乳糜微粒（APOB48）,VLDL,IDL,LDL,LP（A）,HDL（密度從小到大，分子從大到?。?。CM90%含TG,VLDL中TG占一半以上，IDL（膽固醇含量最高）中載脂蛋白以APOB100為主，LP（A）由一分子的APOB100和APO（A）以單個(gè)雙硫鍵相連，與纖溶酶原有同源性，可作為動(dòng)脈硬化性心血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因素指標(biāo),直接在肝中產(chǎn)生。HDL（apoa1和apoa4）中脂質(zhì)和蛋白質(zhì)各占一半。肝臟是載脂蛋白合成部位。脂蛋白受體是位于細(xì)胞膜上能與脂蛋白結(jié)合的蛋白質(zhì)。LDL受體:APOB/E受體，VLDL受體：肝中未發(fā)現(xiàn)，APOE受體:僅存于肝細(xì)胞表面。肝素引起LPL酶釋放入血稱為肝素后現(xiàn)象,APOCII是激活劑,APOCIII是抑制劑。LCAT（卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶）最優(yōu)底物是新生的HDLoHDL的代謝是膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)途徑。LDL是血液中主要攜帶膽固醇的脂蛋白。膽固醇是膽汁酸唯一前體和所有類固醇激素包括性激素和腎上腺素的前體。LDL是冠心病的危險(xiǎn)因素，是血脂異常防治的首要靶標(biāo)。高TG血癥中，小而密的LDL（B型）增高，貝IJAPOB（是動(dòng)脈粥樣硬化標(biāo)志物）多CHOL少，出現(xiàn)LDL—C不高而血清APOB高的“高APOB脂蛋白血癥”。前白蛋白：5.4（分子量）/4.7（等電點(diǎn)），運(yùn)載維生素A。白蛋白：6.64/4-5.8內(nèi)源性氨基酸營養(yǎng)源，酸堿緩沖能力，載體，維持血漿膠體滲透壓。A1-酸性糖蛋白：4.0/2.7-4包括等分子的已糖，已糖胺，唾液酸。Al-抗胰蛋白酶5.5/4.8。血紅素結(jié)合蛋白：5.7/兩對(duì)肽鏈（A和B）A2B2四聚體。A2-巨球蛋白：80/5.4分子量最大。銅蘭蛋白：16/4.4糖蛋白，單鏈，有氧化酶活性，協(xié)助診斷“肝豆?fàn)詈俗冃浴?。B2微球蛋白：1.18存在于有核細(xì)胞表面，特別是淋和腫。CPR：12/6.2o醋酸纖維素薄膜及聚丙稀酰胺凝膠電泳最常用。蛋白電泳后正極起：白蛋白，A1,A2,B,R-球蛋白。肝硬化時(shí)出現(xiàn)B和R難以分開而連在一起叫：B—R橋，是由于肝纖維化導(dǎo)致IGA增高所致。疾病急性相時(shí)，前白蛋白，白蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白相應(yīng)低下。CK和GGT都是男性高于女性，且酒后GGT升高明顯。酶釋放的速度與其分子量成反比（可分析各種酶在病理時(shí)進(jìn)入血液的先后）。酶活性監(jiān)測(cè)方法有：分光，旋光,熒光，電化學(xué)，化學(xué)法，核素測(cè)定，量熱法。用免疫法測(cè)酶的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度和特異性高。酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)中所指速度就是反應(yīng)的初速度。KM值只與酶性質(zhì)有關(guān),與濃度無關(guān)，最小KM值的底物叫最適底物或天然底物。LD,ALP在融凍時(shí)被破壞，LD在低溫反不如室溫穩(wěn)定的現(xiàn)象為“冷變性”。在實(shí)驗(yàn)規(guī)定的條件下（溫度,最適PH,最適底物物濃度時(shí)），在一分鐘內(nèi)催化1UMOL底物發(fā)生反應(yīng)的所需的酶量作為1個(gè)酶活力國際單位。同工酶的差異是由其結(jié)構(gòu)不同造成的。CK-MM的亞型有：MM1,MM2,MM3oCK—MB的亞型:MB1,MB2oCK含量和肌肉運(yùn)動(dòng)相關(guān)，其量與肌肉總量有關(guān)。甲亢，久臥床病人總CK（主要CK—MM）可下降。LD含量：LD2（H3M）LD1（H4主要在心,RBC）LD3（H2M2,肺脾）LD4（H3M）LD5（M4橫紋肌，肝）。AST的同工酶：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)：C-AST線粒體內(nèi)：M—ASToNADH被氧化為NAD,可在34OnM處連續(xù)監(jiān)測(cè)吸光度下降速度。重癥肝炎由于大量肝細(xì)胞死亡，血中ALT可僅輕度升高，臨終時(shí)明顯下降，但膽紅素卻進(jìn)行性升高叫：酶膽分離。405NM處吸光度增高（可測(cè)ALP,GGT等）。雙甘肽是谷氨氨?；氖荏w。GGT含量以腎臟最高其次是前列腺，胰,肝，腦。代謝內(nèi)生水約300ML，水的出入量調(diào)節(jié)在下丘腦，NA=HCO3+CL+12（10）mmol/L,滲透壓（756—760KPA）中摩爾滲量：294—296mOSM/L,根據(jù)鉀鈉糖尿素的濃度可計(jì)算血漿晶體滲透壓，陰離子隙（AG）即鉀鈉與HCO3,CL的差值，總陽減總陰。升高多見于：腎功不全的氮質(zhì)血癥或尿毒癥引起的磷酸鹽硫酸鹽儲(chǔ)留，乳酸堆積，酮體堆積。調(diào)控鈉排出：球一管平衡，腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)，抗利尿,糖皮質(zhì)，甲狀腺（旁腺），心鈉素。調(diào)節(jié)鉀：醛固酮（潴鈉排鉀），糖皮質(zhì)。水過多：高滲性（鹽中毒）等滲性（水腫）低滲性（水中毒）。鈉濃度是血漿滲透濃度的決定因素。低鈉有腎性和非腎性，高鈉見于:水?dāng)z入少，排水多，鈉潴留。不論血鉀水平如何，鉀的濃度與細(xì)胞外液中HC03直接有關(guān)而與PH的變化關(guān)系不大。火焰光度法是一種發(fā)射光譜分析法。內(nèi)標(biāo)法是標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)液采用加進(jìn)相同濃度的內(nèi)部元素進(jìn)行測(cè)定。冠酸指復(fù)環(huán)王冠化合物。離子選擇電極法（ISE）敏感膜將離子活度換成電信號(hào)。血?dú)夥治鲇校篜H,P02,PC02,HC03oHC03與H2CO3的比值維持酸堿平衡。PH=PK+log（A-/HA）簡稱H—H方程。血中HbO2量與Hb總量之比為血氧飽和度。其達(dá)50%時(shí)PO50（3.54KA）o集合管不包含在腎單位中。腎小球?yàn)V過膜分：內(nèi)皮細(xì)胞，基底膜，上皮細(xì)胞三層。近曲小管是重吸收的重要部位。自身調(diào)節(jié)是指腎血流量及腎小球?yàn)V過率基本保持不變。腎神經(jīng)調(diào)節(jié)主要是對(duì)腎入球小動(dòng)脈作用致腎小球?yàn)V過率下降。球管反饋（TGF）是對(duì)更遠(yuǎn)端的腎小管作更精細(xì)調(diào)節(jié)。其中最主要的是抗利尿激素和醛固酮。與日增加的血尿素氮和血肌酎升高是急性腎功能衰竭的可靠依據(jù)，分少尿期，多尿期，恢復(fù)期。慢性腎衰多不可逆，分腎貯備能力喪失期，氮質(zhì)血癥期，腎功能衰竭期，尿毒癥期。單位時(shí)間內(nèi)兩腎生成的濾過液量為腎小球?yàn)V過率。腎小球清除率：GFR=V/P*U,內(nèi)生肌酎清除率：Ccr=U*P/V（ml/min）,小于30為重度，20為腎衰,10為終末腎衰，80—50為腎功能不全代償期，50—20為失代償期。血清B2微球蛋白（小于2.5mg/L）：與血清肌酎有正相關(guān)，測(cè)定對(duì)氨基馬尿酸（PAH）清除率和碘銳特清除率均可反映腎血流量，放射性核素腎圖能比較敏感地反映腎血漿流量。遠(yuǎn)端腎單位功能試驗(yàn)有:濃縮一稀釋試驗(yàn)，尿滲量測(cè)定，滲透溶質(zhì)清除率，自由水清除率等。滲量測(cè)定常采用冰點(diǎn)下降法，尿滲量:600—1000mosm/kg血漿滲量：275—305mosm/kg它們的比值反映重吸收后形成的尿液中溶質(zhì)的濃縮倍數(shù)，急性腎小管壞死＜1.2,尿NA＞20mmol/l腎衰時(shí)＜1,而小球損傷時(shí)此值＞1.2,Nav20mme）l/l。早期腎損傷的檢測(cè)項(xiàng)目可大致分：腎小球標(biāo)記，腎小管標(biāo)記，腎組織蛋白/相關(guān)抗原。