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實驗十四物理和化學因素對微生物的影響第1頁/共13頁目的要求了解常用化學藥劑對微生物的作用原理及其實驗方法;了解不同物理因素對微生物生長的影響及其實驗方法。第2頁/共13頁基本原理
溫度是影響微生物生長與存活的重要因素之一。當微生物處于最適生長溫度時,其生長速度最快;不適宜的溫度可以導致細菌形態(tài)和代謝的改變或使微生物的蛋白質(zhì)凝固變性而導致菌體死亡。根據(jù)微生物對氧的要求不同可將微生物分為專性好氧菌、兼性厭氧菌、微好氧菌、耐氧菌和專性厭氧菌五種類型。
紫外線對微生物生長的影響隨照射劑量、時間和照射距離的變化而不同,劑量大、時間長、距離短時易殺死微生物;劑量小、時間短、距離長時就會有少量個體殘存下來,某些個體會發(fā)生變異。第3頁/共13頁1好氧菌;2厭氧菌;3兼性厭氧/耐氧菌;4微好氧菌
O2對微生物的影響第4頁/共13頁2、紫外線對微生物的影響第5頁/共13頁基本原理
常用化學消毒劑主要有重金屬及其鹽類、酚、醇、醛等有機化合物以及碘、表面活性劑、有機染料等。它們的殺菌或抑菌機制主要是使菌體蛋白質(zhì)變性,或者與酶的-SH結(jié)合而使酶失去活性。本實驗是觀察常用的化學消毒劑在一定濃度下對微生物的抑菌或殺菌作用,從而了解它們的抑菌或殺菌性能。第6頁/共13頁化學藥劑對微生物的影響第7頁/共13頁實驗器材活材料:表皮葡萄球菌懸液;化學藥劑:①2.5%碘酒,②0.05%龍膽紫,③0.5%84消毒液,④0.25%新潔爾滅;培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;器材:無菌培養(yǎng)皿,無菌黑紙,紫外燈,濾紙片,移液器,鑷子,記號筆,酒精燈,火柴,涂布棒,恒溫培養(yǎng)箱第8頁/共13頁實驗步驟1、倒平板將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制成平板。2、接種用無菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上,并用涂布棒涂布均勻。
3、加黑紙打開皿蓋,用無菌黑紙遮住部分平板。4、紫外線照射置紫外線燈下照射30分鐘(打開皿蓋),燈與培養(yǎng)皿距離約30~40cm。照射完畢,蓋上皿蓋。5、培養(yǎng)置37℃溫箱中培養(yǎng)24小時。
6、觀察
觀察并記錄培養(yǎng)基平板上的表皮葡萄球菌生長情況。第9頁/共13頁實驗步驟1、倒平板將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制成平板。2、接種用無菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上,并用涂布棒涂布均勻。
3、標記將上述已接種的培養(yǎng)皿用記號筆在皿底劃成4等份,每一等份內(nèi)標明一種藥物的名稱。4、加化學藥劑用無菌鑷子將圓形濾紙片分別浸入各種藥液中,取出,除去多余藥液后,以無菌操作將紙片對號放入培養(yǎng)皿的小區(qū)內(nèi)。
5、培養(yǎng)置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24小時。
6、觀察記錄微生物生長情況并取出測定抑菌圈大小,比較幾種化學藥劑的殺菌力強弱。第10頁/共13頁第11頁/共13頁實驗報告請比較不同化學藥劑對表皮葡萄球菌的致死能力,并將結(jié)果填入下表。
藥劑抑菌圈直徑(mm)2.5%碘酒0.05%龍膽紫0.5%84消
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