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凝血四項(xiàng)檢查APTT【檢驗(yàn)原理】37APTT試劑,即以腦磷脂作為血小板的替代物參加貧血小板血漿中,在Ca2+的參與下,使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊,測(cè)定凝固所需要的時(shí)間,即APTT。【樣本制備】采血與抗凝:采血后馬上與抗凝劑充分混合,血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕9:1。離心:抗凝血以2500xg離心10待測(cè)血漿。保存:血漿樣本應(yīng)馬上測(cè)試。22~24℃條件下保存,應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定,2~43小時(shí)內(nèi)測(cè)定?!緳z驗(yàn)方法】?jī)x器預(yù)熱:開(kāi)機(jī),依據(jù)儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱,到達(dá)要求穩(wěn)定溫度,進(jìn)入正常工作狀態(tài)。試劑配制:嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑,將直立在18~25℃中靜置3037℃預(yù)溫槽。正常質(zhì)控血漿制備:依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。測(cè)定:以半自動(dòng)高性能血凝儀為例:①將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中,用加珠器在每個(gè)測(cè)試杯中放一粒鋼珠。②試劑放相應(yīng)位置,37℃預(yù)溫,需混勻放攪拌子。100l〔患畜或者質(zhì)控血漿〕參加測(cè)試杯,再將APTT試劑100l參加測(cè)試杯,混勻,啟動(dòng)預(yù)溫時(shí)間計(jì)時(shí),37℃,5分鐘,將測(cè)試杯從預(yù)溫槽移至測(cè)試槽。④使用聯(lián)動(dòng)加樣器參加氯化鈣100l,儀器自動(dòng)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器開(kāi)頭計(jì)時(shí)并自動(dòng)打印結(jié)果?!菊V祬⒖挤秶繃??!緳z驗(yàn)結(jié)果解釋】APTT延長(zhǎng)見(jiàn)于FⅧ、FⅨ、FⅪ血漿水平減低。APTT縮短見(jiàn)于高凝狀態(tài)、血栓性疾病??诜茉兴帟?huì)影響檢測(cè)結(jié)果。PT【檢驗(yàn)原理】在待檢血漿中參加過(guò)量的組織凝血活酶和鈣離子,使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?,凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊,測(cè)定凝固所需要的時(shí)間,即為待測(cè)血漿的凝血酶原時(shí)間〔PT〕。PT與血漿中的外源性凝血因子含量呈負(fù)相關(guān)?!緲颖局苽洹坎裳c抗凝:采血后馬上與抗凝劑充分混合,血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕比例為9:1EDTA、肝素不適于作抗凝劑。2500xg10分鐘。保存:血漿樣本應(yīng)馬上測(cè)試。22~24℃條件下保存,應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定,2~4℃條件下保存,應(yīng)3小時(shí)內(nèi)測(cè)定。如不能60分鐘內(nèi)分別血漿。【檢驗(yàn)方法】?jī)x器預(yù)熱:開(kāi)機(jī),依據(jù)儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱,進(jìn)入正常工作狀態(tài)。試劑配制:嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑,將試劑瓶直立在室溫中靜置30分鐘,使用前輕輕旋轉(zhuǎn)至完全溶解,勿猛烈振搖。正常質(zhì)控血漿制備:依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。測(cè)定:以半自動(dòng)高性能血凝儀為例:①將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中,用加珠器在每個(gè)測(cè)試杯中放一粒鋼珠。②試劑放相應(yīng)位置,37C預(yù)溫,混勻需放攪拌子。100l〔患畜或者質(zhì)控血漿〕參加測(cè)試杯。分鐘,將測(cè)試杯從預(yù)溫槽中移至測(cè)試槽中。⑤使用聯(lián)動(dòng)加樣器參加試劑100l,儀器自動(dòng)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器開(kāi)頭計(jì)時(shí)進(jìn)展測(cè)試。記錄結(jié)果?!菊V祬⒖挤秶咳?.0~15.0秒,建議各試驗(yàn)室建立自己的正常值參考范圍。