血清型1血清型的概念人類某些血清蛋白具有遺傳多態(tài)性，表型有個體差異，稱為血清型（serumtypes。血清型也稱為血清蛋白的多態(tài)性或遺傳標記。血清型的發(fā)展

人們對免疫球蛋白型的研究較為深入。研究發(fā)現(xiàn)免疫球蛋白具有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和功能，是血清蛋白質(zhì)中多態(tài)性最多的一種蛋白質(zhì)。 正常人的免疫球蛋白很不均一，難以研究分析其抗體結(jié)構(gòu)。采用電泳（淀粉電泳、丙烯酰胺電泳）和免疫學(xué)方法（免疫擴散，血凝抑制）及免疫電泳相結(jié)合的方法，以檢出的血清蛋白型有觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、低密度脂蛋白等21個系統(tǒng)，137個抗原。免疫球蛋白人類免疫球蛋白已知有三類同種異型：Gm，Am和Km。免疫球蛋白同種異型遺傳標記同種異型遺傳標記是位于免疫球蛋白上反應(yīng)個體差異的遺傳標記。一、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與分類氨基端羧基端

IgG(γ鏈）、IgA（α鏈）、IgM（μ鏈）、IgD（δ鏈）、IgE（ε鏈）

人類Ig根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原特異性的不同，分為五類：根據(jù)IgG重鏈恒定區(qū)氨基酸排列不同及二硫鍵的數(shù)目和位置不同將IgG進一步分為四個亞類:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4根據(jù)輕鏈恒定區(qū)的不同可分為兩型：κ型和λ型二、Gm型與Km型的命名位于IgG1、IgG2、IgG3、IgA、IgE及κ輕鏈上的同種異型遺傳標記分別以符號G1m、G2m、G3m、Am、Em、Km代表Ｇｍ同種異型Gm（Gammamarker）為IgG表現(xiàn)出來的同種異型。Gm同種異型的抗原性已發(fā)現(xiàn)三十種左右，分別表現(xiàn)在gamma鏈上。Gm系統(tǒng)中每對因子遺傳位點無基因內(nèi)組合，呈緊密連鎖的單倍型。Gm單體型在不同的種族人群中表現(xiàn)各異，人種差別較大。在我國漢族和其他少數(shù)民族單倍體基因型和單倍型表現(xiàn)不一。

由于各群體調(diào)查Gm因子的種類及個數(shù)不同，因而Gm因子單倍型中組合數(shù)目多寡也不同存在于IgG2亞類上的G2m(23）因子最早由Kunkel等發(fā)現(xiàn)。以后的研究表明，G2m(23）因子的分布有以下特點：(1)它是人類IgG2上唯一可檢出的同種異型遺傳標記;(2)在黑人中，G2m(23）因子極少存在，故它是識別人種非“非洲來源”的重要標記；(3）除人類外，它幾乎不存在于其他靈長類動物，提示它具有高度的種屬特異性。因此，G2m(23)因子作為人類免疫系統(tǒng)的特征，可用于研究人類進化、種族特征、基因流動以及自然選擇對人類免疫系統(tǒng)的作用等。Gm型的遺傳通過對Gm因子的廣泛群體遺傳學(xué)及家系調(diào)查，證實Gm因子的遺傳方式為常染色體共顯性單倍型遺傳。

