名詞解釋、操縱序列（因）及其他調節(jié)序列構成。順式作用元件是真核基因變大調控轉錄過程的特殊DNA通常包括啟動子、增強子、沉默子等。能不同分為基因轉錄因子和特異性轉錄因子。RNADNA序列，與基因轉錄起始有關。同源重組：是指發(fā)生在同源序列見得重組，它通過鏈的斷裂和再連接，在兩個DNA分子同源序列間進行單鏈或雙鏈的交換。又稱基因重組。DNADNA細胞內，使其在細胞擴增和繁殖，從而獲得該DNA分子大量拷貝的過程稱為分子克隆，又叫基因克隆或重組DNA技術?；蚬こ蹋涸隗w外將目的基因和載體DNA按照既定的目的基因進行人工重組，并將重組體植物、基因工程生產藥物、基因診斷和基因治療等。限制性核酸內切酶：指一類能識別和切割雙鏈DNA分子內特定的堿基順序的核酸水解酶，絕大多數(shù)是從原核細胞中提取的，可分為三類，其中Ⅱ型是分子克隆中最常用的工具酶。Ampr和重組轉化菌。gDNADNA文庫，是指存在于轉化菌內、由克隆載體所攜帶的所有基因組DNA的集合。它涵蓋了基因組全部基因信息。cDNA文庫：是細胞總mRNA的克隆，文庫只包含表達蛋白質或多肽的基因。態(tài)，此時的宿主細胞即稱為感受態(tài)細胞。DNA診斷，是利用分子生物學即分子遺傳學的技術和原理，在DNA水平分析、鑒定遺傳性疾病所涉及的基因異常?；蛑委煟合蛴泄δ苋毕莸募毎麑刖哂邢鄳δ艿耐庠椿?，以糾正活補償其基因缺陷，從而達到治療的目的，包括體細胞基因治療和性細胞基因治療。宿主細胞內進行復制或表達，所以對宿主細胞DNA而言，又稱它為外源性基因或外源性DNA。質粒：是獨立于細菌染色體之外，能自主復制的共價閉合環(huán)狀雙鏈DNA。細胞信號轉導：細胞針對外源信息所發(fā)生的細胞內生物學變化及效應的全過程。receptr是蛋白質，個別糖脂。鳥苷酸結合蛋白G蛋白亦稱GTP結合蛋白，是一類信號轉導分子，此類蛋白由于其生理活性有賴于三磷酸鳥苷（GTP）的結合以及具有GTP水解酶的活性而得名，在各種細胞信號轉導途徑中轉導信號給不同的效應蛋白。核酸分子雜交DNARNA來檢測樣品中未知核苷酸順序的分子生物學技術，若二者結合后，經顯影或顯色可知結合的位置和大小，這一過程稱為核酸分子雜交。（印跡析的技術。核酸探針：指用來檢測某一特定核苷酸順序或基因順序的有同位素或非同位素標記的已知DNA或NA片段。SouthernE.SouthernDNA片段轉移到載體膜（NC膜，并將DNA固定于膜上的過程稱為Southern印跡。PCR即聚合酶鏈反應，是體外DNA即逆轉錄PCR，又稱RNA-PCRmRNA為模板，經逆轉錄和體外擴增放大得到大量cDNAPCR技術。gDNAlibrar包含某一個生物的全部基因組DNADNA片段的形式貯存著某一生物的全部基因組DNA信息。cDNA文庫：包含某一組織細胞在一定條件下所表達的全部mRNA經反轉錄而合成的cDNA序列的克隆群體，它以cDNA片段的形式貯存著該組織細胞的基因表達信息。指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量DNA蛋白質芯片：將高密度集排列的蛋白質分子作為探針點陣固定在固相支持物上，當與待測樣品反應時，可捕獲樣品中靶蛋白，再經檢測系統(tǒng)對靶蛋白進行定性和定量分析的一種技術。寫出下列代號的中文名稱：PCR-RFLP:PCR結合限制性片段長度多態(tài)性分析（將正常和致病基因的PCR制內切酶消化，可得長度不等的限制性片段，據此判斷致病基因有無的分析方法）PCR-ASO:PCRPCR-SSCP:PCR產物的單鏈構象多態(tài)性分析DGGE:變性梯度凝膠電泳DMD:杜氏營養(yǎng)不良癥SRYPCRRAPD：隨即擴增的多態(tài)性DNADDRT-PCR：RNA差別顯示逆轉錄PCR入動物子宮，使之發(fā)育成個體。核酸轉移技術:核轉移技術是將動物的一個體細胞核導入另一個體得去除了胞核的卵細胞內，將該卵細胞導入動物子宮，使之發(fā)育成個體。:在同源重組的基礎上。功能克隆和定位克隆克隆是指從一種致病基因的染色體定位出發(fā)逐步縮小范圍，最后克隆該基因?；蛟\斷：通過直接檢測基因的結構及其表達水平是否正常，從而對疾病做出診斷的方法，通常用于遺傳病、病原體、腫瘤等基本，物補償缺陷基因的功能或使原有的功能得以加強。DNA使抗原基因在一定時間內持續(xù)表達，不斷刺激機體免疫系統(tǒng)，達到防病或治病目的。寫出下列代號的中文名稱：RFLP：限制性片段長度多態(tài)性 VNTR：可變串聯(lián)重復多態(tài)性 SSCP：單鏈構象多性PCR-ASO：聚合酶鏈式反等位基因特異性寡核苷酸問答題試述乳糖操縱子的調控機。乳糖操縱子的機構中含有、YA三個結構基因，分別編碼利用乳糖乳糖的半乳糖苷酶、通透酶、乙?；D移酶。此外還有一個操作序列O、一個啟動序列P及上游的分解代謝物基因激活蛋白（CAP）結合位點，構成乳糖操縱子的調控區(qū)。在操縱子的上游還有一個調節(jié)基因編碼一種阻遏蛋白，后者可與O縱子處于關閉狀態(tài)?