動物細胞培養(yǎng)上課課件生活聯(lián)系：

燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？自主閱讀P44第5段，思考下列問題：1、什么叫動物細胞培養(yǎng)（animalcellculture)？2、動物細胞培養(yǎng)的原理是什么？一、動物細胞培養(yǎng)1、概念：從動物機體中取出相關組織，將它們分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。原理：細胞增殖如何進行動物細胞培養(yǎng)?

結合問題，閱讀書本，三人一組，討論寫出動物細胞培養(yǎng)的流程圖。每組推選一位“小老師”，準備上臺講解（5min)學習活動一：注意關鍵詞:

細胞貼壁接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)合作學習（結合問題思考流程）1、為何動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞呢？

2、如何將動物組織分散成單個的細胞？3、胰蛋白酶的作用是什么？由此可說明細胞間的物質主要是什么成分？4、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內表面為何要光滑、無毒？5、培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)到什么時候就不再分裂、增殖？細胞貼壁接觸抑制

(contactinhibition)原代培養(yǎng)：通常將直接從動物體內取出的動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細胞出現接觸抑制后，貼滿瓶壁的細胞需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細胞增殖。這樣即為傳代培養(yǎng)。有關概念：

細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。

細胞系：細胞株傳代至50代后又出現細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。

細胞株和細胞系的區(qū)別：細胞系的遺傳物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。有關概念：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液10代細胞50代細胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個細胞加培養(yǎng)液原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎過程：細胞株細胞系動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質，將細胞網絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。遺傳物質未改變遺傳物質已改變去掉組織間蛋白細胞增殖1、選用組織時，一般用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做培養(yǎng)材料，而不用老齡動物的，這是為什么？因為幼齡組織或器官上的細胞增殖能力強，有絲分裂旺盛，容易培養(yǎng)。老齡動物的細胞則相反。學習活動二：尋根問底，加深鞏固2、胰蛋白酶處理組織時要注意什么問題？能夠用胃蛋白酶代替嗎？

控制好消化時間，太長會消化細胞膜上的蛋白質不能，因為兩者的最適PH不同，而正常組織細胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近.學習活動二：尋根問底，加深鞏固3、動物細胞培養(yǎng)能否最終培養(yǎng)成新個體？不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數目增多，不能發(fā)育成新的動物個體學習活動二：尋根問底，加深鞏固多細胞動物和人體的細胞都生活在內環(huán)境中，根據你所學的知識，認為體外培養(yǎng)動物細胞應該模擬內環(huán)境的哪些條件呢？學習活動三：無菌、無毒全部的營養(yǎng)物質適宜的溫度和PH值必要的氣體條件3、動物細胞培養(yǎng)的條件動物細胞培養(yǎng)條件：1、無菌、無毒的環(huán)境（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。）3、溫度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境：

O2和CO2（95%空氣和5%CO2

）補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質，保證細胞順利的生長增殖①生物制品的生產②用于基因工程③用于檢測有毒物質④細胞的生理、病理、藥理研究4、動物細胞培養(yǎng)技術的應用獲得細胞細胞的全能性植物體培養(yǎng)結果或細胞產物快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較細胞群體1．動物細胞工程常用的技術手段中，最基礎的是

A.動物細胞培養(yǎng)B.動物細胞融合

C.單克隆抗體D.胚胎核移植

練一練~~~2．貼壁細胞的分裂方式具體是

A.無絲分裂B.有絲分裂

C.減數分裂D.增殖3．關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是

A.動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分散開來