抗Gm抗體的產(chǎn)生輸血：尤其是兒童患者，經(jīng)多次輸血后常?？蓽y到可識別特異性的抗體。在成人，至少經(jīng)過長期的刺激,才能產(chǎn)生抗體。在經(jīng)產(chǎn)婦,單獨一次注射免疫球蛋白,不可能增加針對免疫球蛋白的抗體；妊娠：曾在孕婦中檢測到抗G1m（1）,后來她的嬰兒證實為G1m（1）。臍血血清中含有少量（1%或更少）的內(nèi)源性IgG,當嬰兒的所載有的IgG決定簇與母親不同時,母親即被免疫；嬰兒對母親IgG同種異型的免疫應(yīng)答吳國光等曾對上海2萬名獻血者進行抗Gm抗體檢測，共檢測出抗Gm抗體陽性標本9份，檢出率為0.045%；抗Gm抗體雖然可能引起輸血過敏反應(yīng)等，但反應(yīng)較輕微，因此輸血中無需常規(guī)檢測抗Gm。Am同種異型屬于IgA表現(xiàn)出來的同種異型。Am抗原存在于Alpha2重鏈的恒定區(qū)，例如IgA2亞型有A2m（1）和A2m（2）兩種同種異型，受控于兩個等位基因。二者在白人、黑人和黃種人中分布都不相同。臨床上IgA缺乏癥患者或少數(shù)IgA含量正?；颊咭蚨啻屋斞僧a(chǎn)生抗IgA抗體。體內(nèi)含有IgA抗體的患者輸注含有IgA的血液或制品時可發(fā)生過敏反應(yīng)，嚴重時會導(dǎo)致休克，甚至死亡。Km同種異型Kappamarker是IgG在Kappa鏈上的同種異型表現(xiàn)。Km系統(tǒng)有三個因子：Km（1）、Km（2）、Km（3），Km系統(tǒng)的等位基因有Km1、Km1，2和Km3三個，按常染色體共顯性規(guī)律遺傳此系各個抗原在白人、黑人和東亞人分別均不相同。

