動物組織學與胚胎學實驗指導(dǎo)畜牧、獸醫(yī)專業(yè)用崔燕主編甘肅農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院基礎(chǔ)獸醫(yī)系動物組織學與胚胎學實驗指導(dǎo)主編崔燕編者崔燕何俊峰王正波課程網(wǎng)址：崔燕2004年6月目錄緒論…………………..1實驗一顯微鏡的使用及細胞的結(jié)構(gòu)………...…….2實驗二上皮組織…………………….…..….………8實驗三結(jié)締組織………….………..11實驗四血液……………….…….....15實驗五肌組織…………………..….18實驗六神經(jīng)組織及神經(jīng)系統(tǒng)…………..……….…21實驗七循環(huán)系統(tǒng)……………..…….25實驗八免疫系統(tǒng)………………..….28實驗九消化系統(tǒng)……………….…..32實驗十呼吸系統(tǒng)…………………...39實驗十一泌尿系統(tǒng)………….……..41實驗十二生殖系統(tǒng)…………….…..44實驗十三被皮系統(tǒng)………………...48*實驗十四石蠟切片的制作.…….………….……..52實驗十五哺乳動物早期胚胎發(fā)育及胎膜、胎盤的結(jié)構(gòu)….……..55*實驗十六顯微攝影方法與步驟…………..…..…58*為開放性選做實驗緒論實驗一顯微鏡的使用及細胞的結(jié)構(gòu)一、目的與要求1.了解生物顯微鏡的構(gòu)造和使用。2.掌握細胞在光鏡下的基本結(jié)構(gòu)。3.認識動物不同組織的細胞，了解由于功能各異，導(dǎo)致細胞的多樣性。4.了解細胞的主要增殖方式—有絲分裂過程中各期的形態(tài)學特征。二、材料LEICA生物顯微鏡、卵巢切片、脊神經(jīng)結(jié)切片、馬蛔蟲卵巢切片。三、內(nèi)容和方法（一）生物顯微鏡的構(gòu)造及使用1.LEICA（徠卡）EME型生物顯微鏡的構(gòu)造包括機械部分和光學部分。機械部分（1）鏡座一般呈蹄鐵狀或方形，有穩(wěn)固和支持鏡體的作用。（2）鏡臂是鏡座與鏡筒的連接部分，呈弓狀，便于手握，有的在基部具一關(guān)節(jié)螺旋，可使鏡簡傾斜，便于觀察。（3）載物臺（鏡臺）方形，上有兩個金屬片夾，供固定標本用，或安裝標本推進器。載物臺中央有一通光孔。（4）標本推進器安放在載物臺上，除固定切片外，還通過轉(zhuǎn)軸連接接兩個調(diào)節(jié)螺旋，這兩個調(diào)節(jié)螺旋可前、后、左、右移動切片。在推進器的縱、橫坐標上標有刻度，以便確定某一結(jié)構(gòu)的方位。（5）物鏡轉(zhuǎn)換器呈圓盤狀，上有3～4個物鏡螺旋口，供物鏡按放大倍數(shù)高低順序嵌入，以便把物鏡根據(jù)觀察需要推到正確的使用位置上。（6）調(diào)節(jié)螺旋分粗調(diào)節(jié)和細調(diào)節(jié)兩個螺旋。粗調(diào)節(jié)螺旋用于低倍鏡調(diào)焦；細凋節(jié)螺旋用于高倍鏡調(diào)焦。兩螺旋結(jié)合使用，使視野清晰。（7）眼間距調(diào)整使兩目鏡與兩眼間距離一致，不同的人兩眼間距離不同，應(yīng)根據(jù)自己的情況加以調(diào)節(jié)。（8）屈光度調(diào)節(jié)光學部分（1）物鏡作第一次放大標本用。安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上，通常有3～4個接物鏡，分別是4×、l0×、40×（50×）和l00×，在每個接物鏡的鏡管上分別標有醒目的紅色、黃色、藍色和白色線圈。4×和l0×稱低倍鏡，40（50）×稱高倍鏡，l00×是油浸鏡，每個接物鏡的鏡管上通常標有主要性能參數(shù)，如40/0.65，160/0.17,40表示放大倍數(shù)，0.65表示鏡口率（數(shù)值孔徑，N·A），160表示機械管長（mm），0.17表示允許蓋玻片厚度（mm）。N·A值越大，透鏡分辨率越高。（2）目鏡亦有5×,10×,15×和20×等。目鏡的作用是將物鏡放大的標本像（實像）再放大成虛像。觀察者可根據(jù)工作需要和標本的實際情況，恰當選擇不同放大倍數(shù)的目鏡。接目鏡內(nèi)常安放一指針，便于指示視野中的某一結(jié)構(gòu)。目鏡可旋轉(zhuǎn)，目鏡底部有相應(yīng)的刻度，以供兩眼度數(shù)不同的人調(diào)節(jié)。（3）聚光器位于載物臺的下方，起著把光線匯聚成光柱（束），增強照明度之用。聚光器的一側(cè)有調(diào)節(jié)螺旋，可以升降，可按需要調(diào)節(jié)亮度。（4）光闌在聚光器下方，由許多金屬葉片組成。由一光圈調(diào)節(jié)桿調(diào)節(jié)光圈大小，以控制聚光鏡的N·A值，以便符合物鏡要求。（5）亮度調(diào)節(jié)鈕用于調(diào)整照明亮度。注意每次用完顯微鏡后應(yīng)將亮度調(diào)節(jié)鈕置于最暗的位置，然后關(guān)閉電源。（6）濾光片在光闌下方有一金屬圈，可安放濾光片，借以改變光源的色調(diào)和強弱，便于觀察和攝影。常用濾光片有三種：①毛玻片—減弱光強度、使光漫射而變的柔和；②藍玻片—白熾燈光照明時用，將黃色燈光校正成白光；③綠玻片—通常適用于黑白照片，顯微攝影用。（7）光源有自然光源（陽光）和人工光源（燈光）之分，本機采用人工光源。2.顯微鏡的使用（1）顯微鏡的提取和放置顯微鏡是精密的光學儀器，從顯微鏡柜中取出時，一定要按操作規(guī)程進行，即一手握住鏡臂，另一手托住鏡座，嚴禁單手握住鏡臂走動。顯微鏡使用前要平放于使用者前方偏左的位置上。用擦鏡紙輕輕擦拭目鏡和物鏡，若有臟物，則用擦鏡紙蘸少許乙醚與酒精混合液擦拭干凈，并用紗布擦拭顯微鏡的機械部分。（2）接通電源，打開電源開關(guān)，調(diào)整光強度，旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，先把低倍接物鏡對準載物臺中央的通光孔（對正光軸），根據(jù)標本染色情況選用不同放大倍率的接物鏡，靈活應(yīng)用亮度調(diào)節(jié)鈕、聚光器和光闌，調(diào)節(jié)至視野完全照明、亮度均勻，光強適宜。（3）觀察切片觀察切片前，先用肉眼分辨切片的正反面，并大致觀察標本的外形、大小和著色。將切片放置于載物臺上，置于持片夾內(nèi)固定，運用推進器將組織塊對準載物臺中央的通光孔。在鏡臂的兩側(cè)有調(diào)節(jié)螺旋，可調(diào)節(jié)鏡筒和物鏡或載物臺的升降。按照低倍鏡、高倍鏡順序觀察切片，低倍鏡觀察的范圍大，便于觀察器官或組織的全貌或整體結(jié)構(gòu)。高倍鏡觀察的范圍小，放大的倍數(shù)高，適用于分辨器官或組織某一局部的微細結(jié)構(gòu)。兩者互相配合，可達到全面了解器官結(jié)構(gòu)的目的。觀察標本時，首先在低倍鏡下對焦至觀察物象最清晰時為止，觀察完切片一般結(jié)構(gòu)后，需要進一步觀察某一部分結(jié)構(gòu)時，應(yīng)將此部位移至視野中央，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察，如圖像不清晰時，只需稍調(diào)節(jié)細調(diào)節(jié)螺旋，即可看到清晰的物象。必須指出，接物鏡放大倍數(shù)愈低，其工作距離（即接物鏡前鏡片與蓋玻片上平面之間的距離）愈長，接物鏡放大倍數(shù)愈高，其工作距離愈短。所以使用高倍物鏡時，應(yīng)避免用粗調(diào)節(jié)器。若必須便用時，則應(yīng)用眼睛從側(cè)方觀看載物臺上升，當蓋玻片至物鏡之間的距離約為1毫米時，然后用眼觀察視野，慢慢轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器，直至看見物象清晰為止。運用粗調(diào)節(jié)器時應(yīng)小心，否則會壓碎切片。觀察切片時姿勢要端正，要做好繪圖或記錄。（4）收藏觀察完畢后，移開物鏡，取下切片，放入切片盒，降下鏡筒。注意每次用完顯微鏡后應(yīng)將亮度調(diào)節(jié)鈕置于最暗的位置，然后關(guān)閉電源，套上塑料套。（二）細胞的結(jié)構(gòu)1.學生觀察切片（1）光鏡下圓形細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以初級卵母細胞為例。A卵巢切片H.E染色肉眼觀察：卵巢縱切面呈橢圓形，著紫紅色。低倍鏡觀察：參考例圖，找到卵巢的邊緣部分，可見其中有許多小而圓、單個或成群存在的原始卵泡。選擇一個典型而清晰的原始卵泡，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：高倍鏡下可見原始卵泡由位于中央的卵母細胞和其外圍呈扁平狀的一層卵泡細胞組成。卵母細胞較大，圓形，中央有一個大而圓、嗜堿性的細胞核，核仁大而明顯、染色質(zhì)呈小塊狀。細胞質(zhì)包繞在核的周圍，弱嗜酸性，呈細顆粒狀或均質(zhì)淡紅色。細胞質(zhì)內(nèi)未見任何細胞器和包含物，這是由于所有的細胞器和包含物都需要經(jīng)過特殊的染色才能顯示。胞膜和核膜在光鏡下不能分辨。切面如不經(jīng)過細胞核或核仁，則細胞內(nèi)無細胞核或缺核仁。