犐犆犛１３．３００；１１．１００

犃８０

中華人民共和國國家標準

犌犅／犜２１７７３—２００８

化學品體內(nèi)哺乳動物紅細胞

微核試驗方法

犆犺犲犿犻犮犪犾狊—犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻狀狏犻狏狅犿犪犿犿犪犾犻犪狀

犲狉狔狋犺狉狅犮狔狋犲犿犻犮狉狅狀狌犮犾犲狌狊

２００８０５１２發(fā)布２００８０９０１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

書

犌犅／犜２１７７３—２００８

前言

本標準等同采用經(jīng)濟合作與發(fā)展組織（ＯＥＣＤ）化學品測試指南Ｎｏ．４７４（１９９７年）《體內(nèi)哺乳動物

骨髓嗜多染紅細胞微核試驗》（英文版）。

本標準作了下列編輯性修改：

———增加了范圍部分；

———計量單位改成我國法定計劑量單位；

———刪除了ＯＥＣＤ參考文獻。

本標準由全國危險化學品管理標準化技術委員會（ＳＡＣ／ＴＣ２５１）提出并歸口。

本標準負責起草單位：中國疾病預防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所。

本標準參加起草單位：天津市疾病預防控制中心、天津市檢驗檢疫科學技術研究院。

本標準主要起草人：劉克明、侯粉霞、楊德一、李津、王春花、楊雪瑩、張園、李寧濤。

Ⅰ

書

犌犅／犜２１７７３—２００８

犗犈犆犇引言

１．哺乳動物體內(nèi)微核試驗通過分析嚙齒類動物骨髓和（或）外周血液樣本中的嗜多染紅細胞，用以

檢測受試物誘發(fā)的染色體或成紅細胞有絲分裂器的損傷。

２．微核試驗的目的是鑒別可引起細胞遺傳學損傷的物質(zhì)，這種損傷會導致含遲滯染色體片斷或整

條染色體的微核形成。

３．當骨髓正染紅細胞演變成為嗜多染紅細胞時，其主核被排出，已形成的微核隨后就留在無細胞

核的胞漿中。由于這些細胞中缺少主核，故很易觀察到。在染毒動物中有微核的嗜多染紅細胞出現(xiàn)頻

率的增加，是引起染色體損傷指征。

４．該試驗中常規(guī)使用嚙齒類動物骨髓，因該組織中可產(chǎn)生嗜多染紅細胞。如果已證明某種動物的

脾臟不能清除有微核紅細胞，或已顯示某種動物對檢測能致染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目畸變的物質(zhì)有足夠的敏

感性，則同樣也可考慮檢測其外周血的有核未成熟的（嗜多染的）紅細胞。有很多判斷微核的標準，其中

包括微核是否存在著絲?；蛑z的ＤＮＡ。有微核的未成熟的（嗜多染的）紅細胞的出現(xiàn)率是主要的終

點。當受試動物連續(xù)染毒４周或更長時，外周血中的某些成熟紅細胞也含有微核，這時外周血中成熟的

（正染紅的）紅細胞數(shù)也可作為試驗終點。

５．哺乳動物體內(nèi)微核試驗特別適用于評價那些需要考慮體內(nèi)代謝、藥物代謝動力學和ＤＮＡ修復

過程諸因素的致突變危害?？缮鲜鲋T因素在不同動物種屬、不同組織和不同的遺傳終點之間是有所不

同。微核試驗對于進一步研究體外系統(tǒng)已檢測到的致突變作用也是有用的。

６．如果有證據(jù)表明受試物質(zhì)或活性代謝產(chǎn)物不能到達相應的靶組織內(nèi)，則不適合使用本試驗。

Ⅱ

犌犅／犜２１７７３—２００８

化學品體內(nèi)哺乳動物紅細胞

微核試驗方法

１范圍

本標準規(guī)定了體內(nèi)哺乳動物紅細胞微核試驗的范圍、術語和定義、試驗基本原則、試驗方法、試驗數(shù)

據(jù)和報告。

本標準適用于檢測化學品的致突變作用。

２術語和定義

下列術語和定義適用于本標準。

２．１

著絲粒犮犲狀狋狉狅犿犲狉犿／犽犻狀犲狋狅犮犺狅狉犲

在細胞分裂期，染色體與紡錘絲聯(lián)合的區(qū)域，以使子染色體有序地向子細胞的兩極移動。

２．２

微核犿犻犮狉狅狀狌犮犾犲犻

在有絲分裂（減數(shù)分裂）末期，由落后染色體片斷或整體染色體產(chǎn)生的，分離或附屬于細胞主核的

小核。

２．３

正染紅細胞狀狅狉犿狅犮犺狉狅犿犪狋犻犮犲狉狔狋犺狅犮狔狋犲

成熟紅細胞，因缺乏核糖體，可以用選擇性核糖體染料與不成熟的嗜多染紅細胞區(qū)分開來。

２．４

嗜多染紅細胞狆狅犾狔犮犺狉狅犿犪狋犻犮犲狉狔狋犺狉狅犮狔狋犲

未成熟紅細胞，處于發(fā)育中期，仍含核糖體，故可用選擇性核糖體染料與成熟的正染紅細胞區(qū)分

開來。

３試驗基本原則

采用適當染毒途徑使受試動物染毒。如使用骨髓樣本，則在染毒后的合適時間將動物處死，提取骨

髓，制片和染色。當使用外周血樣時，則要在染毒后適當時間采血、制備涂片和染色，且最后一次染毒和

細胞收獲之間的時間要盡可能短。分析制片中存在的微核。

４試驗方法

４．１準備

４．１．１動物種屬的選擇

如使用骨髓樣品，則推薦使用小鼠和大鼠，當然其他合適的哺乳動物也可使用。當使用外周血樣，

則推薦使用小鼠。但是，假如某種動物的脾臟不能清除有微核的紅細胞，或已顯示某種動物對檢測能