07212005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年07212005-12吸光光度法簡介第七章第七章（2）22005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年吸光光度法簡介第七章第七章（2）22005-127.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度前節(jié)要點(diǎn)復(fù)習(xí)7.3.1靈敏度的表示方法7.3.2影響準(zhǔn)確度的因素7.3.3測量條件的選擇7.4吸光光度法分析條件的選擇7.4.1酸度的選擇7.4.2顯色劑用量的選擇7.4.3其它條件的選擇32005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度前節(jié)要點(diǎn)復(fù)習(xí)7.4吸7.5吸光光度法應(yīng)用簡介7.5.1微量組分的測定7.5.2示差光度法7.5.3光度滴定法7.5.4絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定7.5.5弱酸弱堿離解常數(shù)的測定7.5.6雙波長分光光度法7.5.7導(dǎo)數(shù)分光光度法前節(jié)要點(diǎn)復(fù)習(xí)42005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.5吸光光度法應(yīng)用簡介7.5.1微量組分的測定前節(jié)7.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度靈敏度吸光光度法是一種適合于微量組分測定的儀器分析法，檢測限大多可達(dá)10-3~10-4g/L或~g/mL數(shù)量級。準(zhǔn)確度能滿足微量組分測定的要求。一般相對誤差2~5%。例如，石灰石中微量鐵，含量為0.067%，相對誤差以5%計(jì)算，結(jié)果為0.064~0.070%，絕對誤差為0.003%比較常量分析：鐵礦中的鐵含量測定，含量為80%，若相對誤差以5%計(jì)算，結(jié)果為84~76%，絕對誤差為4%52005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度靈敏度吸光光度法是一種適實(shí)際測得的是條件摩爾吸收系數(shù)，′對摩爾系數(shù)的理解之一332+桔紅色508鄰二氮菲=1.1104實(shí)際測定摩爾吸收系數(shù)是對吸光物質(zhì)而言，是由吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征，吸光面積等因素決定。靈敏度的表示方法摩爾吸光系數(shù)當(dāng)b=1時，A=CAC062005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年實(shí)際測得的是條件摩爾吸收系數(shù)，′對摩爾系數(shù)的理解之一33對摩爾系數(shù)的理解之二對同一種待測物質(zhì)，不同的方法具有不同的，表明具有不同的靈敏度。例，分光光度法測銅銅試劑法測Cu426=1.28104L．mol-1．cm-1雙硫腙法測Cu495=1.58105L．mol-1．cm-1一般情況<104

~104~105

>105低靈敏度中等靈敏度高靈敏度靈敏度不同的本質(zhì)原因是什么？靈敏度的表示方法72005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年對摩爾系數(shù)的理解之二對同一種待測物質(zhì)，不同的方法具有不同的吸光系數(shù)a比吸光系數(shù)Sandell靈敏度SS值表示單位截面積光程測得吸光度為0.001時，每mL溶液中待測物質(zhì)的微克數(shù)。單位為g．cm-2。Sandell靈敏度與的關(guān)系靈敏度靈敏度靈敏度的表示方法摩爾吸光系數(shù)問題：如何測量S值？S值是否與光程有關(guān)？82005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年吸光系數(shù)a比吸光系數(shù)Sandell靈敏度SS影響準(zhǔn)確度的因素儀器測量誤差根據(jù)誤差傳遞公式，可以推導(dǎo)出濃度測量的相對誤差為T=0.368=36.8%A=0.434為了使測量誤差<5%，控制溶液的透光率T=70~10%誤差公式推導(dǎo)dc/c(%)T(%)dT=2%dT=1%dT=0.1%當(dāng)dT=1%時誤差最小A=0.155~1.0092005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年影響準(zhǔn)確度的因素儀器測量誤差根據(jù)誤差傳遞公式，可以推導(dǎo)出濃度儀器測量誤差公式推導(dǎo)吸光定律根據(jù)誤差傳遞公式，有又得濃度測量的相對偏差令得T=0.368=36.8%A=0.434此時，儀器測量誤差最小102005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年儀器測量誤差公式推導(dǎo)吸光定律根據(jù)誤差傳遞公式，有又得濃度測化學(xué)反應(yīng)的影響M+L=MLmax吸光定律光度法測定通常在一個較大的濃度范圍內(nèi)作工作曲線，當(dāng)′或隨著濃度的變化而變化，或隨著副反應(yīng)的變化而變化時，就表現(xiàn)出對吸光定律的偏離。實(shí)際計(jì)算例：M+L