核內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)可能不在同一焦距平面上，觀察時必須上下轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)螺旋方可獲得清晰的圖像（圖1）。圖1卵巢切片圖2脊神經(jīng)節(jié)縱切片B高爾基復(fù)合體脊神經(jīng)節(jié)縱切片鍍銀法肉眼觀察：脊神經(jīng)節(jié)縱切面略呈橢圓形，染成棕黃色。低倍鏡觀察：可見脊神經(jīng)節(jié)主要由深色的神經(jīng)纖維束和纖維束之間呈淡黃色的脊神經(jīng)節(jié)細胞構(gòu)成。脊神經(jīng)節(jié)細胞成群分布，切面呈圓形或橢圓形，胞體大小不等。選擇一個細胞質(zhì)中有黑色網(wǎng)狀物的脊神經(jīng)節(jié)細胞，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。高倍鏡下觀察：脊神經(jīng)節(jié)細胞呈淡黃色，中央或偏心處有一個不著色圓形的細胞核。核周圍的胞質(zhì)中散布棕黑色的網(wǎng)狀物即高爾基復(fù)合體。注意胞質(zhì)中的高爾基復(fù)合體數(shù)量不等，形狀各異，有的呈網(wǎng)狀，有的則被切斷而呈粗顆粒狀。切面如不經(jīng)胞核的脊神經(jīng)節(jié)細胞，高爾基復(fù)合體則散布于細胞質(zhì)中（圖2）。（2）動物細胞有絲分裂馬蛔蟲子宮切片鐵蘇木精染色肉眼觀察：切片中有4～6個圓形馬蛔蟲子宮橫切面。低倍鏡觀察：一個馬蛔蟲子宮橫切面，可見子宮壁由高柱狀細胞構(gòu)成，子宮腔內(nèi)有許多圓形或橢圓形的馬蛔蟲卵切面。每個蟲卵的外表面都包著一層較厚的膠質(zhì)膜，其內(nèi)是處于不同分裂階段的卵細胞。卵細胞的胞質(zhì)著淡藍色，參考例圖，找出各分裂期的形態(tài)學特點，找出前期、中期、后期和末期的卵細胞，并依次置于高倍鏡下觀察。高倍鏡下觀察：前期：蟲卵的膠質(zhì)膜內(nèi)只有一個圓形的卵細胞，胞核中的染色質(zhì)已形成發(fā)夾樣的染色體，并在核仁、核膜消失后群集于細胞質(zhì)中。紡錘體明顯，其兩極有深染的中心體。中期：紡錘體移至細胞中部，染色體排列于紡錘體中部的赤道面上。后期：染色體分為均等的兩半，并分別向兩極的中心體集中，中部的胞膜向內(nèi)縮窄而呈啞鈴狀。末期：膠質(zhì)膜內(nèi)的兩個子細胞已完全分開，染色體解聚變成小塊狀的染色質(zhì)，核仁、核膜相繼出現(xiàn)，注意若在一個馬蛔蟲的子宮切片中，未能察見各期分裂相時，可從別的子宮切面中尋找，直至全部察見為止（圖3）。圖3馬蛔蟲子宮內(nèi)卵細胞切片2.教師示教切片A立方形細胞甲狀腺切片H.E染色高倍鏡下觀察甲狀腺濾泡，指針所指的是濾泡壁的濾泡上皮細胞，呈立方形，細胞的長、寬和高幾乎相等，細胞核圓形，位于細胞中央，細胞質(zhì)弱嗜酸性，圍繞在核的周圍（圖4）。B柱狀細胞小腸切片H.E染色高倍鏡下觀察小腸絨毛，可見絨毛表面整齊地排著一層柱狀上皮。指針所指的是一個柱狀細胞，細胞的高度大于寬度，呈柱狀，細胞質(zhì)弱嗜酸性.細胞核橢圓形，位于細胞近基部。由于細胞排列緊密，且細胞膜極薄，細胞界限不清，可從兩核之間劃一分界線，即可顯示細胞的柱狀形態(tài)（圖5）。C星狀有突起細胞（神經(jīng)元）脊髓切片硫堇染色高倍鏡下觀察脊髓灰質(zhì)的腹角，指針所指的是脊髓運動神經(jīng)細胞，細胞呈星狀，從胞體向外周伸出數(shù)個突起，胞體中央有一大而圓的細胞核，核內(nèi)有較大的核仁（圖6）。D梭形的平滑肌細胞平滑肌分離裝片高倍鏡下觀察單個平滑肌細胞，可見平滑肌細胞（肌纖維）呈長梭形，兩端尖細，中部略寬，胞質(zhì)紅染，內(nèi)有一深藍色桿狀或長橢圓形的細胞核（圖7）。圖4甲狀腺切片圖5小腸腸絨毛切片圖6神經(jīng)元圖7平滑肌縱切片3.觀察電鏡幻燈片和圖片結(jié)合功能，了解細胞膜、各種細胞器和細胞核的亞微結(jié)構(gòu)。四、作業(yè)1.繪制一個原始卵泡中的卵母細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)高倍鏡圖。2.繪制一個脊神經(jīng)節(jié)細胞，示高爾基復(fù)合體高倍鏡圖。五、思考題1.粗、細調(diào)節(jié)旋鈕使物鏡上下移動還是使載物臺上下移動？2.若用低倍鏡能看到切片內(nèi)容，但用高倍鏡看不到，應(yīng)考慮那些原因？3.一般而言，細胞哪些部分嗜堿性，哪些部分嗜酸性？為什么？實驗二上皮組織一、目的與要求1.掌握各種類型被覆上皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)。2.了解外分泌腺中幾種腺上皮細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點。3.了解上皮細胞各個面的特化結(jié)構(gòu)。二、材料LEICA生物顯微鏡、小腸橫切片、氣管橫切片、食管橫切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）單層柱狀上皮小腸橫切片H.E染色肉眼觀察：小腸橫切面一般呈圓形或橢圓形，中央的空腔為腸腔，周圍紫紅色的部分為腸壁。低倍鏡觀察：可見腸壁腔面有許多突起的小腸絨毛，選擇一個結(jié)構(gòu)清晰的小腸絨毛進一步詳細觀察。高倍鏡觀察：小腸絨毛表面由單層柱狀上皮構(gòu)成。上皮細胞的胞質(zhì)嗜酸性，細胞核橢圓形，嗜堿性且著色較深，位于細胞近基部。轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)螺旋可見上皮的游離面有一條亮紅色粗線樣的結(jié)構(gòu)即紋狀緣，它是由微絨毛密集而成的。上皮的基底面與結(jié)締組織交界處有著色較深的基膜，在局部的上皮細胞之間，夾有單個呈空泡樣的杯狀細胞，屬于單細胞腺，分泌粘液。杯狀細胞的頂部因含大量粘原顆粒而膨大成杯狀，由于粘原顆粒不著色（或著淡藍色）而呈空泡狀。細胞的基部較小，內(nèi)含不規(guī)則或新月狀的細胞核（圖8）。（2）假復(fù)層柱狀纖毛上皮氣管橫切片H.E染色肉眼觀察：氣管橫切面呈圓形，管腔較大，腔面平整，管壁中有染成藍紫色形如“C”字的透明軟骨。低倍鏡觀察：氣管的粘膜層較薄，被覆的是假復(fù)層柱狀纖毛上皮，選擇其中較清晰的部分換高倍鏡觀察，高倍鏡觀察：由于構(gòu)成上皮的三種細胞高低不一，故上皮中細胞核的位置亦高低不平。大致可排成三層。表層的細胞核呈橢圓形，較大，著色較淡的是高柱狀細胞的核，中間層細胞的核呈較小的橢圓形，著色較深，是梭形細胞的核；最深層的核呈圓形，著色最深，是錐形細胞的核。三種細胞同位于基膜上，實屬單層上皮。注意高柱狀細胞的游離面有纖毛。在有的部位上皮細胞間也見到空泡樣的杯狀細胞。上皮的基底面與結(jié)締組織之間有較明顯的基膜（圖9）。圖8小腸腸絨毛切片圖9氣管橫切片（3）復(fù)層扁平上皮食管橫切片H.E染色肉眼觀察：食管橫切面呈橢圓形，粘膜向管腔突出形成數(shù)個皺襞，故管壁面凹凸不平。低倍鏡觀察：找到緊靠腔面的復(fù)層扁平上皮，可見到上皮厚，層數(shù)多，選擇一清晰部位換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：從腔面向外觀察，上皮細胞可分三個層次：表層由數(shù)層扁平狀的細胞構(gòu)成，胞質(zhì)弱嗜酸性，由于不同程度的角化，細胞核可固縮而濃染變小以至消失，最后呈鱗片狀脫落。中間層細胞大，層數(shù)多，由多邊形或梭形的細胞構(gòu)成，細胞核圓或橢圓，著色較淺，細胞質(zhì)亦弱嗜酸性?；讓蛹毎柿⒎叫位虬鶢?，位于基膜上，排列緊密，胞核橢圓著色深，胞質(zhì)弱嗜堿性。因此，易與基膜下淡紅色的結(jié)締組織相區(qū)別（圖10）。圖10食管橫切片圖11甲狀腺切片2.教師示教切片（1）立方上皮甲狀腺切片H.E染色高倍鏡下甲狀腺濾泡壁的單層立方上皮?？梢娂毎母叨群蛯挾却笾孪嗟?，細胞核圓，位于中央（圖11）。（2）變移上皮（高倍）膀胱H.E染色當膀胱收縮時，膀胱壁的變移上皮增厚，由不同形態(tài)的4～6層細胞組成，表層細胞體積大，核圓呈雙核，該細胞頂端的胞質(zhì)濃縮而呈深紅色，稱殼層，中間層細胞稍小，多為梭形或倒梨形，有一個位于中央的圓形核，胞質(zhì)染色淡而清亮，基底層細胞小，呈不規(guī)則立方形，排列較密，核圓色深。當膀胱充盈擴張時，上皮變薄，數(shù)減少至1～3層，細胞變成扁平形（圖12）。（4）腺上皮頜下腺切片H.E染色在頜下腺中，可以見到由漿液性細胞和粘液性細胞組成的不同形態(tài)的腺泡。A漿液性腺泡呈圓形或橢圓形，由數(shù)個錐形的漿液性細胞圍成，腺細胞基部胞質(zhì)嗜堿性，細胞頂部含大量嗜酸性分泌顆粒而呈紅色，核圓，位于細胞基部。B粘液性腺泡由錐形的粘液性細胞組成，胞質(zhì)內(nèi)含大量的粘原顆粒，著色很淡，呈淡藍色，核被擠向基底部，呈扁平月牙形。C混合性腺泡是在粘液性腺泡的一側(cè)有幾個漿液性的細胞附著，呈半月狀排列，色紅，又稱漿半月（圖13）。圖12膀胱圖13頜下腺切片（5）細胞的特化結(jié)構(gòu)通過觀察電鏡圖片和幻燈片，了解上皮細胞游離面的微絨毛，纖毛，側(cè)面的連接復(fù)合體、縫管連接、鑲嵌連接，基底面的基膜、質(zhì)膜內(nèi)褶、半橋粒等的亞微結(jié)構(gòu)。四、作業(yè)1.繪制部分單層柱狀上皮細胞（含杯狀細胞）的高倍鏡圖。2.繪制高倍鏡下的部分復(fù)層扁平上皮。五、思考題1.總結(jié)各種被覆上皮的結(jié)構(gòu)特點及分布。2.