新生兒出生時帶有來自母體的IgG，此期間具有母體的同種型。出生后約6個月，新生兒產(chǎn)生自己的免疫球蛋白，表現(xiàn)出自己的同種異型。免疫球蛋白同種異型檢測的意義很多疾病和其密切相關(guān)，如重癥肌無力、慢性活動性肝病和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和特定的Gm單體型相關(guān)。種系調(diào)查親子鑒定輸血反應(yīng)5、法醫(yī)學(xué)意義Gm、Km系統(tǒng)個人識別率及非父排除率均高于已知的紅細胞血型、紅細胞酶型及其他血清型，且Gm與Km抗原在常溫下或堿性環(huán)境中很穩(wěn)定，溶血對抗原性無大影響，所以Gm、Km系統(tǒng)具有很高的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值免疫球蛋白同種異型與臨床輸血Gm病人體內(nèi)有抗Gm抗體，輸全血、血液成分或血液制品所引起的反應(yīng)一般較輕受血者體內(nèi)缺乏lgA完全缺乏：約有1/500的病人ABO血漿中幾乎完全缺乏lgA，輸入含有l(wèi)gA的血液或血液制品，刺激病人產(chǎn)生很強的抗lgA抗體，以后再輸入含有IgA血液或血液成分及血漿制品可發(fā)生嚴重過敏反應(yīng)，甚至死亡。IgA完全缺乏的人，這種人即使從未輸血或未注射血液制品，特異性抗-IgA抗體也十分常見。據(jù)Schmide(1969)描述一名IgA完全缺乏的婦女，第一次輸血便發(fā)生十分嚴重的過敏性反應(yīng)，測定其抗-IgA效價為1750，第二次輸血后上升到17500。部分缺乏：病人缺乏lgA亞類，輸含lgA的血液或血反應(yīng)，因為受輸入抗體的刺激，于10天后可能產(chǎn)生針對lgA亞類抗體，以后再此類制劑會發(fā)生反應(yīng)，一般癥狀較輕，如蕁麻疹等。IgA缺乏癥由Vyas于1968年首次報道，是已知病因最為明確的一種輸血類過敏反應(yīng)?？笽gA抗體多為IgG型，抗原抗體反應(yīng)激活補體釋放C3a、C5a等致敏物質(zhì)，引起類過敏反應(yīng)類特異性抗-IgA，即aIgA：產(chǎn)生類特異性抗IgA的患者血清中檢測不到IgA，其產(chǎn)生的抗IgA與所有的IgA均可發(fā)生反應(yīng)，在患者血清中滴度高；限定特異性抗-IgA：產(chǎn)生限制特異性抗IgA的患者少見，其血清中可檢測到正常含量或偏低含量的IgA，但某一種IgA亞類缺乏，因此其產(chǎn)生的抗IgA具有限制性，僅與相應(yīng)缺乏的亞類IgA(如IgA1或IgA2)反應(yīng)，且在患者血清中滴度低?？笽gA抗體分類IgA缺乏癥患者必須輸注IgA缺乏的血液或制品。在國外的血液中心已普遍篩選IgA（—）的血液或制品冷凍保存以備急用。 因此開展人群Ig同種異型研究，檢出人血清中抗Ig，對疾病及輸血反應(yīng)的診斷、預(yù)防和治療有積極意義。思考：對IgA缺乏或部分缺乏的病人，應(yīng)該如何輸血？1、IgA完全缺乏獻血員的全血或血漿（最理想）。據(jù)文獻報道,IgA缺乏獻血員中,日本只有0.7/萬人;芬蘭只有1～25/萬人,有文獻報道在中國正常人群中,IgA缺乏患病率為2.4/萬人。因此,要找IgA缺乏的獻血員十分困難。2、自體輸血；3、生理鹽水多次洗滌的紅細胞懸液；4、臍帶血？臍血中IgA極少主要是因為出生前的胎兒與外界隔絕，B細胞尚未受到抗原的刺激,不能轉(zhuǎn)化為分泌抗體的漿細胞,除IgG外,其它IgM、IgA等大分子免疫球蛋白都不能過胎盤,均由出生后不斷接觸病原而逐漸產(chǎn)生,IgA一般出生后2～4個月才開始出現(xiàn)。9歲后接近成人水平。故胎兒娩出時,臍血中IgA不存在或極少。思考IgA缺乏或者部分缺乏者，其體內(nèi)含有抗-IgA抗體，能否作為獻血者？研究方法：復(fù)查輸血記錄，找出有抗-IgA且IgA缺乏的血小板捐獻者，將他們的血小板與非IgA缺乏的血小板作輸血后比較。結(jié)果：4個有抗-IgA且IgA缺乏的血小板捐獻者共獻出血小板25份，輸給22個人，有1人發(fā)生了發(fā)熱反應(yīng)，經(jīng)確定與輸血無關(guān)。對照組60名獻血者共獻出78份血小板，輸給56名受者，其中1人發(fā)生過敏反應(yīng)。結(jié)論：輸入帶有IgA抗體的血液成分似乎不會增加輸血反應(yīng)率。IgA缺乏引起輸血反應(yīng)1例患者,男,65歲,O型血,因肝硬化住某醫(yī)院,3月2日輸O型血漿200ml,未見任何不良反應(yīng),3月24日再次輸入O型血漿200ml時,患者出現(xiàn)了皮膚潮紅,出汗,血壓低,呼吸困難,惡心和會厭水腫等一系列過敏反應(yīng)癥狀。于是立即停止輸血,將患者血樣和所輸血漿送到血液中心進行檢查。核對用血申請單、血袋標簽、交叉配血試驗記錄核對受血者及供血者ABO血型，Rh（D）血型。用保存于冰箱中的受血者與供血者血樣、新采集的受血者血樣、血袋中血樣，重測ABO血型、Rh（D）血型、不規(guī)則抗體篩選及交叉配血試驗（包括鹽水相和非鹽水相試驗）；

結(jié)果

對兩份標本進行血型血清學(xué)檢查,并對所輸血漿進行細菌培養(yǎng),均未發(fā)現(xiàn)任何異常情況。同時根據(jù)患者輸血情況及所出現(xiàn)癥狀以及患者即往史進行分析,推斷其可能是由于患者血漿中缺乏IgA,因輸血漿產(chǎn)生抗體引起抗原抗體反應(yīng),進而產(chǎn)生過敏反應(yīng)癥狀。對患者血漿中IgA情況進行檢測,發(fā)現(xiàn)患者血漿中IgA含量僅為4.5mg/dl,遠遠低于同年齡組平均水平下限;而其抗IgA抗體效價為1:3000；同時對患者即往史調(diào)查發(fā)現(xiàn),患者平時經(jīng)常出現(xiàn)呼吸道、消化道感染癥狀,進一步證明了我們的推斷免疫球蛋白同種異型的其他應(yīng)用免疫球蛋白同種異型檢測意義——人類學(xué)研究中國人免疫球蛋白同種異型的研究：中華民族起源的一個假說

