生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一般操作方法一．生理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法概述生理學(xué)實(shí)驗(yàn)一般可分為急性實(shí)驗(yàn)法和慢性實(shí)驗(yàn)法兩大類。急性實(shí)驗(yàn)法是在無痛條件下剖開動(dòng)物身體，對某一兩個(gè)器官進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察。實(shí)驗(yàn)過程不能太長，試驗(yàn)后將動(dòng)物處死。它又可分為兩種：（1） 離體實(shí)驗(yàn)法將要研究的器官或組織從活的或剛處死的動(dòng)物上取出，置于接近正常生理?xiàng)l件的人工環(huán)境中，以觀察、研究其生理機(jī)能。如離體蛙心灌流等。（2）在體實(shí)驗(yàn)法動(dòng)物在麻醉或毀壞腦或脊髓的狀態(tài)下，用手術(shù)的方法暴露某一器官，觀察、研究其機(jī)能及變化規(guī)律。如心搏過程的觀察、小腸運(yùn)動(dòng)的觀察等。慢性實(shí)驗(yàn)法在無菌條件下對健康動(dòng)物進(jìn)行手術(shù)，暴露要研究的器官或摘除、破壞某一器官，然后在接近正常生活條件下，觀察所暴露器官的某些功能、以及摘除或破壞某器官后所產(chǎn)生的功能紊亂等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的固定在手術(shù)過程中，必須將麻醉動(dòng)物進(jìn)行固定，以限制動(dòng)物的活動(dòng)，保證實(shí)驗(yàn)或手術(shù)的利進(jìn)行。常用的固定方法有兩種：背位固定法將動(dòng)物的背部直接接觸手術(shù)臺(tái)的固定方法。在呼吸、循環(huán)、消化、泌尿等試驗(yàn)中均采用此法。腹部固定法將動(dòng)物的腹部直接接觸手術(shù)臺(tái)的固定方法。這種固定法適用進(jìn)行腦脊髓的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉為了使動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)過程中保持安靜，不掙扎，必須對動(dòng)物進(jìn)行麻醉。麻醉的深淺可以從呼吸、某些反射的消失、肌肉的緊張程度和瞳孔的大小等加以判斷。一般用夾捏后肢股部肌肉以觀察其反應(yīng)的簡易方法了解動(dòng)物的麻醉深度。（一） 常用麻醉藥麻醉藥可分為局部麻醉劑和全身麻醉劑兩種。在生理實(shí)驗(yàn)中，常采用全身麻醉法，如揮發(fā)性的乙醚和非揮發(fā)性的巴比妥類、水合氯醛等。（二） 麻醉藥的給藥途徑和方法非揮發(fā)性麻醉藥的給藥途徑為注射給藥法，主要有靜脈、腹腔、肌肉、皮下和淋巴囊注射。.靜脈注射：兔的部位為耳緣靜脈，兔耳的外緣血管為靜脈，中央的血管為動(dòng)脈。注射前，先剪去注射部位的被毛，用左手食指和中指夾住耳緣靜脈近心端，使其充血，并用左拇指和無名指固定兔耳。用左手持注射器將針頭順血管方向刺入靜脈，刺入后再將左手食指和中指移至針頭處，協(xié)同拇指將針頭固定靜脈內(nèi)，便可緩緩注射。如注射阻力過大或局部腫脹，說明針頭未刺入血管，應(yīng)拔出重新刺入。首次注射應(yīng)從靜脈的遠(yuǎn)心端開始，以便進(jìn)行反復(fù)注射。.腹腔注射：先剪去腹部的被毛，右手將注射器刺入下腹部腹白線稍外側(cè)處，注射器與皮膚呈45°夾角，若針尖通過腹肌后抵抗消失，應(yīng)保持針頭不動(dòng)，輕輕注入麻醉劑。腹腔注射應(yīng)防止把針頭刺入腸、肝、膀胱等內(nèi)臟器官，因此針頭刺入后須輕輕回抽，如無腸內(nèi)容物、尿液或血液被抽出，說明針頭未刺入內(nèi)臟。肌肉注射：常用來麻醉禽類，注射部位多為胸肌或腓腸肌等肌肉較發(fā)達(dá)的部位。固定動(dòng)物后，右手持注射器，使之與肌肉呈60°夾角，一次刺入肌肉。注射完畢后用手輕輕按摩注射部位，幫助藥液吸收。皮下注射：在注射麻醉中并不常用，注射時(shí)可將皮膚拉起，注射針刺入皮下，然后注入藥物。