特定蛋白的免疫測定及臨床意義1醫(yī)學課件ppt特定蛋白的免疫測定方法基本原理：免疫沉淀反應免疫透射比濁免疫散射比濁2醫(yī)學課件ppt免疫沉淀反應的發(fā)展歷史1897年，Kraus發(fā)現(xiàn)細菌培養(yǎng)液與其相應抗血清混合后出現(xiàn)肉眼可見的沉淀反應1902年Ascoli建立了環(huán)狀沉淀試驗。1905年Bechhold將抗體混溶在明膠中，然后再將相應特異抗原加于其上，抗原抗體的特異結合可在明膠中出現(xiàn)沉淀。1946年Oudin報道了試管單向免疫擴散試驗。（1965年Mancini又提出了平板單向免疫擴散試驗。）Grabar和Williams在1953年報道了免疫電泳。（對流免疫電泳、火箭免疫電泳和免疫固定電泳）上述為經(jīng)典免疫沉淀試驗發(fā)展階段，測定范圍窄（10~100μg/ml）、靈敏度低，繁瑣費時，不能自動化。3醫(yī)學課件ppt免疫沉淀反應的發(fā)展歷史1959年，Schultze等報道了透射比濁法（Transmissionturbidimetry)。1967年，Ritchie等報道了散射比濁法(nephelometry)。1977年，Sternberg等進一步發(fā)展建立了速率散射比濁法(Ratenephelometry)。免疫比濁測定方法與免疫沉淀方法相比，靈敏度高，重復性好，測定范圍寬，已用于臨床體液特定蛋白含量的測定，現(xiàn)已有多種自動化檢測儀器應用于臨床檢驗，尤其是免疫散射比濁測定。4醫(yī)學課件ppt免疫透射比濁基本原理：一定波長光線通過抗原抗體反應混合液時，被其中的免疫復合物（IC）反射或遮擋、吸收而減弱。在一定范圍內(nèi)，透射光被吸收的量與免疫復合物的量呈正比，后者又與相應抗原和抗體的量呈函數(shù)關系。抗體量一定，即可從標準曲線獲知抗原的量。由于要求抗原抗體復合物的數(shù)量足夠，并且顆粒要足夠大（35~100nm），本法的測定靈敏度和準確度相對較低。缺點：5醫(yī)學課件ppt免疫散射比濁基本原理：光線通過檢測溶液時，被其中所含的抗原抗體復合物折射而部分偏轉(zhuǎn)，產(chǎn)生散射光。根據(jù)雷利散射公式，在一定條件下，透射光與微粒濃度成正比，散射光與微粒濃度成反比。散射比濁可分為終點和速率散射比濁兩種。光源熒光：高壓汞燈發(fā)射，入射光波長（）355nm，散射夾角（）為90℃激光：氦氖燈，=663nm，=15~35℃碘鎢光：碘鎢燈，=400~500nm，=70℃

6醫(yī)學課件ppt免疫散射比濁儀器得靈、貝克曼等美國THEBIDINGSITE–MINIPEPH德國美創(chuàng)-D-dimer武漢艾爾夫深圳國賽7醫(yī)學課件ppt特定蛋白測定的臨床意義D-二聚體（D-dimer）:生理學背景：纖維蛋白溶解系統(tǒng)——FDP意義：肺栓塞和深V血栓及A血栓的診斷溶栓監(jiān)測8醫(yī)學課件ppt胱抑素C