→ML,ML2,ML3112233如果在1進(jìn)行測定，結(jié)果如左圖所示AC(M)AMLML2ML31ML3ML2ML什么條件滿足？最有可能在什么情況下得到？112005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年化學(xué)反應(yīng)的影響M+L=MLma例，聚合引起的對吸光定律的偏離2max=660nm二聚體：max=610nmACmax=660nm單體：A660nm610nm122005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年例，聚合引起的對吸光定律的偏離2max=660nm二測量條件的選擇測量波長的選擇無干擾，選擇max有干擾AA待測溶液吸光度的選擇（為什么？）選擇C選擇b1、非單色光影響小2、靈敏度高132005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年測量條件的選擇測量波長的選擇無干擾，選擇max有干擾AA參比液的選擇原則：扣除非待測組分的吸收以顯色反應(yīng)為例進(jìn)行討論M+R=M-Rmax試液 顯色劑溶劑吸光物質(zhì)參比液組成無吸收無吸收光學(xué)透明溶劑基質(zhì)吸收無吸收吸收不加顯色劑的試液無吸收吸收吸收顯色劑基質(zhì)吸收吸收吸收吸收顯色劑+試液+待測組分的掩蔽劑若欲測M-R的吸收maxA（樣）=A（待測吸光物質(zhì)）+

A（干擾）+A（池）A（參比）=

A（干擾）+A（池）142005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年參比液的選擇原則：扣除非待測組分的吸收以顯色反應(yīng)為例進(jìn)行討論7.4吸光光度法分析條件的選擇顯色反應(yīng)有機(jī)物質(zhì)官能團(tuán)強(qiáng)吸收直接測定UV-VIS官能團(tuán)弱吸收衍生化反應(yīng)UV-VIS顯色反應(yīng)無機(jī)物質(zhì)通常通過顯色反應(yīng)生成吸光系數(shù)大的有色物質(zhì)進(jìn)行測定，以提高靈敏度332+桔紅色max鄰二氮菲152005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.4吸光光度法分析條件的選擇顯色反應(yīng)有機(jī)物質(zhì)官能團(tuán)強(qiáng)吸酸度的選擇酸度的影響副反應(yīng)M+nR=MRnOH-H+存在型體的變化RH=R-

+H+

12生成不同配比的絡(luò)合物例，磺基水楊酸–Fe3+pH=2~3FeR紫紅色pH=4~7FeR2橙色pH=8~10FeR3黃色162005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年酸度的選擇酸度的影響副反應(yīng)M+nR=MRn酸度的選擇理論計(jì)算以作圖可得適宜pH范圍實(shí)際工作中，作A~pH曲線，尋找適宜pH范圍。ApHM+nR=MRnOH-H+172005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年酸度的選擇理論計(jì)算以作圖可得適宜pH范圍實(shí)際工作中，作A顯色劑的用量M+nR=MRn定量反應(yīng)實(shí)際工作中，作A~CR曲線，尋找適宜CR范圍。ACR182005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年顯色劑的用量M+nR=MRn定量反應(yīng)實(shí)際工溫度的選擇實(shí)際工作中，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度。ATATATATAT反應(yīng)時間的選擇實(shí)際工作中，作A~t曲線，尋找適宜反應(yīng)時間。192005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年溫度的選擇實(shí)際工作中，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫7.5吸光光度法應(yīng)用簡介微量組分的測定單組分的測定多組分的測定介紹一種

