本文格式為Word版，下載可任意編輯——無菌實驗室管理規(guī)定辦法無菌測驗室管理規(guī)定手段之相關(guān)制度和職責(zé)，無菌室標(biāo)準(zhǔn)無菌室是微生物檢測的重要場所與最根本的設(shè)施。它是微生物檢測質(zhì)量保證的重要物質(zhì)根基。因此它的設(shè)計要按國家標(biāo)準(zhǔn)-2022《清白廠房設(shè)計模范》、國家藥品監(jiān)視管理局頒發(fā)的...

無菌室標(biāo)準(zhǔn)

無菌室是微生物檢測的重要場所與最根本的設(shè)施。它是微生物檢測質(zhì)量保證的重要物質(zhì)根基。因此它的設(shè)計要按國家標(biāo)準(zhǔn)-2022《清白廠房設(shè)計模范》、國家藥品監(jiān)視管理局頒發(fā)的《藥品檢驗所測驗室質(zhì)量管理模范(試行)》中第十八條規(guī)定執(zhí)行。微生物測驗室無菌室的施工、安裝、驗收應(yīng)按國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)JGJ71-1990《無菌室的施工及驗收模范》執(zhí)行。對于微生物檢測工和使用管理者來講,更大量的工作是舉行正常管理到日常的使用。無菌室的標(biāo)準(zhǔn)要符合GMP清白度標(biāo)準(zhǔn)要求。

無菌室的使用管理工作

1、無菌室要符合模范要求:無菌室應(yīng)采光良好、制止潮濕、遠(yuǎn)離廁所及污染區(qū)。面積一般不超過10m2,不小于5m2;高度不超過2.4m。由1—2個緩沖間、操作間組成(操作間和緩沖間的門不應(yīng)直對),操作間和緩沖間之間應(yīng)具備滅菌功能的樣品傳遞箱。在緩沖間內(nèi)應(yīng)有洗手盆、毛巾、無菌衣褲放置架及掛鉤、拖鞋等,不應(yīng)放置培養(yǎng)箱和其他雜物;無菌室內(nèi)應(yīng)六面光滑平整,能耐受清洗消毒。墻壁與地面、天花板連接處應(yīng)呈凹弧形,無縫隙,不留死角。操作間內(nèi)不應(yīng)安裝下水道。

無菌操作室應(yīng)具有空氣除菌過濾的單向流空氣裝置,操作區(qū)清白度100級或放置同等級別的超凈工作臺,室內(nèi)溫度操縱18—26℃,相對濕度45%—65%。緩沖間及操作室內(nèi)均應(yīng)設(shè)置能達(dá)成空氣消毒效果的紫外燈或其他適合的消毒裝置,空氣清白級別不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于5Pa,無菌室(區(qū))與室外大氣的靜壓差大于10Pa。無菌室內(nèi)的照明燈應(yīng)嵌裝在天花板內(nèi),室內(nèi)光照應(yīng)分布平勻,光照度不低于300lx。緩沖間和操作間所設(shè)置的紫外線殺菌燈(2—2.5w/m3),應(yīng)定期檢查輻射強度,要求在操作面上達(dá)40uw/m2。不符合要求的紫外殺菌燈應(yīng)實時更換。

2、建立使用登記（制度）:藥廠各個微生物檢測檢驗室都要建立使用登記制度。在登記冊中可設(shè)置以下工程內(nèi)容:如使用日期、時間、使用人、設(shè)備運行狀況、溫度、濕度、清白度狀態(tài)(沉降菌數(shù)、浮游菌數(shù)、塵埃粒子數(shù))、報修理由、報修結(jié)果、清潔工作(臺面、地面、墻面、天花板、傳遞窗、門把手)、消毒液名稱等。

3、建立使用標(biāo)準(zhǔn)操作模范(SOP)并嚴(yán)格管理:SOP內(nèi)容至少要有以下幾點:

(1)規(guī)定凈化系統(tǒng)使運轉(zhuǎn)時間要求每次測驗前應(yīng)開啟凈化系統(tǒng)使運轉(zhuǎn)至少1h以上,同時開啟凈化臺和紫外燈。

(2)物品進(jìn)入無菌室根本要求:凡進(jìn)入無菌室的物品務(wù)必先在第一緩沖間內(nèi)對外部外觀用消毒劑消毒滅菌,再經(jīng)物流緩沖間、傳遞窗1h以上,及無菌空氣吹干后送入無菌室。留神帶纖維、易發(fā)塵物品不得帶進(jìn)凈化測驗室。無菌室內(nèi)固定物品不得任意搬出。

