ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T34750—2017

副豬嗜血桿菌檢測方法

Detectionmethodsforhaemophilusparasuis

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T34750—2017

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物衛(wèi)生標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位河南省動物疫病預防控制中心河南省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所河北農(nóng)業(yè)大

:、、

學動物科技學院山東省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所

、。

本標準起草人吳志明閆若潛張健趙明軍趙雪麗宋勤葉徐引弟王東方王淑娟安春霞

:、、、、、、、、、、

劉梅芬張盼盼謝彩華高鳳山方先珍吳家強拜廷陽王一劉淑敏

、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34750—2017

副豬嗜血桿菌檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了副豬嗜血桿菌的分離與鑒定巢式檢測和實時熒光檢測方法

、PCRPCR。

本標準適用于對豬的肺臟心臟腦等組織胸腔腹腔心包積液或關(guān)節(jié)液抗凝血細菌培養(yǎng)物等

、、,、、,,

樣品中副豬嗜血桿菌的檢測

。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

堿基對

bp:(BasePair)

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(DeoxyribonucleosideTriphosphates)

小溝結(jié)合

MGB:(MinorGrooveBinder)

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸

NAD:(NicotinamideAdenineDinucleotide)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(PhosphateBufferSolution)

聚合酶鏈式反應(yīng)

PCR:(PolymeraseChainReaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNAPolymerase)

緩沖液

TE:Tris-EDTA(Tris-EDTABuffer)

胰蛋白胨大豆瓊脂

TSA:(TrypticSoyAgar)

胰蛋白胨大豆肉湯

TSB:(TrypticSoyBroth)

3儀器

31生物安全柜

.。

32恒溫培養(yǎng)箱

.。

33光學顯微鏡

.。

34全自動微生物鑒定儀

.。

35擴增儀

.PCR。

36高速冷凍離心機g以上

.(12000×)。

37核酸電泳儀和水平電泳槽

.。

38恒溫水浴鍋

.。

39單道微量移液器

.(0.5μL~10μL;2μL~20μL;20μL~200μL;100μL~1000μL)。

310組織勻漿器或研缽

.。

311凝膠成像系統(tǒng)或紫外投射儀

.()。

312實時熒光定量