表1： 動(dòng)物常用麻醉劑的劑量和用法麻醉劑動(dòng)物種類給藥途徑劑(mg/kg量體重）藥物濃度%乙醚各種動(dòng)物氣管吸入適量狗、貓、兔靜脈30腹腔35戊巴比妥納鼠類腹腔403禽類肌肉50?100狗、貓、兔靜脈1000腹腔1000氨基甲酸乙酯鼠類腹腔100020?25禽類肌肉1250蛙類淋巴囊2000狗、貓靜脈80?10010腹腔100?15010水合氯醛靜脈50?755兔腹腔35010皮下5007四．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的局部解剖（一）頸部手術(shù)1.氣管分離術(shù)將動(dòng)物背部固定，剪去頸部腹面的毛，用手術(shù)刀在緊靠喉頭下部沿頸部正中線切開皮膚5?7厘米，在氣管正腹面用手或用止血鉗分層分離皮下結(jié)締組織，即露出胸骨舌骨肌。用止血鉗把正中線的胸骨舌骨肌分開，即可暴露氣管。頸總動(dòng)脈分離術(shù)頸總動(dòng)脈位于氣管外側(cè)，腹部被胸骨舌骨肌和胸骨甲狀肌所覆蓋。分離時(shí)，可用左手拇指和食指捏住已分離的氣管一側(cè)的胸骨肌,再稍想外翻,即可將頸總動(dòng)脈以及神經(jīng)束翻于食指上。用玻璃分針輕輕分離動(dòng)脈外側(cè)的結(jié)締組織，便可將頸總動(dòng)脈分離出來，最后穿線備用。神經(jīng)分離術(shù)在分離頸總動(dòng)脈的基礎(chǔ)上，提起動(dòng)脈，即可看到粗細(xì)不同的神經(jīng)，兔頸部血管神經(jīng)束內(nèi)有3條粗細(xì)不同的神經(jīng)，其中迷走神經(jīng)最粗，呈白色，一般位于外側(cè)；交感神經(jīng)稍細(xì)，略呈灰色，一般位于內(nèi)側(cè)；減壓神經(jīng)最細(xì)，位于迷走和交感神經(jīng)之間。（二）腹部手術(shù)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，腹白線是腹部切口的常用部位。腹白線是位于腹中線下面的白色腱膜線，從胸骨的劍突隆起直至恥骨聯(lián)合。腹白線為較寬的結(jié)締組織間層，神經(jīng)血管分布極少。因此，通過腹白線所作的腹正中切口，不傷及肌肉、神經(jīng)和血管，對動(dòng)物損傷較小，較少出血。血液的組成及紅細(xì)胞比容的測定目的：通過本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞比容的方法，了解血液的組成。原理：全血中紅細(xì)胞所占的容積百分比，稱為紅細(xì)胞比容。血液由血漿和血細(xì)胞組成，將抗凝血放在有刻度的比容管中，用離心沉淀的方法使血細(xì)胞與血漿分離。紅細(xì)胞下沉，彼此壓緊而又不改變每個(gè)血細(xì)胞的正常形態(tài)，這樣就可以計(jì)算出紅細(xì)胞在全血中所占的容積百分比。實(shí)驗(yàn)器材：溫氏比容管、長注射器、離心機(jī)、抗凝血等。方法及步驟：用長注射器吸取抗經(jīng)血，然后將注射器插入溫氏比容管內(nèi)，緩緩地將血液注入比容管中，使血液準(zhǔn)確地裝到刻度10厘米處。離心：將溫氏比容管放入離心機(jī)中，以每分鐘3000轉(zhuǎn)的速度離心30分鐘，取出比容管觀察，其上層為血漿，下層紅色部分為紅細(xì)胞，血漿與紅細(xì)胞之間有一白色薄層為白細(xì)胞和血小板。記錄紅細(xì)胞所占容積的數(shù)值，然后再以3000轉(zhuǎn)速度離心5分鐘。如紅細(xì)胞的容積與上次相同，表明紅細(xì)胞已被壓緊。讀數(shù)即為紅細(xì)胞比容（如兩次離心讀數(shù)不同，則以同法繼續(xù)離心5分鐘，直至相同為止）。注意事項(xiàng)：1.離心后，如紅細(xì)胞表面是斜面，則讀數(shù)取傾斜部分的平均值。裝抗凝血的試管應(yīng)用塞塞緊，防止血漿內(nèi)水分蒸發(fā)，影響紅細(xì)胞比容。血紅蛋白測定目的：把學(xué)習(xí)用比色法測定血紅蛋白的方法。原理：測定血紅蛋白的方法較多，實(shí)驗(yàn)常用比色法。其原理是在一定量的血液中加入一定量的血液的稀鹽酸，血紅蛋白與鹽酸作用后，能是亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色。