9醫(yī)學課件ppt特定蛋白測定的臨床意義血液中含有多種功能蛋白，如載體蛋白、免疫球蛋白（抗體）、酶、凝血因子等，其含量變化通常與多種疾病有密切關系。C反應蛋白(CRP)、免疫球蛋白及亞類、補體C3和C4、抗鏈球溶血素O(ASO)、類風濕因子(RF)、前白蛋白(Prealbumin)、白蛋白(Albumin)、微白蛋白(Microalbumin)β2微球蛋白(β2Microglobulin)、α1抗胰蛋白酶(α1AT)、銅藍蛋白(Caeruloplasmin)、結合珠蛋白(Haptoglobin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)、載脂蛋白A（APO-A1）、載脂蛋白B（APO-B）等。10醫(yī)學課件pptC反應蛋白(CRP)-超敏CRP是一種由肝細胞合成的急性時相反應蛋白，是在炎癥和組織壞死疾病的急性期出現(xiàn)于病人血清中的一種糖蛋白，它能與肺炎雙球菌的莢膜成分C-多糖蛋白質(zhì)起反應，故稱為C-反應蛋白。具有激活補體和促進粒細胞及巨噬細胞吞噬作用。正常值為：800-8000μg/L。CRP是急性時相反應的一個極為靈敏的指標，血漿中CRP濃度在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術、腫癌浸潤時迅速顯著地增高，可達正常水平的2000倍。結合臨床病史，有助于隨訪病程。特別在炎癥過程中，CRP可作為風濕病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病等的隨訪指標。細菌和病毒感染鑒別，細菌感染急性期一般均增高，病毒感染多數(shù)不變。國外有研究認為，CRP是引發(fā)心臟病的最強烈的危險因素，其危險程度是血液中過量膽固醇的2倍。CRP含量高的人患高血壓的危險率比膽固醇高的人大1倍。如果炎癥和過高的膽固醇同時出現(xiàn)的話，那么患心臟病和中風的危險率比正常的人要高出9倍。由此可見，CRP含量高和患心臟病呈正相關。此外，最近一項研究發(fā)現(xiàn)，血中高濃度的CRP是結腸癌發(fā)病的危險因素，并認為CRP可能是結腸癌的一個早期標志物。11醫(yī)學課件ppt免疫球蛋白及亞類其濃度在不同年齡段有所差異，在某些疾病情況下，這些指標的濃度將出現(xiàn)升高或降低，從而具有疾病診斷價值。IgG：正常情況下，臍血7.6～17g／L，新生兒7.0～14.8g／L，0.5～6月3～10.0g／L，6月～2歲5～12g／L，2～6歲5～13g／L，6～12歲7～16.5g／L，12～16歲7～15.5g／L，成人6～16g／L。在慢性肝病，亞急性或慢性感染，結締組織疾病，ＩｇＧ骨髓瘤，無癥狀性單克?。桑纾遣〉?，出現(xiàn)增高；在遺傳性或獲得性抗體缺乏癥，混合性免疫缺陷綜合癥，選擇性ＩｇＧ缺乏癥，蛋白丟失性腸病，腎病綜合癥，強直性肌營養(yǎng)不良，免疫抑制劑治療等降低。

12醫(yī)學課件ppt免疫球蛋白及亞類IgA：正常情況下，臍血0～50mg／L，新生兒0～22mg／L，0.5～6月3～820mg／L，7月～2歲140～1080mg／L，2～6歲230～1900mg／L，6～12歲290～2700mg／L，12～16歲810～2320mg／L，成人760～3900mg／L。在慢性肝病，亞急性或慢性感染性疾?。ㄈ缃Y核、真菌感染等），自身免疫性疾?。ㄈ纾樱蹋?、類風濕性關節(jié)炎），囊性纖維化，家族性嗜中性粒細胞減少癥，乳腺癌，ＩｇＡ腎病，ＩｇＡ骨髓瘤等情況下增高；在遺傳性或獲得性抗體缺乏癥，免疫缺陷病，選擇性ＩｇＡ缺乏癥，無γ－球蛋白血癥，蛋白丟失性腸病，燒傷等?？梗桑纾量贵w現(xiàn)象，免疫抑制劑治療，妊娠后期等情況下降低。13醫(yī)學課件ppt免疫球蛋白及亞類IgM：正常情況下，臍血40～240mg／L，新生兒50～300mg／L，0.5～6月150～1090mg／L，6月～2歲430～2390mg／L，2～6歲500～1990mg／L，6～12歲500～2600mg／L，12～16歲450～2400mg／L，成人400～3450mg／L。在胎兒宮內(nèi)感染，新生兒ＴＯＲＣＨ癥群，慢性或亞急性感染，瘧疾，傳染性單核細胞增多癥，支原體肺炎，肝病，結締組織疾病，巨球蛋白血癥，無癥狀性單克隆ＩｇＭ病等情況下增高。在遺傳性或獲得性抗體缺乏癥，混合性免疫缺陷綜合癥，選擇性ＩｇＭ缺乏癥，蛋白丟失性腸病，燒傷，抗Ｉｇ抗體綜合癥（混合性冷球蛋白血癥），免疫抑制劑治療等情況下降低。14醫(yī)學課件pptIgG和IgA亞類