微量白蛋白（mAlb）：尿中排出量為30—300mg/24h內(nèi)，：是糖尿病誘發(fā)腎小球微血管病變最早期的客觀指標(biāo)之一，是高血壓性腎損傷的早期標(biāo)志。尿轉(zhuǎn)鐵蛋白（UTf）是679個(gè)氨基酸構(gòu)成的糖蛋白，是反映腎小球?yàn)V膜損傷的靈敏指標(biāo)。選擇性指數(shù)（SIP）：即測(cè)定IGG清除率與轉(zhuǎn)鐵蛋白清除率的比值，低分子量蛋白（LMWP）中A1—微球蛋白和尿B2—微球蛋白（99個(gè)氨基的多肽，不含糖）是腎小管一間質(zhì)性腎病的早期標(biāo)志。尿酶：分溶酶體酶和刷狀緣酶二類，常測(cè)NAG和AAP。胰液中的碳酸氫鹽主要是中和胃酸和激活消化酶。胰淀粉酶屬A-淀粉酶,PH6.9是唯一在正常時(shí)尿中的血漿酶，與胰腺提純物區(qū)帶相同為P-同工酶，與唾液腺提純物相同為S-同工酶。新生兒主要是S—同工酶，一歲以內(nèi)測(cè)不出P—同工酶。發(fā)病后2—12H升高，12—72H達(dá)峰，3—4天后正常。測(cè)定時(shí)限定性底物一般有4—7葡萄糖（庚糖等），很多陰離子有激活淀粉酶的作用（CL,Br最強(qiáng)）。淀粉酶清除率與肌酎清除率比值在2-5%（Cam/Ccr）,降低見于巨淀粉酶血癥者。血清脂肪酶在急性胰腺炎時(shí)4—8H內(nèi)升24H達(dá)峰，持續(xù)8—14天，但腮腺炎和巨淀粉酶血癥時(shí)不升高。現(xiàn)用的尿胰蛋白酶原一2的試紙定性方法是基于免疫層析的原理。激素（已知150多）可分：含氮類（多溶于水），類固醇類（要特殊蛋白結(jié)合）。主要受：下丘腦一垂體一內(nèi)分泌腺一激素系統(tǒng)調(diào)節(jié)。一般用EDTA抗凝。Graves?。杭谞钕傩约卓?，TT3是它早期療效觀察及停藥后復(fù)發(fā)的敏感指標(biāo)，TRH試驗(yàn)中TSH不升高，TSAB陽性達(dá)80%--100%。甲減時(shí)嚴(yán)重可出現(xiàn)黏液水腫。目前認(rèn)為聯(lián)合進(jìn)行FT3,FT4,和超TSH測(cè)定是甲狀腺功能評(píng)估的首選方案和第一指標(biāo)。TT4是判定甲狀腺功能最基本的篩選試驗(yàn)。TSH不受TBG濃度影響，是反應(yīng)下丘腦—垂體—甲狀腺軸功能的敏感試驗(yàn)，尤其是對(duì)亞臨床型甲亢和亞臨床型甲減的診斷。腎上腺髓質(zhì)（嗜倍細(xì)胞瘤最好發(fā)部位）是節(jié)后神經(jīng)元轉(zhuǎn)化為內(nèi)分泌細(xì)胞（嗜倍細(xì)胞），能合成，釋放腎上腺素（E）,去甲腎上腺素（NE）,多巴胺（DA）,結(jié)構(gòu)上均為兒茶酚胺類，血液及尿中的腎上腺素幾全為腎上腺髓質(zhì)分泌，尿香草扁桃酸（VMA）是兒茶酚胺的代謝產(chǎn)物測(cè)定時(shí)芬氟拉明可致假陰性。胰升糖素激發(fā)試驗(yàn)禁用于糖尿病人。腎上腺皮質(zhì)分（由外向內(nèi)）：球狀帶（鹽皮質(zhì)激素一醛固酮），束狀帶（糖皮質(zhì)激素一皮質(zhì)醇及少量皮質(zhì)酮，是機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)時(shí)的主要激素），網(wǎng)狀帶（雄激素和少量雌激素）。皮質(zhì)醇增多最多見是垂體促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH,呈脈沖式分泌，上午8時(shí)至10時(shí)最高，夜為上午的二分之一）分泌亢進(jìn)引起的庫欣病。庫欣綜合癥的病理特點(diǎn)：脂肪代謝障礙（面部和軀干部脂肪堆積，向心性肥胖），蛋白質(zhì)代謝障礙（處氮負(fù)平衡，蛋白消耗過多），糖異生加強(qiáng)，電解質(zhì)紊亂。原發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能減退（Addison病）：醛固醇（人體主要的儲(chǔ)鹽激素）缺乏，糖異生減弱，腎排水減弱，出現(xiàn)皮膚色素沉著。尿17—羥皮質(zhì)類固醇（17—0HOS）：多用傳統(tǒng)的Porter—Silber法測(cè)，男11—33,女8—25,用濃鹽酸防腐。尿17—酮類固醇（17—KS）：男34—69,女17—52,采用Zimmerman法測(cè)。當(dāng)腎上腺癌或不伴庫欣綜合癥時(shí)KS比OHCS增高更高，而腎上腺瘤卻傾向于降低或正常。血游離皮質(zhì)醇和尿游離皮質(zhì)醇呈正相關(guān)，是檢查腎上腺皮質(zhì)功能紊亂的首選項(xiàng)目。腎素由腎小球旁器分泌，是人體最強(qiáng)的升壓物質(zhì)也是讓腎上腺釋放醛固醇的主要刺激物。垂體激素均為多肽或糖蛋白，TSH,LH,FSH均由A,B兩個(gè)多肽亞基組成。生長激素（缺乏得垂體性侏儒癥，GH）的促生長作用必須通過生長調(diào)節(jié)素（SM）的介導(dǎo)作用。SM-C及SM結(jié)合蛋白測(cè)定因其不跟GH的分泌而波動(dòng)，故單次即可了解GH功能狀況。催乳素瘤是功能性垂體腺瘤中最常見的，好發(fā)于女性。所有性激素都是類固醇。睪酮代謝物為雄酮是17-KS的主要來源，雌二醇（生物活性最強(qiáng)的天然雌激素，女性早熟指標(biāo)））和雌酮代謝物是雌三醇，孕酮（確證排卵）代謝物是孕烷二醇（黃體功能指標(biāo)）。測(cè)定早晨的睪酮（男青春期10—20,成年期：300—1000）水平可以對(duì)男性睪酮水平下降作出最好評(píng)價(jià)。GNRH興奮試驗(yàn)主要檢測(cè)腺垂體促性腺的貯備功能狀況?？梢砸鹦怨δ芪蓙y的性激素合成酶有：C—17,20裂鏈酶，17—B羥類固醇脫氫酶，5A—還原酶。尿游離皮質(zhì)醇無晝夜變化故可靠反映游離皮質(zhì)醇水平。內(nèi)標(biāo)法只適用于雙通道型原子吸收分光光度計(jì)。聚丙烯酰胺電泳普遍用于分離蛋白質(zhì)及較小分子核酸。瓊脂糖電泳適用于分離同工酶及其亞型，大分子核酸。等電聚焦電泳適合分離分子量相近而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)組份，分辨率最好。離心力（FC）=M（質(zhì)量）co（角度）2X（離軸心距離），相對(duì)離心力（RCF）=1.118*10-5*N（轉(zhuǎn)數(shù)）*X。密度梯度離心法：1速率區(qū)帶離心法：離心后近軸處密度小，一般用于分離大小相異而密度相同的物質(zhì)。2等密度區(qū)帶離心法：當(dāng)管底介質(zhì)的密度大于粒子的密度時(shí)，粒子上浮，用于分離大小相似而密度差異大。凝膠層析常用的是SephadexG系列主要用于脫鹽分離提純高分子物質(zhì)。離子交換層析主要用于分離氨基酸多肽蛋白質(zhì)也可是核酸等。親和層析可用于純化生物大分子，稀釋液的濃縮不穩(wěn)定蛋白的貯藏分離核酸。聚焦層析常用凝膠是Monop多元緩沖交換劑是PBE。K值過高線性寬但重復(fù)性差，過低精密度好但線性差。酶偶聯(lián)法已是是廣泛最頻繁的酶測(cè)定法，主要用30和37,它有明顯的延滯期，最好條件是酶反應(yīng)為限速度，動(dòng)力學(xué)上為零級(jí)反應(yīng)而指示酶是一級(jí)反應(yīng)。Q10值即溫度增加10度化學(xué)速度的變化率，約在1.5—2.5。免疫學(xué)：免疫防御（對(duì)外）免疫自穩(wěn)（防自身免疫?。┟庖弑O(jiān)視（防腫瘤）。標(biāo)記免疫技術(shù)應(yīng)用最多，自動(dòng)化是免疫學(xué)檢驗(yàn)發(fā)展趨勢(shì)?？乖谋砦恢辽儆卸N方式：順序或線性表位，三維結(jié)構(gòu)的構(gòu)象表位。天然抗原絕大多數(shù)是胸腺依賴性抗原（TD—AG）o超抗原被T細(xì)胞識(shí)別時(shí)雖然要與MCHII類分子結(jié)合，但不受II類分子的限制，可以直接活化T細(xì)胞而且效率高?？贵w由漿細(xì)胞產(chǎn)生?？贵w分子上VH和VL是抗原結(jié)合部位，CL,CH1是遺傳標(biāo)記所在，CH2有補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)，CH5能固定組織細(xì)胞,CH3和CH4還參加I型變態(tài)反應(yīng)。免疫學(xué)中常用木瓜和胃蛋白酶。免疫球蛋白的血清型有：同種型（正常個(gè)體都有）同種異型（只存在同種的某些個(gè)體中）獨(dú)特型（某一個(gè)體獨(dú)有的。