用水稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較，可求出每100ml血液中所含的血紅蛋白克數(shù)。實(shí)驗(yàn)器材：血紅蛋白計(jì)（標(biāo)準(zhǔn)比色架、血紅蛋白稀釋管）、玻棒、血紅蛋白吸管、滴管、采血針、1/10鹽酸、酒精棉球、95%酒精、乙醚、蒸餾水等。方法與步驟：.用滴管加1/10N鹽酸于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度“2”處。.用酒精棉球消毒動(dòng)物的采血部位，待其干燥后，用消毒過的采血針刺破血管，使血液流出，第一滴血棄去不要，待第二滴血流出時(shí)，用血紅蛋白吸管的尖端接觸血滴，吸血至刻度20mm3處。用濾紙片擦干吸管周圍的血液，將吸管插入血紅蛋白稀釋管的鹽酸內(nèi)，輕輕吹出血液至管底部，反復(fù)吸入并吹出稀釋管內(nèi)上層的鹽酸，洗滌吸管多次，使吸管內(nèi)的血液完全流入稀釋管內(nèi)，注意避免起泡，用玻棒攪勻后，放置10分鐘。把稀釋管插入比色架中，使無刻度的兩側(cè)面位于空格的前后方，便于比色。用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水（每加一滴要攪拌），邊滴邊觀察顏色，直至顏色與標(biāo)

準(zhǔn)比色柱相同為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100ml血液中血紅蛋白的克數(shù)。注意事項(xiàng)：.血液與鹽酸作用時(shí)間不可少于10分鐘，否則血紅蛋白不能充分轉(zhuǎn)變成高鐵血紅蛋白，使結(jié)果偏低。.比色時(shí)應(yīng)將玻棒取出，而且最好在自然光下，而不應(yīng)在黃色光下進(jìn)行，以免影響結(jié)果。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均應(yīng)注意避免起泡。紅細(xì)胞沉降率的測定目的：了解紅細(xì)胞沉降的原因并掌握沉降率的測定方法。原理：從血管中抽取一定量的血液，經(jīng)抗凝處理后，放入有刻度的血沉管中，直立靜止一段時(shí)間，可見紅細(xì)胞因比重較大而逐漸下沉。在單位時(shí)間內(nèi)紅細(xì)胞下沉的速率，稱為紅細(xì)胞沉降率，簡稱血沉。它是以血漿層的高度來決定，血漿層越高，表示沉降率越快。在臨床上某些疾病可引起紅細(xì)胞沉降率的顯著改變，故測定紅細(xì)胞沉降率具有臨床診斷價(jià)值。實(shí)驗(yàn)器材：抗凝血、血沉管、血沉臺(tái)、3.8%檸檬酸鈉、小試管、注射器、針頭等。方法及步驟：將抗凝血吸至血沉管內(nèi)，恰好吸至刻度“0”處。然后擦去血沉管外面的血液，垂直地固定于血沉臺(tái)上。固定后，立即開始計(jì)算時(shí)間，分別在15分鐘，30分鐘，45分鐘，1小時(shí)，2小時(shí)檢查血沉管上部血漿柱的高度，以毫米表示之。注意事項(xiàng)：.本實(shí)驗(yàn)用的血液與抗凝劑的容積比列規(guī)定為4：1。.自采血時(shí)起，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完畢，否則會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。.小試管、血沉管、注射器、針頭等均應(yīng)清潔干燥。沉降率隨溫度的升高而加快，故應(yīng)在室溫22-270C時(shí)測定為宜。呼吸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)目的：了解呼吸運(yùn)動(dòng)的記錄方法，觀察各種因素對呼吸運(yùn)動(dòng)的影響，并分析其作用機(jī)制。原理：正常的呼吸運(yùn)動(dòng)由于受到體內(nèi)神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)，能夠有節(jié)律地進(jìn)行，并能適應(yīng)機(jī)體代謝的需要。