(3)人員進(jìn)入無菌室要求:測驗人員進(jìn)入無菌室不得打扮、帶手表、戒指等首飾;不得吃東西、嚼口香糖。應(yīng)清潔手后進(jìn)入第一緩沖間更衣,同時換上消毒隔離拖鞋,脫去外衣,用消毒液消毒雙手后戴上無菌手套,換上無菌連衣帽(不得讓頭發(fā)、衣等暴露在外面),戴上無菌口罩。然后,換或是再戴上其次副無菌手套,在進(jìn)入其次緩沖間時換其次雙消毒隔離拖鞋。再經(jīng)風(fēng)淋室30s風(fēng)淋后進(jìn)入無菌室。

(4)溫濕度查看要求:查看溫度計、濕度計上顯示的溫濕度是否在規(guī)定的范圍內(nèi),并作為測驗原始數(shù)據(jù)記錄在案。如察覺問題應(yīng)實時探索理由,實時報修和實時報告測驗室主管,并將報修理由和結(jié)果記錄歸檔。

(5)沉降菌落計數(shù)與浮游菌測定要求:在每次測驗同時,對操作室和層流臺做微生物沉降菌落計數(shù),將結(jié)果記錄在使用登記本上,并作為測驗環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在測驗報告上。每周1次,或在無菌檢查等必要時,在每次測驗同時對操作室和凈化臺舉行浮游菌測定,將結(jié)果記錄在使用登記本上,并作為測驗環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在測驗報告上。

(6)消毒要求:無菌室每周和每次操作前用0.1%新潔爾滅或2%甲酚液或其他適合消毒液(常用消毒劑的品種有:5—20倍稀釋的碘伏水溶液、0.1%新潔爾滅溶液、1:50的84消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸(來蘇兒)消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液(處方:對羥基苯甲酸甲酯21.5g;對羥基苯甲酸丙酯8.6g,75%乙醇10ml)等,所用的消毒劑品種與使用要舉行有效性驗證方可使用,并定期更換消毒劑的品種)擦拭操作臺及可能污染的死角,方法是用無菌紗布浸漬消毒溶液清潔超凈臺的整個內(nèi)外觀、頂面、及無菌室、人流、物流、緩沖間的地板、傳遞窗、門把手。清潔消毒程序應(yīng)從內(nèi)向外,從高清白區(qū)到低清白區(qū)。逐步向外退出清白區(qū)域。然后開啟無菌空氣過濾器及紫外燈殺菌1—2h,以殺滅存留微生物。在每次操作完畢,同樣用上述消毒溶液擦拭工作臺面,除去室內(nèi)濕氣,用紫外燈殺菌30min。

(7)其他要求:如遇停電,應(yīng)立刻中斷測驗,離開無菌室。關(guān)閉全體電閘。重新進(jìn)入無菌室前至少開啟機房運轉(zhuǎn)1h以上。

4、清白度檢查的要求與方法:無菌室在消毒處理后,無菌試驗前及操作過程中需檢查空氣中菌落數(shù),以此來判斷無菌室是否達(dá)成規(guī)定的清白度,常有沉降菌和浮游菌測定方法。

(1)沉降菌檢測方法及標(biāo)準(zhǔn):以無菌方式將3個養(yǎng)分瓊脂平板帶入無菌操作室,在操作區(qū)臺面左、中、右各放1個;開啟平板蓋,在空氣中暴露30min后將平板蓋好,置32.5℃士2.5℃培養(yǎng)48h,取出檢查,3個平板上生長的菌落數(shù)平均小于1個。

(2)浮游菌檢測方法及標(biāo)準(zhǔn):用特意的采樣器,宜采用撞擊法機制的采樣器,一般采用狹縫式或離心式采樣器,并配有流量計和定時器,嚴(yán)格按儀器說明書的要求操作并定時校檢,采樣器和培養(yǎng)皿進(jìn)入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌,使用的培養(yǎng)基為養(yǎng)分瓊脂培養(yǎng)基或藥典認(rèn)可的其他培養(yǎng)基。使用時,先開動真空泵抽氣,時間不少于5min,調(diào)理流量、轉(zhuǎn)盤、轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵,放入培養(yǎng)皿,蓋上采樣器蓋子后調(diào)理縫隙高度。置采樣口采樣點后,依次開啟采樣器、真空泵,轉(zhuǎn)動定時器,根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。全部采樣終止后,將培養(yǎng)皿置32.5℃士2.5培養(yǎng)48h,取出檢查,浮游菌落數(shù)平均不得超過5個/m3。每批培養(yǎng)基應(yīng)選定3只培養(yǎng)皿做對照培養(yǎng)。

無菌操作臺面或超凈工作臺還應(yīng)定期檢測其懸浮粒子,應(yīng)達(dá)成100級(一般用塵埃粒子計數(shù)儀)檢測,并根據(jù)無菌狀況必要時置換過濾器。

