創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天華南師范大年夜學(xué)實驗陳述之老陽三干創(chuàng)作創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天液相色譜剖析混淆樣品中的苯和甲苯一、實驗?zāi)康?、掌握高效液相色譜定性和定量剖析的原理及方法；2、了解高效液相色譜的結(jié)構(gòu)、原理及把持技術(shù).二、實驗原理高效液相色譜由儲液器,泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部份構(gòu)成,儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱內(nèi),因為樣品溶液中的各組分在兩相中擁有分歧的分派系數(shù),在兩相中作相對運動,經(jīng)過頻頻頻頻的吸附—解吸的分派過程,各組分在挪動速度上發(fā)生較大年夜的分歧,被分別成單個組分挨次從柱內(nèi)流出,經(jīng)過檢測器時,樣品濃度被變換成電信號傳遞到記錄儀.三、主要儀器和試劑主要儀器：島津液相色譜儀(LC-10AT)[配有紫外檢測器,PhenomenexODS柱]；10μL微量注射器創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天試劑：苯標準溶液：10.0μL/mL；甲苯標準溶液：10.0μL/mL；苯、甲苯混淆標準溶液：1；甲醇：80%；苯和甲苯混淆待測溶液；四、實驗步伐1、標準溶液的配制系列用100μL的微量注射器分別量取10μL、20μL、50μL、100μL的苯和甲苯的混淆標準溶液（10.0μL/mL）,再分別加入90μL、80μL、50μL、0μL甲醇將其稀釋,作為待測液,其濃度分別為1μL/mL、2μL/mL、5μL/mL、10μL/mL2、色譜條件優(yōu)化①按把持規(guī)程開機,并調(diào)好色譜條件,使儀器處于工作狀態(tài).控制流動相流速為甲醇：0.8mL/min、水：0.2mL/min；柱溫30℃；檢測波長254nm；察看記錄保存時間,經(jīng)過軟件剖析兩峰分別成效.②改變色譜條件,控制流動相流速為甲醇：0.95mL/min、水：0.05mL/min；柱溫30℃；檢測波長254nm；察看記錄保存時間,經(jīng)過軟件剖析兩峰分別成效.創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天③經(jīng)過察看兩種色譜條件下的峰分別成效,選擇最正確的色譜條件.若還不可以抵達最正確的分別成效,能夠再設(shè)定分歧的色譜條件,而后依據(jù)峰分別成效,選擇最正確的色譜條件.3、苯、甲苯定性剖析在最正確條件下,待基線走穩(wěn)后,用10μL微量注射器分別進樣5μL苯和甲苯混淆待測溶液,5μL苯標準溶液（10.0μL/mL）和5μL甲苯標準溶液（10.0μL/mL）(微量注射器用甲醇潤洗3～5遍),察看并記錄色譜圖上顯示的保存時間,確立苯和甲苯的峰.4、苯、甲苯定量剖析最正確條件下,待基線走穩(wěn)后,用10μL微量注射器分別進樣1.0μL/mL、5μL.察看并記錄各色譜圖上的保存時間和峰面積.繪制苯和甲苯混淆標準溶液峰面積與相應(yīng)濃度的標準曲線.5、苯和甲苯混淆待測溶液剖析最正確條件下,待基線走穩(wěn)后,用10μL微量注射器進樣苯和甲苯混淆待測液5μL,察看并記錄各色譜圖上的保存時間和峰面積.依據(jù)峰面積在工作曲線上查出苯和甲苯待測液的濃度,并計算試樣中苯和甲苯的含量.五、實驗數(shù)據(jù)及剖析創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天高效液相色譜數(shù)據(jù)陳述一、色譜條件優(yōu)化μV(x100,000)2.0色譜1.595%1.080%0.50.0min二、定性剖析苯三、定分

樣品苯甲苯量保存時間析苯、甲苯混淆標準溶液濃度分別為：1ul/ml,2ul/ml,5ul/ml,10ul/ml.10ul/ml苯甲苯面積(x1,000,000)面積(x1,000,000)2.03.01.52.51ul/ml2.01.01.50.51.00.50.0濃度0.07.50.0濃度濃度峰面積濃度峰面積1ul/ml2126851ul/ml3877102ul/ml4292912ul/ml7479835ul/ml9545375ul/ml153389210ul/ml190534310ul/ml2928373Y=aX+bY=aX+b創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天四、未知樣品濃度未知樣品苯甲苯濃度2濃度12.9ul/ml六、實驗議論①因為實驗中待測溶液的組分只有苯和甲苯兩種物質(zhì),組分比力簡單,只需在實驗過程中,嚴格控制且定量進樣,就能采用把持、計算簡易的標準曲線法得出正確的實驗結(jié)果,因此采用標準曲線法.若采用歸一化法或內(nèi)標法,固然能獲取正確更高的實驗結(jié)果,但因為實驗把持及計算均較為復(fù)雜,實驗及數(shù)據(jù)處理的時間長,效率相對不高,故實驗中采用標準曲線法作為定量的方法.②最正確色譜條件的選擇是本實驗正確度的重點.若苯與甲苯的峰分別成效過小,苯與甲苯的峰未能完整分別,一定影響其保存時間和峰面積的計算,是實驗正確度減小,數(shù)據(jù)偏差加大年夜；若苯與甲苯的峰分別成效過好,固然能將苯與甲苯的峰完整分別,實驗正確度好,但是耗資的實驗時間較長,效率不好.因此,應(yīng)選擇適合的色譜條件.創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時間：二零二一年六月三十天③為了提升標準曲線的擬合度,能夠重復(fù)進樣頻頻,