犐犆犛１１．２２０

犅４１

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１７９９９．８—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)

第８部分：犛犘犉雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)

犛犘犉犮犺犻犮犽犲狀—犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾狊狌狉狏犲犻犾犾犪狀犮犲—

犘犪狉狋８：犈狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犛犪犾犿狅狀犲犾犾犪狆狌犾犾狅狉狌犿犳狅狉犛犘犉犮犺犻犮犽犲狀

２００８１２３１發(fā)布２００９０５０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜１７９９９．８—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１７９９９《ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)》分為１０個(gè)部分：

———第１部分：ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)總則；

———第２部分：ＳＰＦ雞紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)；

———第３部分：ＳＰＦ雞血清中和試驗(yàn)；

———第４部分：ＳＰＦ雞血清平板凝集試驗(yàn)；

———第５部分：ＳＰＦ雞瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)；

———第６部分：ＳＰＦ雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；

———第７部分：ＳＰＦ雞胚敏感試驗(yàn)；

———第８部分：ＳＰＦ雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)；

———第９部分：ＳＰＦ雞試管凝集試驗(yàn)；

———第１０部分：ＳＰＦ雞間接免疫熒光試驗(yàn)。

本部分為ＧＢ／Ｔ１７９９９的第８部分。

本部分修訂參照了ＮＹ／Ｔ５５６—２００２《雞傳染性喉氣管炎診斷技術(shù)》和ＯＩＥ《陸生動(dòng)物（哺乳動(dòng)物、

禽鳥和蜜蜂）診斷試驗(yàn)和疫苗手冊(cè)》（第五版）中的有關(guān)規(guī)定。

本部分代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９《ＳＰＦ雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９相比主要變化如下：

———增加了活禽泄殖腔拭子檢測(cè)樣品；

———增加了沙門氏菌菌體抗原血清學(xué)檢測(cè)方法；

———增加了附錄Ａ“革蘭氏染色方法及生化試驗(yàn)結(jié)果判定”；

———對(duì)試驗(yàn)操作程序進(jìn)行了修訂，將細(xì)菌鏡檢程序提前；

———在范圍中進(jìn)一步明確了本部分使用的情況；

———?jiǎng)h除了引用標(biāo)準(zhǔn)；

———修訂了試驗(yàn)操作程序。

本部分的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本部分由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出。

本部分由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（ＳＡＣ／ＴＣ１８１）歸口。

本部分起草單位：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心、濟(jì)南斯帕法

斯家禽有限公司。

本部分主要起草人：曲連東、姜騫、韓凌霞、邵衛(wèi)星、朱果、單忠芳、劉家森、司昌德、郭東春、于海波、

孟慶文。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９。

Ⅰ

書

犌犅／犜１７９９９．８—２００８

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)

第８部分：犛犘犉雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)

１范圍

ＧＢ／Ｔ１７９９９的本部分規(guī)定了雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)的技術(shù)要求。

本部分適用于對(duì)ＳＰＦ雞進(jìn)行雞白痢沙門氏菌的分離和鑒定。

用血清平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行雞白痢沙門氏菌的抗體檢測(cè)，結(jié)果難以判斷時(shí)，可采用本部分進(jìn)行復(fù)檢。

２原理

取待檢樣品（腸內(nèi)容物、有關(guān)臟器勻漿、活禽泄殖腔拭子）接種于增菌培養(yǎng)基中進(jìn)行增菌，然后將培

養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到選擇、鑒別培養(yǎng)基上培養(yǎng)，挑選可疑菌落接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，取培養(yǎng)物進(jìn)行生化試驗(yàn)

與血清學(xué)試驗(yàn)，以確定雞白痢沙門氏菌。

３試劑和器材

３．１材料

３．１．１培養(yǎng)基

營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、ＤＨＬ瓊脂、ＳＳ瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂（ＢＳ）、三糖鐵培養(yǎng)基（ＴＳＩ）、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、半固體

瓊脂。

３．１．２生化反應(yīng)試劑

糖發(fā)酵培養(yǎng)基、蛋白胨水、硝酸鹽培養(yǎng)基、氧化酶試劑、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基、尿素培養(yǎng)基（結(jié)果

判定見(jiàn)附錄Ａ）。

３．１．３沙門氏菌診斷血清

ＡＦ多價(jià)Ｏ血清、Ｏ９因子血清、Ｏ１２因子血清、Ｈａ因子血清、Ｈｄ因子血清、Ｈｇ．ｍ因子血清和

Ｈｇ．ｐ因子血清。

３．２器材

３７℃恒溫培養(yǎng)箱。

４操作步驟

４．１采樣

無(wú)菌采取卵巢、肝、脾以及小腸和盲腸，活禽泄殖腔拭子。

４．２分離培養(yǎng)

將采集樣品放入滅菌乳缽或均漿器中研磨成勻漿，加入少量營(yíng)養(yǎng)肉湯稀釋。取培養(yǎng)物或活禽泄殖

腔拭子分別在ＳＳ或ＢＳ和ＤＨＬ瓊脂平板培養(yǎng)基上劃線接種，置（３６±１）℃培養(yǎng)２４ｈ～４８ｈ。在ＤＨＬ

培養(yǎng)基上若出現(xiàn)黃褐色透明小菌落；或在ＳＳ瓊脂平板上出現(xiàn)無(wú)色半透明圓形小菌落；或在ＢＳ瓊脂平

板上出現(xiàn)黑色或黑綠色小菌落，則為可疑菌落。