；蚓幋a一種阻遏蛋白，與O序列結合，阻礙RNA聚合酶與P轉錄。乳糖操縱子的正調控：當細菌只能以乳糖為能源時，乳糖轉變?yōu)榘肴樘?，后者與阻遏蛋白結合，使其構象變化而不能結合OcAMP的含量升高，cAMPCAP結合，使CAPCAP結合位點上，促進轉錄過程。何謂限制性核酸內切酶？Ⅱ型限制酶的作用特點是什么？指一類能識別和切割雙鏈DNA分子內特定的堿基順序的核酸水解酶，絕大多數(shù)是從（1）以內切方式切斷雙鏈DNA）能識別切割4~8bp3）切割可有兩類切口，產生三種末端。何謂載體？分子克隆中良好的載體應具備哪些條件？能夠攜帶外源DNA（目的基因）DNA的無性繁殖或表達有意義的蛋白質所采用的一些DNA能在宿主細胞內獨立自主復制并能攜帶重組DNAb、必須有限制性內切酶酶切位點（即多克隆位點）以供外源DNA、具有可供選擇的遺傳標記（如抗藥基因、酶基因、營養(yǎng)缺陷型以及形成吞噬瘢的能力等、分子量應盡量小，以便容納較大的外源DNA片段，具有拷貝數(shù)高，與宿主細胞核酸易分裂，抗剪切力強等特點。e、表達型載體還應配備與宿主細胞相適應的啟動子、前導順序、增強子等調控元件。簡述DNA克隆的基本步驟。目的基因的獲取基因載體的選擇與構建目的基因與載體的體外拼接重組DNA分子導入受體細胞篩選并無性繁殖含有重組分子的受體細胞（轉化子）常用的工具酶有哪些？其主要用途是什么？限制性核酸內切酶（必須識別并特異切割DNA堿基序列，DNApolⅠ：催化缺口平移，制備高比度DNAKlenow片段（掌握：合成cDNA的第二條鏈，補齊或標記雙鏈DNA3′端5′-羥基末端磷酸化，或標記探針逆轉錄酶：催化合成cDNA3′-羥基末端進行同質多聚物加尾DNA連接酶（必須：催化2條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵堿性磷酸酶：切除常用的基因獲取方法有哪些？制備基因組文庫 建cDNA文庫 PCR擴增目的基因人工合成DNA技術常用的基因與載體連接方法有哪些？:將靶基因片段和載體DNA相同的黏性末端。然后經黏性末端堿基配對，再經DNA連接酶作用，共價連接成新的重組DNA分子，平頭末端連接：將平末端的DNA分子在連接酶催化下，使DNA5′P人工接頭法：是指利用人工接頭加在平端DNA片段的兩端，然后用相應限制酶切割人工接頭以產生黏性末端，再與帶相同黏性末端的載體相連，dG組成的多聚尾，而在目的DNA分子的兩端加上dCDNA聚合酶Ⅰ或KlenowDNA復成環(huán)狀的雙鏈DNA什么是藍白斑篩選法？這種方法是根據組織化學的原理來篩選重組體桿菌半乳糖苷酶的基因片度，攜帶有l(wèi)ac基因片段的載體轉入lac的宿主菌后，在含有溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷平板上形成淺藍色的噬菌斑，外源基因插入lacX-gallac溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷（X-gal）平板上形成白色的噬菌斑，非重組的噬菌體則成為藍色噬菌斑。簡述細胞信號轉導的基本路線。細胞外信號→受體→細胞內多種分子的濃度、活性、位置變化→細胞應答反應簡述細胞在轉導信號過程中所采用的基本方式。①改變細胞內各種信號轉導分子的構象②改變信號轉導分子的細胞內定為③促進各種信號轉導分子復合物的形成④改變小分子信使的細胞內濃度或分布論述：G蛋白歐聯(lián)受體如何通過發(fā)揮信號轉導的作用，舉例說明。要點：G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）得名于這類受體的細胞內部分總是與異源三聚體G蛋白結合，受體信號轉導的第一步反應都是活化G蛋白。GPCR是七跨膜受體信號轉導途徑的基本模式：配體+受體→G蛋白→效應分子→第二信使→靶分子→生物學效應例子：胰高血糖素受體通過AC-ｃＡＭＰ－ＰＫＡ通路轉導信號核酸分子雜交的基本原理、操作要點和常見類型。基本原理：是利用ＤＮＡ變性和復性這一基本性質來進行DNA和RNA定性或定量的分析技術。雙鏈DNA分開的單鏈重新結合并形成雙鏈。交→檢測（放射自顯影和化學檢測）、NorthernDNA術試述PCR系統(tǒng)的原理、過程及應用。1）體細胞分裂中DNA的半保留復制機理2）體外DNA分子的熱變性和退火（3）dNTP存在時，耐高溫的TaqDNA聚合酶使引物沿單鏈模板延伸為dsDNA故通過高溫變性、低溫退火、適溫延伸的若干循環(huán)，目的DNA被擴增、放大1DNA模板的高溫變性：在9dsDNssDN（）ssDNA火形成模板—引物復合體72℃催化以dNTP為底物的目的DNA合25—30次循環(huán)，目的基因被擴大至可供檢測或應用的量、目的基因克隆b、DNARNAdDNAe、基因突變分析說明PCR系統(tǒng)的組成及其在醫(yī)學上的應。組成PCR系統(tǒng)的成分有、耐熱TaqDNA聚合酶、與擴增的目的基因兩側序列互補的一對引物cDNA合成所