解聯(lián)立方程法AXY12根據(jù)加合性原則解聯(lián)立方程，可求得Cx,Cy為物質(zhì)的特征參數(shù)，可通過配制標(biāo)準(zhǔn)溶液測得。請?jiān)O(shè)計(jì)一個測定兩組分的濃度的實(shí)驗(yàn)方案ACs(x)純物質(zhì)或共存物質(zhì)不干擾202005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.5吸光光度法應(yīng)用簡介微量組分的測定單組分的測定多組分單組分的測定微量鐵的測定氨基酸的測定鄰二氮菲法茚三酮法蛋白質(zhì)的測定考馬斯亮藍(lán)法總磷的測定磷鉬藍(lán)法海水中營養(yǎng)鹽的測定212005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年單組分的測定微量鐵的測定氨基酸的測定鄰二氮菲法茚三酮法蛋白質(zhì)示差光度法方法比較常規(guī)法以空白溶劑為參比示差法以濃度為Cs

的標(biāo)準(zhǔn)溶液為參比A△C△CxA′（Cx>Cs）適宜

高

濃度的測定思考：（Cx

Cs）時情況怎樣？222005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年示差光度法方法比較常規(guī)法以空白溶劑為參比示差法以濃度為Cs示差法的誤差方法定量原理相對誤差常規(guī)法示差法∴Tr>Tx∵I0>Is有結(jié)論：示差法提高了準(zhǔn)確度例題232005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年示差法的誤差方法定量原理相對誤差常規(guī)法示差法∴Tr>T例題已知dT=0.01,樣品Tx=2.00%,標(biāo)準(zhǔn)Ts=10.0%示差法常規(guī)法誤差示差法誤差已知dT=0.01,樣品Tx=2.00%,標(biāo)準(zhǔn)Ts=5.00%242005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年例題已知dT=0.01,樣品Tx=2.00%,示差法提高準(zhǔn)確度的實(shí)質(zhì)常規(guī)法TxT051050100落在測量誤差較大的范圍示差法T051050100TrTsTs落在測量誤差較小的范圍結(jié)論：示差法通過提高測量的準(zhǔn)確度提高了方法的準(zhǔn)確度252005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年示差法提高準(zhǔn)確度的實(shí)質(zhì)常規(guī)法TxT051050100落在測光度滴定法光度滴定法是依據(jù)滴定過程中溶液的吸光度的突變來確定滴定終點(diǎn)的滴定分析方法。例,滴定反應(yīng)M+R=MR隨著R的加入，[M][MR]滴定曲線隨各物質(zhì)的吸收性質(zhì)的不同而不同。R=0,M=0,MR>0（不考慮滴定體積的變化）AVRVspR>0,M=0,MR>0AVRR>MRVspR<MRAVRVsp更多例子滴定曲線分析262005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年光度滴定法光度滴定法是依據(jù)滴定過程中溶液的吸光度的突變來確定光度滴定與指示劑法的比較1、線性滴定法AV2、適宜低濃度的滴定3、背景有色溶液也能滴定（為什么？）思考題指示劑法和光度滴定的方法原理的共性？方法原理的應(yīng)用電位滴定，發(fā)光滴定Ve272005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年光度滴定與指示劑法的比較1、線性滴定法AV2、適宜低濃度的滴滴定曲線分析AVM吸收M+R=MRR為滴定劑AVMR無吸收R吸收AV返回AV同學(xué)自己分析282005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年滴定曲線分析AVM吸收M+R=MRR為滴更多例子R=0,M>0,MR>0R>0,M=0,MR=0AVRM<MRVspM>MRAVRVspAVRVspR=0,M>0,MR=0R>0,M>0,MR=0請同學(xué)們自己分析292005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年更多例子R=0,M>0,MR>0R絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定摩爾比法測絡(luò)合比（飽和法）M+nR=MRnCM,固定；CR,從0開始增大CMRnCR在特定波長測定R=0,M=0,MRn>0ACR/CMnR>0,M>0,MRn=0ACR/CMn302005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定摩爾比法測絡(luò)合比（飽和法）M等摩爾連續(xù)變化法（Job）測絡(luò)合比M+nR=MRnCM+CR=常數(shù)CM/C從0→1在特定波長測定R=0,M=0,MRn>000.51.0ACM/C0.33n=1,CM/C=0.5n=2,CM/C=0.3300.51.0ACM/CR>0,M>0,MRn=0CM/C=0.5，n=1312005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年等摩爾連續(xù)變化法（Job）測絡(luò)合比M+nR=條件穩(wěn)定常數(shù)的測定00.51.0ACM/CA′A′<A0由于絡(luò)合物離解引起離解度MR=R+M總濃度c平衡濃度c(1-a)caca將代入上式便可求出絡(luò)合物的條件穩(wěn)定常數(shù)A0322005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年條件穩(wěn)定常數(shù)的測定00.51.0ACM/CA′A′<A弱酸弱堿離解常數(shù)的測定HR