IgG有四種不同的亞類，IgA有兩種不同的亞類。每種亞類具有不同的功能，其含量過低或過高或者缺陷會導致相應的免疫功能低下，造成相應的疾病的發(fā)生。

兒童常見的反復呼吸道感染、經(jīng)常腹瀉、發(fā)育遲緩等癥狀以及經(jīng)常發(fā)生的許多呼吸道疾病如中耳炎、鼻竇炎、肺炎、氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、支氣管擴張以及哮喘等疾病，往往都與IgG或IgA亞類缺陷有關。

15醫(yī)學課件ppt補體C3和C4正常情況下，C3(β1C-球蛋白)800～1550mg／L，C4(β1E-球蛋白)130～370mg／L，血液補體含量與活度在許多病理情況下都會發(fā)生變化。所以，臨床上應動態(tài)觀察補體水平的變化。補體含量下降并不一定代表免疫功能障礙或免疫缺陷，因為在缺血、凝固性壞死和中毒性壞死時，組織能釋放較多的蛋白分解酶，導致補體溶血活度和補體組分的下降。血補體濃度升高：見于各種炎癥性疾病及阻塞性黃疸，急性心肌梗塞，潰瘍性結腸炎，糖尿病，急性痛風，急性和急性甲狀腺炎，急性風濕熱，皮肌炎，多發(fā)性肌炎，混合性結締組織病，結節(jié)性動脈周圍炎等。16醫(yī)學課件ppt抗鏈球溶血素O(ASO)A群溶血性鏈球菌的代謝產(chǎn)物刺激機體產(chǎn)生的抗體。ASO升高見于A群溶血性鏈球菌感染及感染后免疫反應所致的疾病，如：感染性心內(nèi)膜炎、扁桃體炎、風濕熱、鏈球菌感染后急性腎小球腎炎。ASO在溶血性鏈球菌感染后一周開始升高，4～6周達高峰，并持續(xù)數(shù)月，故ASO增高提示曾有溶血性鏈球菌感染，但不一定是近期感染。鏈球菌感染后ASO動態(tài)升高，結合CRP升高及血沉陽性，有利于風濕熱的診斷。高膽固醇血癥、巨球蛋白血癥、多發(fā)行骨髓瘤患者，ASO也可升高。17醫(yī)學課件ppt類風濕因子(RF)RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體，RF可分為IgM、IgG、IgA、IgE四型。類風濕性關節(jié)炎（RA）患者的陽性率為70％～80％，其中尤其以病變廣泛、病情嚴重、病程長、活動期及有關節(jié)外病變者的陽性率高、滴度高并長久存在。除類風濕外，ＲＦ還見于正常人和其他疾病，例如正常人，尤其老年人，陽性率占５％－１０％；各種感染性疾病如乙肝、結核病、亞急性細菌性心內(nèi)膜炎和慢性支氣管炎等；結締組織病如紅斑狼瘡、干燥綜合征、皮肌炎、血管炎、硬皮病、預防接種后以及某些惡性疾病。在這些疾病中，ＲＦ的陽性率可達１０％－７０％。因此，在RA的診斷上，一般認為RF只有參考價值而無特異性診斷價值。18醫(yī)學課件ppt前白蛋白(Prealbumin)為肝內(nèi)合成的糖蛋白，血中半壽期極短，故可作為營養(yǎng)不良的診斷、檢測及肝病的診斷。作為早期肝功能操作指示，比ALT特異，比白蛋白敏感。正常參考值范圍：成年男女為250-----400mg/L；兒童125-----200mg/LPA是負性急性時相蛋白。在炎癥和惡病質(zhì)（如惡性腫瘤等）中，CRP和酸性糖蛋白升高時，PA則可見迅速降低。如果前白蛋白繼續(xù)保持低水平或進一步降低，提示預后不良。在腸道或腎臟的耗蛋白性病變時，血清PA濃度也會相隨降低。何杰金氏及青春發(fā)育期少年，其血清PA濃度升高較顯著。19醫(yī)學課件ppt白蛋白(Albumin)正常值：35-55g/L高：脫水和血液濃縮。降低：白蛋白合成障礙：營養(yǎng)不良、肝臟疾病、慢性消化道疾病。白蛋白消耗或丟失過多：消耗性疾病、惡病質(zhì)、腎病綜合征、急性大出血、嚴重燒傷、腹水形成等。其他：妊娠晚期、遺傳性無白蛋白血癥。