趙桐茂（上海輸血研究所），遺傳學(xué)報，1989目前已知的免疫球蛋白同種異型有GmAm、Em和Km．等系統(tǒng)。Gm在免疫球蛋白lg的重鏈上，受控于第14號染色體，已檢出18種因子。這些Gm因子以比較固定的形式組成單體型遺傳。Km因子有3種，受控于第2號染色體。群體和家庭調(diào)查表明Gm單體型穩(wěn)定，發(fā)生交換的情況極少。不同種族間不但Gm單體型頻率明顯差異，而且還存在一些具有“人種特異性”的Gm單體型，因此在人類學(xué)研究中Gm是個很有用的遺傳標記。

摘要：調(diào)查了我國24個民族、74個群體的免疫球蛋白同種異型Gm、Km分布。測定了9560例個體的Gm((1，2，3，5，21)因子和9611例個體的Km(1)因子。根據(jù)Gm單體型頻率計算了遺傳距離并繪制系統(tǒng)樹。Gm1，21分布Gm（1，3，5）分布這些群體可以分為南北兩大類型，被假設(shè)分別起源于黃河流域和長江流域。北方類型包括居住在我國北方的漢族、維吾爾族、哈薩克族、東鄉(xiāng)族、鄂倫春族、蒙古族、朝鮮族、褡固族、滿族、藏族、回族、錫伯族和保安族。南方類型包括南方漢族、土家族、白族、彝族、苗族、布依族、水族、畬族、仫佬族、壯族、侗族和京族。

結(jié)果支持作者早前提出的有關(guān)中華民族起源于古代兩個不同群體的假說。這兩個群體大致以北緯30度為界，分別居棲在黃河和長江流域。不同人種間的差異，大于同一人種內(nèi)不同群體間的差異。與高加索人種關(guān)聯(lián)的Gm3，5單體型存在于中國西北地區(qū)的少數(shù)民族中，提示混有高加索人種血緣。很可能來源于中亞地區(qū)的高加索人，通過“絲綢之路”進入中國。Km因子在所調(diào)查的74個群體中呈隨機分布。

Ig同種異型檢測方法免疫學(xué)方法：

微量血凝抑制試驗ELISA等方法電泳(Electrophoresis):

SDSPCR抗原分型--紅細胞凝集抑制試驗將稀釋的受檢血清與等量最適稀釋度抗Gm血清混合；室溫反應(yīng)30分鐘；加入已知Gm抗原致敏的指示紅細胞懸液；置室溫1小時后離心,觀察結(jié)果。如果受檢血清中含有某種Gm型免疫球蛋白，將抑制抗Gm凝集帶有Gm因子的抗體所致敏的紅細胞，使之呈陰性反應(yīng)?？乖中汀狤LISA技術(shù)：以檢測G3m(16)為例EL1SA包板抗原為稀釋的混合人IgG，第一抗體為抗G3m(16)因子單克隆抗體，第二抗體為稀釋兔抗鼠Ig辣根氧化酶標記抗體；第一抗體加入測定板之前，預(yù)先加等體積稀釋好的待測血清，置室溫反應(yīng)2小時。然后再分別加入第一抗體和第二抗體；抑制率=(x—Y)／x式中x為未經(jīng)待測血清抑制的單克隆抗體的吸光度；Y為經(jīng)待測血清抑制后的單克隆抗體的吸光度。抑制率大于50％為陽性，抑制率小于或等于50%為陰性。瓊脂糖電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）等電聚焦電泳：是一種根據(jù)樣品的等電點不同而使它們在pH梯度中相互分離的一種電泳技術(shù)，分辨率比常規(guī)凝膠電泳高，能夠揭示許多普通電泳難以檢出的多態(tài)性。如維生素D結(jié)合蛋白普通電泳分為三種表現(xiàn)型，而等電聚焦技術(shù)分為六種。血清型分型技術(shù)——電泳方法