=H++

R-HR用光度法可以測定其離解常數(shù)RAHRRHRR用吸光值表征，相對于pH作圖，可求得pKa或332005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年弱酸弱堿離解常數(shù)的測定HR=H+配制一系列不同pH,濃度C相同的溶液半中和法pH在HR測吸光度ApHRAHRRHRpH<pKa-1C=[HR]pH>pKa+1C=[R-]pH=pKa[HR]/[R-]=1A2A1測得A2測得A1A′對應(yīng)的pH即為pKa

A′pKa

342005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年配制一系列不同pH,濃度C相同的溶液半中和法pH在截距法在上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上作數(shù)據(jù)處理對特定pHb=1cmpH<pKa-1C=[HR]pH>pKa+1C=[R-]代入，得整理，得作圖，直線截距為pKapH352005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年截距法在上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上作數(shù)據(jù)處理對特定pHb=1雙波長分光光度法21AXY∵∴Y

的存在不干擾X的測定光源單色器單色器檢測器切光器狹縫吸收池問題362005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年雙波長分光光度法21AXY∵∴Y的存在不干擾X的問題1.雙波長法與常規(guī)參比法比較，有什么特點(diǎn)？AXY122.如何借助于雙波長法消除干擾？光源單色器單色器檢測器切光器狹縫吸收池372005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年問題1.雙波長法與常規(guī)參比法比較，有什么特點(diǎn)？AXY1對比吸收系數(shù)的理解c(g/100mL),b=1cm例如撲熱息痛的測定：取撲熱息痛約40mg，精密稱定，置250mL量瓶中，加NaOH(0.1mol/L)50mL溶解，加水至刻度，搖勻，精密量取5mL，置100mL量瓶中，加NaOH(0.1mol/L)10mL，加水至刻度，搖勻，在257nm±1的波長處測定吸光度，按C8H9NO2的比吸收系數(shù)為715計(jì)算，即得。382005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年對比吸收系數(shù)的理解c(g/100mL),b=要點(diǎn)1、Plank條件2、物質(zhì)的電子結(jié)構(gòu)不同，所能吸收光的波長也不同，這就構(gòu)成了物質(zhì)對光的選擇吸收基礎(chǔ)。3、在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的濃度成正比。吸光定律c：mol/L摩爾吸光系數(shù)，L·mol–1·cm-1K

