標準解讀

《GB/T 27535-2011 豬流感HI抗體檢測方法》是一項國家標準，規(guī)定了用于檢測豬血清中豬流感病毒（Swine Influenza Virus, SIV）特異性血凝抑制（Hemagglutination Inhibition, HI）抗體的方法。該標準適用于實驗室條件下對豬流感HI抗體水平的測定，對于評估疫苗效力、監(jiān)測豬群免疫狀態(tài)以及流行病學研究具有重要意義。

本標準詳細描述了實驗所需材料與試劑準備，包括但不限于特定類型的紅細胞懸液、抗原制備方法等，并且明確了具體操作步驟，如血清樣本處理方式、稀釋比例設定及最終結果判定原則。其中，關鍵步驟之一是將待測血清按一定梯度稀釋后，加入已知濃度的豬流感病毒抗原溶液中，隨后再添加適量的雞或豚鼠紅細胞，通過觀察是否發(fā)生凝集反應來判斷是否存在能夠阻止病毒引起紅細胞凝集的特異性抗體及其效價高低。


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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2011-11-21 頒布
  • 2012-03-01 實施
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GB/T 27535-2011豬流感HI抗體檢測方法_第1頁
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T27535—2011

豬流感HI抗體檢測方法

Detectionmethodofhemagglutinationinhibitionantibody

againstswineinfluenza

2011-11-21發(fā)布2012-03-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

豬流感HI抗體檢測方法

GB/T27535—2011

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100013)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網址

:

服務熱線

/p>

年月第一版

20121

*

書號

:155066·1-44052

版權專有侵權必究

GB/T27535—2011

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業(yè)部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所

:。

本標準主要起草人喬傳玲楊煥良陳艷辛曉光陳化蘭

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27535—2011

豬流感HI抗體檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了豬流感病毒血凝和血凝抑制試驗的技術要求

(HA)(HI)。

本標準適用于豬流感血清抗體的檢測

HI。

2儀器

水浴箱冰箱等

、4℃。

3試驗材料

單道及多道微量移液器吸頭

、。

4試劑

41參見附錄中

.0.01mol/LpH7.2PBS(AA.1)。

42胰酶溶液參見附錄中

.(AA.2)。

43溶液參見附錄中

.0.01mol/LKIO4(AA.3)。

44丙三醇鹽水參見附錄中

.1%(AA.4)。

45阿氏液參見附錄中

.(Alsevers)(AA.5)。

46雞紅細胞懸液參見附錄中

.0.5%(AA.6)。

47試驗抗原和陰陽性血清參見附錄中

.HI、(AA.7)。

5血凝HA試驗

()

51用多道微量移液器在微量反應板的孔均加入換吸頭

.1~120.05mLPBS,。

52吸取抗原加入第孔反復抽打次混勻

.0.05mL,1,3~5。

53從第孔吸取抗原加入第孔混勻后吸取加入第孔如此進行對倍稀釋至

.10.05mL2,0.05mL3,

第孔從第孔吸取棄之換吸頭第孔作為紅細胞對照

11,110.025mL,。12。

54每孔均加入體積分數雞紅細胞懸液將雞紅細胞懸液充分搖勻后加入

.0.05mL0.5%()()。

55輕輕混勻室溫下靜置后觀察結果如果環(huán)境溫度太高可置環(huán)境下

.,(20℃~25℃)20min(,4℃)。

對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結果

。

56結果判定將反應板傾斜觀察紅細胞若沒有呈淚滴狀流淌則判為陽性完全血凝不流

.:45°,,HA;(

淌的病毒最高稀釋倍數代表個血凝單位

)1(HAU)。

6血凝抑制HI試驗

()

61操作步驟

.

611血清樣品的處理待檢血清樣品需經

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