獨(dú)特性網(wǎng)絡(luò)在免疫應(yīng)答的調(diào)控中起重要作用）。天然igG分子無活性。igM（五聚體，天然凝集素和冷凝集素，是B細(xì)胞膜上主要表面膜lg）激活補(bǔ)體能力最強(qiáng)，IgG（單體，電泳最慢，再次免疫應(yīng)答的主要抗體）至少要兩分子。0.1m,2筑基乙醇能破壞IgM但不破壞IgG,可以區(qū)分它們。母乳中的分泌型IGA提高了嬰兒出生后4—6個(gè)月內(nèi)的局部免疫屏障，常稱為局部抗體。人類重鏈基因位于14號(hào)染色體上，K基因位于第二號(hào)染色體±o參與補(bǔ)體激活經(jīng)典途徑的固有成份按先后為C1,C2ooooC9,C1由C1q,C1r,C1s,三種組成。滅活的補(bǔ)體在片在符號(hào)前加i,有酶活性的上加一橫。補(bǔ)體大多是糖蛋白多屬B球蛋白，C1q,C8是r蛋白。C1s,C9是a球蛋白。C3含量最多，C2含量最少。替代途經(jīng)的激活物主要是細(xì)胞壁成分。補(bǔ)體清除免疫復(fù)合物的方式：吞噬調(diào)理，免疫粘附，免疫復(fù)合物抑制。編碼人C4,C2,B因子的基因在第六染色體短臂上與MHC的基因相鄰，命名為III類組織相容性基因。產(chǎn)生補(bǔ)體主要是肝臟主要是巨噬細(xì)胞。已發(fā)現(xiàn)的歸巢受體有：CD44,LFA-1,VLA-4,MEL-14/LAM-1等。CD2表達(dá)于全部T細(xì)胞和NK細(xì)胞。CD3表達(dá)在全部T細(xì)胞，CD4（輔助性T細(xì)胞）/CD8（細(xì)胞毒性T細(xì)胞）相互關(guān)聯(lián)但意義不同是T細(xì)胞亞群的表面標(biāo)志。SIG的功能是作為B細(xì)胞表面的抗原受體可與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合并將抗原內(nèi)攝處理。MHCII是輔佐細(xì)胞（AC）遞呈抗原的必須物質(zhì)是輔佐細(xì)胞（有單核吞噬，樹突狀，B細(xì)胞）的標(biāo)志。明確的白介素有15個(gè)，IL-2主要由T細(xì)胞（CD+4）受抗原或絲裂原刺激后產(chǎn)生，15KD,113糖蛋白。II型干擾素又稱免疫干擾素或IFNR,主要由T細(xì)胞產(chǎn)生。腫瘤壞死因子：TNEa：由細(xì)菌脂多糖活化的單核細(xì)胞產(chǎn)生引起出血壞死也稱惡病質(zhì)素，TNFb：由抗原或絲裂原刺激的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生有腫瘤殺傷和免疫調(diào)節(jié)功能又稱淋巴毒素。紅細(xì)胞生成素（EPO）是糖蛋白，30—39KD,主要由腎小管內(nèi)皮細(xì)胞合成也可由肝和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。人類MHC稱為HLA復(fù)合體，位于第六對(duì)染色體的短臂上。其多態(tài)性為復(fù)等位基因所致，當(dāng)群體中位于同一位點(diǎn)的等位基因多于兩種時(shí)為復(fù)等位基因，HLA的遺傳特點(diǎn)：單倍型,共顯性，連鎖不平衡。I和II類MHC分子是引起同種異體移植排斥反應(yīng)的主要抗原。當(dāng)抗原遞呈細(xì)胞向免疫活性細(xì)胞遞呈抗原時(shí)，免疫活性細(xì)胞在識(shí)別特異性抗原時(shí)，必須識(shí)別遞呈細(xì)胞的MHC抗原稱為MHC限定性。HLA是體內(nèi)最復(fù)雜的多態(tài)性基因系統(tǒng)?？乖籑HCII類分子復(fù)合物與T細(xì)胞受體的結(jié)合是使TH細(xì)胞活化的首要信號(hào)。細(xì)胞免疫的效應(yīng)方式有：細(xì)胞毒,遲發(fā)超敏。體液免疫以血清中有循環(huán)抗體為特征。炎癥細(xì)胞有：中性，肥大，嗜酸，嗜堿，血小板，內(nèi)皮。炎癥介質(zhì)：血管和平滑肌收縮介質(zhì)，趨化因子，酶類,蛋白多糖。免疫炎癥類型：IGE介導(dǎo)，免疫復(fù)合物，細(xì)胞，皮膚嗜堿細(xì)胞型?？乖贵w結(jié)合基于結(jié)構(gòu)互補(bǔ)與親和性。由一級(jí)結(jié)構(gòu)決定。結(jié)合力有：電荷吸引，范德華力，氫鍵，疏水性作用力。常用佐劑有：氫氧化鋁，明磯（弗氏）是目前動(dòng)物免疫中最常用的，抗血清保存：4度，低溫，冰凍干燥?？贵w特異性純化有:親和層析，吸附法。特異性鑒定有：效價(jià)，特異性，純度，親和力。脾淋巴細(xì)胞特征是抗體分泌功能和能在選擇培養(yǎng)基中生長，骨髓瘤細(xì)胞則可無限分裂既永生性。細(xì)胞融合的選擇培養(yǎng)基有三成份：次黃喋吟（H）氨甲蝶吟（A）胸腺嗑咤核甘（T）稱為HAT培養(yǎng)基。液體沉淀試驗(yàn)有：抗原稀釋法和抗體稀釋法及方陣滴定法。免疫固定電流常用于M蛋白的鑒定。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)中5種成份分三個(gè)系統(tǒng)（反應(yīng)，補(bǔ)體，指示）不溶血為陽性。常用的標(biāo)記酶有辣根過氧化物酶（底物為鄰苯二胺，四甲基聯(lián)苯胺）堿性磷酸酶（底物為磷酸酯）?？贵w制備常用二醛法及過碘酸鹽法。RIA（放免）核素標(biāo)記抗原，競(jìng)爭抑制，2-3個(gè)數(shù)量級(jí)，標(biāo)記物限量。IRMA（免疫放射）核素標(biāo)記抗體，非競(jìng)爭結(jié)合,3個(gè)數(shù)量級(jí)以上，標(biāo)記物過量。常用的熒光素有：異硫氟酸（FITC）四乙基羅丹明（RB200）四甲基異硫鼠酸羅丹明（TRITC）o常用標(biāo)記蛋白的方法有：攪拌法和透析法。熒光抗體鑒定包括效價(jià)及熒光素與蛋白的結(jié)合率，大于1：16為理想，一般固定標(biāo)本的熒光抗體以F/P=1o5為宜用于活細(xì)胞染色的以2O4為宜。時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定以鐮I系元素箱合物為熒光標(biāo)記物，偏振免疫測(cè)定的偏振波長是485（藍(lán)光）。發(fā)光免疫技術(shù)：生物發(fā)光有熒火蟲熒光素，化學(xué)發(fā)光底物有：氨基苯二酰腫類主要為魯米諾及異魯米諾衍生物,啞咤酯類，電化學(xué)發(fā)光底物為三聯(lián)毗釘另一類為三丙胺。膠體金顆粒由一個(gè)基礎(chǔ)金核及包圍在外的雙離子層構(gòu)成，其性質(zhì)有對(duì)電解質(zhì)敏感性，呈色性，光吸收性（510—550）o雙抗體夾心法的質(zhì)控點(diǎn)最好是相應(yīng)抗原。外周單個(gè)核細(xì)胞的分離的分層液常用：Ficoll（由上到下為血漿，單個(gè)核細(xì)胞，粒，紅）和Percoll（由上至下：死細(xì)胞，單個(gè)核細(xì)胞，淋，紅，粒）。純淋巴細(xì)胞群的采集有：黏附貼壁法，吸附柱過濾法，磁鐵吸引法。亞型的分離法有：E花環(huán)沉降法，尼龍分離法，親和板結(jié)合法，熒光激活細(xì)胞分離儀法。淋巴細(xì)胞活力測(cè)定常用臺(tái)盼藍(lán)染色法，死為藍(lán)色。保存時(shí)二甲亞硯為保護(hù)劑。植物血凝素（PHA）刀豆素（CONA）刺激T細(xì)胞增殖。增殖試驗(yàn)有：形態(tài)法（分別計(jì)數(shù)淋母，過渡性淋母，核有絲分裂相及成熟小淋，前三者為轉(zhuǎn)化細(xì)胞，計(jì)200個(gè)，算轉(zhuǎn)化率）核素法。SMfg是鑒定B細(xì)胞可靠的指標(biāo)。B細(xì)胞功能檢測(cè)方法:溶血空斑形成試驗(yàn)（直接法只能檢測(cè)IgM生成細(xì)胞，其它用間接法，即在脾細(xì)胞和SRBC混合時(shí)加入抗lg抗體。B細(xì)胞增殖能力試驗(yàn)。測(cè)定人NK細(xì)胞活性多用以K562細(xì)胞株為靶細(xì)胞，測(cè)鼠NK細(xì)胞活性則用YAG細(xì)胞株。嗜酸粒細(xì)胞活化產(chǎn)物的測(cè)定：產(chǎn)物有：陽離子蛋白（ECP）,主要堿基蛋白（MBP）,X,EPD,EDN等，其中ECP毒性最強(qiáng)因而認(rèn)為是嗜酸的特異性標(biāo)志。特異性鼻粘膜激發(fā)試驗(yàn)用變應(yīng)原非特異性采用乙酰甲膽堿或組胺。新月體性腎小球腎炎的免疫病理類型有：免疫復(fù)合物，抗腎小球基底膜（GBM）抗體，抗中性白細(xì)胞質(zhì)抗體。含有新月體的腎小球數(shù)目和比例是該病的關(guān)鍵。