在組織切片上，可以根據(jù)那些形態(tài)結(jié)構(gòu)特征確認上皮組織？3.復(fù)層扁平上皮和變移上皮在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能上有什么不同？實驗三結(jié)締組織一、目的與要求l.掌握固有結(jié)締組織中特別是疏松結(jié)締組織和網(wǎng)狀組織的形態(tài)特點。2.掌握軟骨的一般結(jié)構(gòu)和三種軟骨的特點，并了解骨組織的結(jié)構(gòu)特征。二、材料Leica生物顯微鏡、結(jié)締組織鋪片、淋巴結(jié)切片（鍍銀法）、淋巴結(jié)切片（H.E）、氣管橫切片、骨干橫磨片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）疏松結(jié)締組織鋪片結(jié)締組織鋪片（活體注射臺盼藍）H.E及特殊的彈性纖維染色法復(fù)染肉眼觀察：鋪片染成藍紫色，形態(tài)不規(guī)則且厚薄不均勻。低倍鏡觀察：可見縱橫交錯呈淡紅色的膠原纖維和深紫色單根的彈性纖維，纖維間有許多散在的細胞。選擇一薄而清晰的部位換高倍鏡觀察，高倍鏡觀察：可以辨認以下幾種纖維和兩種細胞成分：A膠原纖維染成淡紅色，數(shù)量多，為長短粗細均不等的纖維束，呈現(xiàn)波浪狀且有分支，相互交織成網(wǎng)。B彈性纖維數(shù)量少，呈深紫色的發(fā)絲狀，長而比較直，斷端有卷曲。C成纖維細胞數(shù)量最多，胞體大，具有多個突起的星形或多角形的細胞。由于胞質(zhì)染色極淺而細胞輪廓不清，只能根據(jù)細胞核較大，橢圓形，有1～2個明顯的核仁等特點來判斷。這些細胞多沿膠原纖維分布。另外還可見到一些橢圓形、較小且深染，核仁不明顯的細胞核，此系功能不活躍的纖維細胞的細胞核。D巨噬細胞又稱組織細胞，一般呈梭形或星形，最大的特征是胞質(zhì)內(nèi)有許多被吞噬的臺盼藍顆粒。細胞核較小，橢圓形且染色較深，見不到核仁，可借助于胞質(zhì)中吞噬顆粒的存在來判斷它的形狀和大?。▓D14）。（2）網(wǎng)狀細胞淋巴結(jié)切片H.E染色肉眼觀察：淋巴結(jié)切面，周圍色深的部分是淋巴結(jié)的皮質(zhì)，中央色較淺的部分是淋巴結(jié)的髓質(zhì)。低倍鏡觀察：找到淋巴結(jié)髓質(zhì)，把細胞分布比較稀疏的部分（髓竇）置高倍鏡下觀察。高倍鏡觀察：可見網(wǎng)狀細胞較大，有數(shù)目不等的胞質(zhì)突起，相鄰網(wǎng)狀細胞的突起可互相連接成網(wǎng)，胞質(zhì)和突起呈弱嗜堿性，胞核圓形或橢圓形，著色淺（圖15）。圖14疏松結(jié)締組織圖15淋巴結(jié)髓質(zhì)（3）網(wǎng)狀纖維淋巴結(jié)切片鍍銀法肉眼觀察：淋巴結(jié)的切面被染成棕黑色。低倍鏡觀察：找到粗細不等交織成網(wǎng)的黑色纖維，換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：可見纖維著色深淺不同，其中較細呈黑色的是網(wǎng)狀纖維，較粗呈棕色或灰黑色的是膠原纖維。因鍍銀時兩種纖維都著色，只是著色深淺程度不同而已（圖16）。（4）透明軟骨氣管橫切片H.E染色肉眼觀察：在氣管壁中有一條染成深藍紫色的“C”形軟骨環(huán)，即透明軟骨。低倍鏡觀察：找到透明軟骨后，即可見到表面有嗜酸性的軟骨膜，中央的基質(zhì)著淺藍紫色，其中散布著許多軟骨細胞。高倍鏡觀察：軟骨膜由致密結(jié)締組織構(gòu)成，可見嗜酸性平行排列的膠原纖維束，束間夾有扁平的成纖維細胞。軟骨細胞位于軟骨陷窩內(nèi)，邊緣的軟骨細胞小，呈扁平形或橢圓形，越靠近中央，細胞體積漸大變成卵圓形或圓形。生活狀態(tài)下軟骨細胞充滿軟骨陷窩，制片后因胞質(zhì)收縮，軟骨細胞與陷窩壁之間出現(xiàn)空隙。由于軟骨細胞分裂增值，一個陷窩內(nèi)?？梢姷?～4個軟骨細胞，稱同源細胞群。軟骨基質(zhì)呈均質(zhì)凝膠狀，埋于其中的膠原纖維不能分辨。在軟骨陷窩周圍的基質(zhì)中含有較多的硫酸軟骨素而顯強嗜堿性，稱軟骨囊（圖17）。圖16網(wǎng)狀纖維圖17透明軟骨（5）密質(zhì)骨骨干橫磨片原色肉眼觀察：骨磨片形狀呈方形，著淡黃色。低倍鏡觀察：由于是磨片，骨中的骨膜、骨細胞、血管及神經(jīng)等已不存在，只留下骨板、骨陷窩及骨小管等結(jié)構(gòu)。從外向內(nèi)可見骨板、分為外、中，內(nèi)三層。外層骨板較厚，內(nèi)層骨板較薄，它們分別圍繞骨表面和骨髓腔作環(huán)行排列，稱外環(huán)骨板和內(nèi)環(huán)骨板。中間層骨板最厚，有許多同心圓排列的骨板系統(tǒng)即哈佛氏系統(tǒng)（骨單位）。哈佛氏系統(tǒng)中央的深色管腔稱哈佛氏管，周圍環(huán)形的骨板是哈氏骨板。位于哈佛氏系統(tǒng)之間的一些呈不規(guī)則形狀的骨板稱骨間板。在上述各種骨板周圍可見到淺色的分界線即粘合線。在骨板面成骨板內(nèi)有許多深染的小窩為骨陷窩，其周圍伸出的細管為骨小管。骨陷窩和骨小管是骨細胞及其突起存在的腔隙。另外還有少數(shù)呈橫行或斜行的管進穿，與內(nèi)、外環(huán)骨板相通，并與哈佛氏管相通，稱伏克曼氏管（圖18）。圖18骨干橫磨片2.教師示教切片（1）脂肪細胞與脂肪組織皮膚切片H.E染色高倍鏡下的脂肪組織呈蜂窩狀，由大量脂肪細胞及少量結(jié)締組織和毛細血管構(gòu)成。脂肪細胞較大，胞質(zhì)內(nèi)充滿脂滴，胞核被擠到邊緣，染色深呈扁平狀，由于脂滴被溶去，故脂肪細胞呈空泡狀（圖19）。（2）致密結(jié)締組織腱切片H.E染色腱是規(guī)則的致密結(jié)締組織。高倍鏡下可見它由平行排列著的粗大淡紅色的膠原纖維束和夾于纖維束之間的腱細胞構(gòu)成。腱細胞核呈細長狀，著色深，胞質(zhì)少而不易看見（圖20）。圖19脂肪細胞圖20腱切片（3）彈性軟骨耳廓切片Weigert染色高倍鏡下彈性軟骨的主要特征是基質(zhì)中含有大盤染成深藍色的彈性纖維交織成網(wǎng)。在軟骨邊緣的彈性纖維稀疏，深部的粗大而致密。軟骨膜及軟骨細胞的結(jié)構(gòu)，基本同透明軟骨（圖21）。（4）纖維軟骨椎間盤切片H.E染色高倍鏡下可見基質(zhì)中有大量呈淡紅色平行排列的膠原纖維束，纖維束之間有較小的單個、兩個或成行排列的軟骨細胞（圖22）。圖21彈性軟骨圖22纖維軟骨四、作業(yè)1.繪圖：高倍鏡下疏松結(jié)締組織結(jié)構(gòu)圖。2.繪圖：高倍鏡下網(wǎng)狀組織的結(jié)構(gòu)圖。五、思考題1.比較上皮組織和結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)特點。2.疏松結(jié)締組織中有哪幾種細胞和纖維。3.三種軟骨的組織結(jié)構(gòu)有什么不同？實驗四血液一、目的與要求掌握血液涂片的制作方法，并觀察血液涂片。二、材料LEICA生物顯微鏡、牛血液、駱駝血液、雞血液、瑞特氏染液、香柏油、吸水紙、擦鏡紙、載玻片、蒸餾水、二甲苯、染色缸。三、內(nèi)容和方法1.血涂片的制作（1）血涂片的染色取一滴新鮮的血液，置于玻片的一端，以左手拿該片的兩端，迅速用右手拿住另一載玻片的一端，在左手載玻片上由前向后接觸血滴，使兩載玻片約成45o角度，輕輕移動，使血滴成一直線，然后由前向后推為一均勻的薄片。涂片在空氣中干燥后置于染色架上，滴加染色液，使涂片被染色液覆蓋，染1min后，再加等量的緩沖液于染色液上，浸染約5~8min。此時涂片表面呈現(xiàn)一層古銅色，用蒸餾水迅速沖洗，見涂片呈粉紅色后，以吸水紙吸干。（2）將干燥好的血涂片加香柏油一滴，置顯微鏡下觀察。肉眼觀察制作良好的血涂片厚薄適宜,血膜分布均勻,呈粉紅色。有些血片涂抹厚薄不均勻,主要是推片不齊,用力不勻及玻片不潔所致。選一厚薄適宜部位置顯微鏡下觀察。2.學生觀察切片（1）家畜血液涂片（圖23）低倍鏡觀察可見到大量圓形而細小的紅細胞。白細胞很少，稀疏地散布于紅細胞之間,具有藍紫色的細胞核。選白細胞較多的部位（一般在血膜邊緣和血膜尾部,因體積大的細胞常在此出現(xiàn)），換油鏡觀察。油鏡下區(qū)別血液中各種有形成分時，可參考第三版教材的彩色圖版1或3，結(jié)合圖5-1各種血細胞模式圖的特點進行觀察。應(yīng)該指出的是,圖版中的細胞形態(tài)都是經(jīng)過典型化了的，實際上,血細胞的形態(tài)不僅因動物而異，而且常因制片技術(shù)和染色偏酸、偏堿均可使細胞形態(tài)或染色反應(yīng)異常。如血膜過厚，細胞重疊而細胞直徑縮小，血膜太薄，白細胞多集中于邊緣。染色結(jié)果偏酸，則紅細胞和嗜酸性顆粒偏紅，白細胞的細胞核呈極淺藍色或不著色。染色結(jié)果偏堿,所有的紅、白細胞呈灰藍色，顆粒深暗等。故觀察時不能生搬硬套，一定要根據(jù)具體情況，靈活掌握，對比分析，才能做出正確的判斷。A紅細胞數(shù)量最多，體積小而均勻分布，呈粉紅色的圓盤狀，邊緣厚，著色較深，中央薄，著色較淺，無核無細胞器，胞質(zhì)內(nèi)充滿血紅蛋白。C嗜酸粒細胞比中性粒細胞略大，數(shù)量少，胞核常分兩葉，著紫藍色。主要特點是胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大的嗜酸性特殊顆粒，色鮮紅或桔紅。馬的嗜酸性顆粒粗大，晶瑩透亮，呈圓形或橢圓形，其他家畜的嗜酸性顆粒較小。D嗜堿粒細胞數(shù)量很少，體積與嗜酸粒細胞相近或略小。主要特征是胞質(zhì)中含有大小不等，形狀不一的嗜堿性特殊顆粒，顆粒著藍紫色，常蓋于胞核上。