DNA分型技術(shù)也可用于血清型分型。個體差異的實質(zhì)是人類基因組編碼DNA的差異小結(jié)血清型概念：人類某些血清蛋白具有遺傳多態(tài)性，表型有個體差異，稱為血清型（serumtypes）；免疫球蛋白同種異型概念：是指同一種屬不同個體間的Ig分子抗原性的不同，主要反映在Ig分子上的CH和CL上一個或數(shù)個氨基酸的差異。

血清型檢測在臨床輸血中的意義1、Gm不合引起輸血反應(yīng)的概率很低，且輸血反應(yīng)比較輕微；2、對缺乏IgA的受血者，經(jīng)輸血或其他途徑產(chǎn)生抗IgA抗體后，再次輸入含IgA的全血、血漿或血液制品時，會產(chǎn)生嚴重的輸血過敏反應(yīng)。起病急（僅輸入1ml即可產(chǎn)生過敏反應(yīng)），病情嚴重（嚴重的過敏性休克，甚至?xí)斐伤劳觯┙Y(jié)合珠蛋白型1、Hp的生化性質(zhì)與生物學(xué)功能

由肝臟合成，等電點為4.1－4.2，電泳屬于α2－球蛋白組分。含糖量為18.6％

結(jié)合珠蛋白是一種血漿糖蛋白，分子量約為90.000。能與紅細胞外血紅蛋白(Hb)結(jié)合形成緊密的非共價復(fù)合物Hb-Hp。每天降解的Hb約有10%釋入血循環(huán)中，成為紅細胞外游離的Hb，Hb與Hp結(jié)合成Hb-Hp復(fù)合物后分子量可達155,000，不能透過腎小球，從而防止游離血紅蛋白從腎臟丟失，避免Hb所含鐵的丟失。保證鐵再用于合成代謝。溶血性貧血患者血漿結(jié)合珠蛋白濃度下降。由于溶血時大量的Hb釋出，Hp與游離Hb結(jié)合成復(fù)合物而被肝細胞攝取、清除。此外，Hp也是一種急性期蛋白，患各種炎癥時其血漿中含量升高。2、Hp的分子結(jié)構(gòu)

Hp的分子結(jié)構(gòu)類似免疫球蛋白，即由兩條重鏈(β鏈)和兩條輕鏈（α鏈）組成四聚體，而Hp的多態(tài)性主要是輕鏈的遺傳變異造成。輕鏈有α1和α2二種。α1中又有α1S和α1F二種亞型，各由84個氨基酸組成，分子量約9100。兩者區(qū)別在于第54位氨基酸(α1F為賴氨酸，α1S為谷氨酸)，其余83個氨基酸殘基順序均相同，因此可以推斷這一區(qū)別是通過一次點突變形成。β鏈則由143個氨基酸組成，分子量約16000。Hpα1和α2肽鏈是由一對等位基因Hpl和Hp2所決定，基因定位于16q22．1，呈共顯性遺傳，因此有三種基本基因型：Hpl-1型為Hpl／Hpl；Hp2．1型為Hp2／Hpl；Hp2-2型為Hp2／Hp2Hp1-1型由兩條α1鏈和兩條β鏈組成Hp2-1型由一條α1鏈、一條α2鏈和兩條β鏈組成Hp2-2型由兩條α2鏈和兩條β鏈組成。除上述三型外，僅還有其它的變異型，由此組合成人群中Hp的多種多樣的基因型和表現(xiàn)型如：Hp2—1M型；一部分無血管內(nèi)溶血者的血清中沒有Hp或含量甚微，即所謂的Hp0型。常見的三種Hp型別在不同人種中分布不同，Hpl和Hp2的基因頻率也各異，Hp2基因頻率以亞洲人中最高(0．75)，歐洲白人次之(0．60)，非洲人最低(0．30-一0．40)?？梢姡芯縃p型別分布不僅在遺傳學(xué)上有意義，在人種學(xué)上也有一定價值。帶HP1基因者結(jié)合血紅蛋白較多，HP2基因者結(jié)合血紅蛋白較少，如1-1型平均結(jié)合血紅蛋白為118g血紅蛋白/L，1-2型為93g血紅蛋白/L，2-2僅為75g血紅蛋白/L。珠蛋白基因的多態(tài)性會導(dǎo)致珠蛋白本身與血紅蛋白的結(jié)合能力、抗氧化能力、人體內(nèi)鐵的代謝循環(huán)和免疫能力發(fā)生改變。既往的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，珠蛋白基因的多態(tài)性對瘧疾的發(fā)生和人體內(nèi)紅細胞溶解有著重要的意義珠蛋白2-2基因型是瘧疾流行地區(qū)兒童貧血的危險因素，從而提示攜帶Hp2-2基因型的人體在瘧疾引起紅細胞溶血后，其珠蛋白結(jié)合游離血紅蛋白的能力是下降的。