膜性增生性腎小球腎炎（MPGN）是原發(fā)性腎小球病中唯一具有獨(dú)特的血清補(bǔ)體異常的疾病測(cè)C3NeF。自身免疫?。ˋID）的特征：高滴度自身抗體，病理特點(diǎn)為免疫炎癥損傷與抗原分布一致，能建動(dòng)物模型。不溶性DNP（抗核蛋白抗體）通常完全被DNA和組蛋白吸收，是形成狼瘡細(xì)胞的因子?？筪sDNA抗體對(duì)SLE有較高的特異性?？筍m抗體是SLE的特異性標(biāo)志之一。ANA陽性的熒光現(xiàn)象分：周邊型表示抗DNA抗體存在（SLE）,均質(zhì)型表示有抗核蛋白抗原（DNP）抗體，斑點(diǎn)型多為抗ENA抗體（結(jié)締組織病），核仁型多為抗核小體抗體（硬皮?。?。抗乙酰膽堿受體抗體的檢測(cè)對(duì)重癥肌無力（MG）具有診斷意義。Hep—2細(xì)胞（人喉癌上皮細(xì)胞株）,Hela細(xì)胞（宮頸癌細(xì)胞株），F(xiàn)arr法測(cè)定dsDNA抗體的特異性高為公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)法，當(dāng)抗dsDNA抗體結(jié)合率大于20%時(shí)對(duì)SLE有意義?？诟砂Y和干燥性角膜炎是干燥綜合癥（SS）的主要臨床表現(xiàn)。多發(fā)性骨髓瘤（最常見免疫增殖?。┮訧GG居多，重鏈病類別常見R,A,U三型。原發(fā)性B細(xì)胞缺陷?。喝獻(xiàn)G缺失（BROTON病，女帶，男患病，最先考慮測(cè)IG濃度，CD分子，SMIG）,部分缺失，IG正常但無抗原反應(yīng)。原發(fā)性T細(xì)胞缺陷?。阂装l(fā)生GVHR。原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病，以重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）的預(yù)后最差，屬性聯(lián)或常染色體隱性遺傳,T細(xì)胞表面存在特異性CD抗原，通過特異性單克隆抗體檢測(cè)是診斷細(xì)胞免疫最有價(jià)值的試驗(yàn)。補(bǔ)體缺陷發(fā)病率最低。性聯(lián)慢性肉芽腫（CGD）是性聯(lián)遺傳，女帶男患病，特點(diǎn)是吞噬細(xì)胞不能產(chǎn)生超氧化物酶殺菌，白細(xì)胞低于1500時(shí)應(yīng)考慮，可作四哇氮藍(lán)（NTB）還原試驗(yàn)，REBUCK皮膚窗檢測(cè)。只有感染了乙肝才肢感染丁肝。艾滋病T淋巴細(xì)胞亞群檢查可發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞絕對(duì)數(shù)下降，CD4+淋巴細(xì)胞也下降，CD4/CD8小于1?？贵w主要是P24,GP120oCEA大于60微克/升時(shí)可見于結(jié)腸，胃，肺癌。手術(shù)6周后CEA水平正常。血清CEA結(jié)合甲狀腺降鈣素測(cè)定有助于甲狀腺髓樣癌的診斷和估計(jì)。AFP是原發(fā)性肝癌的最靈敏最特異的標(biāo)志。胰胚胎抗原（POA）,糖類抗原有：CA125（上皮性卵巢癌（基因有K-RAS）和子宮內(nèi)膜癌）CA15-3（乳腺癌，基因有P53,C-ERB-2））CA19-9（胰腺,結(jié)直腸癌）CA50（胰腺結(jié)直腸癌）AFU（A—L巖藻糖甘酶）是原發(fā)性肝癌的新指標(biāo)。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是神經(jīng)母細(xì)胞瘤和小細(xì)胞肺癌（基因有P53,RB）的標(biāo)志物。HLA-A,B,C,DR,DQ位點(diǎn)的抗原可用血清學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)，所以稱為SD抗原，采用補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒（CDC）試驗(yàn)，HLA—D,DP位點(diǎn)的抗原須用細(xì)胞分型進(jìn)行鑒定，稱為LD抗原，采用混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（MLC）。排斥反應(yīng)有：宿主抗移植反應(yīng)（HVGR）和移植物抗宿主反應(yīng)（GVHR）。微生物學(xué)：生物學(xué)按界門綱目科屬種分類，種是最小單位。結(jié)核菌可利用甘油為碳源，梭狀芽胞菌可以氨基酸為碳源，流行性感冒桿菌要V,X因子才能生長。致病性島：由基因編碼決定的一團(tuán)與致病性相關(guān)的基因組。細(xì)菌診斷流程有：雙岐索引法，表解法，數(shù)字編碼鑒定法。超凈工作臺(tái)應(yīng)選擇垂直氣流通風(fēng)方式。0/129抑菌試驗(yàn)對(duì)弧菌有用而對(duì)氣單胞菌無用。桿菌肽用于A（敏感）與非A群鏈球菌的鑒定。奧普托欣試驗(yàn)：肺炎鏈球菌敏感。雜交分：斑點(diǎn)，菌落原位，Southern（DNA）印跡,Northern（RNA,DNA）印跡。L型細(xì)菌（形態(tài)多樣，染色不定，可過濾，滲透壓敏感，生化減弱等）培養(yǎng)應(yīng)高滲（20%蔗糖），染色多為G染陰性，形態(tài)不一（巨球形是特征），固定要用10G/L鞅酸不能用火焰。一般菌落有：油煎蛋樣（L）,顆粒型（G）,絲狀菌落（F）,鑒定要點(diǎn)：染色易變多形性，生長在增菌液中微渾，顆粒樣沉淀或沿試管壁生長，返祖現(xiàn)象。原生質(zhì)體與原生質(zhì)球都是細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌。肽聚糖的結(jié)構(gòu)由聚糖骨架，四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋（G-無交聯(lián)橋）。磷壁酸為G+特有，分壁和膜兩種。外膜層由脂多糖，脂質(zhì)雙層，脂蛋白組成。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有核蛋白體（蛋白合成地），核質(zhì)（主要遺傳物質(zhì)）質(zhì)粒,胞質(zhì)顆粒，是細(xì)菌蛋白質(zhì)和酶類合成的重要場(chǎng)所。鞭毛是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。性菌毛僅有1一10根，毒力和耐藥質(zhì)粒都能通過它轉(zhuǎn)移，有致病性。RNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中占細(xì)菌干重的10%,DNA存在于染色體和質(zhì)粒中。G+等電點(diǎn)2—3,G-等電點(diǎn)4-5o細(xì)菌營養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)的方式有：離子，透性酶，磷酸酶。營養(yǎng)攝取的機(jī)制：被動(dòng)擴(kuò)散，主動(dòng)吸收，基團(tuán)轉(zhuǎn)位。嗜冷菌最適溫為10—20,嗜溫菌為20—40,嗜熱菌為50—60。細(xì)菌代謝所需能量主要以生物氧化作用而來。G-菌的菌體脂多糖能引起發(fā)熱故稱熱原質(zhì)。土中的厭氧芽胞桿菌是創(chuàng)傷感染病原菌的主要來源。飲用水中每毫升總數(shù)不過100個(gè)，1000毫升水中大腸桿菌群不過3個(gè)。有芽胞破傷風(fēng)菌需沸水煮三小時(shí)才殺死。水中加入2%碳酸鈉能將沸點(diǎn)提到105度又能防止金屬生銹。紫外線波長265—266時(shí)殺菌力最強(qiáng)。無芽胞菌一般的致死為1800—6500微瓦/CM,殺死芽胞要十倍。濾菌器用于除菌的孔徑是0.22微米，另外以石棉板為濾板的金屬濾器稱SEITZ濾器（蔡氏濾器）按濾孔大小分K：最大，澄清用，EK—S最小，可阻止大病毒通過EK：居中，除去一般細(xì)菌。玻璃濾菌器分G1—G6,G5,G6兩型能阻止細(xì)菌通過。高壓滅菌指示物：嗜熱脂肪芽胞桿菌（ATCC7053）,紫外線殺菌指示物：枯草芽胞桿菌黑色變種（ATCC9372）。細(xì)菌遺傳物質(zhì)主要在于染色體質(zhì)粒和轉(zhuǎn)位因子中。影響基因表達(dá)的因素有：調(diào)控部位，調(diào)節(jié)蛋白，效應(yīng)分子。質(zhì)粒：不依賴染色體而復(fù)制，不相容性，轉(zhuǎn)移性,指令性。主要有耐藥質(zhì)粒，COL質(zhì)粒（編碼腸毒素）VI質(zhì)粒（編碼細(xì)菌與致病性有關(guān)的蛋白）。