胞核呈"S"形或雙葉狀，著淺紫紅色。此種白細胞由于數(shù)量極少，,必須多觀察一些視野方能察見。E淋巴細胞有大、中、小三種類型，其中小淋巴細胞最多，血膜上很易見到，體積與紅細胞相近或略大。核大而圓，幾乎占據(jù)整個細胞，核一側(cè)常見凹陷，染色質(zhì)呈致密塊狀，著深紫藍色。胞質(zhì)極少，僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線狀天藍色或淡藍色的胞質(zhì),有時甚至完全不見。中淋巴細胞體積與中性粒細胞相近,形態(tài)與小淋巴細胞相似，但胞質(zhì)較多呈薄層圍繞在核的周圍。在核的凹陷處胞質(zhì)較多且透亮，偶見少量紫紅色的嗜天青顆粒。大淋巴細胞在正常血液中不常見到，體積與單核細胞相近或略小，胞核圓形著深紫藍色，胞質(zhì)更多，呈天藍色。圍繞核周圍的胞質(zhì)呈一淡染區(qū)。F單核細胞是白細胞中體積最大的一種，胞核呈腎形、馬蹄形或不規(guī)則形，著色淺，染色質(zhì)呈細網(wǎng)狀。細胞質(zhì)豐富，弱嗜堿性，呈灰藍色,偶見細小紫紅色的嗜天青顆粒。G血小板體積很小，常三五成群散布于紅細胞之間，形態(tài)有圓形、橢圓形、星形或多角形的藍紫色小體，,中央著色深的是血小板的顆粒區(qū)，周邊著色淺的是透明區(qū)。（2）家禽血液涂片（圖24）雞血的有形成分與家畜比較有以下不同：A紅細胞呈橢圓形,中央有一深染的橢圓形細胞核，不見核仁，胞質(zhì)呈均質(zhì)的淡紅色。B中性粒細胞，又稱異嗜性粒細胞,圓形,具有2—5個分葉核,胞質(zhì)內(nèi)嗜酸性的特殊顆粒呈桿狀或紡錘形。C凝血細胞，又稱血栓細胞，相當于家畜的血小板。凝血細胞具有典型細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，比紅細胞略小，兩端鈍圓，核呈橢圓形、染色質(zhì)致密。胞質(zhì)微嗜堿性，內(nèi)有1~2個紫紅色的嗜天青顆粒。其它血細胞基本上與其它家畜的血細胞相似。圖23牛血涂片圖24雞血涂片3.教師示范切片駱駝血涂片高倍鏡下觀察駱駝血液中的有形成分,見紅細胞呈橢圓形,無細胞核。其余血細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與一般家畜血液的有形成分相似（圖25）。圖25駱駝血涂片四、作業(yè)1.寫出血涂片制作的操作步驟。2.繪制自制血涂片中的各種血細胞。五、思考題1.比較哺乳動物和禽類紅細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點。2.比較哺乳動物和禽類各種白細胞的結(jié)構(gòu)特點。實驗五肌組織一、目的與要求以骨骼肌為重點，掌握三種肌纖維的形態(tài)和結(jié)構(gòu)特點，要求在顯微鏡下準確識別它們縱橫切面的不同。二、材料LEICA生物顯微鏡、骨骼肌切片、心肌切片、平滑肌切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）骨骼肌縱、橫切鐵蘇木素（或H.E）染色低倍鏡觀察：骨骼肌的縱切面上有許多平行排列著的圓柱狀肌纖維，具有明暗相間的橫紋，邊緣有很多細胞核。橫切面上可見肌纖維集聚成束，被切成許多圓形或多邊形斷面。無論縱切面或橫切面的肌纖維周圍都有疏松結(jié)締組織包裹（肌內(nèi)膜和肌束膜），結(jié)締組織內(nèi)含豐富的血管。高倍鏡觀察：在縱切面找出一條橫紋清晰的肌纖維，在肌纖維膜下分布著一些橢圓形的細胞核，可以見到核仁。肌纖維內(nèi)含有順長軸平行排列的肌原纖維，很多肌原纖維上的明帶（I帶）和暗帶（A帶）相間排列，就形成了橫紋。仔細觀察在暗帶中有一淡染的窄帶稱H帶，H帶中央還有一細的M線。在一般光鏡下，M線不能見到。在明帶中央有一條隱約可見的Z線（間線），相鄰兩條Z線之間的一段肌原纖維，即為一個肌節(jié)。肌纖維的橫切面上可見肌原纖維被切成點狀或短桿狀（斜切），有的均勻分布，有的則被肌漿分別成一個個小區(qū)。在橫切面上還可以見到少量位于周邊的圓形細胞核（圖26，27）。圖26骨骼肌縱切圖27骨骼肌橫切（2）心肌心肌切片H.E染色低倍鏡觀察：由于心肌纖維呈螺旋狀排列，故在切面中可同時觀察到心肌纖維的縱切、斜切或橫切面，各心肌纖維之間由結(jié)締組織相連系并含有豐富的血管。高倍鏡觀察：先觀察縱切的心肌纖維，細胞呈短柱狀，平行排列，并以較細而短的分支與鄰近的肌纖維相吻合，互連成網(wǎng)。胞核橢圓形，位于細胞中央，注意核周圍由于肌漿較多而呈淡染區(qū)。心肌纖維亦可見明暗相間的橫紋，但不如骨骼肌明顯。心肌橫切面呈大小不等的圓形或橢圓形切面，心肌無骨骼肌那樣結(jié)構(gòu)典型的肌原纖維，中間有一圓形胞核，核周圍清亮，但很多切面未能切到核（圖28、29）。（3）平滑肌小腸橫切片H.E染色肉眼觀察：切片呈紅色，本實驗觀察的是小腸的肌層，呈更深的紅色，而且比較厚。低倍鏡觀察：從小腸的腔面向外觀察，依次是粘膜層，粘膜下層（淡紅色）、肌層（深紅色）和漿膜。肌層發(fā)達，由平滑肌纖維呈內(nèi)環(huán)行、外縱行排列，在此切而上內(nèi)環(huán)肌呈縱切，外縱肌呈橫切。高倍鏡觀察：縱切的平滑肌纖維呈細長紡錘形，彼此嵌合緊密排列，胞核為長橢圓形，位于肌纖維中央，若見到扭曲的細胞核，是由于平滑肌收縮所引起。胞質(zhì)嗜酸性，呈均質(zhì)狀，不具橫紋。橫切的肌纖維呈大小不等的圓形切面，較大的切面上可見到圓形的細胞核，偏離肌纖維中部的切面均較小而無核（圖30）。圖28心肌縱切片圖29心肌橫切片2.教師示教切片（1）心肌閏盤鐵蘇木素或鉀礬—蘇木紅染色高倍鏡下可清楚見到肌纖維的分支和橫紋，在兩個心肌纖維的連接處，藍色呈階梯狀的閏盤（圖31）。圖30平滑?。?）觀察肌節(jié)的超微結(jié)構(gòu)從圖片或幻燈片中了解I帶、A帶、H帶、M線、Z線形成及構(gòu)造。四、作業(yè)1.繪制骨骼肌、心肌、平滑肌纖維的縱、橫切面高倍鏡圖。五、思考題1.試述肌組織的基本結(jié)構(gòu)特點。2.如何在光鏡下分辨三種肌組織。實驗六神經(jīng)組織及神經(jīng)系統(tǒng)一、目的與要求掌握神經(jīng)元、脊髓、小腦和脊神經(jīng)節(jié)的構(gòu)造。二、材料LEICA生物顯微鏡、脊髓橫切片、小腦切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）多極神經(jīng)元脊髓橫切片硫堇（或H.E）染色肉眼觀察：標本略呈橢圓形，中間著色較深呈蝶翼狀的是脊髓灰質(zhì)，灰質(zhì)周圍呈淡藍色的是白質(zhì)。低倍鏡觀察：先觀察脊髓全貌，找到脊髓中央管，把灰質(zhì)置視野中心，可見在灰質(zhì)中有成群或單個呈藍色、大小不等、形態(tài)各異的多極神經(jīng)元，位于腹角的神經(jīng)元多而大。選擇一個大而突起多，胞核清晰的神經(jīng)元換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：神經(jīng)元呈星狀，由胞體（核周體）和胞突構(gòu)成。A胞體中央有一個大而圓，著色很淡的細胞核，核與核仁均很清晰，染色質(zhì)呈細顆粒狀。胞質(zhì)中分布著許多深藍色、大小不等的塊狀物即尼氏體。在H.E的切片上尼氏體不甚清楚，呈淡紫紅色。胞體內(nèi)還有許多細絲狀的神經(jīng)原纖維，用鍍銀法方可顯示，見示教片。B.胞突有樹突和軸突兩種，突起的數(shù)目與切面有關(guān)。胞突的起始部較粗，含有尼氏體的是樹突，數(shù)目較多。不含尼氏體的是軸突，起始部稱軸丘。軸突只有一個，因切面關(guān)系不易呈現(xiàn)，需多觀察幾個神經(jīng)元，方能見到。胞突內(nèi)均有神經(jīng)原纖維伸入。在神經(jīng)元的周圍還可見到許多被切斷的神經(jīng)纖維和一些神經(jīng)膠質(zhì)細胞的細胞核。主要是星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的核（圖32）。（2）腰部脊髓橫切面H.E染色肉眼觀察：脊髓橫切面呈橢圓形，中間著色較深呈蝶翼狀的是脊髓灰質(zhì)，周圍著色淺的是白質(zhì)。低倍鏡觀察：移動標本觀察脊髓全貌，外表面包有薄層結(jié)締組織即脊軟膜。脊髓背側(cè)有背正中隔，腹側(cè)有一深溝為腹正中溝。脊髓中央是灰質(zhì)，其尖細的角為背角（背灰柱）。鈍而寬大的角為腹角（腹灰柱），在胸腰部脊髓，背角與腹角之間還有外側(cè)角。脊髓中央的小孔是脊髓中央管，由室管膜上皮圍成。高倍鏡觀察：在脊髓灰質(zhì)可見到背角有胞體較小的多極神經(jīng)元，即中間神經(jīng)元。腹角有許多胞體較大的多極運動神經(jīng)元。外側(cè)角有植物性神經(jīng)的節(jié)前神經(jīng)元的胞體。在神經(jīng)元之間還有神經(jīng)膠質(zhì)細胞和無髓神經(jīng)纖維。白質(zhì)位于灰質(zhì)周圍，主要由粗細不等的有髓神經(jīng)纖維橫切面和散布于其間的神經(jīng)膠質(zhì)細胞構(gòu)成。由于H.E染色不能顯示神經(jīng)膠質(zhì)細胞的形態(tài)，僅見到形態(tài)和大小各異的細胞核，如核較大，圓形或橢圓形的星狀細胞核。核較小呈圓形的少突膠質(zhì)細胞核。核小而濃染，卵圓形或三角形的小膠質(zhì)細胞核等（圖33）。