此外，胎兒血液中不易測出Hp，部分新生兒可測出，4個月的嬰兒Hp型別大部分可測出，個別情況直至15歲以后才能測出。胎兒及新生兒血中測不出Hp，不能稱為Hp0型，這一點在涉及胎兒及嬰幼兒的親權(quán)鑒定時要注意Hp型的分型原理及方法電泳前先使待測樣品與血紅蛋白形成Hp－Hb復(fù)合物。電泳完后可以利用血紅蛋白的過氧化物酶活性在過氧化氫存在時使聯(lián)苯胺氧化成聯(lián)苯胺藍，染色Hp與輸血Hp缺乏癥的患者多次輸入血漿制品可產(chǎn)生針對結(jié)合珠蛋白的抗體。日本紅十字對1993—2000年間4138例非溶血性輸血反應(yīng)的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，在日本人群中，結(jié)合珠蛋白缺乏導(dǎo)致的抗結(jié)合珠蛋白抗體產(chǎn)生引起的類過敏反應(yīng)約比抗IgA引起類過敏反應(yīng)高6倍，且在這些病人血清中同時檢出IgE與IgG抗Hp抗體。擬膽堿酯酶：表現(xiàn)出遺傳多態(tài)性。轉(zhuǎn)鐵蛋白型：多種變異體，各人種基因頻率各不相同。α2球蛋白型：血漿銅藍蛋白：Ceruloplasmin堿性磷酸酶AKPΑ2巨球蛋白型紅細胞酶型酶：活細胞產(chǎn)生的一類具有生物催化作用的有機物,它能使化學(xué)反應(yīng)迅速進行，而本身性質(zhì)不變。酶型：酶所具有的遺傳多態(tài)性或遺傳標記；同工酶的遺傳概念：若同一種酶在不同的個體中表現(xiàn)有遺傳差異，且根據(jù)這些差異可以把人群分為兩個或更多類型，在遺傳上把這種酶稱為同工酶。同工酶的生化概念：在人體的血液、組織和各種體液中所存在的能催化相同的化學(xué)反應(yīng)但蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)不相同的一類酶?；钚灾行模航Y(jié)構(gòu)相同非活性部分：結(jié)構(gòu)差異現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有多種同工酶。如6-磷酸葡萄糖脫氫酶、乳酸脫氫酶、酸性和堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酸、肌酸磷酸激酶、核糖核酸酶、過氧化酶和膽堿酯酶等紅細胞酶型紅細胞酶型：不同個體紅細胞酶的遺傳多態(tài)性。RBC表面酶型呈遺傳多態(tài)性，目前有20余種常用電泳方法進行分析紅細胞酶型應(yīng)用：其多態(tài)性作為遺傳標記在研究細胞來源、基因分析、法醫(yī)中的親子鑒定和個體識別。同工酶的分型方法（電泳分離、酶譜顯示）