轉(zhuǎn)位因子為存在于細(xì)菌染色體或質(zhì)粒上的一特異的核甘酸序列可在DNA中移動(dòng)，主要有三類：插入順序（最小的轉(zhuǎn)位因子），轉(zhuǎn)座子，轉(zhuǎn)座噬菌體。病毒突變株分：空斑和宿主依賴性。遺傳型變異機(jī)制有突變，基因轉(zhuǎn)移,重組。突變：突變率由復(fù)制的準(zhǔn)確度，DNA發(fā)生損傷的機(jī)會(huì)，及對(duì)損傷DNA修復(fù)程度來決定。一般在106-109o堿基的置換：喋吟換喋吟，喀咤換喀咤為轉(zhuǎn)換,噪吟換喀咤為顛換。轉(zhuǎn)化：受體菌直接撮取供體菌提供的游離DNA片段整合重組使受體菌的性狀發(fā)生變異。一般有鏈，嗜血，芽胞菌有此功能。G+菌的感受態(tài)是由感受態(tài)因子（CF）的胞外信號(hào)誘導(dǎo)的。轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到愛體菌內(nèi)而致受體菌基因改變，分普遍和局限。接合：受體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛所帶的F質(zhì)?；蝾愃七z傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌。溶源性轉(zhuǎn)換：是噬菌體的DNA與細(xì)菌染色體重組，使宿主遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生變異。原生質(zhì)融合：兩種經(jīng)過處理失去細(xì)胞壁的原生體混合和可發(fā)生融合后的雙倍體可發(fā)生染色體間的重組。基因重組可使基因再激活表現(xiàn)為：交叉復(fù)活和多重復(fù)活。粘附素是細(xì)菌表面的蛋白質(zhì)有菌毛和非菌毛。進(jìn)入宿主：黏附，定植，侵入，轉(zhuǎn)歸。毒力有侵襲力和毒素。侵襲力：菌體表面結(jié)構(gòu)，菌毛，侵襲性酶（凝固酶，透明質(zhì)酸酶，鏈激酶，膠原酶等）。細(xì)菌的內(nèi)毒素一般由：脂質(zhì)A（主要成份），非特異性核心多糖，菌體特異性多糖。一般7---10天后機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫。IgG和IgM能在血中直接中和病毒。醫(yī)院感染大多以散發(fā)形式流行?？垢腥局委熢瓌t：安全，有效，經(jīng)濟(jì)，關(guān)鍵是有效。細(xì)菌種的科學(xué)命名采用拉丁文種屬雙命名法，前一字為屬名，名詞，后一為種名，形容詞。目前國際上普遍采用伯杰分類系統(tǒng)，也有用CDC（USA）o目前以細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)作最高一級(jí)分類依據(jù)將原核界分為薄，堅(jiān)，軟，疵壁四門?？?，屬，種分類主要依靠生化特性和抗原結(jié)構(gòu)。日光燈波長約0.5微米。顯微鏡的分辯率為波長一半。熒光顯微鏡的光源為高壓汞燈?？顾崛旧?%石碳酸一3%鹽酸酒精一美藍(lán)。糖類發(fā)酵是鑒定細(xì)菌最常用的生化反應(yīng)。懷疑細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)血培養(yǎng)不少于三次。不能立刻接種的血應(yīng)用SPS抗凝。直接鏡檢2H報(bào)告，最后鑒定和藥敏一般不過3天，除血外，必須在24H內(nèi)預(yù)報(bào)。腸桿菌科的強(qiáng)選擇（SS瓊脂）弱選擇（EMB,麥康凱）。A溶血是草綠色，b溶血是透明環(huán)，「溶血紅細(xì)胞不溶解，雙環(huán)。細(xì)菌數(shù)量達(dá)106—107CFU/ML時(shí)培養(yǎng)肉湯才見混濁。血培養(yǎng)中有105菌落形成單位（CFU）/ML時(shí)才能通過革蘭氏染色檢出細(xì)菌。近交系動(dòng)物：采用兄妹交配（或親子交配）繁殖20代以上的純品系動(dòng)物。突變種純系動(dòng)物：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常染色體中某個(gè)基因發(fā)生了變異的具有各種遺傳缺陷的突變品系動(dòng)物。純雜種動(dòng)物：無計(jì)劃隨意交配的動(dòng)物。無菌動(dòng)物：體表腸道內(nèi)無菌體內(nèi)無抗體。悉生動(dòng)物：給出無菌動(dòng)物引入已知的5-17種正常腸道菌的動(dòng)物。小白鼠對(duì)肺鏈，破傷外毒素敏感，脯鼠對(duì)結(jié)核白喉易感，貓對(duì)金葡萄菌腸毒敏感。測(cè)定病原體的感染性最好選用無菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物。冷凍干燥保存法是最有效的方法，利用各種斜面和半固體加石蠟油是最常用和最簡便的方法，一般不含糖，不用液體。真菌,霍亂，銅綠及糞堿需在室溫保存，而腦膜炎，淋球，初次分離的流感嗜血菌保存于37度。每轉(zhuǎn)種三代要鑒定一次。AMS系統(tǒng)是目前微生物鑒定中最常用的自動(dòng)化儀器。葡萄球菌：產(chǎn)生脂溶性色素，多數(shù)分解甘露醇產(chǎn)酸液化明膠和產(chǎn)生血漿凝固酶。蛋白抗原（A蛋白）種屬特異無型特異，多糖抗原（A,B,C）是半抗原，有型特異。是抵抗力最強(qiáng)的無芽胞菌。糞便嘔吐物應(yīng)接種高鹽卵黃或高鹽甘露醇瓊脂，觸酶陽性，凝固酶陽性玻片法篩選，試管法確證。必須做苯哇西林的敏感試驗(yàn)。鏈球菌：沉淀生長（肺鏈為混濁），在含腹水的培養(yǎng)物上生長良好，溶血株呈絮狀或顆粒狀生長，不溶血株呈均勻混濁生長。A鏈對(duì)桿菌肽敏感青霉素G為首選，B鏈CAMP試驗(yàn)陽性氨基糖甘類合用，B溶鏈致病性最強(qiáng)，A溶鏈為條件致病菌。幾乎所有的肺鏈對(duì)OPTOCHIN敏感。肺鏈：最適PH7.6—8.0,在含3%-5%的兔血清中生長良，培養(yǎng)時(shí)間過長會(huì)自溶管底澄清，分解菊糖，膽汁溶解陽性。腸球菌屬：能在高鹽（6.5%NACL）高堿（PH9.6）40%膽汁培養(yǎng)基上和10—45度生長，是G+菌中僅次于葡萄球菌的重要院內(nèi)感染病菌。臨床上分離最高的是糞腸球菌，可分慶霉素高耐藥和低耐藥，一般用B—內(nèi)酰胺類和氨基糖昔類聯(lián)合。腦膜炎奈瑟菌：腦液中位于中性細(xì)胞內(nèi)，不分解麥芽糖，能產(chǎn)生自溶菌不宜冰箱應(yīng)立即送檢，冬末春初為流行高峰，青G為首選。淋球奈瑟菌：人類是唯一天然宿主和傳染源。最適PH7.5,對(duì)糖類生化最低只能發(fā)酵葡萄糖，主要有菌毛蛋白，脂多糖，外膜蛋白抗原。細(xì)菌培養(yǎng)是目前世衛(wèi)推薦的唯一方法，培養(yǎng)基中應(yīng)含兩種以上抗生素（多為萬古和多粘）。腸桿菌科分型多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗(yàn)?？梢删謩e接種克氏雙糖鐵（KIA）尿素靛基質(zhì)動(dòng)力（MIU）來定屬。大腸桿菌：（口引咪，甲基紅，V-P,枸椽酸）IMVIC試驗(yàn)：KIA產(chǎn)酸產(chǎn)氣，MIU+-,有菌體（O）莢膜（K）鞭毛（H）三抗原，已知有171個(gè)O,99個(gè)K,56個(gè)H,腸產(chǎn)毒（ETEC）：霍亂樣腸毒腹瀉，腸致病性（EPEC）：嬰兒腹瀉，腸侵襲性（EIEC）：志賀樣腹瀉，腸出血（EHEC）：其中0157：H7可引起出血性腹瀉和溶血性尿毒癥，是4歲以下兒童急性腎功能衰的主要病原，678三月最高，北美最多見，腸黏附性（EAGGEC）：腹瀉。志賀氏菌分痢疾，福氏，鮑氏，宋內(nèi)四群，我國以福氏和宋內(nèi)常見，無莢無芽無鞭，KIA：K/A,產(chǎn)氣+/-,H2S-,MIU-+/-,最后可用診斷血清作群型鑒定。沙門菌：無芽無莢有鞭毛（除雞沙門）多數(shù)有菌毛，H2S可陽性，傷寒菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，菌體抗原有58種，鞭毛抗原有兩相即特異性和共同，表面抗原有VI,M,5三種，變異有：S—R,H—O,V—W,相位。凡符合:KIA：K/A,產(chǎn)氣+/-,H2S+/-,MIU+-+,硝酸鹽還原陽性，多價(jià)血清陽性的為沙門屬。變形桿菌屬有：普通，產(chǎn)黏，奇異。普羅威登斯屬有：產(chǎn)堿，斯氏，雷極，摩根菌只有摩氏摩根菌。