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實(shí)習(xí)十血液常規(guī)檢驗(yàn)(二)一、實(shí)驗(yàn)時(shí)間2學(xué)時(shí)二、實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)內(nèi)科診斷實(shí)驗(yàn)室三、目的和要求掌握白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)(DC)的操作技術(shù),了解其臨床意義。四、內(nèi)容和方法白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)(DC)1、原理:細(xì)胞的染色反應(yīng),決定于細(xì)胞的化學(xué)結(jié)構(gòu)對(duì)染色物質(zhì)的親和力。將血液制成涂片,經(jīng)染色后鏡檢,根據(jù)顯示各種細(xì)胞形態(tài)和著色特點(diǎn),測(cè)定血液中各種類型白細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。2、試劑與設(shè)備:
瑞氏染色液、磷酸鹽緩沖液、二甲苯、香柏油、載玻片、染色盆及支架、擦鏡紙、吸水紙、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)器、顯微鏡。
3、方法①血片的制作:左手持載玻片兩端,右手持推片,取被檢血一滴滴于載片一端,推片一端與血接觸呈45°角,并使其血液自由沿推片邊緣擴(kuò)散,待均勻后,以同等速度輕輕向另一端推動(dòng),使血均勻地涂抹在載片上。讓其自然干燥,待染。
注意:載玻片必須無(wú)油脂、潔凈、干燥。否則會(huì)影響血細(xì)胞形態(tài)。
②瑞氏染色步驟:將干燥的血片,置于染色架上,滴加瑞氏染液于血片上,并計(jì)其滴數(shù),直至將血膜浸蓋為止。待染1~2min加等量的緩沖液或蒸餾水,并輕輕吹動(dòng)使其混勻。放置染色5~10min,然后用蒸餾水沖洗,吸干,油鏡觀察。注意:沖洗時(shí)應(yīng)將蒸餾水直接向血膜上傾倒,使液體自血邊緣溢出,沉淀物從液面浮去。切勿先將染液傾去再?zèng)_洗,否則沉淀物附著于血膜上不易沖掉。染色良好的血片呈櫻紅色如呈淡紫色,是染色時(shí)間過長(zhǎng)如呈紅色是染色時(shí)間過短。下頁(yè):各種白細(xì)胞的形態(tài)特征(瑞氏染色法)③白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法:白細(xì)胞分類時(shí)先用低倍鏡觀察白細(xì)胞的分布然后滴上香柏油,用油鏡觀察計(jì)數(shù)。采用四角區(qū)法計(jì)數(shù)(在血片的四角各取一點(diǎn),在此區(qū)域內(nèi)各計(jì)數(shù)25個(gè),共計(jì)100個(gè)白細(xì)胞)按各類的白細(xì)胞所占有的百分?jǐn)?shù),計(jì)算其比值。白細(xì)胞種類細(xì)胞核細(xì)胞漿位置形狀顏色核染色質(zhì)細(xì)胞核膜多少顏色透明帶顆粒嗜中性幼年型偏心性橢圓紅紫色細(xì)致不清楚中等藍(lán)色或粉紅色無(wú)紅或藍(lán),細(xì)致或粗糙嗜中性桿狀核中心或偏心性馬蹄或蠟?zāi)c性淺紫藍(lán)色細(xì)致存在多粉紅色無(wú)嗜中、嗜酸或嗜堿嗜中性分葉核中心或偏心性3~5葉者居多深紫藍(lán)色粗糙存在多淺粉紅色無(wú)粉紅色或紫紅色嗜酸性白細(xì)胞中心或偏心性2~3葉者居多較淺紫藍(lán)色粗糙存在多藍(lán)色或粉紅色無(wú)深紅,分布均勻,馬的最大,其他動(dòng)物次之嗜堿性白細(xì)胞中心性葉狀核不太清楚較淺紫藍(lán)色粗糙存在多淺粉紅色無(wú)藍(lán)黑色,分布不均勻,大多數(shù)在細(xì)胞的邊緣淋巴細(xì)胞偏心性圓形或微凹入深紫藍(lán)色大塊或中等塊或致密致密少天藍(lán)深藍(lán)或淡紅色胞漿深染時(shí)有無(wú)或有少數(shù)嗜亞尼林藍(lán)色顆粒大單核細(xì)胞中心或偏心性豆性山字形橢圓形淡藍(lán)紫色細(xì)致網(wǎng)狀邊緣不齊存在很多灰藍(lán)或云藍(lán)色無(wú)很多,非常細(xì)小、淡紫色嗜堿性白細(xì)胞淋巴細(xì)胞漿細(xì)胞單核細(xì)胞嗜堿性白細(xì)胞大單核細(xì)胞思考題1、臨床實(shí)驗(yàn)室檢查時(shí),如何進(jìn)行白細(xì)胞
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