犐犆犛６７．０５０

犡０４

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２３８１４—２００９

蓮蓉制品中蕓豆成分定性犘犆犚檢測(cè)方法

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２００９０５２７發(fā)布２００９０９０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書(shū)

犌犅／犜２３８１４—２００９

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：國(guó)家加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（廣州）、廣州市質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)研究院、中華

人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：蔡依軍、覃芳芳、羅海英、鄧?guó)欌彙⒐聳|、吳玉鑾、藍(lán)芳。

Ⅰ

書(shū)

犌犅／犜２３８１４—２００９

蓮蓉制品中蕓豆成分定性犘犆犚檢測(cè)方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了蓮蓉制品中蕓豆成分的定性ＰＣＲ檢測(cè)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于由蓮蓉制品半成品和成品中蕓豆成分的定性檢測(cè)。

本標(biāo)準(zhǔn)的檢出限為０．５ｎｇ蕓豆ＤＮＡ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）

ＧＢ／Ｔ１９４９５．１轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)通用要求和定義

ＧＢ／Ｔ１９４９５．２轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

ＧＢ／Ｔ１９４９５．７轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)抽樣和制樣方法

３術(shù)語(yǔ)和定義

ＧＢ／Ｔ１９４９５．１確立的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

４防污染措施

檢測(cè)過(guò)程中防止交叉污染的措施按照ＧＢ／Ｔ１９４９５．２中的規(guī)定執(zhí)行。

５抽樣和制樣

按照ＧＢ／Ｔ１９４９５．７規(guī)定的方法執(zhí)行。

６測(cè)定方法

６．１原理

樣品經(jīng)ＤＮＡ提取后，針對(duì)蕓豆特異基因序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)ＰＣＲ技術(shù)，特異性擴(kuò)增蕓豆基因的

ＤＮＡ片段，根據(jù)ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果，判斷該樣品中是否含有蕓豆成分。

６．２試劑和材料

除另有規(guī)定外，所用試劑為分析純或生化試劑，水為按照ＧＢ／Ｔ６６８２規(guī)定的一級(jí)水。

６．２．１引物：檢測(cè)蓮蓉制品內(nèi)源基因和蕓豆特異基因的引物及其信息見(jiàn)表１。

表１蓮蓉制品內(nèi)、外源基因所需的引物信息

ＰＣＲ產(chǎn)物大?。?/p>

檢測(cè)基因引物序列基因性質(zhì)適用范圍

ｂｐ

正：５’ＧＴＡＧＡＡＴＣＧＧＣＡＣＴＧＧＡＧＧＴＡＧ３’

ＮＮＥＡ０７３２１４２蓮子特異基因蓮蓉制品

反：５’ＣＡＴＧＧＧＣＴＡＡＣＣＡＡＣＴＡＧＡＣＡＧＣ３’

正：５’ＣＡＧＡＣＡＴＴＴＣＡＴＡＴＣＣＡＧＧＧＡＧＧ３’

ＡＢ