20醫(yī)學課件pptβ2微球蛋白(β2Microglobulin)β2－微球蛋白是體內(nèi)有核細胞產(chǎn)生的一種小分子球蛋白。正常人血液中β2－微球蛋白濃度很低。血液中升高：腎小球濾過功能下降。炎癥或腫瘤。尿液中升高：腎小管受損時，對β2－微球蛋白β2－微球蛋白的重吸收減少，尿液中β2－微球蛋白排出增加，測定時升高。21醫(yī)學課件pptα1抗胰蛋白酶(α1AT)α1-抗胰蛋白酶是一種特異性抑制絲氨酸蛋白水解酶的蛋白酶抑制物。血液中正常值：2~3g/L。缺陷通常有遺傳原因。濃度低于正常水平的30-40%時，肝臟和肺部疾病相關的臨床表現(xiàn)（肝硬化、支氣管擴張、胰腺纖維化）才會明顯出現(xiàn)。兒童通常受到肝臟疾病影響，而成人更多的為肺部疾病。DIC、甲亢和十二指腸潰瘍等，血中α1AT可減少。升高大多數(shù)是由于感染或炎癥的急性期反應引起。這種情況下，α1-抗胰蛋白酶濃度較正常情況3倍升高。在妊娠和口服避孕藥后，α1-抗胰蛋白酶也可升高。22醫(yī)學課件ppt銅藍蛋白(Caeruloplasmin，CER)屬2糖蛋白，是鐵氧化還原酶，又稱鐵氧化酶，由肝臟合成，含6~8銅原子而呈藍色，故名銅藍蛋白。升高者有妊娠、服雌性激素和甲狀腺素者、壞死、傳染（新近感染的一種指標）。惡性腫瘤、矽肺等。CER是塵肺最靈敏的早期診斷指標，早于肺部X線片的改變。降低者有腎病綜合癥，低蛋白血癥（營養(yǎng)不良，胃腸道患者）、急性肝炎、嚴重肝損傷、多發(fā)性硬化等。Wilson氏病（肝竇狀核變性，是一種遺傳性病變）CRE明顯減少。23醫(yī)學課件ppt轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin，Tf)Tf是一種能結合三價鐵的糖蛋白。是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì)，代表了機體鐵的貯量。它負責運輸由消化道吸收的鐵和由紅細胞降介釋放的鐵。正常值：成人為2.20-4.0g/L；新生兒為1.30-2.75g/L降低可見于如下疾患:急性肝炎(開始↗;后↘；)肝病(重癥肝炎>肝硬化>慢性肝>慢遷肝>急肝),腎病綜合癥、蛋白丟失癥、甲狀腺疾患。增高可見于:妊娠、缺鐵性貧血、急肝早期。24醫(yī)學課件ppt結合珠蛋白(Haptoglobin)結合珠蛋白又稱觸珠蛋白，主要由肝臟合成。降低：血管內(nèi)溶血時，結合珠蛋白與紅細胞溶解釋放出來的血紅蛋白相結合，結合珠蛋白/血紅蛋白復合體很快就會從血中清除，從而導致結合珠蛋白濃度下降，嚴重溶血甚至可消耗光結合珠蛋白，各種溶血時血清結合珠蛋白均有降低，以血管內(nèi)溶血時減低最