c：g/LK

a吸光系數(shù)，L·g–1·cm-10.575392005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年要點(diǎn)1、Plank條件2、物質(zhì)的電子結(jié)構(gòu)不同，所能吸收要點(diǎn)靈敏度及表示方法：吸收系數(shù)，S；準(zhǔn)確度及影響因素：相對誤差2~5%；測量誤差；化學(xué)平衡移動引起的誤差。吸光測量條件的選擇：波長、濃度、參比的選擇分析條件條件的選擇：酸度、濃度、溫度、時間方法介紹光度滴定；示差法；解聯(lián)立方程法吸收定律，吸收系數(shù)及其性質(zhì)402005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年要點(diǎn)靈敏度及表示方法：吸收系數(shù)，S；準(zhǔn)確度及影響因素：相對誤072412005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年07212005-12吸光光度法簡介第七章第七章（2）422005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年吸光光度法簡介第七章第七章（2）22005-127.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度前節(jié)要點(diǎn)復(fù)習(xí)7.3.1靈敏度的表示方法7.3.2影響準(zhǔn)確度的因素7.3.3測量條件的選擇7.4吸光光度法分析條件的選擇7.4.1酸度的選擇7.4.2顯色劑用量的選擇7.4.3其它條件的選擇432005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度前節(jié)要點(diǎn)復(fù)習(xí)7.4吸7.5吸光光度法應(yīng)用簡介7.5.1微量組分的測定7.5.2示差光度法7.5.3光度滴定法7.5.4絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定7.5.5弱酸弱堿離解常數(shù)的測定7.5.6雙波長分光光度法7.5.7導(dǎo)數(shù)分光光度法前節(jié)要點(diǎn)復(fù)習(xí)442005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.5吸光光度法應(yīng)用簡介7.5.1微量組分的測定前節(jié)7.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度靈敏度吸光光度法是一種適合于微量組分測定的儀器分析法，檢測限大多可達(dá)10-3~10-4g/L或~g/mL數(shù)量級。準(zhǔn)確度能滿足微量組分測定的要求。一般相對誤差2~5%。例如，石灰石中微量鐵，含量為0.067%，相對誤差以5%計(jì)算，結(jié)果為0.064~0.070%，絕對誤差為0.003%比較常量分析：鐵礦中的鐵含量測定，含量為80%，若相對誤差以5%計(jì)算，結(jié)果為84~76%，絕對誤差為4%452005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.3吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度靈敏度吸光光度法是一種適實(shí)際測得的是條件摩爾吸收系數(shù)，′對摩爾系數(shù)的理解之一332+桔紅色508鄰二氮菲=1.1104實(shí)際測定摩爾吸收系數(shù)是對吸光物質(zhì)而言，是由吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征，吸光面積等因素決定。靈敏度的表示方法摩爾吸光系數(shù)當(dāng)b=1時，A=CAC0462005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年實(shí)際測得的是條件摩爾吸收系數(shù)，′對摩爾系數(shù)的理解之一33對摩爾系數(shù)的理解之二對同一種待測物質(zhì)，不同的方法具有不同的，表明具有不同的靈敏度。例，分光光度法測銅銅試劑法測Cu426=1.28104L．mol-1．cm-1雙硫腙法測Cu495=1.58105L．mol-1．cm-1一般情況<104

~104~105

>105低靈敏度中等靈敏度高靈敏度靈敏度不同的本質(zhì)原因是什么？靈敏度的表示方法472005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年對摩爾系數(shù)的理解之二對同一種待測物質(zhì)，不同的方法具有不同的吸光系數(shù)a比吸光系數(shù)Sandell靈敏度SS值表示單位截面積光程測得吸光度為0.001時，每mL溶液中待測物質(zhì)的微克數(shù)。單位為g．cm-2。Sandell靈敏度與的關(guān)系靈敏度靈敏度靈敏度的表示方法摩爾吸光系數(shù)問題：如何測量S值？S值是否與光程有關(guān)？482005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年吸光系數(shù)a比吸光系數(shù)Sandell靈敏度SS影響準(zhǔn)確度的因素儀器測量誤差根據(jù)誤差傳遞公式，可以推導(dǎo)出濃度測量的相對誤差為T=0.368=36.8%A=0.434為了使測量誤差<5%，控制溶液的透光率T=70~10%誤差公式推導(dǎo)dc/c(%)T(%)dT=2%dT=1%dT=0.1%當(dāng)dT=1%時誤差最小A=0.155~1.00492005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年影響準(zhǔn)確度的因素儀器測量誤差根據(jù)誤差傳遞公式，可以推導(dǎo)出濃度儀器測量誤差公式推導(dǎo)吸光定律根據(jù)誤差傳遞公式，有又得濃度測量的相對偏差令得T=0.368=36.8%A=0.434此時，儀器測量誤差最小502005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年儀器測量誤差公式推導(dǎo)吸光定律根據(jù)誤差傳遞公式，有又得濃度測化學(xué)反應(yīng)的影響M+L=MLmax吸光定律光度法測定通常在一個較大的濃度范圍內(nèi)作工作曲線，當(dāng)′或隨著濃度的變化而變化，或隨著副反應(yīng)的變化而變化時，就表現(xiàn)出對吸光定律的偏離。實(shí)際計(jì)算例：M+L