體內(nèi)外各種不同因素可通過神經(jīng)與體液途徑，對呼吸運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生影響。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔實(shí)驗(yàn)器材：MS-302型生物信號(hào)記錄分析系統(tǒng)、電子刺激器、保護(hù)電極、手術(shù)臺(tái)、手術(shù)器械、玻璃分針、線、氣管套管、膠管、水合氯醛、3%乳酸、CO2氣球、注射器、注射針頭、鐵支架、雙凹夾等。方法與步驟：1，將兔麻醉后背位固定在手術(shù)臺(tái)上。2，在頸部分離出氣管兩側(cè)的迷走神經(jīng)約2CM長，各穿一條線備用。3，用玻璃分針分離出氣管(在第三氣管環(huán)以后，約1CM長)，在氣管下穿一條線備用。用虹膜剪于2-3氣管環(huán)之間剪一“T”形切口，用小棉球深入切口內(nèi)除去氣管內(nèi)分泌物及血跡，以防窒息。4，從“T”形管切口處插入氣管套管，用備用線結(jié)扎,并將線套側(cè)管上固定，以防套管滑脫.將套管的一端側(cè)管套上壓力換能器.5，儀器連接及應(yīng)用開機(jī),進(jìn)入MS-302系統(tǒng).通道選擇:分別將1、3通道選為“無輸入”，2通道選擇為“呼吸”，將壓力換能器的輸出連至第2通道。打開“打印選擇”菜單，選擇打印通道后，按Esc鍵退回。進(jìn)入“記錄狀態(tài)”，依次進(jìn)行每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，按空格鍵暫停，按F9打印結(jié)果。6，描記一段正常的呼吸曲線。7，將CO2氣球出口與氣管套管的另一端側(cè)管靠近，使兔吸入CO2，觀察呼吸曲線的變化。8，使兔缺氧，觀察呼吸曲線的變化。9，將氣管套管的另一端側(cè)管連接一段大約50CM長的膠管，使無效腔增大，觀察呼吸曲線的變化。10，從耳緣靜脈注入3%的乳酸0.5mL,觀察呼吸曲線的變化。11，提起一側(cè)迷走神經(jīng)的備用線，剪斷迷走神經(jīng)，觀察呼吸曲線的變化。再將另一側(cè)迷走神經(jīng)的備用線結(jié)扎并剪斷，觀察呼吸曲線的變化。剪去腹部之毛，自腹中線剪開，推開腹腔臟器，露出膈肌，注意膈肌收縮及其位置變化與呼吸運(yùn)動(dòng)的關(guān)系。注意事項(xiàng)：1，實(shí)驗(yàn)時(shí)須注意比較每作一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)前后呼吸曲線的變化。2，注射乳酸時(shí)注意不讓乳酸從靜脈中漏出，以免兔子因疼痛而掙扎，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。反射弧的分析目的：通過本實(shí)驗(yàn)分析反射弧的組成部分，了解反射弧的完整性與反射活動(dòng)的關(guān)系。原理：反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)、效應(yīng)器五部分組成。反射弧的結(jié)構(gòu)與功能的完整是實(shí)現(xiàn)反射活動(dòng)的必要條件，反射弧的任何一部分受到破壞，均不能出現(xiàn)放射活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：蛙或蟾蜍實(shí)驗(yàn)器材：手術(shù)器械、玻璃分針、線、蛙板、電子刺激器、鐵支架、雙凹夾、棉花、培養(yǎng)皿、濾紙、保護(hù)電極、普通電極、0.5%和1%硫酸、1%可卡因或乙醚等。方法及步驟：.制備脊蛙或脊蟾蜍：用探針搗毀蛙或蟾蜍的腦髓，用一小棉球塞入創(chuàng)口止血。.用小鑷子將蛙或蟾蜍的下頜穿一小孔，然后穿一條線，將其懸掛在鐵支架上。用培養(yǎng)皿盛0.5%硫酸，將蛙一側(cè)后肢的中趾趾端浸入，該側(cè)后肢立即出現(xiàn)屈腿反射。迅速以清水洗凈腳趾硫酸，并用布輕輕擦干。用剪刀在同側(cè)(指硫酸刺激的那一側(cè))跟腱部位將皮膚做一環(huán)形切口，并將其下部皮膚剝掉，在以上述方法刺激，觀察有無反射出現(xiàn)。