圖32多極神經(jīng)元圖33腰部脊髓橫切面（3）小腦小腦切片H.E染色肉眼觀察：小腦表面許多平行的淺溝把小腦分隔成許多小腦葉，每一個小腦葉表層紫紅色部分是皮質(zhì)，深部淡紅色為髓質(zhì)（白質(zhì)）。低倍鏡觀察：分清面的腦軟膜、皮質(zhì)和髓質(zhì)。轉(zhuǎn)高倍鏡觀察皮質(zhì)和髓質(zhì)。A小腦皮質(zhì)依次觀察下列各層：a分子層位于腦軟膜的深面，很厚、著淡紅色，內(nèi)有大量淡紅色的無髓神經(jīng)纖維縱切面（主要是浦金野氏細胞的樹突）、少量神經(jīng)細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的核。b浦金野氏細胞（節(jié)細胞）層由一層胞體呈梨狀，大而不連續(xù)的浦金野氏細胞構(gòu)成，其胞體頂端的主樹突伸入分子層，軸突穿過顆粒層進入髓質(zhì)。c顆粒層緊靠浦金野氏細胞層，較厚，由大量胞體較小的顆粒細胞和少量胞體較大的高爾基II型細胞構(gòu)成。由于細胞小且排列緊密，細胞輪廓不易分辨，僅見大量圓形或橢圓形嗜堿性的細胞核，似密集的顆粒而得名。細胞核之間深紅色的塊狀物，即小腦小球。B小腦髓質(zhì)（白質(zhì)）在顆粒層深面，由許多縱行排列的有髓神經(jīng)纖維和神經(jīng)膠質(zhì)細胞構(gòu)成。有髓神纖維的髓鞘已在制片過程中被脂溶劑溶去，僅見到神經(jīng)纖維中央著紅色的軸索和其兩側(cè)的神經(jīng)角蛋白網(wǎng)及神經(jīng)膜（圖34）。（4）脊神經(jīng)節(jié)脊神經(jīng)節(jié)切片H.E染色肉眼觀察和低倍鏡觀察：脊神經(jīng)節(jié)縱切面呈橢圓形，著紫紅色，外表面有致密結(jié)締組織被膜，并伸入節(jié)內(nèi)分布于神經(jīng)節(jié)細胞和神經(jīng)纖維之間。節(jié)內(nèi)的假單極神經(jīng)元成群分布于神經(jīng)纖維束之間。選擇結(jié)構(gòu)清晰的神經(jīng)細胞群，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：脊神經(jīng)節(jié)細胞的胞體切面多呈圓形，大小不等，胞質(zhì)嗜酸性，尼氏體呈細顆粒狀，胞核大而圓。偶見胞體一側(cè)有一個淡紅色的胞突起始部。圍繞胞體外周的一層扁平或立方形細胞即衛(wèi)星細胞。在細胞群之間可見到大量神經(jīng)纖維的縱切面，其中主要是有髓神經(jīng)纖維，無髓神經(jīng)纖維很少（圖35）。圖34小腦皮質(zhì)切片圖35脊神經(jīng)節(jié)橫切片2.教師示教切片（1）環(huán)層小體腸系膜環(huán)層小體裝片環(huán)層小體是一種大型感受器，在低倍鏡下就可見到一體積大呈圓形或橢圓形的小體。小體中央有一根直的、呈深藍色的無髓神經(jīng)纖維終末部分，外包著十多層由扁平的結(jié)締組織細胞（注意其扁小而深染的細胞核）排列成同心圓的被囊（圖36）。（2）運動終板肋間肌壓片氯化金法高倍鏡下觀察肋間肌壓片，可見一條較粗、呈深黑色的運動神經(jīng)纖維，分布在許多條淡紅色的骨骼肌纖維上。神經(jīng)纖維到達骨骼肌纖維前，分出一些爪狀的分支，每一分支的終末形成扣狀膨大，貼附在骨骼肌表面的凹槽內(nèi)，即為運動終板。骨骼肌纖維染成淡紅色，有不甚明顯的橫紋（圖37）圖36環(huán)層小體圖37運動終板（3）大腦大腦切片鍍銀法低倍鏡觀察大腦結(jié)構(gòu)，表面是皮質(zhì)，深層是髓質(zhì)，皮質(zhì)的神經(jīng)細胞經(jīng)鍍銀法處理后，胞體及其突起都呈黑色。由表及里分辨皮質(zhì)的分子層、外顆粒層、外錐體細胞層、內(nèi)顆粒層、大錐體細胞層和多形細胞層等。多形細胞層的深面是大腦的髓質(zhì)（白質(zhì)），主要由有髓神經(jīng)纖維構(gòu)成（圖38）。refSHAPE圖38大腦大錐體細胞層四、作業(yè)1.繪制一個高倍鏡下的多極神經(jīng)元。2.繪制一側(cè)脊髓橫切面低倍鏡圖。3.繪制部分小腦葉皮質(zhì)低倍鏡圖。五、思考題1.簡述尼氏體的分布位置。2.簡述有髓神經(jīng)纖維的結(jié)構(gòu)。3.簡述小腦皮質(zhì)的組織結(jié)構(gòu)。實驗七循環(huán)系統(tǒng)一、目的與要求1.掌握中動脈和心臟的基本結(jié)構(gòu)，以及大動脈和毛細血管的結(jié)構(gòu)特點。2.顯微鏡下正確區(qū)分小動脈和小靜脈。二、材料LEICA生物顯微鏡、中動脈和中靜脈的橫切片、心臟切片、三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）中動脈和中靜脈中動、靜脈橫切H.E染色肉眼觀察：動脈橫切面呈圓形，靜脈管壁塌陷，呈扁圓形或不規(guī)則形。低倍鏡觀察；動脈管壁厚、管腔小而圓；靜脈管壁薄、管腔大，常塌陷而呈不規(guī)則形。分別置于視野中央觀察。A中動脈從腔面向外觀察，先分辨出內(nèi)膜、中膜和外膜，再換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：a內(nèi)膜為管璧最內(nèi)層，很薄。注意由于內(nèi)彈性膜的收縮，致使內(nèi)膜在切面上呈波紋狀。內(nèi)膜有三層結(jié)構(gòu)：eq\o\ac(○,1)內(nèi)皮為襯于腔面的單層扁平上皮，其扁而深染的胞核向腔面突出。eq\o\ac(○,2)內(nèi)皮下層為內(nèi)皮深面與內(nèi)彈性膜之間的結(jié)締組織，有的血管較明顯，有的則不明顯。eq\o\ac(○,3)內(nèi)彈性膜切面上很明顯，呈亮紅色的波紋狀，它是內(nèi)膜和中膜的分界線。b中膜很厚，其中含有大量環(huán)行排列、著色較深的平滑肌纖維。平滑肌纖維間呈淡紅色的是彈性纖維和膠原纖維。有的中動脈在中膜與外膜交界處有由彈性纖維構(gòu)成的外彈性膜。c外膜較厚，由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)可見到自養(yǎng)血管。外膜的結(jié)締組織直接移行為血管間的結(jié)締組織（圖39）。B中靜脈高倍鏡下與中動脈比較有下列待點：eq\o\ac(○,1)內(nèi)膜不發(fā)達，僅由內(nèi)皮和內(nèi)皮下層構(gòu)成，缺內(nèi)彈性膜。eq\o\ac(○,2)中膜較薄，平滑肌層數(shù)少。eq\o\ac(○,3)外膜較中膜厚，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)有散在的縱行平滑肌束和自養(yǎng)血管（圖40）。圖39中動脈圖40中靜脈（2）心臟心臟切片H.E染色肉眼觀察：心壁很厚，染成較深的紅色。切面中不平整的一面是心內(nèi)膜，其深面為心肌膜和心外膜。低倍鏡觀察：移動標本，從腔面向外觀察心壁。緊靠腔面呈淡紅色的部分為心內(nèi)膜，其深面很厚，著深紅色部分是心肌膜。最外面是心外膜，內(nèi)可見到空泡樣的脂肪細胞。高倍鏡下逐層觀察下列結(jié)構(gòu)：A心內(nèi)膜心壁最內(nèi)層，又分三層。a內(nèi)皮為襯于腔面的單層扁平上皮。b內(nèi)皮下層位于內(nèi)皮深面較致密的結(jié)締組織.c心內(nèi)膜下層為心內(nèi)膜最深層的疏松結(jié)締組織。它與內(nèi)皮下層無明顯分界線。層內(nèi)可見到單個或成群（束）的浦金野氏纖維的切面，它比心肌纖維粗大，橫切面呈圓形或橢圓形，胞質(zhì)嗜酸性，肌纖維極少，胞核較小（偶見雙核），圓形、位置常偏心（圖41）。B.心肌膜構(gòu)成心壁厚度的大部分，由心肌纖維構(gòu)成。因心肌纖維呈螺旋狀排列，故切片中可見縱、橫、斜等各種切面。在縱切面上可見到較細的橫紋，但閏盤在H.E染色法不能顯示。胞核橢圓形，位于肌纖維的中央。肌纖維分支并吻合成網(wǎng)。許多心肌纖維被疏松結(jié)締組織分成大小不等的纖維束，束間的結(jié)締組織與心肌纖維間的結(jié)締組織相連，內(nèi)見有豐富的血管（圖41）。C心外膜心壁最外層、很薄、由疏松結(jié)締組織和外表面的間皮構(gòu)成。結(jié)締組織中可見到成群的脂肪細胞和血管等（圖42）。圖41心內(nèi)膜和心肌膜圖42心外膜2.教師示教切片（1）大動脈大動脈橫切片H.E染色高倍鏡下觀察大動脈管壁結(jié)構(gòu)，與中動脈比較其特點如下：A內(nèi)膜內(nèi)皮深面的內(nèi)皮下層較厚，內(nèi)彈性膜與中膜的彈性膜相連，分界不明顯。B中膜強厚，內(nèi)有數(shù)十層粗大、亮紅色呈波紋狀排列的彈性膜，彈性膜之向夾有平滑肌纖維、彈性纖維和膠原纖維。C外膜比內(nèi)膜稍厚，主要由縱行膠原纖維、彈性纖維和少量平滑肌纖維、神經(jīng)和血管等構(gòu)成（圖43）。（2）小動脈、小靜脈及毛細血管器官的疏松結(jié)締組織H.E染色高倍鏡下觀察器官的疏松結(jié)締組織，內(nèi)有許多伴行的小動脈和小靜脈切面。指針指的是小動脈，其特點是：管壁厚、著色較深，管腔小、通常無血細胞或僅有少量血細胞。內(nèi)皮外面圍繞著數(shù)層環(huán)行的平滑肌。平滑肌外面的結(jié)締組織與血管間的結(jié)締組織相連。小靜脈位于小動脈一旁，管腔大且不規(guī)則，腔內(nèi)常有血細胞，管璧薄、著色淺，內(nèi)皮細胞外面僅見到薄層結(jié)締組織。毛細血管位于結(jié)締組織纖維之間，切面多，管腔小，腔內(nèi)常有1～2個紅細胞或缺紅細胞，管壁僅由內(nèi)皮細胞圈成，卵圓形著色很深的細胞核向腔面突出（圖44）。