有明顯多形性,呈球狀或絲狀，生長于10—43度，普通和奇異呈遷徒樣生長，三屬氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶陽性G-桿菌，加入石炭酸或苯乙醇使終濃度為1g/L和0.25%可抑制變形菌遷徙樣生長。耶爾森氏菌：有7種，鼠疫,假結(jié)核，小腸與致病有關(guān)。鼠疫：有莢無芽無鞭，兩極濃染，28—30度，PH6.9—7.1,液體中培養(yǎng)好，底部可有鐘乳石樣，加入亞硫酸鈉或脫纖維血有刺激生長，龍膽紫亞硫酸鈉為其選擇性培養(yǎng)基，3%氯化鈉上生長呈多形性。小腸：無動(dòng)無芽無莢G-,25度有周鞭毛，最適溫20—28度，VP試驗(yàn)25度陽性，37度陰性，KIA只利用葡萄糖，MIU22度動(dòng)力陽性37度陰性。假結(jié)核：25度有周鞭毛有動(dòng)力37度無動(dòng)力，最適溫30,PH6—8o枸椽酸桿菌：有弗勞地，異型，無丙二酸鹽。只有弗勞地靛基質(zhì)H2S+,僅異型的丙二酸鹽+,B—半乳糖昔酶，賴氨酸脫竣酶，枸椽酸利用三試驗(yàn)：枸椽酸菌+-+,沙門-/+++,愛德華-+-?？死撞鷮伲阂苑窝卓死撞嘁?，菌體呈卵圓形或球桿狀成雙排列，有時(shí)菌落出現(xiàn)黏液型用接種環(huán)可成絲，動(dòng)力和鳥氨酸脫竣酶陰性是本菌最大特點(diǎn)，三亞種區(qū)別:IMVIC試驗(yàn)：肺炎亞種一++,臭鼻亞種-+-D,鼻硬結(jié)亞種一十一。腸桿菌屬：最適溫30度，氧化酶陰性，有動(dòng)力，與大腸桿菌區(qū)別：IMVIC試驗(yàn)：腸：-++,大:++-o沙雷菌：最適溫10—36度，4%氯化鈉下可長,產(chǎn)生靈紅霉素（非水溶）和毗竣酸（水溶），關(guān)鍵生化是DNA+和葡萄糖酸鹽+。弧菌科：極端鞭毛，甘露醇，脂酶，生長需要NaCL,對(duì)0129敏感五項(xiàng)，弧菌屬+++++,氣單胞菌屬鄰單胞菌屬--+,發(fā)光桿菌-+/-++。前三可引起人類感染。霍亂菌：呈弧狀或豆點(diǎn)狀，滴片檢查見魚群狀G-菌，常用PH8。5的堿性蛋白月東水增菌培養(yǎng)，在硫代硫酸鹽一檸檬酸鹽一膽鹽一蔗糖平板（TCBS）上形成較大黃菌落，在含亞硫酸鉀或慶大霉素平板上呈灰褐色，有耐熱的特異性?？乖?--1群分AC的稻葉型，AB的小川型，ABC的彥島型）和不耐熱的非特異性H抗原，1992年發(fā)現(xiàn)的新流行的0139群，它即不被0—1群抗血清凝集,也不被02-0138群抗血清凝集，常用的保存或運(yùn)送有堿性蛋白月東水，文一臘二氏，卡一布運(yùn)送液。副溶血性弧菌：嗜鹽性弧菌，是我國沿海地區(qū)最常見的食物中毒病原菌，兩極濃染，NaCL最適35g/L,無鹽不長，PH7.0—9.5,最適7.7,在TCBS上不發(fā)酵蔗糖菌落綠色，100g/L鹽內(nèi)不長，神奈川試驗(yàn)是致病株能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血對(duì)馬紅細(xì)胞不溶血為陽性。氣單胞菌最適生長溫度30度,但在0—45度皆可生長o彎曲菌屬是一類微需氧菌，不分解糖,氧化酶+,菌體彎曲逞豆點(diǎn)狀，S狀或螺旋狀有動(dòng)力G-菌，5種5亞種,對(duì)人致病的主要是空腸（人類腹瀉最常見之一，43度生長，25度不生長）和胎兒亞種（免疫功能低下時(shí)的敗血癥，腦膜炎等，25度生長，43度不生長）,簡明彎曲菌在25度，43度均不生長，但都能在37度生長。要加入血液血清才能生長，常用Skirrow,Butzler,Campy-BAP等培養(yǎng)基，滴片可見投鏢式或螺旋狀。幽門螺桿菌：氧化酶+過氧化氫酶+,微需氧，37度生長,25度和42℃均不生長的G-菌，初分要三四天，與十二脂腸潰瘍和胃癌有關(guān)?！恫芟到y(tǒng)細(xì)菌學(xué)分類》的標(biāo)準(zhǔn)：G染特性，形態(tài)，鞭毛，芽胞，莢膜，代謝產(chǎn)物。有芽胞的厭氧菌只有梭菌屬包括83個(gè)種。厭氧菌每克糞中高達(dá)1012個(gè)，標(biāo)本絕不能被正常菌污染，應(yīng)盡量避免接觸空氣。最理想的標(biāo)本是組織，送到實(shí)驗(yàn)室后20—30分鐘內(nèi)處理完不超過2Ho應(yīng)接種固體和液體兩種培養(yǎng)基：盡量用新鮮培養(yǎng)基，2-4小時(shí)內(nèi)用完，應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10分鐘以驅(qū)氧并立即冷卻。每份標(biāo)本至少接種三個(gè)血平板，置于有氧，無氧，5%--10%CO2環(huán)境中培養(yǎng)。厭氧手套箱培養(yǎng)法是迄今最佳厭氧培養(yǎng)儀器之一，太氧狀態(tài)的指示劑有：美藍(lán)和刀天青，無氧時(shí)白色，有氧時(shí)美藍(lán)藍(lán)色，刀天青粉紅色。紫外線下出現(xiàn)熒光也是厭氧菌參考之一，卡那霉素用于梭桿菌與類桿菌的區(qū)分，甲硝哇用于厭氧菌和非厭氧菌的區(qū)別。氣液相色譜已成為鑒定厭氧菌及其分類比較可靠的方法。破傷風(fēng)桿菌：鼓槌狀，早期培養(yǎng)G+,48H后特別是芽胞形成后G-,的。和H抗原，主要癥狀為骨骼肌痙攣，不發(fā)酵糖類，能液化明膠產(chǎn)H2S。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+,20—50均能生長，最適為45度，雙層溶血，可分解糖類產(chǎn)酸產(chǎn)氣，出現(xiàn)洶涌發(fā)酵現(xiàn)象，分5型，主要是A型，外毒素以A毒素為主本質(zhì)是卵磷脂酶，有捻發(fā)感,青霉素為首選，萬古為次選。肉毒梭菌：G+,芽胞膠囊于次極端呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀，嚴(yán)格厭氧，8型，以A,B多見，毒素不耐熱，一分鐘煮沸即死。艱難梭菌:分離困難，主要以臨床和毒素來定，產(chǎn)生A,B兩種,A是腸毒素，B為細(xì)胞毒素，主要是因?yàn)槭褂么罅靠股?，以克林霉素常見。無芽胞厭氧菌是一大類正常菌群，引起感染是內(nèi)源性感染。黑色消化鏈球菌：G+,組織和器官感染。韋榮球菌屬（分小，產(chǎn)堿），G-,小見于上呼吸道感染，產(chǎn)堿見于腸道感染。白喉棒狀桿菌：G+,無莢無芽無鞭無毛，奈瑟染色成黃褐色顆粒成紫黑色，阿培特染色菌體呈藍(lán)綠色，異染顆粒成藍(lán)黑色。分離培養(yǎng)主要用：血平板，呂氏血清斜面（生長迅速，灰白色，S型，形態(tài)典型），亞硅酸鉀血瓊脂（菌落黑色）。一般不侵入血，但外毒素可入血引起毒血癥，不能立即送檢時(shí)應(yīng)浸于無菌生理鹽水或15%甘油鹽水中，出現(xiàn)各種心肌炎，軟腭麻痹是白喉晚期死亡的主要原因。需氧芽胞菌除炭疽外均有鞭毛。炭疽桿菌：最大的致病G+桿菌，菌落低倍鏡下卷發(fā)狀,不分解乳糖，對(duì)碘和氧化劑敏感，有菌體多糖，莢膜多肽，芽胞，炭疽毒素四抗菌素原，用1：1000的升汞固定5分鐘，其選擇培養(yǎng)基是成烷瞇血平板，鑒定試驗(yàn)有：串珠試驗(yàn)，噬菌體試驗(yàn)，重碳酸鹽毒力試驗(yàn)（有毒力形成芽胞呈M型），青霉素抑制試驗(yàn)等。蠟樣桿菌能耐受100度30分鐘。產(chǎn)單核李斯特菌：對(duì)人致病，B溶血，25度有動(dòng)力，能在4度進(jìn)行冷增菌，在半固體中可現(xiàn)倒傘狀，通過胎盤或產(chǎn)道感染新生兒是重要特點(diǎn)，常伴EB病毒引起傳單。分枝桿菌細(xì)胞壁含大量脂類，可占干重的60%,無內(nèi)外毒素，致病性與其索狀因子，蠟質(zhì)D,分枝菌酸有關(guān)。結(jié)核分枝桿菌：人型和牛型，曾發(fā)現(xiàn)G+非抗酸顆粒稱MUCH顆粒，無芽無鞭無莢，燭缸法不適，應(yīng)用二氧化碳培養(yǎng)皿，常用羅一琴或米氏7H10培養(yǎng)基，35—40度可長，35—37最適，PH6.5—6.8,18h分裂一代，2—6周才能長出菌落，不發(fā)酵糖類，人型的煙酸，硝酸鹽還原，煙酰胺酶試驗(yàn)均陽性。可出現(xiàn)KOCH現(xiàn)象（初次不發(fā)生速發(fā)型過敏反應(yīng)），是KOCH在1891年觀察到。HAMSEN在1937年發(fā)現(xiàn)麻風(fēng)桿菌，G+,無動(dòng)力無芽無莢，人是唯一的宿主和傳染源，分瘤型和結(jié)核型。