將浸過硫酸的濾紙片貼在剝皮膚的股部皮膚上，觀察有無屈腿反射？在另一側(cè)后肢股部的背側(cè)，沿坐骨神經(jīng)的行走方向?qū)⑵つw作一縱形切口，將坐骨神經(jīng)分出，并在神經(jīng)下面穿一條線備用，將該側(cè)中趾的趾端進(jìn)入盛有0.5%硫酸的培養(yǎng)皿中，觀察到屈腿反射后，提起放在坐骨神經(jīng)下面的備用線，用蘸有1%可卡因或乙醚的小棉球置于神經(jīng)干下，約半分鐘后，再以同樣方法刺激該側(cè)中趾趾端，觀察有無反射出現(xiàn)？如果仍有反射出現(xiàn)，則每隔半分鐘刺激一次，觀察反射是否消失？當(dāng)反射剛剛消失時(shí)，迅速以浸有1%硫酸的小塊濾紙貼于該側(cè)軀干部的皮膚上，觀察有無反射出現(xiàn)？如有反射，則每隔1分鐘刺激一次，觀察反射是否消失？當(dāng)反射消失后，拿掉蘸有可卡因或乙醚的小棉球，并迅速用任氏液反復(fù)沖洗坐骨神經(jīng)，再以同樣方法刺激該側(cè)中趾趾端（或采用電刺激），觀察是否恢復(fù)？如未恢復(fù)，繼續(xù)用任氏液沖洗坐骨神經(jīng)，并放置一段時(shí)間，再觀察反射的恢復(fù)。.待反射恢復(fù)后，增大電刺激強(qiáng)度，在刺激該側(cè)中趾趾端,觀察對側(cè)有無屈腿反射你？.用探針插入脊椎管，上下攪動(dòng)以破壞脊髓，再刺激身體任何部位，觀察有無反射出現(xiàn)？注意事項(xiàng)：1.搗毀腦組織時(shí)不能損傷脊髓。每次用硫酸刺激的時(shí)間不宜過長，以免燒傷皮膚。用硫酸刺激后，必須立即用清水洗去硫酸，并用布擦干。脊髓反射目的：觀察脊髓反射的基本特征、興奮在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)傳導(dǎo)的基本特征，以及脊髓在維持肌緊張中的作用。原理：中樞神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)的基本方式是反射。每一反射均有其固定的反射弧，并與其他反射相互協(xié)調(diào)。興奮在中樞內(nèi)傳導(dǎo)時(shí)有總和、擴(kuò)散、后作用及抑制等特征；脊髓是維持肌緊張的基本中樞，而且，脊髓是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的最低級(jí)部位，它的機(jī)能最簡單，便于觀察。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：蛙或蟾蜍實(shí)驗(yàn)器材：手術(shù)器械、玻璃分針、線、蛙板、電子刺激器、鐵支架、雙凹夾、棉花、培養(yǎng)皿、紙、保護(hù)電極、普通電極、0.5%和1%硫酸等。方法及步驟：1.觀察脊髓反射活動(dòng)的特征：制備脊蛙或脊蟾蜍，將其懸掛在鐵支架上，進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)：（1） .屈肌反射與對側(cè)伸肌反射：用0.5%硫酸進(jìn)入一側(cè)后肢中趾趾端，可見該側(cè)后肢屈曲，而對側(cè)后肢伸直。（2） .搔扒反射：以浸有0.5%或1%硫酸的小濾紙片貼于蛙或蟾蜍的一側(cè)腹部，可見其同側(cè)后肢抬起，向受刺激的部位搔扒。2．興奮在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)傳導(dǎo)的特征：（1） .反射作用的抑制：用0.5%或1%硫酸測定反射時(shí)，然后用鑷子夾住蛙或蟾蜍一側(cè)大腿根部的一部分皮膚（夾的力度要適當(dāng)，不要太大），待動(dòng)物安靜后，再用0.5%或1%硫酸測定反射時(shí)，比較二者有何區(qū)別？（2） .刺激的總和：將普通電極的兩極置于一側(cè)后肢某處，選用單個(gè)刺激，并調(diào)節(jié)至閥下刺激強(qiáng)度，反復(fù)刺激，觀察有無反射發(fā)生？（3） .興奮的擴(kuò)散：選用連續(xù)刺激，刺激蛙或蟾蜍的一側(cè)后肢某處，調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度逐漸由弱到強(qiáng)，觀察在強(qiáng)電流刺激下，其反應(yīng)部位有無增加？