→ML,ML2,ML3112233如果在1進(jìn)行測定，結(jié)果如左圖所示AC(M)AMLML2ML31ML3ML2ML什么條件滿足？最有可能在什么情況下得到？512005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年化學(xué)反應(yīng)的影響M+L=MLma例，聚合引起的對吸光定律的偏離2max=660nm二聚體：max=610nmACmax=660nm單體：A660nm610nm522005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年例，聚合引起的對吸光定律的偏離2max=660nm二測量條件的選擇測量波長的選擇無干擾，選擇max有干擾AA待測溶液吸光度的選擇（為什么？）選擇C選擇b1、非單色光影響小2、靈敏度高532005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年測量條件的選擇測量波長的選擇無干擾，選擇max有干擾AA參比液的選擇原則：扣除非待測組分的吸收以顯色反應(yīng)為例進(jìn)行討論M+R=M-Rmax試液 顯色劑溶劑吸光物質(zhì)參比液組成無吸收無吸收光學(xué)透明溶劑基質(zhì)吸收無吸收吸收不加顯色劑的試液無吸收吸收吸收顯色劑基質(zhì)吸收吸收吸收吸收顯色劑+試液+待測組分的掩蔽劑若欲測M-R的吸收maxA（樣）=A（待測吸光物質(zhì)）+

A（干擾）+A（池）A（參比）=

A（干擾）+A（池）542005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年參比液的選擇原則：扣除非待測組分的吸收以顯色反應(yīng)為例進(jìn)行討論7.4吸光光度法分析條件的選擇顯色反應(yīng)有機(jī)物質(zhì)官能團(tuán)強(qiáng)吸收直接測定UV-VIS官能團(tuán)弱吸收衍生化反應(yīng)UV-VIS顯色反應(yīng)無機(jī)物質(zhì)通常通過顯色反應(yīng)生成吸光系數(shù)大的有色物質(zhì)進(jìn)行測定，以提高靈敏度332+桔紅色max鄰二氮菲552005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.4吸光光度法分析條件的選擇顯色反應(yīng)有機(jī)物質(zhì)官能團(tuán)強(qiáng)吸酸度的選擇酸度的影響副反應(yīng)M+nR=MRnOH-H+存在型體的變化RH=R-

+H+

12生成不同配比的絡(luò)合物例，磺基水楊酸–Fe3+pH=2~3FeR紫紅色pH=4~7FeR2橙色pH=8~10FeR3黃色562005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年酸度的選擇酸度的影響副反應(yīng)M+nR=MRn酸度的選擇理論計(jì)算以作圖可得適宜pH范圍實(shí)際工作中，作A~pH曲線，尋找適宜pH范圍。ApHM+nR=MRnOH-H+572005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年酸度的選擇理論計(jì)算以作圖可得適宜pH范圍實(shí)際工作中，作A顯色劑的用量M+nR=MRn定量反應(yīng)實(shí)際工作中，作A~CR曲線，尋找適宜CR范圍。ACR582005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年顯色劑的用量M+nR=MRn定量反應(yīng)實(shí)際工溫度的選擇實(shí)際工作中，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度。ATATATATAT反應(yīng)時間的選擇實(shí)際工作中，作A~t曲線，尋找適宜反應(yīng)時間。592005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年溫度的選擇實(shí)際工作中，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫7.5吸光光度法應(yīng)用簡介微量組分的測定單組分的測定多組分的測定介紹一種

解聯(lián)立方程法AXY12根據(jù)加合性原則解聯(lián)立方程，可求得Cx,Cy為物質(zhì)的特征參數(shù)，可通過配制標(biāo)準(zhǔn)溶液測得。請?jiān)O(shè)計(jì)一個測定兩組分的濃度的實(shí)驗(yàn)方案ACs(x)純物質(zhì)或共存物質(zhì)不干擾602005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年7.5吸光光度法應(yīng)用簡介微量組分的測定單組分的測定多組分單組分的測定微量鐵的測定氨基酸的測定鄰二氮菲法茚三酮法蛋白質(zhì)的測定考馬斯亮藍(lán)法總磷的測定磷鉬藍(lán)法海水中營養(yǎng)鹽的測定612005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年單組分的測定微量鐵的測定氨基酸的測定鄰二氮菲法茚三酮法蛋白質(zhì)示差光度法方法比較常規(guī)法以空白溶劑為參比示差法以濃度為Cs