多數(shù)非發(fā)酵菌培養(yǎng)溫度以30度為宜，故常規(guī)應(yīng)先培養(yǎng)于35—37,再培養(yǎng)于30或室溫，觀察動(dòng)力以30或室溫12—24小時(shí)滴片為準(zhǔn)。氧化一發(fā)酵試驗(yàn)是確定非發(fā)酵與發(fā)酵菌是否利用糖的基本試驗(yàn)。HUGH—LEIFSON設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基只含0。2%蛋白月東，1%糖,指示劑是浸香草酚蘭。銅綠假單胞菌：G-,有鞭毛，20—42度長，最適是35,4度不長，液面可形成菌膜,色素有：綠膿素（溶于水和氯仿），熒光素是綠色熒光素（溶于水不溶于氯化）。不動(dòng)桿菌的特征是：氧化酶，硝酸鹽還原，動(dòng)力試驗(yàn)均陰性。主要是鮑曼和洛菲。流感嗜血桿菌要新鮮血液（含X和V因子），用石碳酸復(fù)或美藍(lán)單染呈現(xiàn)兩端濃染，有衛(wèi)星現(xiàn)象，副流感嗜血桿菌生長只要V因子。軍團(tuán)菌：1976年，USA費(fèi)城，常規(guī)不易著色，最適為36度，初次分離要L一半膀氨酸，含鐵鹽可促進(jìn)生長，主要可用活性碳一酵母浸出液平板（BCYE）,不分解糖。百日咳鮑特菌和副百日咳鮑特菌是百日咳病原菌，常用鮑一金培養(yǎng)基，有百日咳毒素，絲狀血細(xì)胞凝聚素和腺喋吟環(huán)化毒素。衣原體：沙眼，鸚鵡，肺炎。原體：姬染紫紅色，無繁殖力有傳染性。始體（網(wǎng)狀體），姬染蘭色，為繁殖型無傳染性，二分裂式。營專性細(xì)胞內(nèi)寄生。鼠亞種沙眼不侵犯人類，性病肉芽腫由沙眼LGV生物亞種（L1,L2,L3）三血清型引起。立克次體：人畜共患，有復(fù)雜的酶系統(tǒng)，對(duì)多種抗生素敏感。發(fā)熱多是稽留熱，恙蟲M染色是藍(lán)色，G染色呈暗紅色。除羅沙利馬體，巴爾通體外其它立克次體只能活在真核細(xì)胞內(nèi)，普氏（流行性和復(fù)發(fā)型斑疹）以人的體虱為傳播媒介，莫氏（地方性斑疹），印鼠客蚤，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是立克次體最常用的方法。支原體：無細(xì)胞壁，僅有細(xì)胞膜（外，中，內(nèi)，中間是脂質(zhì)，內(nèi)外是蛋白質(zhì)），最適PH7.6—8.6,D在95%N2,5%CO2中生長好，菌落呈“荷包蛋）樣，肺炎支原體：分離培養(yǎng)是確診支原體感染的可靠方法之一，40倍鏡下可見油滴狀菌落，100倍下可見桑根狀菌落。對(duì)人致病的厭氧主要是衣氏和牛氏放線菌，可見硫磺顆粒（放射狀），需氧主要是諾卡菌和馬杜拉放線菌（主要致病是足分枝菌）。星形諾卡菌致病最強(qiáng)，其次是巴西和脯鼠，抗酸染色有一定抗酸性可初步確定為諾卡菌。鉤體是致病性螺旋體中唯一能人工培養(yǎng)的，常用柯氏培養(yǎng)基，對(duì)酸堿敏感，最適是7.2—7.4,低于6.8,高于7.7生長不良，最適溫28—30,12小時(shí)分裂一次，伯氏疏螺旋體引起萊姆病。肝素抗凝全血不影響病毒培養(yǎng)。乙腦病毒以接種卵黃囊最佳，嗜神經(jīng)病毒最好接種小鼠腦內(nèi)，包涵體檢查不是特異性檢查。流感病毒：核心，基質(zhì)蛋白（M蛋白），包膜（由血凝素（HA）神經(jīng)氨酸酶（NA））后者是劃分流感病毒亞型的依據(jù)，易變異?？乖儺愋r(shí)是漂移，大時(shí)（形成新的亞種）是轉(zhuǎn)變。初次分離以接種羊膜腔最佳。副黏病毒：呼吸道合胞病毒是引起嬰幼兒下呼吸道疾病最常見的病毒，合胞體形成細(xì)胞融合多核巨細(xì)胞，胞內(nèi)有嗜酸性包涵體。副流感病毒（單負(fù)股RNA）最敏感的細(xì)胞是原代人胚腎和原代猴腎細(xì)胞，最常用的方法是紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)，血清學(xué)診斷難。腺病毒：不能在雞胚中增殖，只能在人源的組織細(xì)胞中增殖，有嗜堿性包涵體，24小時(shí)換培養(yǎng)液一次，避免細(xì)胞毒效應(yīng)。腸道病毒（單正股RNA）是人類最常見最重要的病毒。流腦病毒的結(jié)構(gòu)蛋白有：M（包膜內(nèi)），C（衣殼內(nèi)），E（嵌在包膜上的糖蛋白）三種，組成血凝素,最易感染的動(dòng)物是出生2—3天的乳鼠，通過三帶喙庫蚊傳播，豬是最重要的宿主和傳染源。森林腦炎由蟀傳播。出血熱病毒（單負(fù)股RNA）：漢坦病毒：可在人肺傳代細(xì)胞（A549）非洲綠猴腎細(xì)胞（VER—E6）人胚肺二倍體細(xì)胞（2BS）及地鼠腎細(xì)胞中增殖不引起明顯變化，我國流行的是I和II型，伴三痛（頭，眼眶，腰）及紅（面，頸，上胸部）。新疆出血熱病毒，登革熱：四個(gè)血清型，接種白紋伊蚊的傳代細(xì)胞（C6/36株）。病毒分離培養(yǎng)是HSV感染實(shí)驗(yàn)室診斷的最敏感方法，水痘一帶狀皰疹（VZV,雙股DNA）能在人胚二倍體細(xì)胞（HFDK）或人胚二倍體肺細(xì)胞（HFDL）中增殖，巨細(xì)胞病毒種屬特異性高，只能感染人，只能在成人纖維細(xì)胞中增殖，核內(nèi)有嗜堿性包涵體形似貓頭鷹眼。EB病毒一般用人臍血淋巴細(xì)胞或從外周血分離的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，主要侵犯B細(xì)胞，引起增殖和非增殖感染，狂大病毒：（單負(fù)股RNA）外形如子彈狀，在中樞神經(jīng)細(xì)胞中形成嗜酸性包涵體稱內(nèi)基小體。絕大部分致病性真菌屬于半知菌亞門。形態(tài)有單細(xì)胞和多細(xì)胞兩種，基本結(jié)構(gòu)：菌絲和抱子，鹿角狀菌絲僅見于黃癬菌，假菌絲與真菌絲的主要區(qū)別是它壁兩邊有時(shí)交叉，是由抱子延長而來，有性抱子有：卵，接合，子囊，擔(dān)。無性抱子有：葉狀，分生，抱子子囊。最常用沙保弱氏，最適溫22—28,最適PH5—6,培養(yǎng)4周以上，真菌菌落三型：酵母型，酵母樣，絲狀?？捎?0%氫氧化鉀加熱使標(biāo)本透明。血清出芽試驗(yàn)有芽管出者為白念菌，念珠菌中僅白念菌產(chǎn)厚壁抱子，試管培養(yǎng)是真菌分離，傳代，保存菌種最常用的方法。鑒定曲霉常用察氏瓊脂，以煙曲霉菌居多。藥敏：K—B法（半定量），公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)法，采用水解酪蛋白（M—H）瓊脂，PH7.2,90mm內(nèi)徑,注入25—30mL厚度為4mm,抗菌藥片直徑6.35mm,吸水量20微升。0.5麥?zhǔn)媳葷峁芟喈?dāng)于1.5X108/mlo校正后的菌液應(yīng)在15分鐘內(nèi)接種。各藥敏紙片間距不少于24mm,距平板內(nèi)緣不小于15mm。對(duì)所有產(chǎn)ESBLS的菌株應(yīng)報(bào)告耐所有青霉素，頭抱類及氨曲南。自泌尿道分離的腸桿菌不報(bào)氯霉素的敏感性。利福平不能單獨(dú)用于化療。至今還未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶的肺鏈。至今未發(fā)現(xiàn)肺鏈對(duì)萬古的抑菌圈小于17mm。定量評(píng)價(jià)抗菌藥物殺菌效力的試驗(yàn)主要是最低殺菌濃度（MBC）和殺菌曲線。抑菌濃度指數(shù)（FIC）,<0.5協(xié)同作用，0.5—1相加作用，1—2無關(guān)作用，>2拮抗作用。目前院內(nèi)感染主要是G-桿菌。寄生蟲宿主分：終，中間，儲(chǔ)存或保蟲，轉(zhuǎn)續(xù)。寄生蟲對(duì)宿主：奪取營養(yǎng)，機(jī)械損傷，化學(xué)毒，變應(yīng)原作用。流行特點(diǎn)：地方性，季節(jié)性，自然疫源性。土源性蠕蟲不用中間宿主生物源性要，蛔蟲感染期2—3個(gè)月，成蟲在小腸以空腸多，。鞭蟲寄生于肓腸生活史約一個(gè)月，人是唯一傳染源，蛻蟲寄生于回肓部，鉤蟲的絲狀蠅為感染期成蟲在小腸部可致大糞毒，黃腫病，異嗜癥，桑葉黃。絲蟲絲狀蝌寄生于大淋巴管或淋巴結(jié)內(nèi)可致流火，象皮腫，乳糜尿。吸蟲除血吸蟲外都是雌雄同體。旋毛蟲：成蟲和幼蟲在同一宿主，不用在外發(fā)育，但要轉(zhuǎn)換宿主，被寄生的宿主又是中間宿主，致病分：侵入期，幼蟲移行期，囊包形成期。檢驗(yàn)心活組織最可靠，免疫學(xué)檢驗(yàn)是臨床最常用的方法。吸蟲除血吸蟲（圓柱狀，雌雄異體，蟲卵致病最重）外都是兩側(cè)對(duì)稱，華枝睪吸蟲卵最小，姜片蟲蟲卵最大，肺吸蟲第一中間宿主為川卷螺，第二為淡水石蟹，囊蝴是感染期，致病分：膿腫期，包囊期，纖維瘢痕期。