犐犆犛６５．１６０

犡８７

備案號(hào)：２３５８８—２００８

中華人民共和國(guó)煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

犢犆／犜２４９—２００８

煙草及煙草制品蛋白質(zhì)的測(cè)定

連續(xù)流動(dòng)法

犜狅犫犪犮犮狅犪狀犱狋狅犫犪犮犮狅狆狉狅犱狌犮狋狊—犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狆狉狅狋犲犻狀—

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２００８０４１４發(fā)布２００８０４１４實(shí)施

國(guó)家煙草專賣局發(fā)布

書(shū)

犢犆／犜２４９—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家煙草專賣局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)煙草標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（ＴＣ１４４）歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：安徽中煙工業(yè)公司。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：瞿先中、舒俊生、汪開(kāi)保、程濤、蔣士盛、田振峰。

Ⅰ

書(shū)

犢犆／犜２４９—２００８

煙草及煙草制品蛋白質(zhì)的測(cè)定

連續(xù)流動(dòng)法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了煙草及煙草制品中蛋白質(zhì)的連續(xù)流動(dòng)測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于煙草及煙草制品中蛋白質(zhì)的測(cè)定。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ５６０６．１卷煙第１部分：抽樣

ＧＢ／Ｔ１９６１６煙草成批原料取樣的一般原則（ＧＢ／Ｔ１９６１６—２００４，ＩＳＯ４８７４：２０００，ＭＯＤ）

ＹＣ／Ｔ３１煙草及煙草制品試樣的制備和水分測(cè)定烘箱法

ＹＣ／Ｔ１６１煙草及煙草制品總氮的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)法

３原理

用乙酸溶液沉淀樣品中的蛋白質(zhì)氮。樣品經(jīng)消化后，在堿性條件下（ｐＨ為１２．８～１３．１），與試劑溶

液在線反應(yīng)生成靛藍(lán)化合物，在６６０ｎｍ對(duì)該靛藍(lán)化合物進(jìn)行比色測(cè)定。

４試劑及材料

４．１使用分析純?cè)噭?，水?yīng)為蒸餾水或同等純度的水。

４．２乙酸溶液，０．５％（體積分?jǐn)?shù)）。

４．３Ｂｒｉｊ３５溶液（聚乙氧基月桂醚）

將２５０ｇＢｒｉｊ３５加入到１０００ｍＬ水中，加熱攪拌直至溶解。

４．４濃硫酸。

４．５氧化汞（ＨｇＯ），紅色。

４．６硫酸鉀（Ｋ２ＳＯ４）。

４．７次氯酸鈉溶液：移?。叮恚檀温人徕c（有效氯含量應(yīng)不低于５％）于１００ｍＬ的容量瓶中，用水定容

至刻度，加入２滴Ｂｒｉｊ３５溶液（４．３）。

４．８氯化鈉／硫酸溶液：稱取１０．０ｇ氯化鈉于燒杯中，用水溶解，加入７．５ｍＬ濃硫酸（４．４），轉(zhuǎn)移至

１０００ｍＬ的容量瓶中，用水定容至刻度，加入１ｍＬＢｒｉｊ３５溶液（４．３）。

４．９水楊酸鈉／亞硝基鐵氰化鈉溶液：稱取７５．０ｇ水楊酸鈉（Ｎａ２Ｃ７Ｈ５Ｏ３）、０．１５ｇ亞硝基鐵氰化鈉

［Ｎａ２Ｆｅ（ＣＮ）５ＮＯ·２Ｈ２Ｏ］于燒杯中，用水溶解，轉(zhuǎn)移至５００ｍＬ容量瓶中，用水定容至刻度，加入

０．５ｍＬＢｒｉｊ３５溶液（４．３）。

４．１０緩沖溶液：稱取２５．０ｇ酒石酸鉀鈉（ＮａＫＣ４Ｈ４Ｏ６·４Ｈ２Ｏ）、１７．９ｇ磷酸氫二鈉（Ｎａ２ＨＰＯ４·１２Ｈ２Ｏ）、

２７．０ｇ氫氧化鈉（ＮａＯＨ），用水溶解，轉(zhuǎn)移至５００ｍＬ容量瓶中，用