5、定期舉行清白度再驗證:定期(每季度、半年、1年)或當(dāng)無菌室設(shè)施發(fā)生重大變更時,要按國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16292-16294-1996《醫(yī)藥工業(yè)無菌室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》舉行清白度再驗證,以確保清白度符合規(guī)定,保存驗證原始記錄,定期歸檔保存,并將驗證結(jié)果記錄在無菌室使用登記冊上,作為測驗環(huán)境原始依據(jù)及趨勢分析資料。并定期對無菌室的環(huán)境檢測數(shù)據(jù)舉行趨勢分析和評估,根據(jù)評估結(jié)果,了解無菌室設(shè)施環(huán)境質(zhì)量的穩(wěn)定狀況及變化趨勢,抉擇是否有必要修訂相應(yīng)的防備和糾偏限度。

6、定期更換新的紫外燈管、更換凈化系統(tǒng)的初效、中效、高效頭:定期(至少每年1次)更換新的紫外燈管,以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效。并同時在使用登記本上做好更換記錄,定期歸檔保存。至少2年1次,或按清白度驗表明際處境,定期更換初效、中效、高效頭。以確保凈化系統(tǒng)的功能持續(xù)有效,并同時在使用登記本上做好更換記錄,定期歸檔保存。

7、使用過程中應(yīng)盡可能裁減人員的走動或活動:平日測驗室內(nèi)應(yīng)盡可能裁減人員的走動或活動,同向無菌室的門要關(guān)閉或安裝自動閉門器使其保持關(guān)閉狀態(tài)。

8、清白度不符合規(guī)定時立刻中斷使用:察覺清白度不符合規(guī)定時,應(yīng)立刻中斷使用,探索理由,徹底清潔、務(wù)必經(jīng)清白度再驗證符合規(guī)定后,才再使用,并同時將處境記錄在無菌室使用登記冊上,定期歸檔保存。

9、對進(jìn)入的外來人員或修理人員舉行指導(dǎo)和監(jiān)視:非微生物室檢驗人員不得進(jìn)入無菌室,對務(wù)必進(jìn)入的外來人員或修理人員要舉行指導(dǎo)和監(jiān)視。

10、無菌室的日常管理:建立安好衛(wèi)生值日制度,一旦察覺通風(fēng)系統(tǒng)、墻壁、天花板、地面、門窗及公用介質(zhì)系統(tǒng)等設(shè)施有損壞現(xiàn)象,要實時報告并采取相應(yīng)的修復(fù)措施,并保存記錄實時歸檔。從無菌室環(huán)境中檢測到的微生物應(yīng)能鑒別至屬或種,留存鑒別測驗原始記錄及菌種,作為無菌生產(chǎn)、無菌檢查無菌室環(huán)境質(zhì)量、消毒劑有效性評估及污染源調(diào)查的依據(jù),并且也是為無菌檢查陽性結(jié)果的調(diào)查供給第一手資料。

無菌室工作須知

一、無菌室內(nèi)非請莫入,非本測驗室人員未經(jīng)批準(zhǔn)不得在無菌室內(nèi)工作。

二、全體藥品器材均為無菌室專用,一般不得帶初無菌室,作為其他用處。

三、全體物品用后立刻放回原處。

四、進(jìn)入無菌室工作之前需修剪指甲,手清洗后在用1%新潔爾滅溶液洗手消毒,換鞋進(jìn)入,使用超靜臺需著無菌室專用工作服并用酒精棉球擦手消毒。超靜臺每次使用后都應(yīng)留心做好清潔整理工作。

五、衛(wèi)生值日人員要勤清潔。留神保持無菌室的相對無菌條件,經(jīng)常用新潔爾滅溶液擦洗地面、桌面、臺面和試劑廚。經(jīng)常將無菌室工作服送至洗滌室清洗消毒,使用后的鼠尸及鼠籠唾手帶出無菌室。每日為除濕機倒水。留神無菌時使用藥品、物品的消耗,實時通知工人打定,或匯報負(fù)責(zé)老師以便補充。

六、配培養(yǎng)基和其他試劑都應(yīng)有記錄,瓶子上映注明品質(zhì)、濃度、日期及配制人,使用過的培養(yǎng)基及無菌試劑應(yīng)自覺注明使用人姓名,以防止交錯污染。

七、嚴(yán)格操縱細(xì)胞之間或病原之間的交錯污染,輕易發(fā)生交錯污染的細(xì)胞或病毒不能在同一超凈臺內(nèi)處理。

八、扭力天平使用之后應(yīng)休止,在將讀數(shù)盤回零,托盤及天平外觀擦洗明凈,藥勺也應(yīng)洗凈擦干。使用后的藥品應(yīng)將蓋擰緊,放回原處。

九、離心機使用時應(yīng)留神平衡,使用后將離心杯、橡皮套管清洗明凈,倒置晾干。

十、CO2孵箱為通氣培養(yǎng)箱,應(yīng)自覺維護(hù)箱內(nèi)清潔,定期將托板、托盤換出消毒。如培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基漏出,立刻用酒