（一）電泳分離

1、歷史1955年，發(fā)現(xiàn)了淀粉凝膠電泳法。1963年，應(yīng)用淀粉凝膠電泳法發(fā)現(xiàn)了第一種紅細胞多態(tài)性酶型：酸性磷酸酶。70年代，等電聚焦技術(shù)的應(yīng)用，多種酶型亞型的發(fā)現(xiàn)1972年，發(fā)現(xiàn)了磷酸葡糖變位酶PGM1的亞型2、同工酶的分型多采用區(qū)帶電泳或等電聚焦技術(shù)。

區(qū)帶電泳——利用酶蛋白分子的電荷密度的差異，不同酶蛋白分子在介質(zhì)中的遷移率不同，從而形成清晰的區(qū)帶；等電聚焦技術(shù)——根據(jù)酶蛋白分子的等電點不同，在pH梯度介質(zhì)中，酶蛋白分子聚焦在相應(yīng)的等電點pH位置上，形成狹窄而清晰的區(qū)帶。磷酸葡萄糖變位酶(PGM)

1、生物化學(xué)性質(zhì)與生物學(xué)功能

PGM是參與糖代謝的重要酶類PGM葡萄糖－1－磷酸鹽

葡萄糖－6－磷酸鹽

葡萄糖－1，6－二磷酸鹽

?分子量：PGM2：61KD>PGM3：53KD>PGM1:51KD。?熱穩(wěn)定性：PGM1>PGM2>PGM3?活性：PGM1：占組織中PGM酶活性的80％，紅細胞中50％PGM2：在人體組織中，其余的PGM酶活性來自PGM2。在紅細胞中兩者活性相當，各占紅細胞酶活性的50％。PGM3：胎盤、精子、白細胞和毛根鞘細胞中PGM4：主要見于哺乳期婦女的乳汁中2、PGM1表型

PGM1的多態(tài)性首先由Spencer等在1964年發(fā)現(xiàn)。PGM1普通型

3種由普通凝膠電泳發(fā)現(xiàn)的表型：PGM11-1（a、c帶）PGM12-2（b、d帶）PGM11-2（a、b、c、d帶）等位基因：PGM1*1、PGM1*2

PGM1的稀有表現(xiàn)型:

稀有的表現(xiàn)型都是由一個普通型等位基因與一個稀有型等位基因（PGM1*3～PGM1*8）所形成的雜合子。3、PGM1的亞型聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦技術(shù)可區(qū)分10種亞型：PGM11+、PGM11﹣、PGM12﹣、PGM12+PGM11+2+、PGM11﹣2﹣、PGM11+2﹣PGM11﹣2+、PGM11+1﹣、PGM12+2﹣PGM1的10種亞型受控于4個共顯性等位基因：PGM1*1+、PGM1*1﹣、PGM1*2+、PGM1*2﹣4、群體遺傳學(xué)（一）普通型大多數(shù)群體以PGM1*1頻率最高，最高可達0.90左右。中國各民族的PGM1*1基因頻率在0.59～0.83之間，絕大多數(shù)民族的PGM1*1頻率與亞洲其他地區(qū)、美洲黑人、白人和歐洲多數(shù)群體之間無明顯差異。（二）亞型：

