第24章病毒感染的檢查方法

與防治原則

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)系管艷（11022）E-mail:教學(xué)目的與要求掌握內(nèi)容病毒感染的檢查方法：標(biāo)本采集和送檢；病毒的分離培養(yǎng)方法；病毒感染的血清學(xué)診斷方法。第一節(jié)病毒感染的檢查方法

第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防第三節(jié)病毒感染的治療★病毒感染的檢查檢測(cè)內(nèi)容查病毒查特異性抗體

病毒顆粒病毒抗原病毒核酸病毒酶類：如逆轉(zhuǎn)錄酶

電鏡直接觀察光鏡檢查包涵體分離培養(yǎng)★★一、標(biāo)本的采集與送檢原則基本與細(xì)菌相似，但應(yīng)注意：1.急性期樣本2.標(biāo)本用“雙抗”或兩性霉素B處理

3.

低溫保存，盡快送檢4.

血清學(xué)診斷采雙份血清★病程階段可檢測(cè)到病毒可檢測(cè)到特異性抗體潛伏期少無前驅(qū)癥狀有時(shí)無發(fā)病經(jīng)常有時(shí)急性期經(jīng)常經(jīng)?；謴?fù)期少經(jīng)常二、病毒的分離與鑒定一般程序：標(biāo)本無菌處理動(dòng)物接種雞胚培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)指標(biāo)陽性指標(biāo)陰性病毒鑒定盲傳2～3代指標(biāo)陰性病毒陰性★（一）病毒的分離培養(yǎng)

動(dòng)物接種（animalinoculation）

雞胚接種（egginoculation）

細(xì)胞培養(yǎng)（cell

culture）

二、病毒的分離與鑒定★1.

動(dòng)物接種

應(yīng)用：尚無敏感細(xì)胞的病毒培養(yǎng)動(dòng)物：兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點(diǎn)：簡便，結(jié)果易觀察，可建立動(dòng)物模型缺點(diǎn)：有飼養(yǎng)條件要求，費(fèi)用高，動(dòng)物體內(nèi)常帶有潛在病毒2.

雞胚培養(yǎng)

優(yōu)點(diǎn)：易管理，不帶微生物，成本較低缺點(diǎn)：操作程序復(fù)雜3.細(xì)胞培養(yǎng)

單層細(xì)胞培養(yǎng)（monolayercellculture）

生長方式

懸浮細(xì)胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）

原代細(xì)胞（primarycell）細(xì)胞種類二倍體細(xì)胞（diploidcell）傳代細(xì)胞系（continuouscellline）①細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落(1)細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)(2)紅細(xì)胞吸附（hemadsorption）病毒包膜表面血凝素(HA)＋紅細(xì)胞表面HA受體

(3)干擾現(xiàn)象（interference）

(4)細(xì)胞代謝改變

（二）病毒鑒定1.病毒形態(tài)學(xué)鑒定2.病毒血清學(xué)鑒定3.病毒分子生物學(xué)鑒定二、病毒的分離與鑒定（三）病毒數(shù)量與感染性測(cè)定1.血凝試驗(yàn)：病毒總量（活病毒＋死病毒）2.空斑形成試驗(yàn)

（plaqueformationtest）

3.50％組織細(xì)胞感染量

（50％tissueculture

infectiousdose,

TCID50）感染性病毒量二、病毒的分離與鑒定（一）形態(tài)學(xué)檢查：

電鏡：病毒顆粒；光鏡：包涵體三、病毒感染的診斷（二）病毒成分檢測(cè)：蛋白抗原、核酸（三）血清學(xué)診斷★應(yīng)用：①采取標(biāo)本分離病毒為時(shí)已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實(shí)所分離的病毒的臨床意義④進(jìn)行血清流行病學(xué)調(diào)查等1.中和試驗(yàn)（neutralizationtest）病毒＋中和抗體

病毒失去感染性

特點(diǎn)：特異性高，抗體維持時(shí)間長應(yīng)用：人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用★2.血凝抑制試驗(yàn)（hemagglutination

inhibitiontest）—正黏病毒型與亞型鑒定

病毒＋雞紅細(xì)胞＝凝集（血凝試驗(yàn)）

病毒＋特異性抗體＋雞紅細(xì)胞＝不凝集

（血凝抑制試驗(yàn)）

★特點(diǎn)：特異性高，簡單

應(yīng)用：鑒定病毒種、型、亞型3.IgM

特點(diǎn)：特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快

應(yīng)用：近期感染指標(biāo)?！锏谝还?jié)病毒感染的檢查

第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防第三節(jié)病毒感染的治療滅活疫苗（inactivatedvaccine）減毒活疫苗（attenuatedvaccine）亞單位疫苗（subunitvaccine）基因工程疫苗（geneticallyengineeringvaccine)重組載體疫苗（binantcarriervaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）一、人工主動(dòng)免疫常用生物制品二、人工被動(dòng)免疫常用生物制品

免疫球蛋白

血清丙種球蛋白

細(xì)胞免疫制劑

IFN-α、β、γ細(xì)胞因子IL-2、IL-6、IL-12

TNF、CSF

第一節(jié)病毒感染的檢查

第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防第三節(jié)病毒感染的治療病毒穿入脫殼核酸復(fù)制、轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)合成裝配吸附釋放藥物藥物藥物藥物

核苷類藥物

非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑蛋白酶抑制劑

其他抗病毒藥物

干擾素和干擾素誘生劑

中草藥

基因治療劑

治療性疫苗

抗病毒化學(xué)制劑反義寡核苷酸干擾RNA核酶（ribozyme）

有關(guān)病毒標(biāo)本的采集和運(yùn)送不正確的方法是A.發(fā)病