人是豬帶絳蟲唯心史觀一終宿主，豬或人是中間宿主。人是牛帶絳蟲唯一終宿主，只被成蟲寄生。痢疾阿米巴：包囊一小滋養(yǎng)體一包囊。杜氏利什曼蟲：黑熱病，分人源型（平原型），犬源型（山丘型），野生動(dòng)物型（荒漠型），主要要防治白蛉。陰道滴蟲有4根前鞭毛和1根后鞭毛。隱抱子蟲以空腸上端感染最重，是艾滋病主要死因之一。實(shí)驗(yàn)室管理1946年Belk和Sunderman首先調(diào)查了不同實(shí)驗(yàn)室間差異很大。1950年Levey和Jennings首先將Shewhart（USA,首先提出）工業(yè)質(zhì)量管理上的控制圖移植到醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中來。誤差是測(cè)定值與真值的差。精密度是每次測(cè)定值與算術(shù)平均值的符合程度。系統(tǒng)誤差決定正確度，可以校正和設(shè)法消除增加次數(shù)不能減少。隨機(jī)誤差決定精密度，不能修正，但可增加次數(shù)來減小。含有過失誤差的值為異常值。有效數(shù)字按照：四舍六入五單雙的原則。平均數(shù)是統(tǒng)計(jì)學(xué)中應(yīng)用最廣最重要的一個(gè)指標(biāo)體系，用來說明一組變量值的集中趨勢(shì)，中心位置或平均水平。均數(shù)應(yīng)用于：描述一組變量的平均水平具有代表性因而需同質(zhì)，用于呈正態(tài)分布的資料，只能反應(yīng)數(shù)據(jù)集中趨勢(shì)。正態(tài)分布總面積為1或100%,理論上：U+-0占總面積68%,U+-1.96o占95%,U+-2.85O占99%。質(zhì)控品要瓶間變異小，酶類項(xiàng)目一般CV%應(yīng)小于2%,其它分析物應(yīng)小于1%,凍干品其復(fù)溶后穩(wěn)定,2—8度不少于24小時(shí),零下20度不少于20天，某些不穩(wěn)定成份復(fù)溶前后4小時(shí)變異小于2%。質(zhì)控品到實(shí)驗(yàn)室后有效期一年以上。失控檢查測(cè)定方法本身才是最有效的方法。最有意義的是真失控批數(shù)和假失控批數(shù)和與之相應(yīng)的誤差檢出率（Ped,類似診斷試驗(yàn)的靈敏度）和假失控率（Pfr,相當(dāng)于診斷試驗(yàn)的特異性），一般臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制上Pfr值為何。0.01到0.05范圍內(nèi)的假失控率是可被認(rèn)為合理的。功效函數(shù)圖的重要作用是在控制方法的設(shè)計(jì)上保證常規(guī)試驗(yàn)達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量水平，并表達(dá)當(dāng)分析批中存在隨機(jī)誤差或系統(tǒng)誤差時(shí)決定分析批失控的概率。病人數(shù)據(jù)質(zhì)量控制種類：正態(tài)均值法（1965年HoffmannWaid）,眾數(shù)判斷法，移動(dòng)均值法（由Bull建立，用于血液學(xué)。）Delta—檢驗(yàn)系統(tǒng)，陰離子隙法，酸堿平衡法。允許總誤差可用為室內(nèi)質(zhì)控方法設(shè)計(jì)的起點(diǎn)亦可為室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)，能力評(píng)價(jià)采用Z比分?jǐn)?shù)時(shí)：Z小于或等于2時(shí)為滿意，大于2小于3時(shí)為有問題，大于3時(shí)為不滿意。每一次活動(dòng)每一分析項(xiàng)目未能達(dá)到至少80%可接受成績稱為本次活動(dòng)該分析項(xiàng)目不滿意。實(shí)驗(yàn)室對(duì)文件記錄必須保存兩年以上。計(jì)劃必須提供每次活動(dòng)至少5個(gè)標(biāo)本，一年三次。要保留所有發(fā)給出組織者的文件的復(fù)印件，實(shí)驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)：重復(fù)性試驗(yàn)：考察候選方法的隨機(jī)誤差?；厥赵囼?yàn)：主要用于確定比例誤差。干攏試驗(yàn)：衡量候選方法的準(zhǔn)確度形成恒定系統(tǒng)誤差。檢驗(yàn)知識(shí)拾趣：呂文虎克（荷蘭，發(fā)明顯微鏡），琴納（英國，創(chuàng)制牛痘疫苗），巴斯德（巴氏消毒法），李斯德（創(chuàng)消毒外科），郭霍（首先用固體培養(yǎng)基分離細(xì)菌和創(chuàng)郭霍氏鑒定原則），赫賽夫（建議用瓊脂作培養(yǎng)基），貝林（制白喉抗毒素獲諾貝爾），艾利希（抗體形成體液說），梅奇尼可夫（蘇聯(lián)，細(xì)胞免疫學(xué)說），伊凡洛夫基證明煙草花葉病是病毒引起。湯非凡（中國,1957年發(fā)現(xiàn)沙眼衣原體，）landsteiner（ABO血型發(fā)現(xiàn)者）和wiener于恒河猴（RhesusMonkey）發(fā)現(xiàn)Rh血型，最早組織開展臨床檢驗(yàn)室間質(zhì)控的人：Belk和Sunderman,1959年Yallow等開發(fā)出放射免疫分析法，1975年Kohler等創(chuàng)建單克隆抗體技術(shù)，英國人BenceJonec發(fā)現(xiàn)本周氏蛋白。，50年代，Skeggs首次介紹管道式自動(dòng)生化分析儀（Techicon公司產(chǎn)），連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀，隔離連續(xù)分析，分立式自動(dòng)生化分析儀模擬手工，應(yīng)用最多，能同測(cè)多項(xiàng)。，1969年Aderson設(shè)計(jì)離心式自，生化分析儀，能同步分析，但只能同測(cè)一項(xiàng)目。，80年代KODAK公司開發(fā)干片式自動(dòng)生化分析儀，評(píng)價(jià)生化儀的指標(biāo):自動(dòng)化程度，分析效率，應(yīng)用范圍，分析準(zhǔn)確度。1809年P(guān)erice發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象，1937年,瑞典Tiselins建立自由電泳，1948年Wieland和Fischer建立濾紙電泳。PT：能力對(duì)比分析，起源于美國，是EQAS（全球室間質(zhì)量保證系統(tǒng)）的主要組成內(nèi)容，CLIA88：美國88年臨床實(shí)驗(yàn)室修正案，S1為某一項(xiàng)目得分，S2為總項(xiàng)目得分，滿意為S1,S2均在80分以上，SOP：標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程EQA：室間質(zhì)量評(píng)價(jià)QC：質(zhì)控IQC：室內(nèi)質(zhì)控，國際通用真空采血管顏色標(biāo)志：紅色：普通血清管，橘紅色：快速血清管（內(nèi)含促凝劑），金黃色：惰性分離膠促凝管，綠色：肝素抗凝管，淺綠色：血漿分離管（肝素鋰），黑色：枸椽酸鈉血沉管,淺蘭色：枸椽酸鈉血凝管，紫色：EDTA抗凝管，灰色：草酸鉀/氟化鈉抗凝管（測(cè)血糖時(shí)常用），生化試劑第一，二代為手工配制，三代為凍干粉，四代為液體雙生化試劑。，第一次檢查尿中是否有蛋白的是中國人，既“泡沫尿會(huì)有疾病”，第一次測(cè)血糖的是埃及人,用是否會(huì)吸引螞蟻來檢驗(yàn)。，LIS：實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)。止血帶壓迫最好不過半分鐘。生化儀校準(zhǔn)法：1,K因素法，適用于濃度與吸光度成比例變化，較常用。2,非線性法（曲線擬合法），適用于濃度與吸光度不成比例變化。常用流動(dòng)相的極性大小是：水〉甲醇〉乙醇〉丙醇〉正丁醇〉乙酸乙酯〉氯仿〉乙醛〉甲苯〉四氯化碳〉環(huán)已烷＞石油酸。離子選擇電極測(cè)定的是離子活度，而不是離子濃度，a=fc,F是活度系數(shù)?？俁NA測(cè)定法有:異硫氟酸呱一氯化鈉超速離心法，鹽酸胭一有機(jī)溶劑法。Broin和Henri于1902,03年提出中間產(chǎn)物學(xué)說。腦脊液中蛋白質(zhì)少，測(cè)定用考馬斯亮蘭染料結(jié)合法（線性差，手工多用），鄰苯三酚紅鋁絡(luò)合顯色法（線性好，多用自動(dòng)分析）。1977年Sanger■創(chuàng)建雙