?PGM1亞型的基因頻率在各群體之間多無顯著性差異

5、PGM1的電泳分型和酶譜顯示。

普通型：淀粉凝膠電泳或瓊脂糖凝膠電泳。電子轉(zhuǎn)移染料染色法亞型：聚丙烯酰胺等電聚焦法電子轉(zhuǎn)移染料染色法。谷丙轉(zhuǎn)氨酶谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）：又稱丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，是氨基酸代謝中的重要酶類。其多態(tài)性是1971年用垂直板淀粉凝膠電泳發(fā)現(xiàn)的1、生化特征GPT廣泛存在于各組織器官的細胞中，肝的含量最為豐富，其活性遠比其他組織高。GPT以兩種形式存在于細胞中：一種存在于細胞漿中，稱為可溶性GPT（sGPT）；另一種存在于線粒體中，稱為線粒體型GPT（mGPT）血清GPT活性顯著升高是由于細胞壞死或病變細胞膜通透性增強所致，故臨床上將血清GPT活性測定用于肝臟疾病的診斷GPT分子由兩個亞基構(gòu)成，相對分子質(zhì)量為100000。催化丙氨酸與谷氨酸的氨基互換2、遺傳多態(tài)性1971年采用淀粉凝膠電泳分離并經(jīng)特殊染色，首次確定可溶性GPT的三種常見表現(xiàn)型：GPT1、GPT2-1、GPT2，并確定該表現(xiàn)型由人類第8號染色體上的一對共顯性基因GPT1、GPT2所控制，其遺傳方式符合孟德爾定律。以后相繼發(fā)現(xiàn)了GPT基因座上的多個稀有等位基因GPT3－GPT8及沉默基因GPT0。中國人群中尚沒有檢出稀有基因的報道。瓊脂糖凝膠電泳檢出的GPT譜型：純合子1型和2型各有一條譜帶，2型帶泳動較快，靠近正極；1型帶泳動較慢，靠近負極；雜合子2－1型有三條譜帶，在1型和2型的譜帶中間還多一條帶3、群體遺傳學(xué)調(diào)查黃種人和白種人各人群GPT型的基因頻率分布差異不明顯。GPT1的頻率較GPT2略高。非洲黑種人GPT1的基因頻率高達0.85，與白種人及黃種人差異明顯。GPT屬高鑒別能力的酶型系統(tǒng)，在個人識別中極具實用價值。4、GPT的分型方法方法有：淀粉凝膠電泳、瓊脂糖凝膠電泳、乙酸纖維素膜及聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦等，其中較常用的是瓊脂糖凝膠電泳。GPT酶譜顯示方法為熒光染色；其原理為：GPT能催化α－酮戊二酸與L－丙氨酸反應(yīng)，分別生成谷氨酸和丙酮酸，后者轉(zhuǎn)化為乳酸，同時使NADH變?yōu)镹AD，NADH為熒光物質(zhì)，而NAD則無熒光性，故有GPT存在的部位不發(fā)熒光，屬于負顯影。

紅細胞酸性磷酸酶（EAP）1、生物化學(xué)性質(zhì)與生物學(xué)功能

酸性磷酸酶又稱為磷酸單酯磷酸水解酶或酸性磷酸酯酶（ACP)，是一組在酸性條件下，催化磷酸單酯水解的酶類，能催化磷酸單酯水解成磷酸和醇?？煞譃?大類：1、ACP1-紅細胞酸性磷酸酶（EAP）2、ACP2-細胞分泌的酸性磷酸酶，如精液ACP(SAP)、陰道液ACP(VAP)3、ACP3-組織細胞溶酶體中的ACP在這三類同工酶中，紅細胞酸性磷酸酶是具有遺傳多態(tài)性的同工酶。2、EAP表型

6種普通表型：EAPA、EAPB、EAPC、EAPBA、EAPCA和EAPCB2號染色體短臂上單一基因座的3個等位基因：EAP*A、EAP*B、EAP*C此外，EAP基因座存在稀有等位基因EAP*D、EAP*E、EAP*F、EAP*G、EAP*R、EAP*Tic-1及EAP*0等。3、EAP基因EAP基因位于人類2p25

4、群體遺傳學(xué)?各群體中EAP*B的頻率都明顯高于EAP*A，其中以黑人EAP*B的基因頻率最高，高達0.9以上，黃種人EAP*B基因頻率介于黑人和白人之間。?EAP基因頻率的分布有明顯的種族差異，稀有基因EAP*C多見于白