ICS07080

B30.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T30988—2014

多酚類植物基因組DNA提取純化

及測(cè)試方法

MethodsofgenomicDNAextractionfromplantswithhighlevelsofpolyphenols

2014-07-24發(fā)布2015-03-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T30988—2014

目次

前言

…………………………Ⅲ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

縮略語

3……………………1

原理

4………………………1

實(shí)驗(yàn)室通用要求

5…………………………2

試劑與溶液

6………………2

儀器和設(shè)備

7………………2

提取步驟

8…………………3

純度濃度測(cè)試

9DNA、……………………4

Ⅰ

GB/T30988—2014

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)測(cè)試技術(shù)研究院提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)測(cè)試技術(shù)研究院中測(cè)測(cè)試科技有限公司

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人譚和平沈興中唐祥凱周李華孫登峰

:、、、、。

Ⅲ

GB/T30988—2014

多酚類植物基因組DNA提取純化

及測(cè)試方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了以茶樹為代表的多酚類植物基因組提取純化方法以及純度濃度測(cè)試

DNADNA、

方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于茶樹馬鈴薯櫻桃葡萄以及其他富含多酚類的植物的植物基因組提取及

、、、DNA

純化

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法

GB/T6682—2008

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸提取純化方法

GB/T19495.3—2004

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

三羥甲基氨基甲烷

Tris:()

十二烷基磺酸鈉

SDS:

聚乙烯吡咯烷酮

PVP:

核糖核酸酶

RNaseA:A

二甲苯青

FF:

乙二胺四乙酸

EDTA:

三羥甲基氨基甲烷–乙二胺四乙酸

TE:()

4原理

41提取純化

.

在液氮條件中通過物理研磨方法破碎多酚類植物葉片的細(xì)胞利用抗氧化劑防止多酚類化合物氧

,,

化褐變同時(shí)利用聚乙烯吡咯烷酮的粘接性去除多酚類化合物及其他次生代謝物等雜質(zhì)然后利

,(PVP),

用化學(xué)方法使從植物細(xì)胞中釋放出來再棄除中的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)以及提取過程中

DNA,DNA,DNA

加入的異戊醇異丙醇乙醇等有機(jī)溶劑最后得到純的

、、,DNA。

42純度測(cè)試

.

在下根據(jù)在處有吸收高峰蛋白質(zhì)在處有吸收高峰硫氰酸鹽

pH7~8.5,DNA260nm,280nm,、

碳水化合物糖類在處有吸