標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 31808-2015 向日葵白銹病菌檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在提供一套科學(xué)、規(guī)范的方法用于向日葵白銹病菌（Albugo tragopogonis）的檢測(cè)與鑒定。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境植物及其產(chǎn)品中向日葵白銹病菌的檢疫工作，同時(shí)也可用于國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域的研究和監(jiān)測(cè)。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，首先明確了向日葵白銹病菌的基本特征及其對(duì)向日葵造成的危害情況。接著，詳細(xì)描述了從樣本采集到最終結(jié)果判定整個(gè)過程中的具體步驟和技術(shù)要求。這包括但不限于樣品收集與保存條件、實(shí)驗(yàn)室處理流程、病原體分離培養(yǎng)技術(shù)、形態(tài)學(xué)觀察要點(diǎn)以及分子生物學(xué)檢測(cè)手段等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

在樣品準(zhǔn)備階段，強(qiáng)調(diào)了正確選取具有典型癥狀部位的重要性，并給出了推薦的取樣量及保存方式；對(duì)于疑似感染材料，則需要通過表面消毒后接種于適宜的人工培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)過程中需注意控制溫度、濕度等因素以促進(jìn)目標(biāo)微生物生長(zhǎng)；待菌落形成后，可通過顯微鏡下觀察其結(jié)構(gòu)特征來進(jìn)行初步識(shí)別；此外，還提供了基于PCR擴(kuò)增特定基因片段的方法作為輔助診斷工具，提高了檢測(cè)準(zhǔn)確性與效率。

整個(gè)鑒定流程嚴(yán)格遵循科學(xué)原則，確保結(jié)果可靠有效。同時(shí)，該標(biāo)準(zhǔn)也為從事相關(guān)領(lǐng)域工作的人員提供了明確的操作指南，有助于提高工作效率和質(zhì)量。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2015-07-03 頒布
  • 2015-11-27 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T31808—2015

向日葵白銹病菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofAlbugotragopogonisPers.S.F.Gra

()y

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

向日葵白銹病菌檢疫鑒定方法

GB/T31808—2015

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽(yáng)區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20159

*

書號(hào)

:155066·1-49963

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T31808—2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)新疆出入境檢驗(yàn)檢疫局新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張祥林王翀趙冰梅王文正張江國(guó)乾義柯

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T31808—2015

向日葵白銹病菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了向日葵白銹病菌的檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于向日葵種子和植株中向日葵白銹病菌的檢疫和鑒定

。

2儀器和用具

生物顯微鏡體視顯微鏡超凈工作臺(tái)高壓滅菌器高速離心機(jī)制冰機(jī)全溫水浴擴(kuò)增儀

、、、、、、、PCR、

電泳儀凝膠成像儀往復(fù)式振蕩器培養(yǎng)皿燒杯酒精燈三角瓶載玻片蓋玻片鑷子剪刀量筒

、、、、、、、、、、、、

吸管

。

3試劑

乳酸苯酚甘油棉藍(lán)藏紅花次氯酸鈉十二烷基硫酸鈉三羥甲基氨基甲烷鹽

、、、、、(NaClO),(SDS),-

酸氯化鎂乙二胺四乙酸四鈉鹽氫氧化鈉醋酸鈉

(Tris-HCl),(MgCl2),(EDTA),(NaOH),(NaOAc),

氯化鉀十六烷基三甲基溴化銨無水乙醇苯酚三氯甲烷

(KCl),(CTAB),(Ethanol),(Phenol),(Chloro-

異丙醇異戊醇核酸染料蛋白酶Taq

form),(Isopropanol),(Isoamylalcohol),(SYBRGreenⅠ),K,

聚合酶Taq脫氧核糖核苷三磷酸分子量標(biāo)記

DNA(DNApolymerase),(dNTP),DNA(DNA

電泳緩沖液

Marker),TAE(TAEbuffer)。

4檢疫鑒定方法

41田間癥狀檢查

.

在向日葵現(xiàn)蕾中期至盛花期到向日葵隔離種植區(qū)或大田進(jìn)行調(diào)查觀察向日葵植株發(fā)病情況

,,。

42種子帶菌檢查

.

選取癟小的向日葵種子置于干凈三角瓶中加入清水和少量洗衣粉在往復(fù)式振蕩器

5g,,200mL,

上振蕩倒去洗滌液再加入等量的清水重復(fù)洗滌次次直至洗凈向日葵種子上的種衣劑

10min,,,3~5,

如無種子包衣可省略此步晾干剝開向日葵種子將果皮和種仁一起放入裝有乳酚油的燒杯中酒

(,),,,,

精燈下煮沸冷卻后在解剖鏡下用鑷子剝?nèi)?nèi)果皮和種皮放入一干凈培養(yǎng)皿中加入少量棉藍(lán)

3min,,,-

藏紅花染色液靜置左右用乙醇清洗后用鑷子夾取內(nèi)果皮或種皮置于載玻片上加一滴乳酚

,5h,95%,,

油作浮載劑蓋片鏡檢

,。

43病原菌形態(tài)觀察

.

用干凈刀片刮取少量向日葵病葉背面或葉柄花盤等的白色皰斑中的病菌置于載玻片上在生

(、),,

物顯微鏡下觀察該病菌形態(tài)特征記錄孢囊梗孢子囊卵孢子的形狀及大小

,、、。

將制備的向日葵內(nèi)果皮或種皮玻片置于生物顯微鏡下觀察病

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