圖43大動脈圖44小動脈、小靜脈四、作業(yè)1.繪制部分中動脈橫切面低倍鏡圖。2.繪制一小動脈和小靜脈高倍鏡圖。五、思考題1.光鏡下如何區(qū)別動脈和靜脈？2.比較中動脈與中靜脈管壁組織結(jié)構(gòu)的特點。3.比較小動脈與小靜脈組織結(jié)構(gòu)特點。實驗八免疫系統(tǒng)一、目的與要求1.掌握淋巴結(jié)和脾臟的組織構(gòu)造及其在免疫過程中的形態(tài)變化，并了解豬淋巴結(jié)的結(jié)構(gòu)特點。2.了解胸腺和禽類腔上囊的結(jié)構(gòu)特點和B,T淋巴細胞的分化、發(fā)育過程。二、材料LEICA生物顯微鏡、淋巴結(jié)切片、脾臟切片、胸腺切片，腔上囊橫切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）淋巴結(jié)淋巴結(jié)縱切片H.E染色肉眼觀察：淋巴結(jié)正中切面呈豆狀，一側(cè)凹陷處為淋巴門，表面淡紅色的是被膜，其深面著藍紫色的部分是淋巴結(jié)皮質(zhì)，中央淡紅色部分是髓質(zhì)。低倍鏡觀察：依次分辨被膜、小梁、皮質(zhì)和髓質(zhì)。高倍鏡觀察下列結(jié)構(gòu)：A被膜和小梁包在淋巴結(jié)外表面的被膜，著淡紅色，由致密結(jié)締組織和少量平滑肌構(gòu)成。被膜上偶見輸入淋巴管的切面，門部結(jié)締組織較多并有輸出淋巴管和血管等切面。結(jié)締組織從多處伸人皮質(zhì)和髓質(zhì)，穿行于淋巴組織之間形成小梁，其切面呈淡紅色，粗細不等，形態(tài)各異，有的小梁上可見到血管即小梁動脈和小梁靜脈。B皮質(zhì)位于被膜深面著深紫藍色的致密淋巴組織。有的淋巴組織密集成圓形或橢圓形的淋巴小結(jié)，小結(jié)中央的淡染區(qū)為生發(fā)中心（反應(yīng)中心），還有明區(qū)，暗區(qū)和帽等結(jié)構(gòu)，主要由B淋巴細胞和巨噬細胞等構(gòu)成。副皮質(zhì)區(qū)位于淋巴小結(jié)之間或皮質(zhì)深層的彌散淋巴組織，主要由T淋巴細胞和巨噬細胞等構(gòu)成。有的淋巴結(jié)的皮質(zhì)未見到淋巴小結(jié)或生發(fā)中心，或副皮質(zhì)區(qū)甚薄，可能是由于切面的關(guān)系，成淋巴結(jié)不處于免疫反應(yīng)之故。移動標本至被膜深面成小梁周圍，可見到一些疏網(wǎng)狀的間隙，即為皮質(zhì)淋巴竇中的被膜下竇和小梁旁竇。竇壁由內(nèi)皮圍成，竇腔中有網(wǎng)狀細胞、巨噬細胞和淋巴細胞等（圖45）。C髓質(zhì)位于副皮質(zhì)區(qū)深部，即淋巴結(jié)中央的疏松部分，包括呈紫藍色的髓索和其周圍疏網(wǎng)狀的髓質(zhì)淋巴竇，髓索是索條狀的淋巴組織，彼此吻合成網(wǎng)，主要由B淋巴細胞、漿細胞、網(wǎng)狀細胞和巨噬細胞等構(gòu)成。髓質(zhì)淋巴竇是髓索之間的疏網(wǎng)狀區(qū)域，竇腔較大。結(jié)構(gòu)與皮質(zhì)淋巴竇相同且相通，是濾過淋巴液的場所（圖46）。圖45淋巴結(jié)皮質(zhì)圖46淋巴結(jié)髓質(zhì)（2）脾臟脾臟切片H.E染色注意與淋巴結(jié)作比較，分辨它們結(jié)構(gòu)的異同。肉眼觀察：脾切面呈三角形或長橢圓形，其中呈紫紅色部分為紅髓，散布于紅髓間藍色的塊狀結(jié)構(gòu)即白髓。低倍鏡觀察：區(qū)分脾臟的被膜、小梁、白髓和紅髓等結(jié)構(gòu)。高倍鏡觀察下結(jié)構(gòu)：A被膜與小梁脾的表面覆蓋著漿膜，可見到間皮的細胞核整齊地排列于表面。漿膜下是致密結(jié)締組織和大量平滑肌纖維構(gòu)成的被膜，結(jié)締組織和平滑肌纖維深入實質(zhì)，穿行于實質(zhì)之間形成粗大的肌性小梁切面。B實質(zhì)包括白髓和紅髓。a白髓為略呈圓形、著藍紫色的致密淋巴組織團塊，散布于紅髓中，由動脈周圍淋巴鞘和脾小體構(gòu)成。動脈周圍淋巴鞘在切面上是圍繞著1～2個小動脈（中央動脈）周圈的一團淋巴組織（T淋巴細胞）。脾小體是位于淋巴鞘一側(cè)的淋巴小結(jié)，也有生發(fā)中心、明區(qū)、暗區(qū)和帽等結(jié)構(gòu)。b紅髓位于白髓和小梁之間，由脾索、脾竇和邊緣區(qū)構(gòu)成。脾索在切面上呈索條狀，由網(wǎng)狀組織、各種血細胞和巨噬細胞等構(gòu)成。脾竇則位于脾索之間，可有縱，橫、斜等切面，竇壁的長桿狀內(nèi)皮細胞（里細胞）含核部分較厚，并突向管腔。竇腔大小不等，內(nèi)含有各種血細胞。通常由于動物放血后，脾竇收縮變窄，以致在切面上難以分辨脾索和脾竇。邊緣區(qū)位于白髓和紅髓交接處，切面中可見該處淋巴組織較疏松，但有較多的紅細胞和巨噬細胞（圖47）。（3）胸腺胸腺切片H.E染色肉眼觀察：胸腺切片著較深的紫藍色，由淡紅色的結(jié)締組織分隔成小葉。低倍鏡觀察：分辨出表面的被膜，伸入實質(zhì)中的小葉間隔，胸腺小葉內(nèi)的皮質(zhì)和髓質(zhì)等結(jié)構(gòu)。高倍鏡觀察下列結(jié)構(gòu)：A被膜位于胸腺表面，由薄層結(jié)締組織構(gòu)成，結(jié)締組織伸入實質(zhì)形成小葉間隔，把實質(zhì)分隔成不完全的小葉。切面中常見相鄰小葉的髓質(zhì)融合在一起。B胸腺小葉由周邊著深紫藍色的皮質(zhì)和中央著淡紅色的髓質(zhì)構(gòu)成。皮質(zhì)主要由淋巴細胞、上皮網(wǎng)狀細胞和巨噬細胞等構(gòu)成。淋巴細胞又稱胸腺細胞，多而密集。皮質(zhì)淺層為大、中淋巴細胞，深層為小淋巴細胞。上皮網(wǎng)狀細胞少，細胞較大，且有多個突起，胞核圓形位于中央。上皮網(wǎng)狀細胞彼此以突起連接成網(wǎng)狀支架，并圍繞在毛細血管的周圍形成血—胸腺屏障。由于淋巴細胞密集，往往不易看見上皮網(wǎng)狀細胞的全貌。巨噬細胞數(shù)量較多，分散在淋巴細胞之間。髓質(zhì)淋巴細胞少而疏松，上皮網(wǎng)狀細胞多，成群或散在于淋巴細胞之間。髓質(zhì)?？梢姷揭坏蕉鄠€略呈圓形、由二到多個上皮網(wǎng)狀細胞圈成的淡紅色結(jié)構(gòu)即胸腺小體，小體外層的上皮網(wǎng)狀細胞略見紫藍色的細胞核，中央部的上皮網(wǎng)狀細胞的胞核模糊不清或消失，胞質(zhì)呈均質(zhì)嗜酸性，常融合在一起（圖48）。圖47脾臟切片圖48胸腺切片2.教師示教切片（1）豬淋巴結(jié)H.E染色低倍鏡觀察豬淋巴結(jié)，與牛淋巴結(jié)比較，有下列特點：A含有淋巴小結(jié)及彌散淋巴組織的區(qū)城，位于淋巴結(jié)的中央，而含髓索和髓竇的區(qū)域則位于淋巴結(jié)的周圍。B髓質(zhì)的淋巴組織中淋巴竇數(shù)量少而狹窄，故髓索不明顯。C被膜上多處見到輸入或輸出淋巴管切面（圖49）。（2）禽類腔上囊（法氏囊）腔上囊橫切片H.E染色低倍鏡下觀察腔上囊，見囊壁由粘膜、肌層和外膜構(gòu)成。粘膜層較厚，肌層和外膜較薄，粘膜層向囊腔形成二個縱行大皺襞。高倍鏡觀察下列結(jié)構(gòu)：A粘膜上皮為假復(fù)層柱狀上皮。B固有層疏松結(jié)締組織中有許多圓形、橢圓形或不規(guī)則多邊形的淋巴小結(jié)樣結(jié)構(gòu)，稱淋巴濾泡或史丹紐氏濾泡。每個濾泡由外周著色深的皮質(zhì)和中央著色淺的髓質(zhì)構(gòu)成。皮質(zhì)由網(wǎng)狀細胞和網(wǎng)狀纖維構(gòu)成支架，其間填充著大量中、小淋巴細胞和巨噬細胞。髓質(zhì)由上皮網(wǎng)狀細胞構(gòu)成疏松的支架，內(nèi)有大、中型淋巴細胞和巨噬細胞。在皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處可見到一層略呈立方形或柱狀的未分化上皮細胞（圖50）。圖49豬淋巴結(jié)圖50腔上囊橫切片四、作業(yè)1.繪制部分牛（羊）淋巴結(jié)低倍鏡圖。2.繪制部分脾臟低倍鏡圖。五、思考題1.如何在光鏡下辨別淋巴結(jié)、脾臟和胸腺的組織切片。2.比較中樞淋巴器官和周圍淋巴器官的結(jié)構(gòu)特點。實驗九消化系統(tǒng)一、目的與要求1.掌握消化管各段的結(jié)構(gòu)特點。2.掌握肝臟和胰腺的結(jié)構(gòu)特點。二、材料LEICA生物顯微鏡、食管橫切片、胃底部切片、空腸切片、肝臟切片、胰腺切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）食管食管橫切H.E染色以食管為例，從內(nèi)向外，辨認消化管的四層結(jié)構(gòu)。肉眼觀察：食管橫切面呈橢圓形，中央為管腔，周圍紫紅色部分為管壁。低倍鏡觀察：找到食管腔，可見粘膜向管腔突入，形成多個縱行皺襞。從腔面向外觀察管壁，分辨粘膜層、粘膜下層、肌層和外膜（觀察時注意各層的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性和厚度）。高倍鏡下逐層觀察各層的微細結(jié)構(gòu)：A粘膜層位于管壁內(nèi)層，襯于腔面的上皮為復(fù)層扁平上皮，很厚。注意有的部位表層細胞無核，發(fā)生輕度角化。上皮深面的疏松結(jié)締組織是固有層，其淺層組織與上皮層互相交錯，粘膜肌層較薄，位于固有層的深面，由一些縱行的平滑肌纖維素構(gòu)成。B粘膜下層為疏松結(jié)締組織，內(nèi)有較大的血管和成群的混合腺即食管腺。