的標(biāo)準(zhǔn)溶液為參比A△C△CxA′（Cx>Cs）適宜

高

濃度的測定思考：（Cx

Cs）時情況怎樣？622005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年示差光度法方法比較常規(guī)法以空白溶劑為參比示差法以濃度為Cs示差法的誤差方法定量原理相對誤差常規(guī)法示差法∴Tr>Tx∵I0>Is有結(jié)論：示差法提高了準(zhǔn)確度例題632005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年示差法的誤差方法定量原理相對誤差常規(guī)法示差法∴Tr>T例題已知dT=0.01,樣品Tx=2.00%,標(biāo)準(zhǔn)Ts=10.0%示差法常規(guī)法誤差示差法誤差已知dT=0.01,樣品Tx=2.00%,標(biāo)準(zhǔn)Ts=5.00%642005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年例題已知dT=0.01,樣品Tx=2.00%,示差法提高準(zhǔn)確度的實(shí)質(zhì)常規(guī)法TxT051050100落在測量誤差較大的范圍示差法T051050100TrTsTs落在測量誤差較小的范圍結(jié)論：示差法通過提高測量的準(zhǔn)確度提高了方法的準(zhǔn)確度652005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年示差法提高準(zhǔn)確度的實(shí)質(zhì)常規(guī)法TxT051050100落在測光度滴定法光度滴定法是依據(jù)滴定過程中溶液的吸光度的突變來確定滴定終點(diǎn)的滴定分析方法。例,滴定反應(yīng)M+R=MR隨著R的加入，[M][MR]滴定曲線隨各物質(zhì)的吸收性質(zhì)的不同而不同。R=0,M=0,MR>0（不考慮滴定體積的變化）AVRVspR>0,M=0,MR>0AVRR>MRVspR<MRAVRVsp更多例子滴定曲線分析662005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年光度滴定法光度滴定法是依據(jù)滴定過程中溶液的吸光度的突變來確定光度滴定與指示劑法的比較1、線性滴定法AV2、適宜低濃度的滴定3、背景有色溶液也能滴定（為什么？）思考題指示劑法和光度滴定的方法原理的共性？方法原理的應(yīng)用電位滴定，發(fā)光滴定Ve672005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年光度滴定與指示劑法的比較1、線性滴定法AV2、適宜低濃度的滴滴定曲線分析AVM吸收M+R=MRR為滴定劑AVMR無吸收R吸收AV返回AV同學(xué)自己分析682005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年滴定曲線分析AVM吸收M+R=MRR為滴更多例子R=0,M>0,MR>0R>0,M=0,MR=0AVRM<MRVspM>MRAVRVspAVRVspR=0,M>0,MR=0R>0,M>0,MR=0請同學(xué)們自己分析692005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年更多例子R=0,M>0,MR>0R絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定摩爾比法測絡(luò)合比（飽和法）M+nR=MRnCM,固定；CR,從0開始增大CMRnCR在特定波長測定R=0,M=0,MRn>0ACR/CMnR>0,M>0,MRn=0ACR/CMn702005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定摩爾比法測絡(luò)合比（飽和法）M等摩爾連續(xù)變化法（Job）測絡(luò)合比M+nR=MRnCM+CR=常數(shù)CM/C從0→1在特定波長測定R=0,M=0,MRn>000.51.0ACM/C0.33n=1,CM/C=0.5n=2,CM/C=0.3300.51.0ACM/CR>0,M>0,MRn=0CM/C=0.5，n=1712005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年等摩爾連續(xù)變化法（Job）測絡(luò)合比M+nR=條件穩(wěn)定常數(shù)的測定00.51.0ACM/CA′A′<A0由于絡(luò)合物離解引起離解度MR=R+M總濃度c平衡濃度c(1-a)caca將代入上式便可求出絡(luò)合物的條件穩(wěn)定常數(shù)A0722005-12GXQ分析化學(xué)2005-2006學(xué)年條件穩(wěn)定常數(shù)的測定00.51.0ACM/CA′A′<A弱酸弱堿離解常數(shù)的測定