標(biāo)準(zhǔn)解讀
GB/T 20929-2007 是一項(xiàng)由中國(guó)發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《嗜酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測(cè)方法》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一套科學(xué)、統(tǒng)一的方法來(lái)檢測(cè)和評(píng)估嗜酸氧化亞鐵硫桿菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)的存在及其生物活性,利用基因芯片技術(shù)作為核心手段。
標(biāo)準(zhǔn)適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于環(huán)境樣本(如土壤、礦石、廢水等)中嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的鑒定及活性分析。這種細(xì)菌因其在礦物溶解、生物瀝濾等過(guò)程中的關(guān)鍵作用而受到關(guān)注,尤其在生物冶金和環(huán)境修復(fù)領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值。
主要內(nèi)容概覽
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術(shù)語(yǔ)與定義:明確了嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的基本概念,以及基因芯片技術(shù)相關(guān)的專業(yè)術(shù)語(yǔ),為標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用提供清晰的語(yǔ)言基礎(chǔ)。
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試劑與材料:詳細(xì)列出了進(jìn)行基因芯片檢測(cè)所需的各種化學(xué)試劑、生物材料及基因芯片制備所需的原材料規(guī)格和質(zhì)量要求,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
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儀器設(shè)備:描述了實(shí)施基因芯片檢測(cè)所必需的儀器設(shè)備,包括核酸提取設(shè)備、PCR擴(kuò)增儀、掃描儀等,以及這些設(shè)備的操作和校準(zhǔn)要求。
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樣品采集與前處理:規(guī)范了從不同環(huán)境中采集樣品的方法,以及樣品預(yù)處理步驟,如均質(zhì)、過(guò)濾、核酸提取等,以去除雜質(zhì)并富集目標(biāo)DNA。
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基因芯片設(shè)計(jì)與制備:介紹了如何根據(jù)嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的基因序列設(shè)計(jì)探針,以及芯片的合成、標(biāo)記和質(zhì)量控制流程,確保芯片能夠特異性識(shí)別目標(biāo)微生物的DNA。
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檢測(cè)步驟:詳細(xì)闡述了從DNA提取到雜交、洗脫、信號(hào)檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析的全過(guò)程,每一步都配有具體操作指南和質(zhì)量控制指標(biāo)。
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結(jié)果判斷與報(bào)告:提供了判斷測(cè)試結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)和方法,包括如何根據(jù)基因芯片上的信號(hào)強(qiáng)度來(lái)評(píng)估嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的豐度和活性,并對(duì)如何編寫檢測(cè)報(bào)告給出了指導(dǎo)。
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質(zhì)量控制與保證:強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)采取的質(zhì)量控制措施,確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性,包括對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置、儀器校準(zhǔn)、操作人員培訓(xùn)等。
實(shí)施意義
該標(biāo)準(zhǔn)的出臺(tái),不僅為嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的研究和應(yīng)用提供了一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的技術(shù)平臺(tái),還促進(jìn)了生物技術(shù)在資源開發(fā)、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域的規(guī)范化發(fā)展。通過(guò)規(guī)范化的基因芯片檢測(cè)方法,可以更高效、準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)和評(píng)估這一微生物的生態(tài)分布及其在特定環(huán)境條件下的功能活性,為相關(guān)科學(xué)研究、工業(yè)應(yīng)用及環(huán)境管理決策提供科學(xué)依據(jù)。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2007-04-30 頒布
- 2007-11-01 實(shí)施
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GB/T 20929-2007嗜酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測(cè)方法-免費(fèi)下載試讀頁(yè)文檔簡(jiǎn)介
ICS07.100.01D16中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20929—2007暗酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測(cè)方法Themethodsoftestingacidithiobacillusferrooxidansandltsactivitybymicroarraytechnology2007-04-30發(fā)布2007-11-01實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
GB/T20929—2007前本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)有色金屬工業(yè)協(xié)會(huì)提出本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)有色金屬標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口本標(biāo)準(zhǔn)由中南大學(xué)資源加工與生物工程學(xué)院負(fù)責(zé)起草本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:邱冠周、劉學(xué)端、柳建設(shè)、劉新星、中麗、王軍。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)有色金屬標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)負(fù)責(zé)解釋.