偶見腺的導(dǎo)管穿過固有層，開口于粘膜表面。C肌層很厚，著深紫紅色。狗食管肌層由橫紋肌組成，分內(nèi)、外兩層，內(nèi)層厚為環(huán)肌層，外層薄為縱肌層。兩肌層間可見副交感神經(jīng)系的神經(jīng)節(jié)（腸肌叢），內(nèi)有副交感神經(jīng)節(jié)后神經(jīng)元的胞體。D外膜管壁最外層，食管頸段位結(jié)締組織構(gòu)成的纖維膜，胸、腹段位漿膜。（圖51）。圖51食管橫切（2）胃胃底部切片H.E染色肉眼觀察：標本著深紫紅色一面為粘膜層，著色略淺的一面為肌層與漿膜。低倍鏡觀察：從粘膜面向外分辨胃壁四層結(jié)構(gòu)，注意粘膜層中的胃小凹和胃底腺的形態(tài)結(jié)構(gòu)，肌層與食管對照要注意肌纖維的種類和排列。轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察胃底部各層的微細構(gòu)造。高倍鏡下觀察：A粘膜層很厚，著紫紅色.a粘膜上皮為單層柱狀上皮，上皮細胞呈高柱狀，細胞頂部由于粘原顆粒不著色而呈空泡狀。細胞核橢圓形，位于細胞基部，粘膜表面有許多深、淺不一的凹陷即胃小凹，是胃底腺的開口（圖52）。b固有層位于上皮深面，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成。由于固有層中存在著大量平行排列的胃底腺，因此，結(jié)締組織僅見于相鄰兩條胃底腺間（呈縱行排列）。結(jié)締組織內(nèi)還可見到胞核呈長桿狀的單個平滑肌纖維，淋巴細胞和漿細胞等。胃底腺為單管狀腺或分支管狀腺。腺分頸、體和底三部分，頸部與胃小凹通連，底部靠近粘膜肌層。由于切面不同，胃底腺被切成長管狀、橢圓形和團形等形態(tài)。胃底腺的腺細胞，在H.E染色的標本上僅能見到主細胞、壁細胞和頸粘液細胞。內(nèi)分泌細胞用鍍銀法方可顯示。eq\o\ac(○,1)主細胞（泌酶細胞）數(shù)目較多，可見于腺體部和底部，細胞呈柱狀，胞核圓形，位于細胞基部，胞質(zhì)弱嗜堿性。eq\o\ac(○,2)壁細胞（泌酸細胞）比主細胞大，胞體呈錐狀或多面形，胞核圓而深染，胞質(zhì)強嗜酸性，單個或成群鑲嵌于主細胞之間，在腺頸部和體部較多。eq\o\ac(○,3)頸粘液細胞多數(shù)動物僅見于腺頸部，但在豬和狗的腺底部和體部亦存在，細胞形狀呈柱狀或不規(guī)則形，胞核扁平或不規(guī)則形，位于細胞基部，胞質(zhì)弱嗜堿性。c粘膜肌層位于胃底腺底部的深面，很薄，由內(nèi)環(huán)行和外縱行的平滑肌構(gòu)成。B粘膜下層為疏松結(jié)締組織，著淡紅色，內(nèi)有較大的血管。C肌層很厚，大致呈內(nèi)斜、中環(huán)和外縱三層，有的部位僅見內(nèi)環(huán)行、外縱行兩層。D漿膜由一薄層疏松結(jié)締組織和外表面的間皮構(gòu)成（圖53）。圖52胃小凹圖53胃底部（3）小腸空腸切片H.E染色肉眼觀察：可見粘膜形成數(shù)個皺襞突向管腔。皺襞上有許多小突起即絨毛。低倍鏡觀察：移動標本，分辨腸壁的四層結(jié)構(gòu)。觀察時注意粘膜層的皺襞、絨毛和腸腺等結(jié)構(gòu)。高倍鏡下重點觀察粘膜層的微細結(jié)構(gòu)：A粘膜層小腸的粘膜層形成兩種重要結(jié)構(gòu)，一種是腸絨毛，另一種是腸腺。a絨毛為粘膜上皮與固有層結(jié)締組織伸向腸腔的指狀突起。由于切面關(guān)系，絨毛在切片上長短不一，被切成縱、橫和斜等各種切面。絨毛表面是單層柱狀上皮，其間夾雜有杯狀細胞，上皮的游離面有紋狀緣。絨毛的軸芯是固有層的結(jié)締組織，其中央有一縱走的乳糜管，管壁由內(nèi)皮圍成。b腸腺位于固有層內(nèi)，由粘膜上皮下陷形成的單管狀腺。腸腺亦被切成縱、橫，斜等各種切面，腺上皮細胞在H.E染色的標本上只能分辨出柱狀細胞和杯狀細胞，用鍍銀法還能見到內(nèi)分泌細胞。有的動物如馬、牛、羊在腺體底部還可見到胞體內(nèi)充滿紅色顆粒的潘氏細胞。腸腺開口于相鄰兩根絨毛底部之間的腸腔。腸腺之間的結(jié)締組織中有淋巴組織，有時還見有孤立淋巴小結(jié)、漿細胞、白細胞等。粘膜肌層位于固有層深面，很薄，由內(nèi)環(huán)、外縱的平滑肌構(gòu)成。B粘膜下層為疏松結(jié)締組織，內(nèi)有較大的血管和淋巴管等。注意一些部位的粘膜下層與粘膜層一起突向腸腔，形成皺襞。C肌層為內(nèi)環(huán)、外縱的平滑肌。內(nèi)環(huán)肌層厚，外縱肌層薄。兩肌層間有腸肌叢，內(nèi)有較大的副交感神經(jīng)的節(jié)后神經(jīng)元。D漿膜很薄，由少量結(jié)締組織和間皮構(gòu)成（圖54）。圖54空腸切片（4）肝臟肝臟切片H.E染色肉眼觀察：肝臟切片著紫紅色，內(nèi)有許多呈多角形的肝小葉。低倍鏡觀察：肝臟表面有漿膜，其深面有致密結(jié)締組織的纖維囊。結(jié)締組織深入肝實質(zhì)將其分隔成許多多角形的肝小葉。豬肝小葉間結(jié)締組織多，肝小葉清晰，牛、羊、兔等小葉間結(jié)締組織少，肝小葉分界不明顯。相鄰幾個肝小葉之間結(jié)締組織較多，為門管區(qū)或匯管區(qū)，內(nèi)有小葉間動脈、小葉間靜脈和小葉間膽管。高倍鏡觀察肝小葉和門管區(qū)的微細結(jié)構(gòu)：A肝小葉a中央靜脈位于肝小葉的中央，少數(shù)肝小葉由于切面關(guān)系，未顯示出中央靜脈。中央靜脈主要由內(nèi)皮圍成，注意內(nèi)皮細胞扁平而深染的細胞核突向管腔。中央靜脈與肝血竇相通連。管腔中可見到血細胞或缺如。b肝細胞索在橫切面上由單行肝細胞連接而成，以中央靜脈為中心，向周圍呈放射狀排列。肝細胞索分支可彼此連成不規(guī)則的網(wǎng)。肝細胞較大，呈多邊形，細胞質(zhì)呈細顆粒狀，胞核大而圓，著色淺，偶見雙核。c肝血竇（竇狀隙）位于相鄰兩條肝細胞索之間，或肝細胞索圍成的網(wǎng)孔內(nèi)。竇腔大小不等，竇壁由內(nèi)皮圍成，內(nèi)皮細胞緊貼肝細胞。竇腔中可見到體積較大的星狀細胞即枯否氏細胞（Kupffer’sCell），及少量血細胞（圖55）。膽小管和竇周間隙（狄氏間隙），H.E染色法的標本不易分辨。B門管區(qū)移動標本至門管區(qū)，分辨小葉間動脈、小葉間靜脈和小葉間膽管。a小葉間動脈為小動脈結(jié)構(gòu)，管腔小、管壁厚，內(nèi)皮外可見到多層環(huán)行的平滑肌纖維.b小葉間靜脈為小靜脈結(jié)構(gòu)，管腔大、管壁薄，內(nèi)皮外有少量結(jié)締組織，腔內(nèi)常有血細胞。c小葉間膽管由立方或柱狀上皮圍成，細胞核圓形或橢圓形，由于胞核大、著色深，故呈藍色外觀。有時在這些管道的近旁，還見到管壁比小葉間靜脈更薄的小葉間淋巴管（圖56）。圖55肝小葉圖56門管區(qū)（5）胰腺胰腺切片重鉻酸鉀固定H.E染色肉眼觀察：胰腺切片著深紫紅色。低倍鏡觀察：分辨構(gòu)成胰腺的兩個主要組成部分。著深紫紅色部分為胰腺外分泌部的腺泡，分散在腺泡之間，呈淡紅色、大小不等的細胞團，為胰臟的內(nèi)分泌部，即胰島。高倍鏡下分別觀察二者的微細結(jié)構(gòu)：A外分泌部腺泡呈泡狀、管狀。每個腺泡由數(shù)個錐狀的腺細胞圍成，中央有狹窄的腺腔。腺細胞經(jīng)重鉻酸鉀固定，H.E染色后，細胞頂部的酶原顆粒著鮮紅色，而細胞基部由于含有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)而著紫藍色。注意觀察腺泡腔壁存在橢圓形或圓形的泡心細胞核。在腺泡周圍的結(jié)締組織中，還可見到由單層扁平上皮和立方上皮圍成的閏管和小葉內(nèi)導(dǎo)管。B內(nèi)分泌部由內(nèi)分泌細胞團構(gòu)成胰島。在H.E染色的標本上，只見其由大小和形狀不一的細胞核和胞質(zhì)弱嗜酸性的細胞團構(gòu)成，無法辨認胰島的細胞類型。胰島細胞排列成不規(guī)則的索，索間見有毛細血管（圖57、58）。圖57、58胰腺切片2.教師示教切片（1）十二指腸十二指腸切片H.E染色低倍鏡下觀察十二指腸，并與空腸比較，其特點是在粘膜下層的疏松結(jié)締組織中，存在許多粘膜下腺即十二指腸腺，為混合腺，內(nèi)有漿液性腺泡、亦有粘液性腺泡，偶見粘膜下腺的導(dǎo)管穿過粘膜肌層開口于腸腺底部。其余各層結(jié)構(gòu)與空腸相似（圖59）。（2）回腸回腸切片H.E染色低倍鏡下觀察回腸，與空腸比較，其主要特點是在粘膜下層的疏松結(jié)締組織中，存在有許多被切成圓形或橢圓形的集合淋巴小結(jié)，有的小結(jié)亦見到生發(fā)中心等結(jié)構(gòu)。有的小結(jié)圓錐狀的頂部穿過粘膜肌層伸至固有層中，其余每層結(jié)構(gòu)與空腸結(jié)構(gòu)相似（圖60）。圖59十二指腸切片圖60回腸切片（3）大腸結(jié)腸切片H.E染色高倍鏡下觀察結(jié)腸粘膜層，與空腸粘膜層比較有下列特點：①粘膜層缺絨毛。②粘膜上皮的單層柱狀上皮間夾雜有大量杯狀細胞。③腸腺較寬而直，腺上皮間亦見到大量杯狀細胞。其余各層與空腸相似（圖61）。（4）反芻獸前胃牛瘤胃壁切片H.E染色低倍鏡下觀察瘤胃壁結(jié)構(gòu)，除粘膜層外，其余各層結(jié)構(gòu)與單室胃結(jié)構(gòu)相似。瘤胃粘膜上皮為復(fù)層扁平上皮，淺層細胞角質(zhì)化，固有層結(jié)締組織中缺腺體。固有層淺層的結(jié)締組織與上皮向胃腔突出，形成葉狀或圓狀乳頭，粘膜層缺乏粘膜肌層（圖62）。