（4） .興奮的后作用：用電刺激蛙或蟾蜍的一側(cè)后肢某處，觀察在刺激停止后，反射活動(dòng)是否立即停止？3．脊髓在維持肌緊張中的作用：實(shí)驗(yàn)蛙的四肢一直處于某種程度的委曲狀態(tài)，這說明肌肉處于某種程度的緊張狀態(tài)，若用探針插入脊椎管內(nèi)，上下攪動(dòng)，將脊髓破壞后，則肌肉松弛，四肢完全下垂。注意事項(xiàng)：在每次刺激之間應(yīng)間隔3-4分鐘，其余同實(shí)驗(yàn)二十五。胰島素驚厥目的：通過本實(shí)驗(yàn)觀察注射胰島素對動(dòng)物血糖水的調(diào)節(jié)作用。原理：胰島素是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖水平的激素之一。給動(dòng)物注射大量胰島素后，引起血糖降低，動(dòng)物出現(xiàn)驚厥現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小白鼠或家兔。實(shí)驗(yàn)器材：注射器、胰島素溶液、50%葡萄糖、酸性生理鹽水、0.01%腎上腺素、20%葡萄糖等。方法與步驟一：取4只體重相近的小鼠，分為實(shí)驗(yàn)組與對照組，每組2只。給實(shí)驗(yàn)組小鼠腹腔注射胰島素溶液（0.1毫克/10克體重），胰島素溶液濃度為2國際單位/毫升。給對照組小鼠腹腔注射等量生理鹽水。將兩組動(dòng)物做好標(biāo)記后，放在室溫下觀察，比較兩組動(dòng)物的神態(tài)、姿勢及活動(dòng)情況。當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)抽搐，翻滾等驚厥反應(yīng)是，記錄時(shí)間，并將其中一只立即皮下注射50%葡萄糖（0.1毫升/10克體重）。比較對照組動(dòng)物、注射葡萄糖的動(dòng)物、以及出現(xiàn)驚厥而未經(jīng)注射葡萄糖的動(dòng)物的活動(dòng)情況，分析所得結(jié)果。注意事項(xiàng)：.動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前必須饑餓18-24小時(shí)。.用pH2.5-3.5的酸性生理鹽水配置胰島素。酸性生理鹽水配置：將10毫升0.1NHCL加入300毫升生理鹽水中，調(diào)pH值為2.5-3.5.若實(shí)驗(yàn)在冬天進(jìn)行，注射胰島素后，最好將動(dòng)物放在30-370C環(huán)境下保溫，以加快反應(yīng)的出現(xiàn)。方法與步驟二：.取事先經(jīng)過饑餓24-36小時(shí)的家兔二只，稱重后從耳緣靜脈注射胰島素10-20國際單位/公斤體重。.約1小時(shí)后，觀察動(dòng)物有無不安、呼吸急促、驚攣，甚至休克現(xiàn)象。3.待上述低血糖癥狀出現(xiàn)后，給甲兔即使靜脈注射20%葡萄糖20毫升，給乙兔及時(shí)皮下注射0.01%腎上腺素（0.3-0.4毫升/公斤體重），仔細(xì)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并記錄試驗(yàn)結(jié)果。摘除動(dòng)物腎上腺的觀察目的：學(xué)習(xí)用器官摘除法造成功能缺損，從而研究內(nèi)分泌腺生理功能的方法：觀察動(dòng)物被摘除腎上腺后，對其生理機(jī)能的影響。原理：腎上腺分皮質(zhì)和髓質(zhì)兩部分。腎上腺皮質(zhì)分泌糖皮質(zhì)激素、鹽皮質(zhì)激素和少量性激素。糖皮質(zhì)激素參與調(diào)節(jié)體內(nèi)糖、蛋白質(zhì)、脂肪的代謝，并能增強(qiáng)機(jī)體對有害刺激的耐受能力；鹽皮質(zhì)摘除腎上腺后，動(dòng)物表現(xiàn)出腎上腺皮質(zhì)功能失調(diào)的現(xiàn)象，例如食欲降低、低血壓、肌無力、腎衰竭等，同時(shí)也表現(xiàn)出抗炎癥、抗過敏能力下降及對有害刺激的耐受力下降等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小白鼠或大