GB/T20929—2007生物治金是利用以礦物為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的微生物將礦物氧化分解,從而使金屬進(jìn)入溶液,通過(guò)進(jìn)一步分離、富集、純化而提取金屬的高新技術(shù),它具有流程短、成本低、環(huán)境友好和低污染等優(yōu)點(diǎn),尤其在低品位、復(fù)雜難處理礦產(chǎn)資源的開發(fā)利用中,顯示出強(qiáng)大的優(yōu)勢(shì),可以大幅度提高礦產(chǎn)資源的開發(fā)利用率和資源的保障程度。生生物治金速度慢、浸出率低是國(guó)際上未能解決的難題。特別是原生礦(如黃銅礦CuFeS.)生物治金速度慢的問(wèn)題最為突出.主要原因是缺乏高效的浸礦微生物菌種.其關(guān)鍵是沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的來(lái)自微生物本身的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)判微生物浸礦性能。22000年以來(lái),中南大學(xué)開展了模式曙酸氧化亞鐵硫桿菌ATCC23270的研究,獲得了該菌3217個(gè)基因序列信息。本標(biāo)準(zhǔn)是以該菌作為模式菌,利用基因芯片技術(shù),建立暗酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測(cè)方法
GB/T20929—2007暗酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測(cè)方法T范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用基因芯片技術(shù)檢測(cè)暗酸氧化亞鐵硫桿菌(以下簡(jiǎn)稱A.f菌)及其活性的術(shù)語(yǔ)、定義、符號(hào)、省略語(yǔ)、主要技術(shù)指標(biāo)和待測(cè)樣品的要求、樣品圖譜的制作及分析方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于利用基因芯片技術(shù)來(lái)高效快速的鑒別A.f菌,并確定待測(cè)樣品中A.f菌株的氧化活性。2方法原理A.f菌的浸礦性能與其對(duì)亞鐵和硫的氧化能力及其環(huán)境適應(yīng)性相關(guān),而這些特征主要受基因控制利用獲得的純A.f標(biāo)準(zhǔn)菌ATCC23270及其全部3217個(gè)基因序列信息構(gòu)建高通量的基因芯片技術(shù)、通過(guò)不同活性類型(高氧化活性菌和低氧化活性菌)A.f菌與基因芯片雜交,找到高氧化活性菌的特征基因及其與浸礦作用密切相關(guān)的功能基因的表達(dá)情況.根據(jù)待測(cè)樣品特征基因的有無(wú)和比例以及功能基因的表達(dá)水平評(píng)定A.f菌的浸礦性能。術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)、定義、符號(hào)和縮略語(yǔ)適用于本標(biāo)準(zhǔn)A,f苗acidithiobacillusferrooxidans屬于原核生物門、細(xì)菌綱、硫化細(xì)菌科、硫桿菌屬,革蘭氏陰性,有鞭毛。該菌好氧暗酸、化能自養(yǎng)能氧化金屬硫化物.將Fe+氧化成Fe+·將還原態(tài)的硫氧化成SO,-,是生物治金中最常用的菌種。3.2基因芯片microarraytechnology將大量基因片段以預(yù)先設(shè)計(jì)的方式固定在片基上組成的密集分子排列33基因芯片圖譜microarraygeneexpressionprofiles將熒光標(biāo)記的靶分子與芯片上的探針?lè)肿与s交后,通過(guò)激光共聚焦掃描所獲得的圖像和數(shù)據(jù)。生物治金biohydro-metallurgy一種利用以礦物為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的微生物·將礦物氧化分解后,再進(jìn)一步分離提取金屬的工藝3.5探針DrobeDNA探針是指能識(shí)別特定堿基序列的經(jīng)過(guò)人工標(biāo)記的一小段單鏈DNA分子,即一段與被測(cè)定的核苷酸序列(靶序列)互補(bǔ)的帶標(biāo)記的單鏈脫氧核糖核苷酸。3.6熒光標(biāo)記labellingusingfluorescentdyes
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