圖61結(jié)腸切片圖62牛瘤胃壁切片（5）膽小管肝切片鍍銀法高倍鏡下觀察經(jīng)鍍銀法染色的肝小葉，可見肝細胞不著色，膽小管呈黑色，粗細一致，以中央靜脈為中心，向小葉周圍呈放射狀排列，并彼此吻合成網(wǎng)（圖63）。（6）肝臟示星狀細胞肝切片中性紅活體染色—蘇木精復(fù)染高倍鏡下觀察肝血竇中的星狀細胞，可見細胞較大，形狀不規(guī)則，（7）唾液腺頜下腺切片H.E染色高倍鏡下觀察頜下腺，其結(jié)構(gòu)特點是：A腺泡屬以粘液性腺泡為主的混合腺，即有大量粘液性腺泡和漿液性半月型的混合腺泡。粘液性腺泡，腺細胞呈錐形或立方形，胞質(zhì)弱嗜堿性呈空泡狀。胞核呈扁圓形、深染，位于腺細胞底部?；旌闲韵倥荩丛谡骋盒韵倥莸囊粋?cè)，附著有幾個漿液性腺細胞，呈漿液性半月。偶見單個漿液性腺泡。B導(dǎo)管分泌管位于腺泡間，由單層柱狀上皮圍成，前連閏管后接小葉間導(dǎo)管。細胞質(zhì)嗜酸性，著深紅色，細胞基部有縱紋（圖64）。圖63膽小管200×鍍銀法圖64頜下腺切片四、作業(yè)1.繪制部分空腸結(jié)構(gòu)低倍鏡圖。2.繪制一條完整的胃底腺及其周圍結(jié)締組織圖。3.繪制一個豬肝小葉及門管區(qū)低倍鏡圖。4.繪制一胰島及周圍部分外分泌腺泡低倍鏡圖。五、思考題1.如何在光鏡下分辨胃、小腸各段及大腸。2.從胃底腺的細胞類型和結(jié)構(gòu)特點討論各種細胞的功能。3.從小腸的光鏡和電鏡的結(jié)構(gòu)特點討論小腸的消化吸收功能。4.肝臟組織結(jié)構(gòu)和其功能的關(guān)系。實驗十呼吸系統(tǒng)一、目的及要求掌握氣管、肺的構(gòu)造。二、材料LEICA生物顯微鏡、氣管切片、肺臟切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）氣管氣管切片H.E染色肉眼觀察：標本呈圓環(huán)形，中央是管腔，周圍紫紅色部分是管壁。低倍鏡觀察：從腔面向外觀察氣管壁，分辨粘膜層、粘膜下層和外膜。高倍鏡觀察：A粘膜層a上皮位于腔面著深紫紅色部分，為假復(fù)層柱狀纖毛上皮，上皮間夾有許多杯狀細胞。注意上皮的腔面有較長的纖毛，其基底面有著色較深的基膜。b固有層：位于上皮深面的結(jié)締組織，較薄，纖維排列較致密。內(nèi)含許多粗大、亮紅色、呈縱行排列的彈性纖維，并在固有層深面形成彈性纖維膜。粘膜肌層缺如。B粘膜下層為固有層深面的疏松結(jié)締組織，它與固有層間無明顯分界線。粘膜下層有成群的混合腺即氣管腺和較大的血管，偶見氣管腺的導(dǎo)管通過固有層開口于上皮表面。C外膜由淡紫紅色或淡藍色的透明軟骨環(huán)和其周圍的致密結(jié)締組織構(gòu)成。在軟骨環(huán)缺口處內(nèi)側(cè)可見到深紫紅色的平滑肌纖維束（圖65）。（2）肺肺切片HE染色肉眼觀察：可見標本呈紫紅色，內(nèi)有大量空泡和小管切面，空泡即肺泡，小管即肺內(nèi)支氣管及其分支。低倍鏡觀察：肺表面有漿膜和富含彈性纖維（切面上呈亮紅色）的致密結(jié)締組織，它伸入肺內(nèi)把肺實質(zhì)分隔成許多肺小葉，在肺小葉內(nèi)可見到管腔大小不等的導(dǎo)管切面和大量囊泡狀的肺泡。先根據(jù)管腔的大小，管壁結(jié)構(gòu)的厚薄，區(qū)分出肺內(nèi)支氣管、細支氣管、終末細支氣管等各級導(dǎo)管和呼吸部。高倍鏡觀察：A肺內(nèi)支氣管管腔較大，管壁較厚，腔面較平，皺襞少。粘膜上皮為假復(fù)層柱狀纖毛上皮（注意腔面有纖毛）。上皮間夾有較多杯狀細胞，固有膜深面有分散的平滑肌纖維束。粘膜下層有較多的混合腺。外膜的結(jié)締組織中有較多且較大的透明軟骨片。注意隨著支氣管的分支，管腔由大變小，管壁結(jié)構(gòu)由厚變薄，腺體由多變少和軟骨片由大塊變小塊，最后消失。肺動脈位于支氣管一側(cè)，隨支氣管分支而分支，直達肺泡。B細支氣管管腔較小，管壁較薄。粘膜層向管腔突出形成多個皺襞，故腔面呈星狀。粘膜上皮為假復(fù)層柱狀纖毛上皮或單層柱狀纖毛上皮，杯狀細胞極少或缺如。固有膜很薄，其深面的平滑肌纖維束增多，形成完整的環(huán)肌層。腺體和軟骨均消失（圖66）。C終末細支氣管管腔更小，管壁更薄。腔面有少量皺襞或缺如，上皮為單層柱狀上皮或立方上皮，缺纖毛及杯狀細胞，平滑肌層薄而完整（圖67）。D呼吸性細支氣管直接與肺泡管通連，但管壁不完整，見有少量肺泡開口，由單層柱狀或立方上皮構(gòu)成。上皮外面有少量結(jié)締組織和很薄的平滑肌層（圖68）。E肺泡管肺泡管無完整的管壁，系由多個肺泡圈成，在相鄰肺泡開口處，立方上皮或扁平上皮外面有較多的結(jié)締組織和少量的平滑肌，故呈結(jié)節(jié)狀膨大，可視為肺泡管的管壁。F肺泡囊是多個肺泡共同的通道，是個部位名稱。G肺泡在切面上為大、小不等，呈空泡狀的薄壁囊泡，一面開口于肺泡管、肺泡囊或呼吸性細支氣管，另一側(cè)與肺泡膈或與鄰近肺泡接觸。肺泡壁由扁平細胞和立方細胞（分泌細胞）圍成，相鄰兩肺泡間有極少量結(jié)締組織和毛細血管構(gòu)成的肺泡膈，這些結(jié)構(gòu)在切面上不易分辨。在肺泡腔內(nèi)偶見細胞形狀不規(guī)則，胞質(zhì)中含有黑色灰塵顆粒的塵細胞（圖68）。圖65氣管切片圖66細支氣管圖67終末細支氣管圖68呼吸性細支氣管四、作業(yè)1.繪制氣管的高倍鏡圖。2.繪制一肺呼吸部的高倍鏡圖。五、思考題1.如何在光鏡下辨別小支氣管、細支氣管、呼吸性細支氣管、肺泡管和肺泡囊。2.肺內(nèi)各級支氣管壁的變化規(guī)律。實驗十一泌尿系統(tǒng)一、目的及要求掌握腎臟和膀胱的構(gòu)造。二、材料LEICA生物顯微鏡、腎臟切片、膀胱切片。三、內(nèi)容和方法1.學生觀察切片（1）腎腎縱切片H.E染色肉眼觀察：標本呈深紫紅色的一側(cè)為皮質(zhì)，淡紅色一側(cè)為髓質(zhì)。低倍鏡下分辨出表面的被膜，被膜深層的皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)很厚，染色紅，內(nèi)有許多圓球狀的腎小體和其周圍的腎小管切面。髓質(zhì)在皮質(zhì)的深層，染色淡紅，其中只有袢部的腎小管和集合管。高倍鏡觀察：A被膜為腎表面的致密結(jié)締組織膜，內(nèi)夾雜有少量平滑肌纖維。B皮質(zhì)位于被膜的深面，主要由腎小體和大量染色深淺不同的腎小管切面構(gòu)成。a腎小體呈圓球狀，分散存在于腎小管切面之間。腎小體中央是血管球，由一團毛細血管和分布其間的球內(nèi)系膜細胞及包在毛細血管外面的腎小囊內(nèi)層，即足細胞等構(gòu)成。血管球的外面是空隙狀的腎小囊的囊腔（活體時充滿原尿）和腎小囊外層的單層扁平上皮（圖68）。b近曲小管（近端小管曲部）為腎小管起始部，偶見它與腎小囊外層的單層扁平上皮相連續(xù)。近曲小管位于腎小體附近，由于管徑較粗，長且彎曲，故切面較多。管壁上皮呈錐狀或立方形，細胞界限不清，胞質(zhì)強嗜酸性，上皮細胞的腔面有一層紅色的線狀物，即刷狀緣，管腔小而不規(guī)則、細胞核圓形或橢圓形，位于細胞基底部，注意，動物死后，刷狀緣即分解，若（圖69）c遠曲小管（遠端小管曲部）位于腎小體附近，切面比近曲小管少。管腔比近曲小管大，管壁上皮為立方上皮，細胞界限較清楚，胞核圓形，位于細胞中央，胞質(zhì)弱嗜酸性（圖69）。d致密斑為腎小球旁器的一種。位于腎小體入球小動脈和出球小動脈之間、遠曲小管近腎小體一側(cè)的管壁上。致密斑的上皮細胞呈高柱狀，胞核橢圓形，深染且密集，形成突向管腔的盆狀區(qū)（圖70）。C髓質(zhì)位于皮質(zhì)深層，與皮質(zhì)沒有明顯的分界線（有時在皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處見有兩個較大的血管，即弓形動脈和靜脈）。髓質(zhì)主要由大量縱行的腎小管（包括近端小管直部、髓袢的細段和粗段）和集合管構(gòu)成。（圖71、72）a近端小管直部見于髓質(zhì)淺部（即皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處），其管壁上皮的結(jié)構(gòu)和染色性與近曲小管相似，只是上皮細胞略低，胞質(zhì)各種結(jié)構(gòu)不如曲部發(fā)達。b髓袢細段（降支）髓質(zhì)深部特別多，由單層扁平上皮圍成，管徑細，管腔小，管壁薄，胞核扁橢圓形，并向腔面突出，注意區(qū)別髓袢細段和毛細血管的結(jié)構(gòu)：①毛細血管內(nèi)皮比細段的單層扁平上皮更薄，故胞核向腔面突出更明顯。②毛細血管的管腔內(nèi)常有血細胞，而細段則缺血細胞。c髓袢粗段（升支）常見于髓質(zhì)淺部，管徑較粗，由立方上皮圍成。細胞質(zhì)嗜酸性，但著色比近端小管直部淺，胞核圓形，位于細胞中央或近腔面，集合管很長，從皮質(zhì)延伸到髓質(zhì)，上皮細胞由立方形轉(zhuǎn)變?yōu)楦咧鶢睿|(zhì)清晰，界限清楚。細胞核圓形，位于細胞基部。集合管在腎乳頭開口處變?yōu)槿轭^管。其上皮為變移上皮。此外，在皮質(zhì)和髓質(zhì)的腎小管之間還見到少量間質(zhì)（結(jié)締組織和血管）。圖68、69、70腎皮質(zhì)400×H.E圖71、72腎髓質(zhì)400×H.E（2）膀胱膀胱收縮期切片H.E染色低倍鏡下由內(nèi)到外現(xiàn)察膀胱壁結(jié)構(gòu)，分辨出粘膜層、肌層和漿膜（或外膜），再轉(zhuǎn)換高倍鏡逐層觀察其微細結(jié)構(gòu)：A粘膜層管壁最內(nèi)層a上皮為變移上皮，細胞4～7層不等，表層細胞大，胞核圓形，位于中央，偶見雙核。b固