ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T27644—2011

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測方法

Protocolofreal-timePCRfordetectingGallidHepersVirus2

2011-12-30發(fā)布2012-04-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測方法

GB/T27644—2011

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100013)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

/p>

年月第一版

20123

*

書號

:155066·1-44332

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T27644—2011

前言

本標準按照的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中華人民共和國深圳出入境檢驗檢疫局揚州大學(xué)河南農(nóng)業(yè)大學(xué)

:、、。

本標準主要起草人詹愛軍劉文博王新衛(wèi)盧體康花群義陳書琨秦智鋒陳兵高小博

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27644—2011

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了禽皰疹病毒型熒光檢測的操作方法

2PCR。

本標準適用于禽皰疹病毒型的鑒定及其流行病學(xué)調(diào)查診斷檢疫和監(jiān)測

2、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

Ct值每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號量達到設(shè)定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

:。

DNA脫氧核糖核酸

:deoxyribonucleicacid。

dNTP三磷酸脫氧核糖核苷含有

:deoxy-ribonucleosidetriphosphate。dCTP、dGTP、dATP、

四種脫氧核糖核苷

dTTP。

EDTA乙二胺四乙酸

:ethylenediaminetetraaceticacid。

GHV2禽皰疹病毒型馬立克氏病病毒血清型

:GallidHepersVirus22(1)。

MD馬立克氏病

:Marek’sDisease。

PBS磷酸鹽緩沖生理鹽水

:phosphatebelancedsolution。

PCR聚合酶鏈式反應(yīng)

:polymerasechainreaction。

Real-timePCR實時熒光聚合酶鏈反應(yīng)

:Real-timepolymerasechainreaction。

Taq酶耐熱聚合酶

:ThermusaquaticuspolymeraseDNA。

4試劑

41試劑級別除另有規(guī)定本方法試驗用水應(yīng)符合規(guī)定的二級水所用化學(xué)試劑均為分

.:,GB/T6682,

析純

。

42禽皰疹病毒型熒光檢測試劑盒保存組成及使用注意事項參見附錄

.2PCR,-20℃,A。

43引物和探針序列產(chǎn)物長度

.(142bp)

上游引物

:5’CCACCACCTCCCATCTGTAC3’

下游引物

:5’GACAAGGCTGAGCGTAAACC3’

探針其端和端分別標記

TaqMan:5’ACACGGCTCGGTAACAGGACACAATG3’,5’3’FAM

和或或

BHQ(Ta