標準解讀

《GB/T 34796-2017 水溶液中核酸的濃度和純度檢測 紫外分光光度法》是一項國家標準，該標準規(guī)定了使用紫外分光光度計測定水溶液中脫氧核糖核酸（DNA）或核糖核酸（RNA）濃度與純度的方法。此方法基于核酸在特定波長下的吸收特性來評估其濃度及純度。

標準首先介紹了適用范圍，適用于各種類型的核酸樣品，包括但不限于基因組DNA、質粒DNA、總RNA等，在生物醫(yī)學研究、分子生物學實驗等領域具有廣泛應用價值。接著詳細描述了所需儀器設備及其技術參數要求，如紫外可見分光光度計應具備良好的線性響應范圍、低噪聲水平等特性；同時明確了試劑的選擇與配制方法，比如TE緩沖液作為溶解介質時的具體成分比例。

對于實際操作流程，《GB/T 34796-2017》給出了詳細的步驟指導，包括樣品準備、空白對照設置、測量條件設定等方面內容，并強調了每一步驟中的關鍵點。例如，在進行核酸溶液吸光值讀取之前，需確保比色皿內外清潔無污染，且每次更換樣品后都應用去離子水徹底沖洗比色皿再用待測樣本潤洗三次以上以減少交叉污染的可能性。


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....

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  • 現行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實施
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GB/T 34796-2017水溶液中核酸的濃度和純度檢測紫外分光光度法_第1頁
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文檔簡介

ICS07080

A40.

中華人民共和國國家標準

GB/T34796—2017

水溶液中核酸的濃度和純度

檢測紫外分光光度法

Quantificationandpurityanalysisofnucleicacidconcentrationin

solution—Ultravioletspectrophotometry

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T34796—2017

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位中國測試技術研究院生物研究所上海市計量測試技術研究院中國測試技術研

:、、

究院四川中測生物科技有限公司

、。

本標準主要起草人譚和平周李華許麗劉剛馬麗俠李妍葉德萍梁文王智丁敏孫登峰

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34796—2017

水溶液中核酸的濃度和純度

檢測紫外分光光度法

1范圍

本標準規(guī)定了使用紫外分光光度法檢測水溶液中核酸的濃度和純度的原理樣品制備及檢測方法

、。

本標準適用于水溶液中核酸的濃度和純度檢測可對濃度在及以上的水溶液核酸樣品定

,5ng/μL

量檢測和純度分析

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

實驗室計

GB/T11165pH

雙光束紫外可見分光光度計

GB/T26813

移液器檢定規(guī)程

JJG646

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

4原理

核酸中嘌呤和嘧啶堿基有共軛雙鍵具有吸收紫外光的性質其最大吸收值在波長為

,,250nm~

之間堿基與戊糖磷酸形成核苷酸后其最大吸收峰不會改變最大吸收波長約吸收

270nm。、,260nm,

低峰在在波長處單位值的光密度相當于雙鏈濃度為單鏈

230nm。260nm,1ODDNA50μg/mL、

及為單鏈寡核苷酸為利用此量和濃度關系可用于計算核酸樣品

DNARNA40μg/mL、33μg/mL,,

的濃度

。

5試劑和材料

除非另有規(guī)定本方法所用試劑均為分析純水為規(guī)定的一級水

,,GB/T6682。

51DNA標準溶液

.

小牛胸腺標準溶液

DNA。

52三羥甲基氨基甲烷緩沖液1mol/LTris-HClpH74

.(,.)

稱取置于燒杯中加入去離子水充分攪拌溶解用

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