質(zhì)量掌握程序:試驗(yàn)室應(yīng)建立質(zhì)量掌握程序,使用質(zhì)控血漿測(cè)定。FIB【檢驗(yàn)原理】在待檢稀釋血漿中參加高濃度的凝血酶,使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊,測(cè)定凝固所需要的時(shí)間,在以參比血漿制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得待測(cè)血漿的纖維蛋白原濃度,即為待測(cè)血漿的纖維蛋白原〔FIB〕含量?!緲颖局苽洹坎裳c抗凝:采血后馬上與抗凝劑充分混合,血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕9:1。2500xg10分鐘。1:5比例稀釋血漿。保存:血漿樣本應(yīng)馬上測(cè)試。22~24℃條件下保存,應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定,2~43小時(shí)內(nèi)測(cè)定?!緳z驗(yàn)方法】?jī)x器預(yù)熱:開(kāi)機(jī),依據(jù)儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱,進(jìn)入正常工作狀態(tài)。試劑配制:嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑,并放室溫靜置30分鐘,使用前輕輕旋轉(zhuǎn)至完全溶解,勿猛烈振搖。定標(biāo)血漿制備:以蒸餾水復(fù)溶血漿,參加量標(biāo)識(shí)在上。正常質(zhì)控血漿制備:依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。FIB標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備:以半自動(dòng)血凝儀為例:①按下表稀釋標(biāo)準(zhǔn)血漿〔FIB2.57g/L〕:標(biāo)準(zhǔn)血比例咪唑緩沖液〔l〕總體積FIB濃〔l〕〔g/L〕1:51004005005.141:10504505002.571721:20305706001.281:40207808000.64②每份稀釋血漿宜重復(fù)測(cè)試4次〔至少測(cè)定2次〕,求秒數(shù)均值。③進(jìn)入FIB標(biāo)定菜單,選錄入,將不同稀釋度血漿凝固時(shí)間FIB濃度輸入儀器。④選計(jì)算,按2次確認(rèn),標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)輸入完成并打印。則檢測(cè)g/L。更換試劑批號(hào)時(shí)應(yīng)重做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。測(cè)定:以半自動(dòng)高性能血凝儀為例:①將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中,用加珠器在測(cè)試杯中放一粒鋼珠。②將5倍稀釋血漿100l〔患畜或者質(zhì)控血漿參加測(cè)試杯,37C3分鐘,將測(cè)試杯移至測(cè)試槽。100l,啟動(dòng)計(jì)時(shí)器,儀器記錄時(shí)間并自動(dòng)打印結(jié)果。【正常值參考范圍】秒。建議各試驗(yàn)室建立自己的正常值參考范圍。TT【檢驗(yàn)原理】在待檢血漿中參加標(biāo)定的凝血酶,使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊,測(cè)定凝固所需要的時(shí)間,即為待測(cè)血漿的凝血酶時(shí)間〔TT〕?!緲颖局苽洹坎裳c抗凝:采血后馬上與抗凝劑充分混合,血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕9:1。2500xg10分鐘。保存:血漿樣本應(yīng)馬上測(cè)試。22~24℃條件下保存,應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定,2~43小時(shí)內(nèi)測(cè)定。【檢驗(yàn)方法】?jī)x器預(yù)熱:開(kāi)機(jī),依據(jù)儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱,到達(dá)要求穩(wěn)定溫度,進(jìn)入正常工作狀態(tài)。試劑配制:嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑,將試劑瓶直立在室溫中靜置30分鐘,使用前輕輕旋轉(zhuǎn)至完全溶解,勿猛烈振搖。正常質(zhì)控血漿制備:依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。測(cè)定:以半自動(dòng)高性能血凝儀為例:①將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中,用加珠器在每個(gè)測(cè)試杯中放一粒鋼珠。②將待測(cè)血漿100l〔患畜或者質(zhì)控血漿〕參加測(cè)試
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