ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36810—2018

草莓枯萎病菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofFusariumoxysporumSchlecht.f.s.

()p

FragariaeWinks&Williams

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T36810—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)天津出入境檢驗(yàn)檢疫局

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人劉躍庭羅加鳳牛春敬崔鐵軍廖芳

:、、、、。

Ⅰ

GB/T36810—2018

草莓枯萎病菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了草莓枯萎病菌的檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于草莓苗中及其攜帶土壤中草莓枯萎病菌的檢疫鑒定

。

2草莓枯萎病菌的基本信息

中文名草莓枯萎病菌

:

學(xué)名Fusariumoxysporumfragariae

:(Schlecht.)f.sp.Winks&Williams

英文名

:fusariumwiltofstrawberry

分類(lèi)地位草莓枯萎病菌屬真菌界子囊菌門(mén)盤(pán)菌亞門(mén)

:(Fungi),(Ascomycota),(Pezizomycotina),

糞殼菌綱肉座菌目叢赤殼科鐮刀菌屬Fusarium

(Sordariomycetes),(Hypocreales),(Nectriaceae),()。

傳播途徑病菌依靠帶菌種苗和土壤進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播

:。

草莓枯萎病菌的其他信息參見(jiàn)附錄

A。

3方法原理

病原菌的為害癥狀分離培養(yǎng)性狀形態(tài)特征及特異性擴(kuò)增片段作為草莓枯萎病菌的檢疫鑒

、、PCR

定依據(jù)

。

4儀器用具和主要試劑

41儀器用具

.

顯微鏡超凈工作臺(tái)生物培養(yǎng)箱電子天平高壓滅菌鍋常規(guī)冰箱擴(kuò)增儀電泳

、、、、、(-20℃)。PCR、

儀凝膠成像儀高速冷凍離心機(jī)恒溫水浴鍋

、、、。

培養(yǎng)皿三角瓶鑷子手術(shù)剪手術(shù)刀接種針移液器酒精燈

、、、、、、、。

42主要試劑

.

乙二胺四乙酸十二烷基磺酸鈉異戊醇三氯甲烷無(wú)水乙醇乙

(EDTA)、(SDS)、Tris-HCl、、、、70%

醇氯化鉀氯化鎂蛋白酶引物Taq聚合酶等分子生物學(xué)試劑或用植物組織及

、、、K、FofraF/FofraR、。

真菌基因組提取試劑盒提取蔗糖葡萄糖瓊脂青霉素鏈霉素次氯酸鈉

DNA。、、、、、0.5%(NaClO)。

馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的制備參見(jiàn)附錄

(PSA)、(PDA)B。

5病菌的鑒定

51癥狀檢查

.

取待檢植株觀察植株有無(wú)生長(zhǎng)不良矮小衰弱及腐爛癥狀下部葉片是否變紫紅色萎蔫